乳铁蛋白和白质.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 103957928 A (43)申请公布日 2014.07.30 CN 103957928 A (21)申请号 201280057156.2 (22)申请日 2012.11.20 11189879.7 2011.11.21 EP A61K 38/40(2006.01) A61P 25/00(2006.01) (71)申请人 雀巢产品技术援助有限公司 地址 瑞士沃韦 (72)发明人 B王 M福雷 (74)专利代理机构 北京市中咨律师事务所 11247 代理人 宋卫霞 黄革生 (54) 发明名称 乳铁蛋白和白质 (57) 摘要 本发明概括而言涉及脑白质。 具体而言， 本发。

2、 明涉及可以用于促进白质发育和 / 或避免白质损 失的组合物。本发明的一个实施方案涉及用于促 进白质发育、 治疗或预防白质的延缓发育和 / 或 治疗或预防白质损失的含乳铁蛋白的组合物。 (30)优先权数据 (85)PCT国际申请进入国家阶段日 2014.05.21 (86)PCT国际申请的申请数据 PCT/EP2012/073138 2012.11.20 (87)PCT国际申请的公布数据 WO2013/076101 EN 2013.05.30 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 8 页 附图 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说。

3、明书8页 附图2页 (10)申请公布号 CN 103957928 A CN 103957928 A 1/1 页 2 1. 用于促进白质发育、 治疗或预防白质延缓发育和 / 或治疗或预防白质损失的含乳铁 蛋白的组合物。 2.用于应用的依据权利要求1的组合物， 其中所述组合物包含至少0.1g/100kcal组合 物的量的乳铁蛋白。 3. 用于应用的依据前述权利要求中的一项的组合物， 其中乳铁蛋白以约 0.01g-100g、 优选 0.1g50g、 甚至更优选 2g25g/100kcal 的浓度存在。 4. 用于应用的依据前述权利要求中的一项的组合物， 其中将所述组合物以相当于每天 每 kg 体重摄。

4、入至少 0.01g 乳铁蛋白的量施用。 5. 用于应用的依据前述权利要求中的一项的组合物， 其中所述乳铁蛋白作为富集乳铁 蛋白的乳或乳清级分而提供。 6. 用于应用的依据前述权利要求中的一项的组合物， 其中所述组合物包含以重量计含 至少 50乳清蛋白的蛋白质源。 7. 用于应用的依据前述权利要求中的一项的组合物， 其中所述白质是脑白质。 8. 用于应用的依据前述权利要求中的一项的组合物， 其中所述白质是胼胝体的白质。 9. 用于应用的依据前述权利要求中的一项的组合物， 其中白质体积增加。 10. 用于应用的依据前述权利要求中的一项的组合物， 其中所述组合物选自食物产品、 动物食物产品、 药物组。

5、合物、 营养配制物、 营养保健品、 饮料、 食品添加剂、 婴儿喂养配方产 品或母亲食品组合物。 11. 用于应用的依据前述权利要求中的一项的组合物， 其中将所述组合物施用于妊娠 期间的母亲、 哺乳期间的母亲、 早产儿或足月产儿、 婴儿、 幼儿、 儿童和 / 或青少年。 12. 用于应用的依据前述权利要求中的一项的组合物， 其中将所述组合物施用于有 IUGR 婴儿的母亲或施用于 IUGR 婴儿。 13. 用于应用的依据前述权利要求中的一项的组合物， 其用于治疗或预防白质障碍。 14. 依据权利要求 13 使用的组合物， 其中所述白质障碍是遗传的或后天获得的。 权 利 要 求 书 CN 10395。

6、7928 A 2 1/8 页 3 乳铁蛋白和白质 0001 本发明概括而言涉及脑白质。具体而言， 本发明涉及可以用于促进白质发育和 / 或避免白质损失的组合物。本发明的一个实施方案涉及用于促进白质发育、 治疗或预防白 质的延缓发育和 / 或治疗或预防白质损失的含乳铁蛋白的组合物。 0002 营养素是生物生长和发育的必要条件。新生成组织的 “结构单元” 可以作为预形 成的单元源自膳食， 或者经由内源性生物合成或生物转化获得。当组织生长最快时 ( 即在 宫内期期间 )， 该过程发生的速度最快。 0003 在组织形成之后， 所有的组织经历不同程度的重塑 ( 或更新 )， 但重塑是相当缓慢 的过程、 。

7、尤其对于中枢神经系统。选出组织生长的非 - 必需或半 - 必需结构单元的两种主 要来源的比例不是一项简单的任务， 因为 (a) 组织生长通常是相同缓慢的和 (b) 来自膳食 来源的结构单元与内源性生物合成的那些难以区分。 0004 然而该问题在人的营养中通常最为重要、 特别是在婴儿营养中。在快速生长阶段 期间， 非-必需或半-必需营养素的可获得性可影响内源性生物合成， 且可限制胎儿或新生 儿的生长潜力。 0005 妊娠和泌乳的女性和小于三岁的幼儿最容易遭受营养不良。 科学证据已经显示生 命早期的慢性营养不良有不利的神经病学后果， 诸如弱的空间导航、 记忆形成和记忆巩固。 0006 在生命的前三。

8、年营养更好的个体具有显著更好的生活。 在宫内发育期间穿过胎盘 屏障的营养素和在人乳中存在的营养素可代表改善早期脑发育的最适合的候选物 ( 特别 是在不利的产前暴露之后 )。 0007 适当的大脑发育是所有父母主要关心的问题。 0008 人脑由灰质、 白质和黑质组成。 灰质由神经元细胞体组成， 且包含涉及记忆、 视觉、 听觉、 语言的脑区域， 而且包含涉及情感和肌肉控制的脑区域。黑质在学习、 争取奖励和成 瘾中起作用。 0009 根据 Reiss 等 ,Brain,1995, 第 119 卷 , 第 5 期 , 第 1763-1774， 在儿童中 IQ 与总 脑体积正相关， 特别是与脑额叶前区中。

9、的皮质灰质的体积正相关。还发现皮质下灰质有助 于 IQ 的变化， 尽管小于皮质灰质体积促进的程度。因此， 在本领域中在促进灰质的发育方 面进行了努力。 0010 白质是如下的组织， 信息通过其在神经系统内在灰质的不同区域之间传递。髓磷 脂包裹长神经纤维， 并提供允许快速和高效的信息传递的电绝缘。通过少突神经胶质细胞 环绕轴突而建立绝缘的同心磷脂层的髓鞘形成加快神经元传递。 在儿童中脑白质通路的成 熟在认知、 行为、 情感和运动发育中是重要的因素。 0011 白质完整性由更好的功能连通性构成， 所述功能连通性可有助于建立广泛分布的 大脑功能， 这被认为是复杂的行为自主控制的基础 (Luna B.。

10、in:Aboitiz F 等编撰 .From attention to goal-directed behavior:neurodynamical,methodological and clinical trends.Heidelberg( 德国 ):Springer-Verlag ； 2009. 第 249-274 页 )。快速和有效的信息 传递对于适宜的脑性能也非常重要。因此， 本领域中对也支持白质的发育有强烈的需求。 0012 本发明人已经致力于该需求。 说 明 书 CN 103957928 A 3 2/8 页 4 0013 因此， 本发明的目的是为本领域提供特别允许其促进白质发育的组合。

11、物和 / 或在 白质的发育较慢的阶段后允许其赶上发育进度的组合物。 如果该组合物还可用于通过母亲 营养来支持未出生婴儿的发育， 这将是进一步合乎需要的。 0014 本发明人惊讶地看到他们可通过独立的权利要求的主题实现这些目的。 从属权利 要求进一步发展了本发明的构思。 0015 使用强高场 MRI 技术， 本发明人能证实母亲乳铁蛋白补充导致脑白质体积 (white matter volume) 显著增加。 0016 例如对于胼胝体内容物的白质体积显示这种作用。 0017 例如， 对于宫内生长受限 (IUGR) 的哺乳动物显示了效果。宫内生长受限 (IUGR)， 以前称为宫内发育迟缓， 更常在看。

12、到怀孕末期看到， 且可对婴儿的发育具有负面作用。 以下 若干因素可以增加 IUGR 的可能性 ： 诸如酗酒、 凝血障碍、 药瘾、 高血压或心脏病、 肾病、 营养 不良、 吸烟、 感染和母体疾病。 0018 可促进 IUGR 的胎儿危险因素包括例如遗传问题或多胎妊娠。 0019 可促进IUGR的胎盘和脐带异常方面的危险因素包括:前置胎盘、 胎盘增生或胎盘 早剥， 伴随其他的胎盘异常。 另外的危险因素是脐带的位置绕颈或身体的一部分， 这减少了 脐带血流。 0020 乳铁蛋白 ( 血清唾液酸化糖蛋白 ) 由人从胚胎至成年期分泌， 且在初乳和乳中尤 其丰富。该唾液酸化糖蛋白具有多种生理效应， 包括铁内。

13、稳态的调节、 细胞生长和分化、 益 生元和抗炎作用和免疫应答的激发。 0021 本发明人已经证明在脑结构和发育有负面改变的动物中， 在妊娠期和哺乳期间母 亲的乳铁蛋白的补充可修正和 / 或恢复脑结构和 / 或发育的变化。 0022 提供科学证据证实在宫内生长受限 (IUGR) 的哺乳动物中乳铁蛋白的补充， 增加 了脑白质体积， 例如胼胝体内容物的脑白质体积， 并支持赶上生命早期的正常发育。 0023 因此， 本发明部分涉及含乳铁蛋白的组合物， 其用于促进白质发育和 / 或治疗或 预防白质的延缓发育。 0024 本发明还涉及乳铁蛋白在制备组合物中的应用， 所述组合物用于促进白质发育和 / 或治疗。

14、或预防白质的延缓发育。 0025 乳铁蛋白 (LF)， 也称为乳运铁蛋白 (LTF)， 是已知显示抗菌活性的球状多功能蛋 白质， 且是先天防御的部分的一部分， 主要在粘液中。 0026 乳铁蛋白可以在例如乳和乳清及许多粘膜分泌物诸如眼泪和唾液中找到。因此， 乳铁蛋白可从例如乳中纯化， 或可重组制备。 0027 本发明涉及从任何来源获得的乳铁蛋白。 0028 来自乳或乳清的乳铁蛋白， 例如， 具有其是从食品级组合物得到的天然成分的优 点， 因此可以未经进一步纯化地用作食品组合物的富集级分。 0029 本发明的组合物因此可包含作为富集乳铁蛋白的乳或乳清级分而提供的乳铁蛋 白。 0030 富集意指将。

15、乳铁蛋白加入级分中， 从而得到的级分的乳铁蛋白含量高于没有添加 乳铁蛋白的级分的乳铁蛋白含量， 或者以将级分中的天然乳铁蛋白内含物浓缩的方式处理 乳或乳清。 说 明 书 CN 103957928 A 4 3/8 页 5 0031 经重组获得的乳铁蛋白具有以下优点 ： 其能容易地以高浓度制备。 0032 人初乳具有相对高的乳铁蛋白浓度， 随后是人乳， 然后是牛乳。 0033 在治疗应用中， 组合物以足以至少部分上治愈或抑制障碍的症状和 / 或其并发症 的量施用。将足以完成该目的的量定义为 “ 治疗有效剂量 “。对该目的有效的量将取决于 本领域技术人员已知的多个因素， 诸如障碍的严重性和或患者体重。

16、和一般状态。在预防性 应用中， 将本发明的组合物以足以至少部分上降低发展为障碍的风险的量施用于易罹患特 定障碍或者处于特定障碍的风险中的患者。将所述量定义为 “ 预防有效剂量 “。同样， 精确 的量取决于多个患者特定因素， 诸如患者的健康状态和体重。 0034 乳铁蛋白可在本发明的框架内以治疗有效剂量和 / 或预防有效剂量内施用。 0035 典型的本发明的含乳铁蛋白的组合物可包含至少 1.6g/L 的量的乳铁蛋白。 0036 例如， 本发明的组合物可包含至少 0.75 (w/w)、 优选至少 1 (w/w) 的浓度的乳 铁蛋白。 0037 在一个实施方案中， 将所述组合物以相当于每天每kg体重。

17、摄入至少0.01g乳铁蛋 白、 至少 0.25g 乳铁蛋白、 优选至少 0.5g 乳铁蛋白、 更优选至少 1g 乳铁蛋白的量施用。 0038 例如， 对于妊娠和/或泌乳的母亲， 组合物可以以相当于摄入至少1g乳铁蛋白/kg 体重 / 天的量被消耗。 0039 对于儿童， 组合物还可以以相当于摄入至少 200mg 乳铁蛋白 /kg 体重 / 天的量被 消耗。 0040 乳铁蛋白可以以至少 0.01g/100kcal、 优选至少 0.1g/100kcal 的浓度存在于组合 物中。 例如， 乳铁蛋白可以以约0.01g-100g、 优选0.1g50g、 甚至更优选2g25g/100kcal 组合物的范。

18、围存在于组合物中。 0041 例如， 乳铁蛋白还可与其它的化合物、 例如唾液酸和 / 或铁组合使用。 0042 本发明的组合物可例如包含至少约 0.001 重量 -唾液酸。在本发明的另外的实 施方案中， 组合物可包含至少约 0.005 重量 -或至少约 0.01 重量 -的唾液酸。 0043 或者或另外， 含乳铁蛋白的组合物可包含约1mg/100g(w/w)至50mg/100g(w/w)的 组合物、 例如 10mg/100g(w/w) 至 30mg/100g(w/w) 的组合物的范围的量的铁。 0044 乳铁蛋白的良好的来源是乳清蛋白。 本发明的组合物因此可包含含至少50乳清 蛋白 ( 以重量。

19、计 ) 的蛋白质源。 0045 白质是中枢神经系统的组分， 且包含大量的有髓鞘的轴突。白质形成脑深部的大 部分和脊髓的浅表。 0046 因此， 用本发明的组合物处理的白质可以是脑的白质、 例如胼胝体的白质。 胼胝体 是脑中连接左和右大脑半球、 促进大脑半球沟通的最大的白质结构。胼胝体是真哺乳亚纲 动物脑中的皮质之下的宽的、 平的神经纤维束， 位于脑纵裂， 且也称为巨大的连合束。 0047 使用本发明的组合物例如增加白质体积是可能的。 0048 Marner 等的著作 ,2003,J.Comp.Neurol.462(2):144-52 已经显示在体积和有髓 鞘的轴突的长度两方面， 男人均具有比女。

20、人略微更多的白质。在 20 岁的年龄， 发现在男性 中有髓鞘神经纤维的总长度为 176,000km， 而发现女性的为 149,000km。作者观察到总长度 每十年随年龄减少约 10， 由此 80 岁的男人具有 97,200km， 且女人具有 82,000km。 0049 因此， 本发明的组合物可用于治疗、 预防或改善年龄相关的白质减少。 说 明 书 CN 103957928 A 5 4/8 页 6 0050 由于白质年龄相关的减少在约 20 岁的年龄开始， 所以本发明的组合物可施用于 至少 20 岁、 至少 30 岁、 至少 40 岁、 至少 50 岁、 至少 60 岁、 至少 70 岁或至少。

21、 80 岁的个体。 0051 本发明的组合物可以是任何适用于口服、 肠内或胃肠外施用的组合物。 0052 例如， 组合物可选自食物产品、 动物食物产品、 药物组合物、 营养配制物、 营养保健 品、 饮料、 食品添加剂、 婴儿喂养配方产品或母亲食品组合物。 0053 本发明的组合物可以施用于有需要的任何人、 例如婴儿、 儿童和青少年以支持白 质发育， 且可施用于成人或老年人以治疗或预防年龄相关的白质损失。 0054 例如， 本发明的组合物可施用于妊娠期间的母亲、 哺乳期间的母亲、 早产儿或足月 产儿 (term born babies)、 婴儿、 幼儿、 儿童和 / 或青少年。 0055 特别地。

22、， 乳铁蛋白和 / 或本发明的组合物可施用于例如 0056 -早产儿或经历过宫内发育迟缓(可在妊娠期期间的任何不利事件(母亲吸烟、 母 亲药物治疗、 低胎盘质量、 胎盘位置异常、 母亲和胎儿营养不良等 ) 后发生 ) 的足月产儿 0057 - 没有任何宫内发育迟缓的早产婴儿 0058 - 非常低 / 低出生重量的婴儿 0059 -IUGR 婴儿 0060 -(例如出生时的低血氧-缺血或任何其他的不利事件后)显示脑发育迟缓的新生 儿和儿童 0061 - 显示认知功能障碍、 迟缓的新生儿和儿童。 0062 乳铁蛋白或本发明的组合物因此可以施用于儿童和/或妊娠期和/或泌乳期的母 亲。 0063 用于。

23、本发明目的的术语 “儿童” 包括婴儿且包括 0-14 岁的年龄范围的个体。 0064 “ 婴儿 “ 是低于 12 个月龄的儿童。 0065 低于 1 个月月龄的人类婴儿是新生儿或初生婴儿。术语 “ 新生儿 “ 包括早产婴 儿、 过熟儿、 低出生体重婴儿和足月新生儿。在达到一岁或开始走路后， 婴儿也被称为 “ 幼 儿 “( 通常 12-36 个月 )。 0066 在本发明的一个实施方案中， 将组合物施用于有 IUGR 婴儿的母亲或施用于 IUGR 婴儿。 0067 本发明的组合物在 IUGR 哺乳动物中可以特别有效。宫内生长受限 (IUGR) 用于描 述胎儿或婴儿比根据妊娠的周数预期的小的状况的。

24、术语。IUGR 的胎儿或婴儿经常具有比 相同孕龄的正常胎儿或婴儿的重量少至少 10的重量。例如具有 IUGR 的胎儿可足月出生 (37 周妊娠之后 ) 或早产出生 ( 早于 37 周 )。 0068 本发明中描述的组合物可用于治疗、 预防或改善白质障碍。 0069 在儿童期的许多神经病学障碍中， 主要涉及脑的白质。这些被称为 “ 白质障碍 “。 它们一般基于MRI检查结果来诊断。 MRI的白质异常可以具有组织水平的许多不同的原因。 例如， 可能缺乏髓磷脂和 / 或髓磷脂可能退化。髓鞘中可能已经形成无数空泡， 或者白质中 可能已经形成瘢痕组织。在有髓鞘神经纤维等之间可能有增加量的水和 / 或可能。

25、损失神经 纤维。 0070 因此， “ 白质障碍 “ 包括可对脑功能具有不同严重性的影响的许多不同的障碍。 0071 白质障碍可以是遗传的或后天获得的。 说 明 书 CN 103957928 A 6 5/8 页 7 0072 后天获得形式的白质障碍的原因根据原因的类型可以细分为感染性 - 炎性的、 非 感染性 - 炎性的、 毒性 - 代谢性的、 创伤性的和低含氧量 - 缺血性的。 0073 以下障碍可以是获得性白质障碍， 例如 0074 非 - 感染性 - 炎性障碍， 诸如 0075 多发性硬化及其变型 0076 急性播散性脑脊髓炎 (Acute disseminated encephalop。

26、myelitis) 0077 感染性 - 炎性的障碍， 诸如 0078 先天性巨细胞病毒感染 0079 亚急性硬化性全脑炎 0080 亚急性 HIV 脑炎 0081 亚急性 CMV 脑炎 0082 进行性多灶性脑白质炎 0083 毒性 - 代谢性障碍， 诸如 0084 脑桥中央和脑桥外髓鞘破坏 0085 维生素 B12 缺乏 0086 叶酸缺乏 0087 马基法瓦 - 比恩亚米病 0088 营养不良 0089 中毒性脑病 ( 内源性 - 外源性 ) 0090 低含氧量 - 缺血性的障碍， 诸如 0091 室周脑白质软化 0092 多囊脑白质病 (Polycystic leukoencephal。

27、opathy) 0093 迟发性的缺氧后 - 缺血性脱髓鞘 0094 皮质下动脉硬化性脑病 ( 宾斯旺格病 ) 0095 衰老相关的 0096 脉管炎 0097 辐射 0098 创伤性障碍， 诸如 0099 剪切 (Shearing) 0100 水肿 0101 由于涉及不同障碍的基因和蛋白质众多， 遗传性白质障碍分类复杂， 通常基于所 涉及的生物化学途径进行分类。 0102 以下的障碍可以是遗传性白质障碍， 例如 : 0103 溶酶体障碍 0104 异染性脑白质营养不良 0105 克拉伯病 ( 球形细胞脑白质营养不良 ) 0106 GM1 神经节苷脂沉积症 ( 婴儿变型 ) 0107 GM2 。

28、神经节苷脂沉积症 ( 婴儿变型 ) 0108 婴儿神经元蜡样质脂褐质沉积症 说 明 书 CN 103957928 A 7 6/8 页 8 0109 法布里病 0110 唾液酸贮积障碍， Salla 病 0111 岩藻糖苷病 0112 粘多糖病 0113 过氧化物酶体失调 0114 泽尔韦格综合征 0115 新生儿肾上腺脑白质营养不良 0116 婴儿雷弗素姆病 0117 泽尔韦格样综合征 0118 假性泽尔韦格综合征 0119 假性 - 新生儿肾上腺脑白质营养不良 0120 双功能蛋白质缺乏 0121 X- 链锁肾上腺脑白质营养不良和肾上腺脊髓神经病 0122 雷弗素姆病 0123 线粒体障碍 。

29、0124 呼吸链缺陷 0125 脑腱黄瘤病 0126 DNA 修复障碍 0127 科克因病 0128 PIBD 或 Tay 综合征 0129 髓磷脂蛋白质类缺陷 0130 佩利措伊斯 - 梅茨巴赫病 0131 18q- 综合征 0132 氨基酸病和有机酸病 (organic acidopathies) 0133 苯丙酮尿症 0134 I 型戊二酸尿症 0135 丙酸尿 0136 非酮性高甘氨酸血症 0137 槭糖尿症 0138 卡纳范病 0139 L-2- 羟基戊二酸尿症 0140 高同型半胱氨酸血症 0141 尿素循环缺陷 0142 3- 羟基 -3- 甲基戊二酰辅酶 A 裂解酶缺陷 014。

30、3 丝氨酸合成缺陷 0144 另外的障碍 0145 半乳糖血症 0146 综合征 0147 洛氏综合征 说 明 书 CN 103957928 A 8 7/8 页 9 0148 威尔逊病 0149 亚力山大病 0150 肌强直性肌营养不良 0151 先天性肌营养不良 0152 巨脑性脑白质病伴皮质下囊肿 0153 消融性白质 /CACH 0154 髓鞘形成功能衰退伴基底核和小脑萎缩 0155 Aicardi-Goutires 综合征 0156 可以是白质障碍的另外的障碍包括消融性白质病、 涉及脑干和脊髓和伴有乳酸盐 升高脑的白质病、 巨脑性脑白质病伴皮质下囊肿、 髓鞘形成功能衰退、 低促性腺功能。

31、减退症 和牙发育不全、 髓鞘形成功能衰退伴基底核和小脑萎缩和多元醇代谢中的缺陷。 0157 本领域那些技术人员会明白它们可以自由地组合本文所述的本发明的所有特征 而不背离本发明所公开的范围。特别地， 为本发明的用途描述的特征可应用于本发明的组 合物， 反之亦然。 0158 从以下的实施例和附图中可明白本发明的进一步的优势和特征。 0159 图1显示对于从21天-大的小狗切除的脑进行均沿胼胝体(CC)定位的切片的DT 图像的采集。 0160 图 2 显示在出生后 21 天 (PND) 使用称为弥散张量成像 (DTI) 的先进的高场 9.4T MR 成像评价脑组织的微观构造的定量结果。 实施例 :。

32、 0161 为证实乳铁蛋白对脑白质的作用， 本发明人选择了广为接受的和感兴趣的母亲补 充模型。已发现例如， 母亲乳铁蛋白补充通过增加胼胝体内容物的脑白质体积对神经元保 护和神经发育具有显著的益处， 例如在宫内生长受限 (IUGR) 的哺乳动物中如此。 0162 在妊娠期的第三周期间用地塞米松(100g/kg/天)处理母兽来得到宫内发育迟 缓 (IUGR) 的模型。从妊娠期的开始至泌乳的结束 (6 周 ) 将乳铁蛋白以 1g/kg/ 天的剂量 水平不限制地口服施用于母兽。 0163 测试以下 3 组动物 : 0164 组1:正常的小狗 ； 在对照母兽中没有乳铁蛋白介入(假的含盐水缓冲液的渗透 泵。

33、 )。 0165 组 2:IUGR 小狗 ； 在地塞米松处理的母兽中没有乳铁蛋白介入。 0166 组 3:IUGR 小狗 ； 从妊娠期的开始至泌乳的结束向地塞米松处理的母兽补充 bLf(1g/Kg/ 天 )。 0167 在出生后 21 天 (PND) 使用称为弥散张量成像 (DTI) 的先进的高场 9.4TMR 成像离 体评价脑组织的微观构造。 0168 在出生后 21 天离体评价两个 IUGR 小狗组和一个正常组的脑的微观构造。 0169 在 PND21 将动物贲门内灌注 0.9 NaCl、 然后是 4低聚甲醛。移出大脑， 称重， 并在 4低聚甲醛中后固定过夜， 然后在 +4在 1X 磷酸盐。

34、缓冲盐水中储存。用收发 25-mm 鸟笼状 RF 线圈进行离体 DTI 实验。手动调节一阶和二阶匀场 (shim)， 水带宽范围为 20 至 说 明 书 CN 103957928 A 9 8/8 页 10 40Hz。 使用加有Stejskal-Tanner扩散梯度的自旋回波程序。 沿十二个空间方向:(x,y,0)、 (x,-y,0)、 (x,0,z)、 (x,0,-z)、 (0,y,z)、 (0,y,-z) 以及六个相反方向应用扩散梯度以抵 消 b- 值交叉项。将强度、 持续时间和弥散时间分别设为 22G/cm、 3ms 和 20ms， 得到 1184s. mm2的 b- 值。在填零至 256。

35、256 的 12864 卡式坐标的方格取样 1717mm2的视野， 得到 66m 的面内象素尺寸。轴平面中需要 15 个 0.5mm 层厚的层面。扫描为平均 10 次， TE/TR 35/2000ms。 数据分析:使用自制Matlab(Mathworks,Natick,MA)软件， 从张量得到弥散 值 (Dmin、 Dmed和 Dmax)。计算正交弥散 (Dorth (Dmin,Dmed)/2)、 平行弥散 (D/ Dmax)、 平均弥 散 (DAV (Dmin+Dmed+Dmax)/3) 和各向异性分数 (fractional anisotropy)(FA (3/2)( (Dmin-MD)2。

36、+(Dmed-MD)2+(Dmax-MD)2)/(Dmin2+Dmed2+Dmax2)1/2)。 0170 程序允许在FA图中手工描绘感兴趣区(ROI)。 分析了两个不同的脑区域:在脑的 5 个不同的图像平面的胼胝体 (CC) 和皮质 (CX)。 0171 结果 0172 MRI 0173 已经为该计划开发了新的 MRI 硬件 ( 天线和夹持器 (holder)。联合用于弥散张 量成像的最佳序列， 分辨率的增强是之前的方案的约 3.6- 倍 ( 分辨率从 2.10-2mm3增加至 5.5.10-3mm3)。 0174 对于从 21 天 - 大的小狗切除的脑进行均沿胼胝体 (CC) 定位的切片的。

37、 DT 图像的 采集。在 PND21 使用各向异性分数 (FA) 参数比较不同组之间的皮质结构和纤维束 (CC) 的 完整性 ( 对于所有组 n 6)( 图 1)。 0175 皮质 : 没有观测到 FA 值的不同。 0176 在胼胝体中测定出对照 - 地塞米松组的 FA 值比对照 - 介质组显著降低 ( 图 2)。 这是由于可涉及髓鞘形成缺陷的Dorth的显著增加。 暴露于母兽乳铁蛋白补充的小狗在它们 的胼胝体中已显示恢复的 FA 值 ( 图 2)。胼胝体是脑中最大的白质结构， 由组成 22.5 亿 个对侧轴突突出物组成， 其负责连接左和右大脑半球并促进大脑半球沟通。 0177 总之， 产前地塞米松暴露诱导脑结构和发育的变化。整个妊娠期和泌乳期间的母 亲乳铁蛋白补充可修正 ( 恢复 ) 产前地塞米松暴露诱导的白质脑结构的变化， 并促进白质 脑结构的发育。 这些发现是乳铁蛋白补充对神经保护和脑成熟过程具有益处的强有力的证 据， 例如在儿童中。 说 明 书 CN 103957928 A 10 1/2 页 11 图 1 说 明 书 附 图 CN 103957928 A 11 2/2 页 12 图 2 说 明 书 附 图 CN 103957928 A 12 。