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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610979885.3 (22)申请日 2016.11.08 (71)申请人 江西益盟科技有限公司 地址 338000 江西省新余市渝水区下村工 业基地 (72)发明人 刘冠环 刘冠中 张雪东 (74)专利代理机构 深圳市硕法知识产权代理事 务所(普通合伙) 44321 代理人 李晓阳 (51)Int.Cl. A61K 35/747(2015.01) A61K 47/42(2017.01) A61P 37/08(2006.01) A61P 17/00(2006.01) A6。
2、1P 11/02(2006.01) A61P 11/06(2006.01) A61K 35/745(2015.01) (54)发明名称 治疗过敏体质的乳酸菌组合物及其制备方 法 (57)摘要 本发明公开了一种治疗过敏体质的乳酸菌 组合物， 包括乳酸菌组合核， 所述乳酸菌组合核 外包裹有包被层； 所述包被层包括重量份数的成 份： 低聚异麦芽糖3050、 蛋白物质3050、 硝酸 纤维素510； 所述乳酸菌组合核由如下重量份 数的菌株组成： 乳双歧杆菌3040、 罗伊氏乳杆 菌2030、 鼠李糖乳杆菌1020、 副干酪乳杆菌 1020。 本发明还公开了其制备方法。 本发明具 有显著的抗过敏作用且无。
3、任何毒副作用的优点。 权利要求书1页 说明书5页 CN 107050063 A 2017.08.18 CN 107050063 A 1.一种治疗过敏体质的乳酸菌组合物， 其特征在于： 包括乳酸菌组合核， 所述乳酸菌组 合核外包裹有包被层； 所述包被层包括重量份数的成份： 低聚异麦芽糖3050、 蛋白物质30 50、 硝酸纤维素510； 所述乳酸菌组合核由如下重量份数的菌株组成： 乳双歧杆菌30 40、 罗伊氏乳杆菌2030、 鼠李糖乳杆菌1020、 副干酪乳杆菌1020。 2.根据权利要求1所述的乳酸菌组合物， 其特征在于： 所述乳酸菌组合物中乳双歧杆菌 的含量为107109cuf/g、 罗伊。
4、氏乳杆菌的含量为106108cuf/g、 鼠李糖乳杆菌的含量为106 107cuf/g、 副干酪乳杆菌的含量为106107cuf/g。 3.根据权利要求1所述的乳酸菌组合物， 其特征在于： 所述乳酸菌组合核中乳双歧杆 菌、 罗伊氏乳杆菌、 鼠李糖乳杆菌和副干酪乳杆菌分别经过耐猪胆盐、 耐酸筛选的， 能耐 0.3的猪胆盐及pH为2.5的酸性环境。 4.根据权利要求1所述的乳酸菌组合物， 其特征在于： 所述罗伊氏乳杆菌为GL-104菌 株， 中国典型培养物保藏中心保藏号M209138。 5.根据权利要求1所述的乳酸菌组合物， 其特征在于： 所述蛋白物质为酪蛋白和乳铁蛋 白层， 其中酪蛋白和乳铁蛋白。
5、的重量比为1-5： 1-5。 6.一种治疗过敏体质的乳酸菌组合物的制备方法， 其特征在于包括如下步骤： (1)将乳双歧杆菌、 罗伊氏乳杆菌、 鼠李糖乳杆菌、 副干酪乳杆菌分别以1ml/100ml的接 种量接种至培养基中， 在3545下， 培养1224h， 得到活化的乳杆菌菌种； (2)将活化的四种菌种以重量份数： 乳双歧杆菌3040、 罗伊氏乳杆菌2030、 鼠李糖 乳杆菌1020、 副干酪乳杆菌1020混合后， 再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培 养液中， 在3545下， 培养1012h后， 离心取沉淀， 在410下保温610h后， 均 质， 得到组合菌； (3)将重量份数的：。
6、 低聚异麦芽糖3050、 蛋白物质3050、 硝酸纤维素510加水充分 混合成包被液， 将组合菌加入包被液混和均匀； (4)将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化， 过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组合 物。 7.根据权利要求6所述的制备方法， 其特征在于： 所述乳酸菌组合物中乳双歧杆菌的含 量为107109cuf/g、 罗伊氏乳杆菌的含量为106108cuf/g、 鼠李糖乳杆菌的含量为106 107cuf/g、 副干酪乳杆菌的含量为106107cuf/g。 8.根据权利要求6所述的制备方法， 其特征在于： 所述乳双歧杆菌、 罗伊氏乳杆菌、 鼠李 糖乳杆菌和副干酪乳杆菌在活化前分别经过耐猪胆盐、。
7、 耐酸筛选的， 能耐0.3的猪胆盐及 pH为2.5的酸性环境。 9.根据权利要求6所述的制备方法， 其特征在于： 所述罗伊氏乳杆菌为GL-104菌株， 中 国典型培养物保藏中心保藏号M209138。 10.根据权利要求6所述的制备方法， 其特征在于： 所述蛋白物质为酪蛋白和乳铁蛋白 层， 其中酪蛋白和乳铁蛋白的重量比为1-5： 1-5。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 107050063 A 2 治疗过敏体质的乳酸菌组合物及其制备方法 技术领域 0001 本发明涉及益生菌， 尤其是涉及一种具有显著的抗过敏作用且无任何毒副作用的 治疗过敏体质的乳酸菌组合物及其制备方法。 背景技术 00。
8、02 近几年来， 过敏疾病有逐年增加的趋势， 例如过敏性湿疹、 荨麻疹、 反复发作的过 敏性鼻炎及过敏性气喘， 已成为严重的社会问题。 有关过敏疾病的增加， 目前认为跟大环境 的变化有密切关系， 特别是在环境方面有更明显的关系。 西医治疗过敏性疾病多采用抗组 胺药、 激素类及受体拮抗剂等。 药物起效快、 对症治疗效果明显。 如抗组胺药物， 在结构上与 组胺相似， 可通过竞争组胺受体而阻断其对外周组织的效应。 但治疗上仍存在很大的缺陷， 往往作用时间短， 停药后易复发， 特别是可引起中枢抑制、 抗胆碱作用甚至心脏毒性作用等 副作用， 如常用的扑尔敏、 苯海拉明、 非那根、 赛庚啶等， 用后多有嗜。
9、睡， 口干、 头晕等副作 用， 病人不乐于接受， 高空、 高速作业者在工作期间不能使用， 在长期使用时又易产生耐药 性。 因此， 研究和寻找高效低毒、 效果好的抗过敏药物仍是一项重要而迫切的全球性课题。 发明内容 0003 为克服现有技术的缺点， 本发明目的在于提供一种具有显著的抗过敏作用且无任 何毒副作用的治疗过敏体质的乳酸菌组合物及其制备方法。 0004 本发明通过以下技术措施实现的， 一种治疗过敏体质的乳酸菌组合物， 包括乳酸 菌组合核， 所述乳酸菌组合核外包裹有包被层； 所述包被层包括重量份数的成份： 低聚异麦 芽糖3050、 蛋白物质3050、 硝酸纤维素510； 所述乳酸菌组合核由。
10、如下重量份数的菌 株组成： 乳双歧杆菌3040、 罗伊氏乳杆菌2030、 鼠李糖乳杆菌1020、 副干酪乳杆菌10 20。 0005 作为一种优选方式， 所述乳酸菌组合物中乳双歧杆菌的含量为107109cuf/g、 罗 伊氏乳杆菌的含量为106108cuf/g、 鼠李糖乳杆菌的含量为106107cuf/g、 副干酪乳杆菌 的含量为106107cuf/g。 0006 作为一种优选方式， 所述乳酸菌组合核中乳双歧杆菌、 罗伊氏乳杆菌、 鼠李糖乳杆 菌和副干酪乳杆菌分别经过耐猪胆盐、 耐酸筛选的， 能耐0.3的猪胆盐及pH为2.5的酸性 环境。 0007 作为一种优选方式， 所述罗伊氏乳杆菌为GL-。
11、104菌株， 中国典型培养物保藏中心 保藏号M209138。 0008 作为一种优选方式， 所述蛋白物质为酪蛋白和乳铁蛋白层， 其中酪蛋白和乳铁蛋 白的重量比为1-5： 1-5。 0009 本发明还一种治疗过敏体质的乳酸菌组合物的制备方法， 包括如下步骤： 0010 (1)将乳双歧杆菌、 罗伊氏乳杆菌、 鼠李糖乳杆菌、 副干酪乳杆菌分别以1ml/100ml 的接种量接种至培养基中， 在3545下， 培养1224h， 得到活化的乳杆菌菌种； 说 明 书 1/5 页 3 CN 107050063 A 3 0011 (2)将活化的四种菌种以重量份数： 乳双歧杆菌3040、 罗伊氏乳杆菌2030、 鼠。
12、 李糖乳杆菌1020、 副干酪乳杆菌1020混合后， 再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种 至培养液中， 在3545下， 培养1012h后， 离心取沉淀， 在410下保温610h后， 均质， 得到组合菌； 0012 (3)将重量份数的： 低聚异麦芽糖3050、 蛋白物质3050、 硝酸纤维素510加水 充分混合成包被液， 将组合菌加入包被液混和均匀； 0013 (4)将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化， 过滤后真空冻干12h得到乳酸菌 组合物。 0014 作为一种优选方式， 所述乳酸菌组合物中乳双歧杆菌的含量为107109cuf/g、 罗 伊氏乳杆菌的含量为106108cuf/g、。
13、 鼠李糖乳杆菌的含量为106107cuf/g、 副干酪乳杆菌 的含量为106107cuf/g。 0015 作为一种优选方式， 所述乳双歧杆菌、 罗伊氏乳杆菌、 鼠李糖乳杆菌和副干酪乳杆 菌在活化前分别经过耐猪胆盐、 耐酸筛选的， 能耐0.3的猪胆盐及pH为2.5的酸性环境。 0016 作为一种优选方式， 所述罗伊氏乳杆菌为GL-104菌株， 中国典型培养物保藏中心 保藏号M209138。 0017 作为一种优选方式， 所述蛋白物质为酪蛋白和乳铁蛋白层， 其中酪蛋白和乳铁蛋 白的重量比为1-5： 1-5。 0018 本发明具有显著的抗过敏作用， 其中在治疗过敏性湿疹、 治疗过敏性鼻炎和治疗 过敏。
14、性哮喘效果显著， 且因为是益生菌类产品， 对人体没有任何毒副作用。 具体实施方式 0019 下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。 0020 实施例1 0021 (1)菌种活化 0022 筛选出耐0.3猪胆盐、 耐PH为2.5的酸性环境的乳双歧杆菌、 罗伊氏乳杆菌(罗伊 氏乳杆菌为GL-104菌株， 中国典型培养物保藏中心保藏号M209138)、 鼠李糖乳杆菌和副干 酪乳杆菌， 将筛选出的四种菌分别以1ml/100ml的接种量接种至MRS培养基中， 在45下， 培 养12h， 得到活化的乳杆菌菌种； 0023 其中， MRS培养基的配方为： 在1000mL蒸馏水中加入10g蛋白胨、 8g牛肉。
15、浸粉、 20g葡 萄糖、 4g酵母浸膏、 0.05g四水硫酸锰、 1mL吐温80、 2g磷酸氢二钾、 5g乙酸钠、 0.2g硫酸镁、 2g 柠檬酸二铵； 0024 (2)制备组合菌 0025 将活化的四种菌种以重量份数： 乳双歧杆菌30g、 罗伊氏乳杆菌20g、 鼠李糖乳杆菌 10g、 副干酪乳杆菌10g混合后， 再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中， 在45 下， 培养10h后， 以6000r/min， 在5下， 离心15min， 取沉淀物， 在4下保温6h后， 均质， 得 到组合菌； 0026 (3)制备包被组合菌 0027 将以下重量的： 低聚异麦芽糖30g、 酪蛋白1。
16、5g、 乳铁蛋白15g、 硝酸纤维素5g加水 1000ml充分混合成包被液， 将组合菌加入包被液混和均匀； 说 明 书 2/5 页 4 CN 107050063 A 4 0028 (4)制备乳酸菌组合物 0029 将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化， 过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组 合物。 在乳酸菌组合物中乳双歧杆菌的含量为107109cuf/g、 罗伊氏乳杆菌的含量为106 108cuf/g、 鼠李糖乳杆菌的含量为106107cuf/g、 副干酪乳杆菌的含量为106107cuf/g。 0030 实施例2 0031 筛选出耐0.3猪胆盐、 耐PH为2.5的酸性环境的乳双歧杆菌、 罗伊氏乳。
17、杆菌(罗伊 氏乳杆菌为GL-104菌株， 中国典型培养物保藏中心保藏号M209138)、 鼠李糖乳杆菌和副干 酪乳杆菌， 将筛选出的四种菌分别以1ml/100ml的接种量接种至MRS培养基中， 在35下， 培 养24h， 得到活化的乳杆菌菌种； 0032 其中， MRS培养基的配方为： 在1000mL蒸馏水中加入10g蛋白胨、 8g牛肉浸粉、 20g葡 萄糖、 5g酵母浸膏、 0.06g四水硫酸锰、 1mL吐温80、 2g磷酸氢二钾、 5g乙酸钠、 0.2g硫酸镁、 2g 柠檬酸二铵； 0033 (2)制备组合菌 0034 将活化的四种菌种以重量份数： 乳双歧杆菌40g、 罗伊氏乳杆菌30g、。
18、 鼠李糖乳杆菌 20g、 副干酪乳杆菌20g混合后， 再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中， 在35 下， 培养12h后， 以4500r/min， 在10下， 离心20min， 取沉淀物， 在10下保温10h后， 均 质， 得到组合菌； 0035 (3)制备包被组合菌 0036 将以下重量的： 低聚异麦芽糖50g、 酪蛋白35g、 乳铁蛋白35g、 硝酸纤维素10g加水 1000ml充分混合成包被液， 将组合菌加入包被液混和均匀； 0037 (4)制备乳酸菌组合物 0038 将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化， 过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组 合物。 在乳酸菌组合物中乳。
19、双歧杆菌的含量为107109cuf/g、 罗伊氏乳杆菌的含量为106 108cuf/g、 鼠李糖乳杆菌的含量为106107cuf/g、 副干酪乳杆菌的含量为106107cuf/g。 0039 实施例3 0040 筛选出耐0.3猪胆盐、 耐PH为2.5的酸性环境的乳双歧杆菌、 罗伊氏乳杆菌(罗伊 氏乳杆菌为GL-104菌株， 中国典型培养物保藏中心保藏号M209138)、 鼠李糖乳杆菌和副干 酪乳杆菌， 将筛选出的四种菌分别以1ml/100ml的接种量接种至MRS培养基中， 在42下， 培 养13h， 得到活化的乳杆菌菌种； 0041 其中， MRS培养基的配方为： 在1000mL蒸馏水中加入1。
20、0g蛋白胨、 8g牛肉浸粉、 20g葡 萄糖、 4g酵母浸膏、 0.05g四水硫酸锰、 1mL吐温80、 2g磷酸氢二钾、 5g乙酸钠、 0.2g硫酸镁、 2g 柠檬酸二铵； 0042 (2)制备组合菌 0043 将活化的四种菌种以重量份数： 乳双歧杆菌35g、 罗伊氏乳杆菌23g、 鼠李糖乳杆菌 15g、 副干酪乳杆菌15g混合后， 再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中， 在42 下， 培养11h后， 以7000r/min， 在5下， 离心10min， 取沉淀物， 在4下保温10h后， 均质， 得到组合菌； 0044 (3)制备包被组合菌 0045 将重量份数的： 低聚异麦。
21、芽糖35g、 酪蛋白20g、 乳铁蛋白20g、 硝酸纤维素6g加水 说 明 书 3/5 页 5 CN 107050063 A 5 1000ml充分混合成包被液， 将组合菌加入包被液混和均匀； 0046 (4)制备乳酸菌组合物冻干粉 0047 将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化， 过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组 合物冻干粉。 在乳酸菌组合物冻干粉中乳双歧杆菌的含量为107109cuf/g、 罗伊氏乳杆菌 的含量为106108cuf/g、 鼠李糖乳杆菌的含量为106107cuf/g、 副干酪乳杆菌的含量为106 107cuf/g。 0048 下面通过临床试验用于进一步说明本发明。 0049 。
22、1、 临床观察 0050 本发明乳酸菌组合物冻干粉(按照实施例1方法制备)对治疗过敏性湿疹、 过敏性 鼻炎和过敏性哮喘患者各200例， 其中男性100例， 女性100例。 0051 2、 药物选择 0052 治疗组选本发明乳酸菌组合物冻干粉(按照实施例1方法制备)， 二个疗程(7天一 疗程)， 1.5g/袋， 0053 一日二次， 每次2袋， 开水冲服。 0054 3、 诊断标准 0055 (1)过敏性鼻炎 0056 过敏性鼻炎的诊断标准之一、 过敏性鼻炎主要症状如鼻痒、 连续喷嚏、 大量清水样 鼻涕等。 0057 过敏性鼻炎的诊断标准之二、 前鼻镜检查： 可见鼻粘膜苍白水肿， 大量清水样分泌。
23、 物， 若因持久性水肿可发生鼻息肉或息肉样变性。 0058 过敏性鼻炎的诊断标准之三、 具有典型的过敏症的病史(包括过敏性疾病家族史、 本人婴幼儿湿疹或哮喘病史)和典型的临床症状。 0059 过敏性鼻炎的诊断标准之四、 变应源皮肤试验： 主要观察皮试后的速发相过敏反 应， 是目前变态反应学界中的主要诊断方法， 它已广泛用于检测IgE介导的过敏反应。 变应 源皮肤试验可以在短时间内同时一次提供多种变应源的试验结果， 简捷方便。 应当注意的 是， 由于皮试的操作方法和对结果的评价方法较为复杂， 故应由经专门训练的医务人员施 行。 0060 过敏性鼻炎的诊断标准之五、 鼻腔分泌物涂片检查： 在变态反。
24、应发作期间， 鼻分泌 物中可见嗜酸性白细胞增多， 也可查见较多嗜酸性白细胞或肥大细胞。 0061 (2)过敏性湿疹 0062 过敏性湿疹是一种常见的炎症性皮肤病， 其临床特点为多形性皮疹， 倾向渗出， 对 称分布， 自觉剧烈搔痒， 病情易反复， 可多年不愈。 病因较复杂。 多由于某些外界或体内因素 的相互作用所致。 因果关系较复杂， 其他影响因素亦多， 因而与接触性皮炎不同。 原因不易 除去， 易倾向复发和慢性化。 0063 (3)、 过敏性哮喘 0064 大部分过敏性哮喘患者都存在过敏现象或者有过敏性鼻炎， 有过敏性鼻炎的哮喘 患者发病前兆会有打喷嚏、 流鼻涕、 鼻痒、 眼痒、 流泪等症状。。
25、 由于哮喘是一种过敏特征的炎 症性疾病， 所以诊断上往往会采取一些过敏标记性手段进行检查。 其中最为主要的方法之 一是一氧化氮标记法。 此种气体是从炎症的组织中产生的。 在有炎症的肺里， 一氧化氮可沿 说 明 书 4/5 页 6 CN 107050063 A 6 气道排出。 虽然， 一氧化氮的含量并不能准确地预知哮喘的炎症程度， 但早期的研究仍是通 0065 过此法来确定其与哮喘症状程度的关系。 0066 4、 疗效标准 0067 参照国家中医药管理局1994年实施的 中医病诊断疗效标准 拟定如下： 0068 临床痊愈： 中医临床症状、 体征消失或基本消失； 0069 显效： 中医临床症状、 。
26、体征明显改变； 0070 有效： 中医临床症状、 体征均有好转； 0071 无效： 中医临床症状、 体征均无明显改善； 0072 5、 治疗结果 0073 组别治疗人数治愈显效有效无效总有效率 过敏性鼻炎2001811360100 过敏性湿疹2001752050100 过敏性哮喘200169228199.5 0074 6、 结论 0075 本发明乳酸菌组合物冻干粉具有显著的抗过敏作用， 其中治疗过敏性鼻炎总有效 率为100， 治疗过敏性湿疹总有效率为100， 治疗过敏性哮喘总有效率为99.5。 0076 典型病例 0077 病例1： 李某某， 男， 50岁。 症状： 患者的过敏体很多， 比如说。
27、尘土， 花草。 哮喘严重， 经当地医院检查为过敏性哮喘， 在当地医院治疗二周后， 效果不明显， 经人介绍饮用本发明 乳酸菌组合物冻干粉(按照实施例1方法制备， 一日二次， 每次二包)二周后， 哮喘明显好转， 继续巩固饮用一周后已哮喘全愈。 随访一年未复发。 0078 病例2： 张某， 女， 15岁。 症状： 患者2年左右开始手臂上初为多数密集的粟粒大小的 丘疹、 丘疱疹或小水疱， 基底潮红， 逐渐融合成片， 由于搔抓， 丘疹、 丘疱疹或水疱顶端抓破 后呈明显的点状渗出及小糜烂面等症状， 经当地医院检查为过敏性湿疹， 在当地医院治疗 二周后， 效果不明显， 经人介绍服用本发明乳酸菌组合物冻干粉(。
28、按照实施例1方法制备， 一 日二次， 每次二包)一周后， 咽炎症状明显好转， 继续巩固服用一周后已咽炎症状全无， 治疗 全愈。 随访一年未复发。 0079 病例3： 赵某某， 女， 55岁。 症状： 患者常打喷嚏、 流鼻涕， 鼻子痒， 有过敏史， 经检查 为过敏性鼻炎， 在当地医院治疗一周后， 效果不明显， 经人介绍服用本发明每次二包(按照 实施例2方法制备， 一日二次， 每次二包)二周后， 鼻炎症状明显好转， 继续巩固服用一周后 全愈。 随访一年未复发。 0080 以上是对本发明治疗过敏体质的乳酸菌组合物及其制备方法进行了阐述， 用于帮 助理解本发明， 但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制， 任何未背离本发明原理下 所作的改变、 修饰、 替代、 组合、 简化， 均应为等效的置换方式， 都包含在本发明的保护范围 之内。 说 明 书 5/5 页 7 CN 107050063 A 7 。