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1、(10)授权公告号 CN 102579911 B (45)授权公告日 2013.07.03 CN 102579911 B *CN102579911B* (21)申请号 201210083008.X (22)申请日 2012.03.27 A61K 36/8998(2006.01) A61P 31/04(2006.01) (73)专利权人 贵州省畜牧兽医研究所 地址 550005 贵州省贵阳市龙洞堡老李坡 (72)发明人 文正常 潘淑惠 杨粤黔 任荣清 高明琴 (74)专利代理机构 贵阳中新专利商标事务所 52100 代理人 程新敏 (54) 发明名称 一种治疗鸡大肠杆菌病中草药制剂 (57) 摘。
2、要 本发明公开了一种治疗鸡大肠杆菌病中草药 制剂， 它是由黄连、 黄柏、 勾藤、 大黄、 栀子、 苦参、 白头翁、 苍术、 紫花地丁、 厚朴、 枳壳、 秦皮、 焦三仙 制得， 本发明制剂对鸡大肠杆菌 CVCC-245（致病） 菌株有明显的抑制作用 ； 人工感染防治实验有效 率为 93.85 97.78%， 田间应用推广试验有效率 为 92.37%， 其应用具有显著的防治效果及使用安 全性， 具有清热解毒、 凉血止痢、 燥湿化气、 健脾之 功效。 (51)Int.Cl. 审查员 郑茹 权利要求书 1 页 说明书 5 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明。
3、书5页 (10)授权公告号 CN 102579911 B CN 102579911 B *CN102579911B* 1/1 页 2 1. 一种治疗鸡大肠杆菌病中草药制剂， 其特征在于 ： 它是由以下原料药组成的 ： 黄连 30-50g、 黄柏 30-50g、 钩藤 50-70g、 大黄 15-35g、 栀子 20-60g、 苦参 15-35g、 白头翁 50-70g、 苍术 25-45g、 紫花地丁 15-35g、 厚朴 20-40g、 枳壳 30-50g、 秦皮 20-40g、 焦三仙 40-60g。 2. 根据权利要求 1 所述的一种治疗鸡大肠杆菌病中草药制剂， 其特征在于 ： 它是由以。
4、 下原料药组成的 ： 黄连 40g、 黄柏 40g、 钩藤 60g、 大黄 25g、 栀子 40g、 苦参 25g、 白头翁 60g、 苍术 35g、 紫花地丁 25g、 厚朴 30g、 枳壳 40g、 秦皮 30g、 焦三仙 50g。 权 利 要 求 书 CN 102579911 B 2 1/5 页 3 一种治疗鸡大肠杆菌病中草药制剂 技术领域 0001 本发明涉及一种兽用中草药制剂， 特别涉及一种治疗鸡大肠杆菌病中草药制剂， 属于兽药技术领域。 背景技术 0002 鸡大肠杆菌病是目前养鸡生产中较为常发， 影响面较广的一种细菌性疾病， 其发 病原因主要表现在两个方面， 一是因环境、 水源等污。
5、染导致的原发性感染， 另一方面是饲养 管理应激或其他疫病发生时导致的继发性感染， 急症时多表现为体温升高， 拉黄白色、 菜绿 色样稀便、 脱水等症状而大量死亡 ； 雏鸡在孵化过程中， 经常因卵或胚胎感染引起脐带炎而 死亡。 由于大肠杆菌的血清型较多， 不同的地理区域其血清型存在很大差异， 给该病免疫防 治带来诸多困难。 长期以来， 其防治仍长期依赖于抗生素及化药制剂， 由于受细菌耐药性的 影响， 在养鸡生产中经常反复发生， 化药及抗生素的残留， 易给食品安全生产带来潜在的危 害， 在今后的养禽生产中， 抗生素及化药的大面积使用拟将逐步受到一定的限制。因此， 目 前寻求使用毒副作用小、 残毒低、。
6、 不易产生耐药、 具有较好疗效的兽用中草药制剂防治该病 具有重要意义。 发明内容 0003 本发明的目的在于提供一种对鸡大肠杆菌 CVCC-245（致病） 菌株有明显的抑制作 用 ； 人工感染防治实验有效率为93.8597.78%， 田间应用推广试验有效率为92.37%， 具有 显著的防治效果及使用安全性的治疗鸡大肠杆菌病中草药制剂。 0004 本发明是这样实现的 ： 治疗鸡大肠杆菌病中草药制剂的配方为 ： 黄连 30-50g、 黄柏 30-50g、 勾藤 50-70g、 大黄 15-35g、 栀子 20-60g、 苦参 15-35g、 白头翁 50-70g、 苍术 25-45g、 紫花地丁 。
7、15-35g、 厚朴 20-40g、 枳壳 30-50g、 秦皮 20-40g、 焦三仙 40-60g。 0005 优选的， 它优选后的组方为 ： 黄连 40g、 黄柏 40g、 勾藤 60g、 大黄 25g、 栀子 40g、 苦 参 25g、 白头翁 60g、 苍术 35g、 紫花地丁 25g、 厚朴 30g、 枳壳 40g、 秦皮 30g、 焦三仙 50g。 0006 本发明制剂是将原料药粉粹、 80 目过筛， 混合均匀， 封装密闭。 0007 用法与用量 ： 拌料自由采饲 ； 治疗量 ： 500g 拌料 250kg ； 预防量减半使用。 0008 本发明制剂主要用于鸡及其它禽类原发或继发。
8、性大肠杆菌感染导致的， 以拉黄白 色或菜绿色样稀便、 脱水等为主要临床特征的禽大肠杆菌病。本发明制剂经过鸡大肠杆菌 感染发病治疗、 体外抑菌， 实验动物药物急性及慢性毒理、 理化测定、 田间应用推广防治试 验等一系列实验研究表明 ： 对鸡大肠杆菌 CVCC-245（致病） 菌株有明显的抑制作用 ； 人工感 染防治实验有效率为 93.85 97.78%， 田间应用推广试验有效率为 92.37%。其组方药物筛 选严格遵循中兽医医学 “标本兼治” 的防治理论， 根据鸡大肠杆菌病的临床病理特性， 其应 用具有显著的防治效果及使用安全性， 具有清热解毒、 凉血止痢、 燥湿化气、 健脾之功效。 0009 。
9、、 试验材料 0010 1.1 实验药物及组方 ： 说 明 书 CN 102579911 B 3 2/5 页 4 0011 本发明的商品名称 “肠杆灵散” 。 0012 “肠杆灵散” 组方主要药物成分 ： 黄连、 黄柏、 大黄、 栀子、 苦参、 白头翁、 苍术、 紫花 地丁、 厚朴、 枳壳、 秦皮、 焦三仙等。 0013 1.2 实验菌株 ： 鸡大肠杆菌 CVCC-245（致病） 菌株购自中国兽医药品监察所。 0014 1.3 人工感染实验动物 ： 35 日龄杂交肉鸡 480 只， 体重 400g25g。 0015 1.4 急性、 亚急性毒性实验动物 ： 昆明小白鼠 40 只 （公、 母各 2。
10、0 只） ， SD 大鼠 32 只 （公、 母各 16 只） ， 由贵阳医学院实验动物室提供。 0016 1.5 实验用培养基 ： 肉汤、 伊红美蓝、 麦康凯。 0017 、 实验内容及方法 0018 2.1细菌培养及计数 ： 用伊红美蓝、 麦康凯选择性培养基经3724h将CVCC245菌 株进行培养复壮， 再接种于肉汤培养基中扩大培养 36h 计数， 按 5X1010/ml 装瓶备用。 0019 2.2 体外抑菌实验 ： 0020 将制剂煎熬浓缩成 1g 生药 /ml 的药物浓度制剂作环形抑菌纸片 （直径 3mm） ， 在普 通平板上进行抑菌培养24h， 观察CVCC-245菌株的生长情况，。
11、 如抑菌圈直径大于56mm判 为显著。 0021 2.3 人工感染及防治实验 0022 2.3.1 实验动物分组 ： 0023 设细菌人工感染实验组4个， 其中用于方剂预防处理后感染组1个、 直接感染方剂 治疗组1个、 直接感染化药治疗组1个、 直接感染观察对照组1个 ； 实验空白对照组1个 ； 每 组实验鸡只数量为 98 只。 0024 2.3.2 人工感染实验 ： 对设置的 4 个感染实验组鸡只按每只分别皮下注射活菌 0.5ml， 灌服活菌 0.5ml。 0025 2.3.3 治疗用药剂量及方法 ： 待实验感染鸡群发病后， 对第一、 第二实验组用制备 的 “肠杆灵散” 中草药粉剂 （80 。
12、目过筛） 每日按每公斤体重 0.3g 拌料自由采饲， 连续使用 7d ； 对第三实验组用 5% 胺普霉素 （河南康星动物药业有限公司生产） 每日按 100g 兑水 150 自由饮用， 连用 7d ； 第四组实验不用药， 为治疗对照组 ； 第五组为空白对照组。 0026 2.4 急性、 亚急性毒性药理试验 ： 根据国家 中药天然药物长期毒性研究指导原 则 ， 用 II 级实验动物昆明小白鼠、 大鼠 （SD 品系） 制定急性毒性试验 （MTD） 和反复给药毒 性试验， 以最大程度暴露其药物毒性， 对其凝血系统指标、 血液生化指标以及各主要器脏病 理组织学变化等检查。 0027 2.5 理化测定实验。
13、 ： 将 “肠杆灵散” 中草药制剂委托贵州师范大学分析测试中心依 据 5337-2008JY/T023-1996 进行铅、 镉、 汞、 砷、 铜等主要重金属元素的测定。 0028 2.6 田间应用推广试验 ： 在贵州省贵阳、 遵义、 黔南、 黔东南、 安顺、 六盘水等地区 的部分养鸡场进行鸡大肠杆菌病的生产预防和临床治疗应用推广试验。 0029 、 实验结果 ： 0030 3.1 抑菌实验 ： 抑菌圈直径均在 4.2 6.5mm 之间。 0031 3.2 药物防治实验 ： 结果见表 1。 0032 附表 1 ： 0033 说 明 书 CN 102579911 B 4 3/5 页 5 0034 。
14、注 ： 方剂预防治疗组为先用实验方剂预防处理 5d 后进行人工感染实验。 0035 3.3 急性、 亚急性毒性药理试验 ： 0036 3.4 理化测定分析 ： 见表 2。 0037 附表 2 ： 0038 0039 3.5 应用推广试验 ： 结果见表 3。 0040 附表 3 ： 0041 说 明 书 CN 102579911 B 5 4/5 页 6 0042 4、 实验研究分析 ： 0043 4.1 本实验研究筛选出的中草药方剂 “肠杆灵散” 具有清热解毒、 凉血止痢、 燥湿化 气、 健脾之功效。鸡大肠杆菌 CVCC-245 菌株人工感染防治实验 （表 1） 和临床防治应用试验 （表 2） 。
15、结果表明， 方剂 “肠杆灵散” 对鸡大肠杆菌感染具有显著的防治效果， 其人工感染防治 实验有效率为 93.85 97.78%， 田间应用推广试验鸡群 29.3 万只， 平均有效率为 92.37%。 其中， 实验 1 组发病率和治愈率均显著优于其它实验组， 表明 “肠杆灵散” 对鸡大肠杆菌病 具有良好的早期防治作用。 0044 4.2 急性和亚急性毒理实验研究表明，“肠杆灵散” 无明显毒理学意义， 在生产应用 中无明显的毒副作用， 具有良好的使用安全性和可靠性。 0045 4.3 “肠杆灵散”的治疗使用量为每天每公斤体重 0.3g， 使用方法为拌料， 即 1000g 拌料 250kg， 理化测定。
16、中的主要重金属离子混料后增加的含量每 1000g 饲料为 ： 砷 0.0009mg、 铅 0.0362mg、 汞 0.000mg、 膈 0.0018mg。远远低于我国饲料安全生产标准中 有关重金属离子的含量， 即 ： 每 1000g 饲料中砷 2. 0mg、 铅 13.0mg、 汞 0.10mg、 膈 说 明 书 CN 102579911 B 6 5/5 页 7 0.50mg。同时， 防治过程中的使用时间为 5 7d， 不易造成重金属离子的长期蓄积作用。 0046 4.4 在贵州省的养鸡生产中， 蛋鸡主要采用笼养模式， 肉鸡多为高密度地面平养， 肉鸡饲养对环境的污染度明显高于蛋鸡， 在田间应用。
17、推广试验研究中显示，“肠杆灵散” 的 治疗效果蛋鸡比肉鸡明显， 主要原因可能与蛋、 肉鸡的饲养模式导致大肠杆菌的感染程度 有一定的相关性。 具体实施方式 0047 实施例 1 ： 将黄连 40g、 黄柏 40g、 勾藤 60g、 大黄 25g、 栀子 40g、 苦参 25g、 白头翁 60g、 苍术 35g、 紫花地丁 25g、 厚朴 30g、 枳壳 40g、 秦皮 30g、 焦三仙 50g 粉碎， 80 目过筛， 搅 拌均匀， 封装密闭。 0048 用法与用量 ： 拌料自由采饲 ； 治疗量 ： 500g 拌料 250kg ； 预防量 0049 减半使用。 0050 实施例 2 ： 将黄连 3。
18、0g、 黄柏 30g、 勾藤 50g、 大黄 15g、 栀子 20g、 苦参 15g、 白头翁 50g、 苍术 25g、 紫花地丁 15g、 厚朴 20g、 枳壳 30g、 秦皮 20g、 焦三仙 40g 粉碎， 80 目过筛， 搅 拌均匀， 封装密闭。 0051 用法与用量 ： 拌料自由采饲 ； 治疗量 ： 500g 拌料 250kg ； 预防量 0052 减半使用。 0053 实施例 3 ： 将黄连 50g、 黄柏 50g、 勾藤 70g、 大黄 35g、 栀子 60g、 苦参 35g、 白头翁 70g、 苍术 45g、 紫花地丁 35g、 厚朴 40g、 枳壳 50g、 秦皮 40g、 焦三仙 60g 粉碎， 80 目过筛， 搅 拌均匀， 封装密闭。 0054 用法与用量 ： 拌料自由采饲 ； 治疗量 ： 500g 拌料 250kg ； 预防量 0055 减半使用。 说 明 书 CN 102579911 B 7 。