《含脂肪干细胞的美容制剂及其制备方法和应用.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《含脂肪干细胞的美容制剂及其制备方法和应用.pdf（9页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710325482.1 (22)申请日 2017.05.10 (71)申请人 健生生物技术有限公司 地址 102600 北京市大兴区中关村科技园 区大兴生物医药产业基地永大路38号 3幢101 (72)发明人 刘国卿 张彬 (74)专利代理机构 重庆中流知识产权代理事务 所(普通合伙) 50214 代理人 余义丽 (51)Int.Cl. A61K 35/28(2015.01) A61K 8/99(2017.01) A61Q 19/08(2006.01) A61P 17/18。
2、(2006.01) A61P 17/00(2006.01) A61L 27/38(2006.01) (54)发明名称 含脂肪干细胞的美容制剂及其制备方法和 应用 (57)摘要 为了解决现有脂肪干细胞(ADSCs)移植美容 技术存在的起效慢， 效果不理想等问题， 本发明 提出一种含脂肪干细胞的美容制剂及其制备方 法和应用。 本发明的美容制剂为脂肪干细胞 （Adipose tissue derived stem cells,ADSCs） 悬液和脂肪干细胞裂解液中的一种或二种的组 合； 所述脂肪干细胞悬液为通过水流辅助吸脂术 获取脂肪组织后， 直接用100目筛网过滤制得的 脂肪干细胞悬液； 所述脂肪。
3、干细胞裂解液为对脂 肪干细胞悬液冷冻、 破碎裂解得到的裂解液。 本 发明使得一次美容手术就有很好的疗效， 长久的 维持时间， 比单独的自体ADSCs移植有更高的成 活率， 治疗时间缩短， 治疗效果更好。 权利要求书2页 说明书6页 CN 107115358 A 2017.09.01 CN 107115358 A 1.一种含脂肪干细胞的美容制剂， 其特征在于： 所述制剂为脂肪干细胞 （Adipose tissue derived stem cells,ADSCs） 悬液和脂肪干细胞裂解液中的一种或二种的组合； 所 述脂肪干细胞悬液为通过水流辅助吸脂术获取脂肪组织后， 直接用100目筛网过滤制得的。
4、 脂肪干细胞悬液； 所述脂肪干细胞裂解液为对脂肪干细胞悬液冷冻、 破碎裂解得到的脂肪 干细胞裂解液。 2.根据权利要求1所述的制剂， 其特征在于： 所述制剂为自体脂肪干细胞 （Adipose tissue derived stem cells,ADSCs） 悬液和自体脂肪干细胞裂解液中的一种或二种的组 合。 3.根据权利要求1或2所述的制剂， 其特征在于： 所述制剂为脂肪干细胞悬液和脂肪干 细胞裂解液的组合时， 或者自体脂肪干细胞悬液和自体脂肪干细胞裂解液的组合时， 所述 脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液的容积比为0.5-2:1-3。 4.根据权利要求3所述的制剂， 其特征在于： 所述制剂为脂。
5、肪干细胞悬液和脂肪干细胞 裂解液的组合时， 或者自体脂肪干细胞悬液和自体脂肪干细胞裂解液的组合时， 所述脂肪 干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液容积比为1:1。 5.一种权利要求1至4中任一项所述含脂肪干细胞的美容制剂的制备方法， 其特征在 于： 包括脂肪干细胞悬液的制备、 脂肪干细胞裂解液的制备、 脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞 裂解液组合物的制备； 其中， 所述脂肪干细胞悬液的制备方法， 包括以下步骤： S101、 通过水流辅助吸脂术获取脂肪组织； S102、 将步骤S101得到的脂肪组织通过100目筛网过滤， 制得脂肪干细胞悬液； 所述脂肪干细胞裂解液的制备方法， 包括以下步骤： S201、 将步。
6、骤S102得到的脂肪干细胞悬液装入冻存管内， 立即放入- 196液氨罐内， 冻存10分钟， 然后取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞充分破碎裂解； S202、 将步骤S201得到的脂肪干细胞液再放入- 196液氨罐内， 冻存10分钟， 然后取 出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞充分破碎裂解； S203、 将步骤S202得到的已破碎裂解的脂肪干细胞液进行离心处理， 3000转/分， 5分 种， 取上层清液即为脂肪干细胞裂解液； 所述脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液组合物的制备方法， 包括以下步骤； S301、 将步骤S102制备的脂肪干细胞悬液与步骤S20。
7、3制备的脂肪干细胞裂解液混按比 例合均匀， 即得到脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液组合物。 6.根据权利要求5所述含脂肪干细胞的美容制剂的制备方法， 其特征在于： 所述步骤 S101中， 所述脂肪组织为患者自体的脂肪组织。 7.根据权利要求5或6所述含脂肪干细胞的美容制剂的制备方法， 其特征在于： 所述步 骤S301中， 所述脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液容积比为0.5-2:1-3。 8.根据权利要求7所述含脂肪干细胞的美容制剂的制备方法， 其特征在于： 所述步骤 S301中， 所述脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液容积比为1:1。 9.一种权利要求1至4中任一项所述含脂肪干细胞的美容制剂在除。
8、皱， 填充， 塑形、 美容 护肤面膜和护肤霜方面的应用， 其特征在于： 所述制剂为脂肪干细胞 （Adipose tissue derived stem cells,ADSCs） 悬液和脂肪干细胞裂解液中的一种或二种的组合； 所述脂肪 权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 107115358 A 2 干细胞悬液为通过水流辅助吸脂术获取脂肪组织后， 直接用100目筛网过滤制得的脂肪干 细胞悬液； 所述脂肪干细胞裂解液为对脂肪干细胞悬液冷冻、 破碎裂解得到的裂解液。 10.根据权利要求9所述含脂肪干细胞的美容制剂的在除皱， 填充， 塑形、 美容护肤面膜 和护肤霜方面的应用， 其特征在于： 所述制。
9、剂为自体脂肪干细胞 （Adipose tissue derived stem cells,ADSCs） 悬液和自体脂肪干细胞裂解液中的一种或二种的组合。 权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 107115358 A 3 含脂肪干细胞的美容制剂及其制备方法和应用 技术领域 0001 本发明涉及医药技术领域， 尤其涉及含脂肪干细胞的美容制剂及其制备方法和应 用。 背景技术 0002 随着人们物质生活水平的逐渐提高， 吃饱穿暖对人们来说不再是难题， 生活的富 裕使得人们开始追求更高层面的生活。 爱美之心人皆有之， 所有人都希望自己能够永远年 轻、 漂亮， 很多人都将目光转向了各种能提升自己的外表。
10、形象的方法。 皮肤作为人体最大的 组织器官， 覆盖于人体的外表， 是美学美容研究的主要组织器官。 一时之间， 各种化妆品、 护 肤品等如同雨后春笋一样的应运而生了。 然而， 市面上的这些化妆品只是通过遮掩缺陷或 是在皮肤表层起作用来达到美丽的目的， 但是只是治标， 而不能治本。 人们渐渐也不满足这 样的效果， 将目光聚集到了搜寻能从根本上美容的方法。 0003 细胞是我们人体的基本组成单位， 人体衰老的原因就是体内细胞的衰老。 随着年 龄的增长， 人体内细胞增殖和分化能力减弱， 新生细胞补充不足， 衰老细胞不能及时被替 代。 细胞的老化促使人体的各生理系统功能下降和衰变， 从而导致各种疾病的发。
11、生， 最终引 起死亡。 0004 干细胞是一类具有自我更新， 多向分化的多潜能细胞， 具有再生各种组织器官和 人体的潜在功能， 医学界称为 “万用细胞” 。 在一定条件下， 它可以分化成多种功能细胞。 0005 干细胞第一次从脂肪组织提取是在2001年的时候， 用于在很多医疗应用都已被广 泛承认， 而且脂肪提取的难度不高、 增加了脂肪干细胞的优势。 自从那时候， 脂肪干细胞的 密集研究和成功的医疗应用已在全球广泛实施。 0006 现有技术脂肪干细胞(ADSCs)移植美容越来越受到人们的青睐， 现有的脂肪干细 胞(ADSCs)移植美容技术中， 脂肪干细胞(ADSCs)的存活率较低， 一般在治疗后。
12、的6个月左右 才能达到美容效果， 且美容效果不够理想不能满足爱美人士的迫切需求， 可见， 现有脂肪干 细胞(ADSCs)移植美容技术存在着起效慢和效果不理想等问题。 发明内容 0007 为了解决现有脂肪干细胞(ADSCs)移植美容技术存在的起效慢， 效果不理想等问 题， 本发明提出一种含脂肪干细胞的美容制剂及其制备方法和应用。 0008 本发明含脂肪干细胞的美容制剂， 其特征在于： 所述制剂为脂肪干细胞(Adipose tissue derived stem cells,ADSCs)悬液和脂肪干细胞裂解液中的一种或二种的组合； 所 述脂肪干细胞悬液为通过水流辅助吸脂术获取脂肪组织后， 直接用1。
13、00目筛网过滤制得的 脂肪干细胞悬液； 所述脂肪干细胞裂解液为对脂肪干细胞悬液冷冻、 破碎裂解得到的裂解 液。 0009 进一步的， 所述制剂为自体脂肪干细胞(Adipose tissue derived stem cells, ADSCs)悬液和自体脂肪干细胞裂解液中的一种或二种的组合。 说 明 书 1/6 页 4 CN 107115358 A 4 0010 进一步的， 所述制剂为脂肪干细胞悬液和自体脂肪干细胞裂解液的组合时， 所述 脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液容积比为0.5-2:1-3。 0011 进一步的， 所述制剂为脂肪干细胞悬液和自体脂肪干细胞裂解液的组合时， 所述 脂肪干细胞悬。
14、液和脂肪干细胞裂解液容积比为1:1。 0012 本发明还包括含上述脂肪干细胞的美容制剂的制备方法， 包括脂肪干细胞悬液的 制备、 脂肪干细胞裂解液的制备、 脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液组合物的制备； 其 中， 0013 所述脂肪干细胞悬液的制备方法， 包括以下步骤： 0014 S101、 通过水流辅助吸脂术获取脂肪组织； 0015 S102、 将步骤S101得到的脂肪组织通过100目筛网过滤， 制得含有脂肪干细胞的悬 液； 0016 所述脂肪干细胞裂解液的制备方法， 包括以下步骤： 0017 S201、 将步骤S102得到的脂肪干细胞悬液装入冻存管内， 立即放入-196液氨罐 内， 冻存1。
15、0分钟， 然后取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞充分破碎裂 解； 0018 S202、 将步骤S201得到的脂肪干细胞液再放入-196液氨罐内， 冻存10分钟， 然后 取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞充分破碎裂解； 0019 S203、 将步骤S202得到的已破碎裂解的脂肪干细胞液进行离心处理， 3000转/分， 5 分种， 取上层清液即为脂肪干细胞裂解液； 0020 所述脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液组合物的制备方法， 包括以下步骤； 0021 S301、 将步骤S102制备的脂肪干细胞悬液与步骤S203制备的脂肪干细胞裂解液混 按比例混合均匀。
16、， 即得到脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液组合物。 0022 进一步的， 所述步骤S101中， 所述脂肪组织为患者自体的脂肪组织。 0023 进一步的， 所述步骤S301中， 所述脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液容积比为 0.5-2:1-3。 0024 进一步的， 所述步骤S301中， 所述脂肪干细胞悬液和脂肪干细胞裂解液容积比为 1:1。 0025 本发明还包括含上述脂肪干细胞的美容制剂在除皱， 填充， 塑形、 美容护肤面膜和 护肤霜方面的应用， 其特征在于： 所述制剂为脂肪干细胞(Adipose tissue derived stem cells,ADSCs)悬液和脂肪干细胞裂解液中的一种。
17、或二种的组合； 所述脂肪干细胞悬液为通 过水流辅助吸脂术获取脂肪组织后， 直接用100目筛网过滤制得的脂肪干细胞悬液； 所述脂 肪干细胞裂解液为对脂肪干细胞悬液冷冻、 破碎裂解得到的裂解液。 0026 进一步的， 所述制剂为自体脂肪干细胞(Adipose tissue derived stem cells, ADSCs)悬液和自体脂肪干细胞裂解液中的一种或二种的组合。 0027 本发明含脂肪干细胞的美容制剂采用ADSCs移植美容， 其作用机制是： (1)移植到 局部的ADSCs分泌抗凋亡和促有丝分裂因子， 作用于皮肤的成纤维细胞， 促进其更新和增 殖； (2)ADSCs通过旁路分泌作用， 生成。
18、名种细胞因子， 调节细胞外基质重塑， 血管生成， 抑制 氧化损伤。 旁分泌是ADSCs发挥作用的主要途径， ADSCs的裂解液也具有ADSCs移植同样的治 疗效果。 说 明 书 2/6 页 5 CN 107115358 A 5 0028 本发明使用的自体ADSCs+ADSCs裂解液的混合制剂， 将综合ADSCs的细胞移植成活 及细胞的分化作用和ADCs裂解液产生的细胞生长因子的刺激作用， 促进局部老化和受损细 胞的修复， 即是自体ADSCs移植和ADSCs所含细胞生长因子的补充双管齐下后作用。 使得一 次美容手术就有很好的疗效， 长久的维持时间， 比单独的自体ADSCs移植有更高的成活率， 治。
19、疗时间缩短， 治疗效果更好。 用此方法治疗后， 皱纹消失， 弹力妀善， 肤色改善， 毛孔缩小， 痘印改善， 皮肤变得光滑水嫩。 本发明还可以应用在填充， 塑形、 美容护肤面膜和护肤霜方 面， 均取得较好效果。 具体实施方式 0029 实施例1： 0030 用于含脂肪干细胞的美容制剂， 所述制剂为脂肪干细胞悬液， 所述脂肪干细胞悬 液为通过水流辅助吸脂术从患者自身获取后， 直接用100目筛网过滤制得的脂肪干细胞悬 液。 0031 实施例2： 0032 用于含脂肪干细胞的美容制剂， 所述制剂为脂肪干细胞裂解液， 所述脂肪干细胞 裂解液通过以下制备方法得到： 0033 S1、 通过水流辅助吸脂术获取。
20、患者自身的脂肪组织； 0034 S2、 将步骤S1得到的脂肪组织通过100目筛网过滤， 制得脂肪干细胞悬液； 0035 S3、 将步骤S2得到的脂肪干细胞悬液装入冻存管内， 立即放入-196液氨罐内， 冻 存10分钟， 然后取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞充分破碎裂解； 0036 S4、 将步骤S3得到的脂肪干细胞液再放入-196液氨罐内， 冻存10分钟， 然后取出 融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞充分破碎裂解； 0037 S5、 将步骤S4得到的已破碎裂解的脂肪干细胞液进行离心处理， 3000转/分， 5分 种， 取上层清液即为脂肪干细胞裂解液。 。
21、0038 实施例3： 0039 用于含脂肪干细胞的美容制剂， 所述制剂为脂肪干细胞和脂肪干细胞裂解液， 所 述制剂通过以下制备方法得到： 0040 S1、 通过水流辅助吸脂术获取患者自身的脂肪组织； 0041 S2、 将步骤S1得到的脂肪组织通过100目筛网过滤， 制得脂肪干细胞悬液； 0042 S3、 将步骤S2得到的脂肪干细胞悬液分为两份， 一份备用， 另一份用于制备脂肪干 细胞裂解液， 将后者装入冻存管内， 立即放入-196液氨罐内， 冻存10分钟， 然后取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞破碎裂解； 0043 S4、 将步骤S3得到的破碎裂解的脂肪干细胞液再放入-1。
22、96液氨罐内， 冻存10分 钟， 然后取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞充分破碎裂解； 0044 S5、 将步骤S4得到的已充分破碎裂解的脂肪干细胞液进行离心处理， 3000转/分， 5 分种， 取上层清液即为脂肪干细胞裂解液； 0045 S6、 将步骤S3的备用脂肪干细胞悬液与步骤S5制备的脂肪干细胞裂解液按照质量 比为1:1混合均匀， 即得到所制备制剂。 0046 实施例4： 说 明 书 3/6 页 6 CN 107115358 A 6 0047 用于含脂肪干细胞的美容制剂， 所述制剂为脂肪干细胞和脂肪干细胞裂解液， 所 述制剂通过以下制备方法得到： 0048 S1、。
23、 通过水流辅助吸脂术获取患者自身的脂肪组织； 0049 S2、 将步骤S1得到的脂肪组织通过100目筛网过滤， 制得脂肪干细胞悬液； 0050 S3、 将步骤S2得到的脂肪干细胞悬液分为两份， 一份备用， 另一份用于制备脂肪干 细胞裂解液， 将后者装入冻存管内， 立即放入-196液氨罐内， 冻存10分钟， 然后取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞破碎裂解； 0051 S4、 将步骤S3得到的破碎裂解的脂肪干细胞液再放入-196液氨罐内， 冻存10分 钟， 然后取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞充分破碎裂解； 0052 S5、 将步骤S4得到的已充分破碎。
24、裂解的脂肪干细胞液进行离心处理， 3000转/分， 5 分种， 取上层清液即为脂肪干细胞裂解液； 0053 S6、 将步骤S3的备用脂肪干细胞悬液与步骤S5制备的脂肪干细胞裂解液按照质量 比为0.5:3混合均匀， 即得到所制备制剂。 0054 实施例5： 0055 用于含脂肪干细胞的美容制剂， 所述制剂为脂肪干细胞和脂肪干细胞裂解液， 所 述制剂通过以下制备方法得到： 0056 S1、 通过水流辅助吸脂术获取患者自身的脂肪组织； 0057 S2、 将步骤S1得到的脂肪组织通过100目筛网过滤， 制得脂肪干细胞悬液； 0058 S3、 将步骤S2得到的脂肪干细胞悬液分为两份， 一份备用， 另一份。
25、用于制备脂肪干 细胞裂解液， 将后者装入冻存管内， 立即放入-196液氨罐内， 冻存10分钟， 然后取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞破碎裂解； 0059 S4、 将步骤S3得到的破碎裂解的脂肪干细胞液再放入-196液氨罐内， 冻存10分 钟， 然后取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞充分破碎裂解； 0060 S5、 将步骤S4得到的已充分破碎裂解的脂肪干细胞液进行离心处理， 3000转/分， 5 分种， 取上层清液即为脂肪干细胞裂解液； 0061 S6、 将步骤S3的备用脂肪干细胞悬液与步骤S5制备的脂肪干细胞裂解液按照质量 比为2:1混合均匀， 即。
26、得到所制备制剂。 0062 实施例6： 0063 用于含脂肪干细胞的美容制剂， 所述制剂为脂肪干细胞和脂肪干细胞裂解液， 所 述制剂通过以下制备方法得到： 0064 S1、 通过水流辅助吸脂术获取身体健康者的脂肪组织； 0065 S2、 将步骤S1得到的脂肪组织通过100目筛网过滤， 制得脂肪干细胞悬液； 0066 S3、 将步骤S2得到的脂肪干细胞悬液分为两份， 一份备用， 另一份用于制备脂肪干 细胞裂解液， 将后者装入冻存管内， 立即放入-196液氨罐内， 冻存10分钟， 然后取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞破碎裂解； 0067 S4、 将步骤S3得到的破碎裂解的脂。
27、肪干细胞液再放入-196液氨罐内， 冻存10分 钟， 然后取出融化， 在电动混匀器上强力混匀5分钟， 将脂肪干细胞充分破碎裂解； 0068 S5、 将步骤S4得到的已充分破碎裂解的脂肪干细胞液进行离心处理， 3000转/分， 5 分种， 取上层清液即为脂肪干细胞裂解液； 说 明 书 4/6 页 7 CN 107115358 A 7 0069 S6、 将步骤S3的备用脂肪干细胞悬液与步骤S5制备的脂肪干细胞裂解液按照质量 比为1:1混合均匀， 即得到所制备制剂。 0070 实施例7： 0071 将实施例3用于填充整形。 0072 实施例8： 0073 将实施例4用于塑形。 0074 实施例9： 。
28、0075 将实施例5用于美容护肤面膜。 0076 实施例10： 0077 将实施例6用于护肤霜。 0078 选取70名美容者， 随机分为7组， 每组10人， 前6组分别用实施例1-6的治疗制剂， 第 7组用市售XX美容制剂。 将实施例1-6用专用注射器注射到前6组美容者面部皱纹处， 要求注 射时间与抽取脂肪组织的时间为2小时以内； 第7组患者按照XX美容制剂要求使用。 7组美容 者在跟踪时间内均不再使用其他美容制剂， 以下为试验结果： 0079 说 明 书 5/6 页 8 CN 107115358 A 8 0080 0081 备注： A： 皮肤得到初步改善， 皱纹减少； 0082 A+:皮肤得。
29、到较好改善， 无皱纹； 0083 A+:皮肤变得光滑、 细腻、 有弹性； 0084 B： 皮肤未发生明显改变。 0085 由以上试验结果可知， 将脂肪干细胞作为含脂肪干细胞的美容制剂， 其单独使用， 美容效果较好； 将脂肪干细胞裂解液作为含脂肪干细胞的美容制剂， 其单独使用， 美容效果 略优于脂肪干细胞制剂； 将脂肪干细胞和脂肪干细胞裂解液一起作为含脂肪干细胞的美容 制剂， 即可发挥脂肪干细胞的细胞分化作用， 又可以发挥脂肪干细胞裂解液的旁路分泌作 用， 其协同作用大大优于单独的脂肪干细胞制剂和单独的脂肪干细胞裂解液制剂， 其疗效 快， 持续时间长， 治疗效果好， 用此方法治疗后， 皱纹消失， 弹力妀善， 肤色改善， 毛孔缩小， 痘印改善， 皮肤变得光滑水嫩。 本发明还可以应用在填充， 塑形、 美容护肤面膜和护肤霜方 面， 均取得较好效果。 0086 最后， 还需要注意的是， 以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。 显然， 本发 明不限于以上实施例， 本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的 所有技术方案， 均应认为在本发明的保护范围之内。 说 明 书 6/6 页 9 CN 107115358 A 9 。