技术领域
本发明涉及一种中药材的有效部位及其用途，具体的说是涉及香蕉皮的有效部位及其在 制备预防和治疗高血压药物中的用途。
背景技术
香蕉为常见水果，其皮资源丰富，具有多种药用功效。可消食化积，涩肠止泻。用于食 滞，消化不良，痢疾，腹痛。《中药学大辞典》中载成熟香蕉的干果皮甲醇提取物的水溶性部 分有抑制真菌、细菌的作用。抗真菌物质可能是焦皮素(Musarin)。《广东中药》载“内服治 痢疾，炒过煎水服，治霍乱肚痛。煎水洗皮肤痕(骚)痒。”
近年来随着高血压发病率的提高，人们积极寻找能够预防治疗高血压的药物。《现代中药 学大辞典》中记载香蕉皮或果柄30～60g。煎汤服，可治高血压(《食物中药与便方》)。
发明内容
本发明的目的在于提供一种香蕉皮的有效部位。
本发明的再一目的在于提供所述香蕉皮有效部位的用途。
本发明的目的是通过如下的技术方案实现的：
本发明提供的香蕉皮的有效部位，其为由如下的方法得到：
a、提取：将干燥的香蕉皮粉碎至10～20目，使用水和/或醇作为提取溶剂进行提取；
b、树脂吸附：将步骤a得到的提取液浓缩，上大孔吸附树脂，先用3～4个柱体积的水洗 去杂质，然后用洗脱溶剂进行洗脱，直至薄层检识无明显斑点为止；收集洗脱液，干燥，即 得香蕉皮有效部位；
所述的洗脱溶剂为水和/或10～50V％的甲醇、乙醇或丙酮的水溶液。
所述步骤a的香蕉皮为尖叶蕉(Musa acuminata)或长梗蕉(Musa balbisiana)或这两个 原始野生蕉种内或种间杂交后代进化而成的香蕉栽培品种的果皮。包括香蕉(Musa nana Lour.)和大蕉(Musa sapientum L.)的果皮。
所述步骤a的提取溶剂中水和醇的混合物是50～95V％的乙醇水溶液。
所述步骤a的提取为加入6～8倍量的提取溶剂提取2～3次，可以是在室温下浸渍提取24～ 48h；或为用20～100Hz的超声波提取15～30min/次；或在60～80℃加热提取1～2h/次；或 加热回流提取1～2h/次。
所述步骤b所采用的树脂包括D系列，HPD系列、HP系列、XAD系列和AB-8型大孔 吸附树脂。
所述D系列的大孔吸附树脂优选D-101；HPD系列的大孔吸附树脂优选HPD-500型； HP系列的大孔吸附树脂优选HP-20型；XAD系列的大孔吸附树脂优选XAD-4型。
洗脱溶剂为水及10～50％的甲醇、乙醇或丙酮的水溶液。
本发明提供的香蕉皮有效部位，其制备方法还包括在步骤a中或之后进行脱脂。具体步 骤如下：
在步骤a中，将干燥香蕉皮粉碎至10～20目之后，先用6～8倍量的极性较小的有机溶 剂对香蕉皮进行提取2～3次，残渣再用水或/和乙醇作为溶剂提取；
或在步骤a的提取之后，将提取液浓缩至不含有机溶剂，加入水，制成密度为1.1～1.2g/mL 的悬浮液，再用极性较小的有机溶剂进行萃取2～3次，分出水相。
所述极性较小的有机溶剂包括石油醚、汽油、环己烷、正己烷、乙醚等。脱脂过程以2～ 3次为最佳。
本发明提供的香蕉皮有效部位，其制备方法还包括在步骤b之后进行萃取。具体步骤如 下：
在步骤b的洗脱之后，水洗脱液浓缩至一定体积，用等体积的有机溶剂萃取3～4次，分 出有机相。浓缩，即得香蕉皮有效部位。
所述有机溶剂包括乙醚、醋酸乙酯、正丁醇等。
本发明提供的香蕉皮的有效部位，是来源于香蕉皮的活性成分包括原儿茶醛在内的香蕉 皮多酚类成分。
本发明提供一种所述香蕉皮的有效部位在制备预防和治疗高血压药物中的用途。将香蕉 皮有效部位，即含原儿茶醛在内的香蕉皮多酚类性抗高血压有效成分，使之与药学上可接受 的载体或其他适宜赋形剂相结合，按照常规方法制成经口服给药的内用剂型和非口服给药的 注射剂或其它剂型，可以临床用于预防和治疗高血压。
本发明首次分离出了香蕉皮的有效部位香蕉皮多酚，并利用脱脂、溶剂提取和大孔吸附 树脂法，得到纯度较高的香蕉皮多酚。本发明提供的香蕉的有效部位的制备方法工艺操作简 单，生产成本低，适宜工业化生产。而且，通过二肾一夹型肾性高血压大鼠(RHR)模型实验 证明活性部位在150.0mg.kg-1.d-1的降压作用与卡托普利5.0mg.kg-1.d-1相当，提示了该多酚 类成分可作为活性成分在制备预防和治疗高血压药物中的应用。
附图说明
图1为本发明实施例1～3分离制备出的香蕉皮多酚与各对照品对照的TLC图谱；薄层 板为硅胶GF254薄层预制板(青岛海洋化工公司)，展开剂为石油醚-醋酸乙酯-甲酸(8∶ 4∶0.1)，显色为①碘蒸气显色，②紫外灯下(365nm)观察荧光，③紫外灯下(254nm)观 察荧光，④铁氰化钾-三氯化铁显色剂显色；其中1为实施例1的香蕉皮多酚，2为呋喃甲 酸，3为实施例2的香蕉皮多酚，4为原儿茶醛，5为实施例3的香蕉皮多酚。
具体实施方式
实施例1、
取干燥香蕉皮100g粉碎至20目，用500mL95V％乙醇回流提取2次，每次3h。合并提 取液，减压浓缩近干，得稠浸膏18.46g，悬浮于少量水中，用环己烷进行萃取脱脂，共三次。 然后分出水层，减压浓缩至少量，上D-101型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水洗去杂 质，然后用40V％乙醇洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶醋酸乙酯∶甲 酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.12g。
实施例2、
取干燥香蕉皮100g粉碎至20目，用600mL水回流提取2次，每次2h。合并提取液，浓 缩至少量，上D-101型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水洗去杂质，然后用50V％乙醇 洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止； 收集洗脱液，浓缩至少量，用等体积醋酸乙酯萃取，共3次，合并醋酸乙酯层，浓缩，即得 香蕉皮有效部位3.03g。
实施例3、
取干燥香蕉皮100g粉碎至10目，用800mL95V％乙醇在室温下浸渍提取2次，每次48h。 合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏19.30g，悬浮于少量水中，用石油醚进行萃取脱脂， 共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上HPD-500型大孔吸附树脂柱，先用3个体积 的水洗去杂质，然后用30V％丙酮水溶液洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油 醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.23g。
实施例4、
取干燥香蕉皮100g粉碎至20目，用700mL50V％乙醇水溶液在70W超声波中提取2次， 每次15min。合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏20.35g，悬浮于少量水中，用石油醚进 行萃取脱脂，共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上HP-20型大孔吸附树脂柱，先用 3个体积的水洗去杂质，然后用40V％甲醇洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石 油醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.27g。
实施例5、
取干燥香蕉皮100g粉碎至10目，用650mL70V％乙醇水溶液用50kHz超声波提取3次， 每次30min。合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏22.37g，悬浮于少量水中，用石油醚进 行萃取脱脂，共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上XAD-4型大孔吸附树脂柱，先 用3个体积的水洗去杂质，然后用40V％甲醇水溶液洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展 开剂石油醚∶醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部 位3.16g。
实施例6、
取干燥香蕉皮100g粉碎至15目，用600mL60V％乙醇水溶液在60℃加热提取2次，每 次1.5h。合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏24.28g，悬浮于少量水中，用石油醚进行萃 取脱脂，共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用3个 体积的水洗去杂质，然后用50V％乙醇洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶ 醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.17g。
实施例7、
取干燥香蕉皮100g粉碎至20目，用600mL60V％乙醇水溶液在回流提取3次，每次2h。 合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏23.78g，悬浮于少量水中，用石油醚进行萃取脱脂， 共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水 洗去杂质，然后用40V％甲醇洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶醋酸乙 酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.14g。
实施例8、
取干燥香蕉皮100g粉碎至10目，用700mL50V％乙醇在60℃加热提取2次，每次1.5h。 合并提取液，减压浓缩近干，得稠浸膏23.76g，悬浮于少量水中，用石油醚进行萃取脱脂， 共三次。然后分出水层，减压浓缩至少量，上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用3个体积的水 洗去杂质，然后用35V％丙酮水溶液洗脱，直至薄层色谱检识无明显斑点(展开剂石油醚∶ 醋酸乙酯∶甲酸＝8∶4∶0.1)为止；收集洗脱液，干燥，即得香蕉皮有效部位3.25g。
实施例9、
香蕉皮有效部位对清醒肾性高血压大鼠血压及心率的影响
首先制备二肾一夹型肾性高血压大鼠(RHR)模型，待模型形成后[以手术4周后收缩压大 于160mmHg(21.3kPa)作为模型形成的标志]，随机分为模型对照组、香蕉皮有效部位组及卡 托普利阳性对照组。给药前测量血压4次以上，间隔二天测量血压一次，以使动物适应测压 过程并获得较稳定的给药前血压记录，以给药前数次血压测量结果的平均值作为给药前血压 数据。
然后，每天上午9:00～10:00灌胃给药，每天给药一次，连续给药6d。香蕉皮有效部位 每天给药150.0mg.kg-1.d-1；模型对照组灌等容量蒸馏水；阳性对照组灌卡托普利5.0mg.kg-1. d-1。分别在给药后第2、4、6天测量收缩压(SAP)、舒张压(DAP)及心率(HR)，记录给药 后的血压及心率。并计算血压(心率)相对变化率[＝(给药后血压或心率-给药前血压或心 率)÷给药前血压或心率×100％]。结果以均值±标准差( X±S)表示，统计学检验采 用T-student组间t检验。结果见表1。
香蕉皮有效部位降压作用较明显，150.0mg.kg-1.d-1对SAP的最大降压百分率为16％，对DAP 达18％。香蕉皮有效部位150.0mg.kg-1.d-1的降压作用与卡托普利5.0mg.kg-1.d-1相当(P＞ 0.05)。给药期间，香蕉皮有效部位有减慢心率作用。
实验结果表明，香蕉皮有效部位灌胃给药对清醒肾性高血压大鼠具有良好的治疗性降压 作用，给药第二天即出现明显的降压疗效。香蕉皮有效部位具有轻度减慢心率作用，这对高 血压的治疗有利。
表1.香蕉皮有效部位对清醒RHR血压和心率的影响( X±S) 组别 给药量 mg·kg-1 鼠 数 给药前血压(kPa)及心率 (BPM) 给药后血压、心率变化百分率(％) 第2天 第4天 第6天 模型对照 6 SAP DAP HR 24.79±3.65 19.98±3.59 405±59 2.61±4.02 -0.60±2.80 -2.40±5.54 -0.22±3.88 -1.96±3.27 -1.18±6.93 0.49±2.99 -2.79±1.71 1.51±5.12 香蕉皮 150.0 6 SAP 23.30±1.89 -10.61±5.80** -15.73±3.87** -15.16±4.82* 有效部位 DAP HR 18.96±2.23 422±40 -12.41±7.05** -1.94±4.27 -18.19±6.57** -8.29±2.80* -18.12±7.21** -6.07±10.15 卡托普利 5.0 6 SAP DAP HR 24.99±4.55 20.02±4.34 418±31 -13.64±5.54** -16.28±7.59* -0.15±4.28 -14.65±5.67** -4.52±11.34 -4.52±11.34 -17.92±5.15** -20.07±6.46** -7.36±10.65
注：与对照组比较*P＜0.05 **P＜0.01(下同)
实施例10、
香蕉皮有效部位静脉给药对麻醉RHR及麻醉SD大鼠血压及心率的影响
实验分别用RHR及正常SD大鼠，用氨基甲酸乙酯(1.0g.kg-1)腹腔注射麻醉。动物麻醉后 行颈总动脉插管测量血压，颈静脉插管给药。手术后至少观察血压2小时以上，待血压稳定后 进行给药。观察静脉注射香蕉皮有效部位125.0mg.kg-1对血压的影响。结果见表2、表3。
香蕉皮有效部位125.0mg.kg-1静脉注射对麻醉肾性高血压大鼠具有明显的降压作用，对 SAP、平均动脉压(MAP)及DAP均表现出明显的降压作用。作用较平和，最大降压幅度8％～11％， 出现时间较晚，给药后150min才出现明显的血压下降，但降压作用持续时间较长，给药后8 小时仍表现出明确而持久的降压作用。香蕉皮有效部位对麻醉RHR心率没有明显的影响。香蕉 皮有效部位对麻醉SD大鼠血压及心率均没有明显的影响。
实验结果表明，香蕉皮有效部位有明显的降压活性。该活性部位可以在制备预防和治疗 高血压药物中应用。
表2香蕉皮有效部位对麻醉RHR大鼠血压及心率的影响(N＝6)( X±S) 组 别 给药前血压 (kPa)心率 (BPM)) 给药后血压及心率相对变化率(％) 60min 90mm 120min 150min 180min 240min 300min 360min 420min 480min 模 型 对 照 SAP MAP DAP HR 22.45± 3.75 18.64± 3.71 16.14± 3.32 375± 59 4.97± 4.43 5.34± 5.47 3.50± 5.69 6.75± 8.64 3.99± 3.43 4.41± 3.43 4.34± 2.92 5.11± 8.69 3.34± 4.74 3.83± 3.55 3.88± 3.52 5.98± 11.83 4.35± 8.23 5.26± 6.84 5.44± 7.30 5.44± 14.24 6.25± 6.57 7.98± 3.91 7.04± 4.51 5.15± 15.10 9.91± 13.10 11.48± 11.91 11.31± 14.93 13.44± 17.83 10.08± 12.11 12.04± 10.45 11.56± 12.75 10.90± 18.31 11.80± 12.12 14.19± 10.81 12.92± 13.77 10.84± 15.13 12.32± 13.29 17.38± 12.29 17.42± 14.51 13.31± 18.60 13.33± 13.94 17.46± 11.92 20.01± 10.73 13.82± 17.60 香 蕉 皮 有 效 部 位 SAP MAP DAP HR 23.13± 3.57 19.88± 2.90 17.22± 2.31 405± 51 2.94± 10.90 3.85± 10.10 6.84± 10.54 -6.14± 14.86 -1.31± 11.56 0.98± 9.14 1.02± 10.20 -3.98± 11.89 -3.48± 10.11 -5.80± 9.44 -3.78± 9.59 -5.50± 9.90 -6.07± 7.03*-5.10± 6.09*-5.31± 6.37*-4.60± 8.85 -7.05± 5.88**-5.31± 5.30**-5.57± 5.93**-5.02± 10.62 -7.86± 5.12*-7.25± 4.24**-8.55± 4.48*-5.62± 163.59 -8.49± 7.24**-6.11± 3.70**-6.71± 2.86**-3.71± 10.60 -8.51± 4.29**-7.26± 4.93**-7.80± 5.77**-3.95± 11.42 -8.86± 7.76**-7.22± 4.06**-7.93± 5.28**-3.70± 14.17 -8.67± 7.29**-9.21± 5.88**-11.57± 5.34**-3.50± 15.18
表3香蕉皮有效部位对麻醉SD大鼠血压和心率的影响(N＝8)( X±S) 组 别 给药前血压 (kPa)心率 (BPM)) 给药后血压及心率相对变化率(％) 10min 30min 60min 90min 120min 150min 180min 240min 空 白 对 照 SAP MAP DAP HR 17.34± 2.87 12.68± 2.56 10.98± 2.46 376±48 12.14± 8.46 14.24± 6.47 15.12± 7.21 2.12± 4.56 7.65± 6.75 8.65± 8.87 9.24± 8.44 3.45± 6.74 4.23± 8.57 5.24± 9.57 6.55± 9.47 0.47± 8.54 1.23± 7.69 3.12± 7.87 2.37± 8.85 -0.45± 7.46 0.12± 10.58 1.24± 9.89 0.14± 10.24 2.31± 9.66 -1.54± 15.06 -1.02± 12.13 -2.34± 11.63 -1.30± 8.34 0.89± 14.43 1.24± 12.36 -0.87± 11.47 -2.04± 9.05 -2.01± 10.65 -1.87± 12.66 -3.42± 10.24 -3.68± 8.78 香 蕉 皮 有 效 部 位 SAP MAP DAP HR 16.87± 3.01 12.04± 2.98 10.11± 3.23 381±39 14.12± 10.23 13.58± 8.54 13.78± 9.65 -2.45± 6.45 9.12± 9.87 9.77± 8.66 10.24± 7.66 -3.97± 8.65 7.23± 10.45 6.65± 7.64 8.54± 8.78 -2.78± 8.62 6.25± 9.56 4.66± 6.87 5.47± 7.63 -1.18± 7.88 3.45± 7.56 1.44± 10.22 3.12± 9.87 -1.24± 6.75 0.78± 12.14 -0.77± 10.24 -1.23± 9.46 -3.78± 6.25 -6.54± 9.87 -6.47± 10.54 -6.89± 11.47 -5.46± 3.47 -5.47± 11.36 -5.66± 10.87 -6.25± 12.24 -5.89± 8.78