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1、(10)申请公布号 CN 102166243 A (43)申请公布日 2011.08.31 CN 102166243 A *CN102166243A* (21)申请号 201110073133.8 (22)申请日 2011.03.25 A61K 36/28(2006.01) A61P 3/10(2006.01) (71)申请人 新疆大学 地址 830046 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 胜利路 14 号 (72)发明人 晁群芳 方美珠 刘小宁 樊永红 王咏星 徐鑫 (54) 发明名称 新疆一枝蒿制剂及用于治疗糖尿病药物中的 应用 (57) 摘要 本发明公开一种用于治疗糖尿病药物中应 用的新疆一枝。
2、蒿制剂及制备。通过将新疆一枝 蒿全草粉碎, 称重加 3 倍体积的乙醚放置 8h 后 过滤, 沉淀物用 80乙醇在 35下超声提取, 每 次 30-40min, 过滤得到乙醇提取液, 用 95乙醇 沉淀、 离心取上清液, 乙酸乙酯萃取, 过滤得乙酸 乙酯部位, 乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用 20、 40、 60、 80不同浓度的乙醇溶液洗脱, 收集 60和 80的乙醇洗脱物, 减压浓缩成浸 膏与黄芪浸膏按重量比 (5-10) 1 比例配伍, 配置一定量的纯水制备获得成品制剂。制备获 得新疆一枝蒿制剂具有降血糖活性, 使用剂量为 67.5mg/kg, 在治疗糖尿病药物中具有广泛的应用 领域。 。
3、(51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 8 页 附图 2 页 CN 102166247 A1/1 页 2 1. 一种在治疗糖尿病药物中应用的新疆一枝蒿制剂, 其特征在于, 通过将新疆一枝蒿 全草粉碎, 称重加 3 倍体积的乙醚放置 8h 后过滤, 沉淀物用 80乙醇在 35下超声提取, 每次 30-40min, 过滤得到新疆一枝蒿乙醇提取液, 用 95乙醇沉淀过夜, 离心取上清液, 乙 酸乙酯萃取, 萃取温度为常温, 过滤得乙酸乙酯部位, 乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用 20、 40、 60、 80不同浓度的乙醇溶液洗脱。
4、, 收集 60和 80的乙醇洗脱物, 减压浓 缩成浸膏, 浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比 (5-10) 1 比例配伍, 按照中草药液体药剂 通常做法, 配置一定量的纯水制备获得成品制剂。 2. 一种如权利要求 1 所述的新疆一枝蒿制剂的制备方法, 其特征在于, 具体包括如下 步骤 : (1)、 首先将新疆一枝蒿全草粉碎成粉末, 称重加3倍体积的乙醚放置8小时后过滤, 沉 淀物用 80乙醇在 35下超声提取, 每次 30-40min, 过滤得到新疆一枝蒿乙醇提取液 ; (2)、 将新疆一枝蒿提取液用 95乙醇沉淀过夜, 过滤, 旋转蒸发除去乙醇, 乙酸乙酯萃 取, 萃取温度为常温, 得乙酸乙酯部。
5、位, 将乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用 20、 40、 60、 80不同浓度的乙醇溶液洗脱, 收集 60和 80的乙醇洗脱物减压浓缩成浸膏, 浓 缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比 (5-10) 1 比例配伍, 按照中草药液体药剂通常做法, 配 置一定量的纯水制备获得成品制剂。 3. 如权利要求 1 所述的新疆一枝蒿制剂在治疗糖尿病药物中的应用, 其特征在于, 所 述的使用剂量为 67.5mg/kg。 权 利 要 求 书 CN 102166243 A CN 102166247 A1/8 页 3 新疆一枝蒿制剂及用于治疗糖尿病药物中的应用 发明领域 0001 本发明涉及中草药制剂技术领域。具体的说,。
6、 本发明涉及一种用于治疗糖尿病药 物中应用的新疆一枝蒿制剂及制备技术领域。 背景技术 0002 近年来, 由于生活水平的提高、 饮食结构的改变、 日趋紧张的生活节奏以及少动多 坐的生活方式等诸多因素, 全球糖尿病发病率增长迅速, 糖尿病已经成为继肿瘤、 心血管病 变之后第三大严重威胁人类健康的慢性疾病。对于糖尿病的治疗, 西医多采用饮食、 口服 降糖药物及胰岛素替代等方法, 它们的优点是降糖作用肯定, 起效快, 但不足之处是副作用 多。 天然药物具有来源丰富, 毒副作用小、 易于接受和长期服用的优点, 因此, 近年来国内外 有关植物中天然降糖物质的研究和开发十分活跃。 0003 糖尿病 (DM。
7、, Diabetes Mellitus) 是一种于遗传因素和多种环境因素相关联的以 慢性高血糖为特征的代谢紊乱综合症, 目前虽然有一些不同作用靶点的药物用于治疗糖尿 病, 但有时并不能达到预期治疗效果。 因此, 能够开发高效的治疗糖尿病的药物是治疗糖尿 病的核心问题。近年来研究发现, 中药的降血糖作用温和持久, 副作用小, 且作用机制具有 多效应、 多位点及多功能等特点。 所以, 开发高效低毒的抗糖尿病中药将是一个具有发展前 景的研究领域, 而新疆一枝蒿的药效作用近年来成为研究的热点, 研究开发新疆一枝蒿在 治疗糖尿病药物的相关产品具有重要的现实意义。 发明内容 0004 针对现有技术中未见报。
8、道有关新疆一枝蒿在治疗糖尿病药物中的应用的技术现 状, 本发明旨在提供新疆一枝蒿制剂及用于治疗糖尿病药物中应用。 0005 本发明的技术方案 : 0006 通过以新疆一枝蒿为原料, 将新疆一枝蒿全草粉碎、 置于乙醚溶液中浸泡, 过滤旋 转蒸发除去乙醚溶液后用乙醇超声提取、 提取液用乙醇沉淀、 离心, 经乙酸乙酯萃取、 聚酰 胺柱层析、 最后浓缩制成浸膏, 浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比配伍溶于水中制成液体 制剂。该制剂用于治疗糖尿病药物中应用, 使用剂量小, 疗效高, 经检测具有良好的降血糖 活性作用。 0007 具体的, 本发明提供了一种在治疗糖尿病药物中应用的新疆一枝蒿制剂, 通过将 新疆。
9、一枝蒿全草粉碎, 称重加 3 倍体积的乙醚放置 8h 后过滤, 沉淀物用 80乙醇在 35下 超声提取, 每次 30-40min, 过滤得到新疆一枝蒿乙醇提取液, 用 95乙醇沉淀过夜, 离心取 上清液, 乙酸乙酯萃取, 萃取温度为常温, 过滤得乙酸乙酯部位, 乙酸乙酯部位聚酰胺柱层 析依次采用 20、 40、 60、 80不同浓度的乙醇溶液洗脱, 收集 60和 80的乙醇洗脱 物, 减压浓缩成浸膏, 浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比(5-10)1比例配伍, 按照中草药 液体药剂通常做法, 配置一定量的纯水制备获得成品制剂。 0008 进一步, 本发明提供了一种在治疗糖尿病药物中应用的一枝蒿制剂。
10、的制备方法, 说 明 书 CN 102166243 A CN 102166247 A2/8 页 4 具体包括如下步骤 : 0009 (1)、 首先将新疆一枝蒿全草粉碎成粉末, 称重加 3 倍体积的乙醚放置 8 小时后过 滤, 沉淀物用 80乙醇在 35下超声提取, 每次 30-40min, 过滤得到新疆一枝蒿乙醇提取 液 ; 0010 (2)、 将新疆一枝蒿提取液用 95乙醇沉淀过夜, 过滤, 旋转蒸发除去乙醇, 乙酸乙 酯萃取, 萃取温度为常温, 得乙酸乙酯部位, 将乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用 20、 40、 60、 80不同浓度的乙醇溶液洗脱, 收集 60和 80的乙醇洗脱物减压浓缩。
11、成浸 膏, 浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比 (5-10) 1 比例配伍, 按照中草药液体药剂通常做 法, 配置一定量的纯水制备获得成品制剂。 0011 新疆一枝蒿 (Artemisia rupestris L.), 别名岩蒿, 菊科蒿属, 是新疆哈萨克族 和维吾尔族民间传统用药, 该药材记载于我国清代赵学敏的 本草纲目拾遗 , 已收 药品 标准 维吾尔药分册和 维吾尔药志 ( 上册 ) 。新疆一枝蒿为多年生草本, 高 20-50cm, 全 株具特异芳香。茎呈圆柱形, 直径 1mm 4mm, 有紫茎和淡黄绿茎 . 表面略有纵棱, 质脆, 断面淡黄、 中空, 气香特异, 味淡。叶绿色, 枯时淡黄色。
12、, 裂片呈狭披针形, 长 2mm 8mm, 宽 0.5mm 1mm, 两面具有疏短柔毛, 无柄或具短柄, 基部有假托叶。头状花序半球形, 黄紫色, 径为 5mm 8mm, 梗长 3mm 5mm, 总苞 3 4 列, 外层草质条形。多于 5 月下旬至 6 月上旬 萌发, 生长较缓慢, 7月上, 中旬现蕾, 8月开始开花, 一直可开放到9月上, 中旬, 首批开放的 花则在此时进入果期, 果期可延至 10 月上旬, 很快枯萎, 进入休眠期。国内临床资料表明, 作为民族药, 它具有清热解毒、 健胃消食、 镇静止吐、 抗过敏等功效, 用于治疗毒蛇咬伤、 荨 麻疹、 消化不良、 感冒、 肝炎、 过敏性疾病。
13、等。 0012 本发明选用的黄芪浸膏可通过本领域熟知常见的技术手段所获得。 0013 本发明通过用四氧嘧啶诱导建立小鼠糖尿病模型, 研究了制备获得的新疆一枝蒿 制剂的降血糖作用, 最佳的使用剂量为 67.5mg/kg。 0014 通过实施本发明具体的发明内容, 可以达到以下效果 : 0015 1. 本发明通过对制备获得的新疆一枝蒿制剂进行提取, 分析给药后四氧嘧啶糖尿 病 KM 小鼠体重、 血糖、 SOD 以及 MDA 变化, 并对其组织形态进行观察, 来探究新疆一枝蒿提 取液对糖尿病KM小鼠的影响。 结果表明 : 本发明提供的新疆一枝蒿制剂具有良好的降血糖 活性, 在制备治疗糖尿病药物中具有。
14、广阔的应用前景。 0016 2. 本发明所需试剂均为分析纯, 制备方法为超声波提取技术, 操作简便快捷、 无需 加热、 提出率高、 速度快、 提取物的结构未被破坏、 效果好, 显示出明显的优势, 可直接进行 放大生产。 附图说明 0017 图 1 所示为新疆一枝蒿制剂的制备工艺流程图。 0018 图 2 所示为新疆一枝蒿制剂对实验性高血糖小鼠肝脏的影响图, 图中 a 代表糖尿 病小鼠肝脏 (HE 染色, 10)、 b 代表新疆一枝蒿制剂治疗肝脏 (HE 染色, 10)、 c 代表药物 治疗小鼠肝脏 (HE 染色, 10)、 d 代表正常小鼠肝脏 (HE 染色, 10)。 0019 图 3 所示。
15、为新疆一枝蒿制剂对实验性高血糖小鼠肾脏的影响图, 图中 a 代表糖尿 病小鼠肾脏 (HE 染色, 10)、 b 代表新疆一枝蒿制剂治疗肾脏 (HE 染色, 10)、 c 代表药物 说 明 书 CN 102166243 A CN 102166247 A3/8 页 5 治疗小鼠肾脏 (HE 染色, 10)、 d 代表正常小鼠肾脏 (HE 染色, 10)。 具体实施方式 0020 下面, 举实施例说明本发明, 但是, 本发明并不限于下述的实施例。 0021 本发明中涉及到的主要原辅材料和设备有 : 0022 主要原料及选用试剂 : 新疆一枝蒿, 采自天山支脉 - 天格尔山北路, 采回后置阴 凉处自然。
16、干燥、 粉碎装袋后备用。黄芪浸膏可通过本领域熟知常见的技术手段所获得。 0023 昆明种小白鼠, 雄性, 购自新疆医科大学医学实验动物中心 ( 动物许可证号 : SYXK( 新 )2003-0001)。 0024 四氧嘧啶, 购自美国 Sigma 公司 ; SOD, 南京建成生物工程研究所产品 ; MDA, 南京建 成生物工程研究所产品 : 石油醚, 分析纯试剂, 天津市富宇精细化工有限公司 ; 无水乙醇, 分析纯试剂, 天津市富宇精细化工有限公司 ; 乙酸乙酯, 分析纯试剂, 天津市富宇精细化工 有限公司。盐酸二甲基胍, 北京中慧药业有限公司。 0025 主要仪器 : 0026 超声波细胞粉。
17、碎机隔音箱, 宁波新芝生物科技股份有限公司 ; JFSD-70 型实验室 万能粉碎机, 上海嘉定粮油检测仪器有限公司 ; RE-5299 型旋转蒸发器, 巩义市予华仪器有 限责任公司 ; 循环水式真空泵, 巩义市予华仪器有限责任公司 ; AL104-IC 型电子天平, 梅特 勒-托利多仪器有限公司 ; KQ-250DE型数控超声波清洗器, 昆山市超声仪器有限公司 ; 乐康 全血糖测定仪, 罗氏诊断公司产品 ( 批号 2005-06 22381501)。 0027 本发明中选用的所有试剂和仪器都为本领域熟知选用的, 但不限制本发明的实 施, 其他本领域熟知的一些试剂和设备都可适用于本发明以下实施。
18、方式的实施。 0028 实施例一 : 新疆一枝蒿制剂的制备 0029 参见附图 1, 具体描述新疆一枝蒿制剂的制备如下 : 0030 (1)、 首先将新疆一枝蒿全草粉碎成粉末, 称重加 3 倍体积的乙醚放置 8 小时后过 滤, 沉淀物用 80乙醇在 35下超声提取, 每次 30-40min, 过滤得到新疆一枝蒿乙醇提取 液 ; 0031 (2)、 将新疆一枝蒿提取液用 95乙醇沉淀过夜, 过滤, 旋转蒸发除去乙醇, 乙酸乙 酯萃取, 萃取温度为常温, 得乙酸乙酯部位, 将乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用 20、 40、 60、 80不同浓度的乙醇溶液洗脱, 收集 60和 80的乙醇洗脱物减压浓。
19、缩成浸 膏, 浓缩后的浸膏与黄芪浸膏按重量比 (5-10) 1 比例配伍, 按照中草药液体药剂通常做 法, 配置一定量的纯水制备获得成品制剂。 0032 通过将上述技术手段获得新疆一枝蒿制剂, 分析给药后四氧嘧啶糖尿病 KM 小鼠 体重、 血糖、 SOD 以及 MDA 变化, 并对其组织形态进行观察, 来探究新疆一枝蒿提取液对糖 尿病 KM 小鼠的影响。结果表明 : 通过用四氧嘧啶诱导建立小鼠糖尿病模型, 本发明提供的 新疆一枝蒿制剂具有良好的降血糖活性功效, 在制备治疗糖尿病药物中具有广阔的应用前 景。 0033 实施例二 : 新疆一枝蒿制剂的制备 0034 参见附图 1, 按照实施例一所述。
20、的技术方案, 通过将新疆一枝蒿全草粉碎, 称重加 3 倍体积的乙醚放置 8h 后过滤, 沉淀物用 80乙醇在 35下超声提取, 每次 30-40min, 过 说 明 书 CN 102166243 A CN 102166247 A4/8 页 6 滤得到新疆一枝蒿乙醇提取液, 用 95乙醇沉淀过夜, 离心取上清液, 乙酸乙酯萃取, 萃取 温度为常温, 过滤得乙酸乙酯部位, 乙酸乙酯部位聚酰胺柱层析依次采用 20、 40、 60、 80不同浓度的乙醇溶液洗脱, 收集 60和 80的乙醇洗脱物, 减压浓缩成浸膏, 浓缩后 的浸膏与黄芪浸膏按重量比51比例配伍, 按照中草药液体药剂通常做法, 配置一定量。
21、的 纯水制备获得成品制剂。 0035 通过分析给药后四氧嘧啶糖尿病 KM 小鼠体重、 血糖、 SOD 以及 MDA 变化, 并对其组 织形态进行观察, 来探究新疆一枝蒿提取液对糖尿病 KM 小鼠的影响。结果表明 : 本发明提 供的新疆一枝蒿制剂制备中, 采用上述技术工艺获得的新疆一枝蒿制剂, 具有显著的降血 糖活性, 使用剂量为 67.5mg/kg。 0036 实施例三 : 实验性四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的建立 0037 取体重 18-22g 的昆明种雄性小鼠 120 只, 适应性喂养一周, 随机选取 10 只为正 常对照组 (Nomal control group, NC), 其余腹腔注射四氧。
22、嘧啶 200mg/kg( 四氧嘧啶用生 理盐水配置 ), 注射前禁食不禁水 12h, 造成实验性高血糖模型, 造模型后 48h 内给与 10 葡萄糖水, 防止动物发生低血糖性死亡, 72h 后, 小鼠尾端取血测血糖 ( 取血前小鼠禁食 12h)。观察动物的饮水、 饲料摄入情况, 是否出现糖尿病典型 “三多” 症状。最后选取血糖 值 11.1mmol/L 的小鼠为实验性糖尿病动物模型。 0038 四氧嘧啶可对胰岛 细胞造成损伤, 从而影响了胰岛素的分泌, 使动物血糖升 高。 昆明种小鼠注射四氧嘧啶造模, 3d后各组出现多饮、 多食、 多尿、 体重减轻的 “三多一少” 症状, 并逐渐加重。给药后,。
23、 采用新疆一枝蒿制剂高、 中、 低剂量组昆明种小鼠的症状减轻, 且随实验进程症状得到缓解 ; 而模型对照组的症状随实验进程加重。 0039 实施例四 : 新疆一枝蒿制剂对实验性高血糖小鼠的降血糖作用 0040 将造模成功的糖尿病模型小鼠 50 只, 正常小鼠 10 只进行分组, 共分为 6 组, 包括 正常对照组、 糖尿病模型对照组、 药物治疗组和 3 个实验组 : 0041 糖尿病模型对照组 (Diabetic control group, DC), 每天灌胃 0.9生理盐水 ; 0042 新疆一枝蒿制剂低剂量组 (Low dose, L), 每天灌胃 33.75mg/kg ; 0043 新。
24、疆一枝蒿制剂中剂量组 (Middle dose, M), 每天灌胃 67.5mg/kg ; 0044 新疆一枝蒿制剂高剂量组 (High dose, H), 每天灌胃 135mg/kg ; 0045 正常对照组 (Nomal control group, NC), 每天灌胃 0.9生理盐水 ; 0046 药物治疗组 (Cure group, CG), 每天灌胃 1.0g/kg。 0047 连续给药 14d, 每周测一次体重、 尾静脉取血测一次空腹血糖浓度, 见表 1、 表 2。 0048 表 1 : 实验期间小鼠体重 (g) 变化情况 0049 说 明 书 CN 102166243 A CN 。
25、102166247 A5/8 页 7 0050 注 : #p 0.01, #p 0.05 与正常对照组相比 *p 0.01, *p 0.05 与模型对 照组相比 0051 前期实验证明, 注射四氧嘧啶后小鼠体重明显下降, 注射四氧嘧啶 72h 后, 小鼠体 重间无明显差异。 随着实验进程的进行, 3个实验组糖尿病小鼠的体重变化与糖尿病模型组 相比有统计学差异 (t 检验, P 0.05), 模型对照组小鼠体重增长比较缓慢, 其余各组动物 体重均稳定增长, 表明新疆一枝蒿制剂能够改善由于四氧嘧啶化学损伤而导致的小鼠体重 下降。 0052 表 2 : 新疆一枝蒿制剂对糖尿病小鼠血糖 (mmo l/。
26、L) 水平的影响 0053 0054 注 : #p p 0.01, #p 0.05 与正常对照组相比 说 明 书 CN 102166243 A CN 102166247 A6/8 页 8 0055 *p p 0.01, *p 0.05 与模型对照组相比 0056 由表 2 中数据可知, 模型组的血糖值明显高于正常组, 说明实验造模是成功的。不 同剂量的新疆一枝蒿制剂对糖尿病小鼠降血糖作用存在着显著差异 (p 0.01)。一枝蒿 制剂高剂量组和中剂量组可使糖尿病 KM 小鼠的高血糖降低, 而一枝蒿制剂低剂量组与模 型组相比具有差异不显著 (p 0.05), 与正常对照组相比差异极显著 (p 0.。
27、01), 说明新 疆一枝蒿制剂低剂量组无明显的降血糖作用。当剂量为 67.5mg/kg 时, 降血搪作用最强 (P 0.01), 继续增加剂量, 血糖下降不明显。本实验选用 67.5mg/kg 作为治疗糖尿病的最佳 剂量。 0057 实施例五 : 新疆一枝蒿制剂对实验性高血糖小鼠 SOD、 MDA 酶活的影响 0058 末次给药前禁食 12h, 给药 2h 后眼眶静脉采血, 0.5h 内 6000r/min 离心 15min 分 离血清, 按试剂盒方法测定空腹血清超氧化物歧化酶 (SOD)、 (MDA) 指标。 0059 (1) 血清 SOD 活性测定 0060 测定方法 : 取血清, 超氧化。
28、物歧化酶的测定使用超氧化物歧化酶测定试剂盒, 按说 明书进行操作。 0061 公式 : 总 SOD 活力 (U/ml) ( 对照管吸光度 - 测定管吸光度 )/ 对照管吸光度吸 光度 /50 * 反应体系的稀释倍数 * 样本测试前的稀释倍数 0062 操作步骤 0063 0064 注 : a * 代表样本取样量和蒸馏水取样量 0065 混匀, 室温放置 10min, 于酶标仪中测定血清中的 SOD 活力, 结果见表 3。 0066 (2) 血清 MDA 含量测定 0067 测定方法 : 取血清, 脂质过氧化物的测定使用脂质过氧化物测定试剂盒, 按说明书 进行操作。 0068 操作步骤 0069。
29、 标准管 标准空白管 测定管 测定空白管 * 10nmol/ml 标准品 (ml) a* - - 无水乙醇 (ml) - a* - 测试样品 (ml) - - a* 说 明 书 CN 102166243 A CN 102166247 A7/8 页 9 混合试剂 (ml) 4 4 4 0070 注 : a* 表不所需的样品量、 标准品量、 无水乙醇的量、 试剂一的量四者均相等。 0071 * 表示测定空白管可省略不做用标准空白管来代替。 0072 漩涡混匀器混匀, 试管口用保鲜膜扎紧, 用针头刺一小孔, 95水浴 40min, 取出后 用流水冷却, 然后 3500-4000r/min, 离心 1。
30、0min(3000r/min 以下离心需延长, 目的使沉淀完 全 ) 取上清, 至于酶标板中用酶标仪测定其活力。 0073 公式 : 血清中 MDA 含量 (nmol/ml) ( 测定管吸光度 - 测定空白管吸光度 )/( 标 准管吸光度 - 标准空白管吸光度 )* 标准品浓度 (10nmol/ml)* 样品测试前稀释倍数 0074 表 3 : 新疆一枝蒿制剂对糖尿病小鼠 SOD 和 MDA 的影响 0075 0076 注 : #p 0.01, #p 0.05 与正常对照组相比 *p 0.01, *p 0.05 与模型 对照组相比 0077 SOD 对机体的氧化与抗氧化平衡起着重要的作用, 能。
31、清除超氧阴离子自由基, 保护 细胞免受损伤。MDA 是机体内不饱和脂肪酸在自由基的作用下产生的脂质过氧化产物。由 表 3 可以看出, 胰岛细胞经 Alloxan 作用后, 其 SOD 的活性有所降低, 而 MDA 明显升高 (p 0.05), 说明胰岛细胞受到一定程度的损伤。而给予新疆一枝蒿制剂后, 其 SOD 的值明显 升高, 一枝蒿制剂(高、 中、 低)三个剂量组和模型组相比具有显著性差异(p0.05), 同时 MDA的含量明显降低, 三个剂量组和模型组相比具有显著性差异(p0.05), 说明新疆一枝 蒿制剂的抗氧化能力也有所提高。 0078 实施例六 : 新疆一枝蒿制剂对实验性高血糖小鼠。
32、肝脏和肾脏的影响 0079 将小鼠脱颈椎处死, 立即解剖取肝脏、 肾脏组织, 制作其石蜡切片 : 0080 通过采用 10的甲醛溶液固定、 不同浓度乙醇脱水、 石蜡包埋、 切片机切片、 HE 染 色、 观察拍照。通过显微镜观察结果显示 : 0081 参见附图 2 中 a、 b、 c、 d。正常组小鼠肝小叶结构正常, 未见纤维增生及纤维间隔 形成, 肝索、 窦比例正常, 无炎细胞浸润 ; 对照组小鼠肝细胞肿胀, 肝小叶结构模糊, 由大小 不等的圆形、 椭圆形或不规则形肝细胞结节 ( 假小叶 ) 所取代, 结节内肝细胞索排列紊乱, 肝细胞核增大, 染色加深 ; 而采用本发明提供的新疆一枝蒿制剂中、。
33、 高剂量组小鼠肝小叶多 说 明 书 CN 102166243 A CN 102166247 A8/8 页 10 数结构清晰, 少量结构模糊, 肝细胞索排列基本清晰, 部分细胞肿胀。表明采用本发明提供 的新疆一枝蒿制剂具有很好的保肝作用。 0082 参见附图 3 中 a、 b、 c、 d。小鼠处死后解剖取出其肾脏发现对照组小鼠肾脏肿胀, 肾小球弥漫性增大, 毛细血管腔变窄 ; 正常组小鼠的毛细血管正常 ; 而采用本发明提供的 新疆一枝蒿制剂中、 高剂量组小鼠肾脏的损伤状况有一定的改善作用。表明采用本发明提 供的新疆一枝蒿制剂对于肾脏的损伤具有很好的改善作用。 说 明 书 CN 102166243 A CN 102166247 A1/2 页 11 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 102166243 A CN 102166247 A2/2 页 12 图 3 说 明 书 附 图 CN 102166243 A 。