发明领域
本发明涉及免疫抑制化合物和它们在治疗中的用途。
发明背景
炎症性神经病或免疫介导的神经病是一个多样的疾病组，这些疾病包 括例如吉-巴综合征(GBS)、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根神经病 (CIDP)、伴有传导阻滞的多灶性运动神经病(MMN)和副蛋白血症脱髓鞘性 周围神经病(paraproteinaemic demyelinating peripheral neuropathy，PDN) 等周围神经病。炎症性神经病的发病机制仍在研究中。
下面对大量脱髓鞘性周围神经病进行讨论。
因此，周围神经病包括吉-巴综合征，其是一种影响外周神经系统的急 性的自身免疫性多发性神经病，通常由急性感染过程触发。存在多种类型 的GBS，最常见的形式是急性炎症性脱髓鞘性多发性神经病(AIDP)。GBS 常常很严重并且通常表现为以腿部无力著称的上行性麻痹，其向上肢和面 部蔓延，伴有深层腱反射的完全丧失。抑制性T细胞响应降低，这提示一 种指向外周神经的细胞介导的免疫反应。
多灶性运动神经病是一种进行性肌肉障碍，特征在于手部肌肉无力， 身体的一侧与另一侧在所涉及的具体肌肉方面有差异。症状还包括腿部肌 肉的肌肉萎缩、痉挛以及无意识的收缩或颤搐。
副蛋白血症脱髓鞘性神经病是迟发型脱髓鞘性神经病的一个主要原 因，与CIDP非常相似，但是后者更为慢性。它主要影响60岁及60岁以 上的人。患者具有许多要抗争的症状并且其往往是一种长期疾患。
慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根神经病(CIDP)特征在于腿和手臂 的进行性无力和感觉功能受损。这些症状是由外周神经的髓鞘损伤造成的。 其常常表现出一些症状，包括手臂和腿的麻刺感或麻木(开始于脚趾和手 指)、无力、深层腱反射的丧失、疲劳和感觉异常。CIDP的发病率是约十 万分之二至四。发病机理不明，但是可能既涉及T细胞介导的机理，又涉 及B细胞介导的机理。
CIDP的进程个体间差异很大。一些人可能具有一次CIDP发作，然 后自发恢复，而另一些人可能具有许多次发作，在复发之间部分恢复。CIDP 在相当多的患者中导致严重残疾。目前的治疗旨在调节免疫响应以获得缓 和以及维持功能状态。
WO 2004/103306和US 2005/0014728描述了可用于治疗由淋巴细胞相 互作用介导的疾病或障碍的化合物。将上述公开物全部引入本文作为参考 用于所有目的，特别是US 2005/0014728的如下部分：第[0006]至[0015]段、 第[0022]至[0042]段、第[0102]至[0124]段和第[0126]至[0149]段以及表1。 特别值得提及的是US 2005/0014728的实施例1至5。
发明概述
本发明的一个方面提供了用于治疗周围神经病例如CIDP的如下所述 的化合物。本发明的另一个方面在于治疗患有周围神经病例如CIDP的个 体的方法，其包括给所述个体施用有效量的如下所述的化合物。本发明的 另一个方面是如下所述的化合物在制备用于治疗周围神经病例如CIDP的 药物中的用途。
本申请涉及的化合物是WO 04/103306和US 2005/0014728、WO 05/000833、WO 05/103309或WO 05/113330中所公开的化合物，例如式 A1或A2的化合物：
其中
A是COOR5、OPO(OR5)2、PO(OR5)2、SO2OR5、POR5OR5或1H- 四唑-5-基，R5是H或成酯基团，例如C1-6烷基；
W是价键、C1-3亚烷基或C2-3亚链烯基；
Y是C6-10芳基或C2-9杂芳基，例如C3-9杂芳基，其任选被1至3个选 自以下的基团取代：卤素、OH、NO2、C1-6烷基、C1-6烷氧基；卤素取代 的C1-6烷基和卤素取代的C1-6烷氧基；
Z选自：
其中Z左侧和右侧的星号分别表示式Ia或Ib的在-C(R3)(R4)-与A之间的 连接点；R6选自氢和C1-6烷基；且J1和J2独立地是亚甲基或选自S、O和 NR5的杂原子；其中R5选自氢和C1-6烷基；并且Z的任何亚烷基可以进 一步被1至3个选自卤素、羟基、C1-6烷基的基团取代；或者R6可以与Y 的碳原子相连从而形成5-7元环；
R1是C6-10芳基或C2-9杂芳基，例如C3-9杂芳基，其任选被C1-6烷基、 C6-10芳基、C6-10芳基C1-4烷基、C3-9杂芳基、C3-9杂芳基C1-4烷基、C3-8环烷基、C3-8环烷基C1-4烷基、C3-8杂环烷基或C3-8杂环烷基C1-4烷基取 代；其中R1的任何芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基可以被1至5个选自 卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和卤素取代的-C1-6烷基或-C1-6烷氧基的基团 取代；
R2是H、C1-6烷基、卤素取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基； 且
R3或R4各自独立地是H、卤素、OH、C1-6烷基、C1-6烷氧基或者卤 素取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基；
以及其N-氧化物衍生物或其前体药物，
或其可药用的盐、溶剂化物或水合物。
还提供了用于治疗周围神经病例如CIDP的、包含所公开的化合物并 且任选包含可药用的稀释剂或载体的药物制剂。在实施方案中，药物制剂 含有一种或多种另外的治疗剂。
本发明还提供了一种产品，其包含所公开的化合物和治疗剂，是组合 制剂的形式，在治疗周围神经病例如CIDP中用于同时、分别或相继使用。
在另一个方面，本发明提供了一种药物制剂，其包含所公开的化合物 和可用于周围神经病例如CIDP的治疗剂。
本发明的化合物可以以不同形式如游离酸、游离碱、酯和其它前体药 物、盐和互变异构体的形式存在，本公开物包括所述化合物的所有变体形 式。
保护范围包括含有或声称含有本发明的化合物的赝品或假冒产品，不 论它们实际上是否含有该类化合物，也不论任何该类化合物是否以治疗有 效量被包含。
在保护范围内包括组装产品(package)，其包含说明所述组装产品含有 本发明的物质种类或药物制剂的说明书或指导书以及是或包含或者声称是 或包含该类制剂或物质种类的产品。该类组装产品可以是但不一定是赝品 或假冒产品。
除非与其不相容，否则与本发明的特定方面、实施方案或实施例一起 描述的特征、整数、特点、化合物、化学部分或基团应当理解为适用于本 文所述的任何其它方面、实施方案或实施例。
附图简要说明
图1A表示用水基质和CMC基质处理的EAN大鼠相对于从免疫接种 开始计算的天数的神经病学得分变化。
图1B表示用3和10mg/kg浓度的化合物A混悬液处理的EAN大鼠 相对于从免疫接种开始计算的天数的神经病学得分变化。
图2A表示用水基质和CMC基质处理的EAN大鼠相对于从免疫接种 开始计算的天数的体重变化。
图2B表示用3和10mg/kg浓度的化合物A混悬液处理的EAN大鼠 相对于从免疫接种开始计算的天数的体重变化。
不同实施方案的描述
定义
在本说明书中，除非另有定义，否则：
烷基，链烯基，炔基
作为一个基团和作为其它基团例如卤素取代的烷基、烷氧基、酰基、 烷硫基、烷基磺酰基和烷基亚硫酰基的结构元素的“烷基”可以是直链的或 支链的，并且除非另有说明，否则其可以具有1至6个碳原子。C1-C6烷 基可以具有1、2、3、4、5或6个碳原子。作为一个基团和作为其它基团 的结构元素的“链烯基”含有一个或多个碳-碳双键，并且可以是直链的或支 链的。双键可以是顺式-或反式-构型。作为一个基团和作为其它基团和化 合物的结构元素的“炔基”含有至少一个C≡C三键并且还可以含有一个或 多个C＝C双键，并且只要可能，可以是直链的或支链的。除非另有说明， 否则链烯基和炔基可以具有2、3、4、5或6个碳原子。单独的或作为其它 基团的结构元素的任何环烷基可以含有3、4、5、6、7或8个碳原子，优 选含有3、4、5或6个碳原子。“亚烷基”和“亚链烯基”分别是衍生自“烷基” 和“链烯基”的二价基团。在本申请中，R1的任何烷基任选是具有被选自-S-、 -S(O)-、-S(O)2-、-NR20-和-O-(其中R20是氢或C1-6烷基)的成员替代的亚甲 基的被间断的烷基。这些基团包括例如-CH2-O-CH2-、-CH2-S(O)2-CH2-、 -(CH2)2-NR20-CH2、-CH2-O-(CH2)2-。在一个实施方案中，不存在该类被间 断的烷基；其包括其中所有烷基均未被间断的一类化合物。
芳基
“芳基”意指含有6至10个环碳原子的单环或稠合二环的芳族环系。例 如，C6-10芳基可以是苯基、联苯基或萘基，优选苯基。稠合二环可以是部 分饱和的，例如1，2，3，4-四氢-萘等。“亚芳基”意指衍生自芳基的二价基团。 例如，本申请中所用的亚芳基可以是亚苯基、亚联苯基、亚萘基等。
卤素
“卤代”或“卤素”意指F、Cl、Br或I，优选F或Cl。卤素取代的烷基 基团和化合物可以是部分卤化的或全卤化的，在多卤化的情况下，卤素取 代基可以相同或不同。优选的全卤化烷基是例如三氟甲基或三氟甲氧基。
杂芳基
“杂芳基”意指在环结构中包含至少一个选自N、O或S的杂原子部分 的本申请中所定义的芳基，并且除非另有说明，否则各环包含5或6个环 原子。例如，C2杂芳基包括二唑、三唑等。C9杂芳基包括喹啉、1，2，3，4- 四氢-喹啉等。本申请中所用的C2-9杂芳基包括噻吩基、吡啶基、呋喃基、 异唑基、苯并唑基或苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基，优选噻吩基、呋喃 基或吡啶基。“亚杂芳基”意指本申请中所定义的杂芳基，前提是该环系包 含二价残基。稠合二环杂芳基环系可以是部分饱和的，例如2，3-二氢-1H- 异吲哚、1，2，3，4-四氢-喹啉等。
取代(的)
除非另有说明，否则本文在提及基团或部分时所用的术语“取代(的)” 意指在所述基团或部分中一个或多个、尤其是至多5个、更尤其是1、2 或3个氢原子彼此独立地被相应数目的所述取代基所代替。本文所用的术 语“任选被......取代”意指取代的或未取代的。
当然，应当理解的是，取代基仅位于化学上其被允许的位置，本领域 技术人员能在不进行不适宜的努力的情况下确定(实验或理论上确定)特定 的取代是否可能。例如，如果与具有不饱和键(例如烯键)的碳原子结合， 则具有游离氢的氨基或羟基可能是不稳定的。
可药用的
本文所用的术语“可药用的”包括在合理医学判断范围内适于与人或动 物的组织接触而没有过度毒性、刺激性、变态反应或者其它问题或并发症、 具有合理的效益/风险比的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。该术语包 括对于人和兽医目的而言的可接受性。
独立地
在两个或更多个基团或部分被描述为“各自独立地”选自原子或基团列 表的情况下，这意指所述基团或部分可以相同或不同。因此，各基团或部 分的身份独立于一个或多个其它基团或部分的身份。
化合物
本申请涉及WO 2004/103306和US 2005/0014728、WO 05/000833、 WO 05/103309或WO 05/113330中所公开的化合物，例如式A1或A2的 化合物：
其中
A是COOR5、OPO(OR5)2、PO(OR5)2、SO2OR5、POR5OR5或1H- 四唑-5-基，R5是H或成酯基团，例如C1-6烷基；
W是价键、C1-3亚烷基或C2-3亚链烯基；
Y是C6-10芳基或C2-9杂芳基，例如C3-9杂芳基，其任选被1至3个选 自以下的基团取代：卤素、OH、NO2、C1-6烷基、C1-6烷氧基；卤素取代 的C1-6烷基和卤素取代的C1-6烷氧基；
Z选自：
其中Z的星号分别表示式Ia或Ib的在-C(R3)(R4)-与A之间的连接点；R6选自氢和C1-6烷基；且J1和J2独立地是亚甲基或选自S、O和NR5的杂原 子；其中R5选自氢和C1-6烷基；并且Z的任何亚烷基可以进一步被1至3 个选自卤素、羟基、C1-6烷基的基团取代；或者R6可以与Y的碳原子相连 从而形成5-7元环；
R1是C6-10芳基或C2-9杂芳基，例如C3-9杂芳基，其任选被C1-6烷基、 C6-10芳基、C6-10芳基C1-4烷基、C3-9杂芳基、C3-9杂芳基C1-4烷基、C3-8环烷基、C3-8环烷基C1-4烷基、C3-8杂环烷基或C3-8杂环烷基C1-4烷基取 代；其中R1的任何芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基可以被1至5个选自 卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和卤素取代的-C1-6烷基或-C1-6烷氧基的基团 取代；
R2是H、C1-6烷基、卤素取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基； 且
R3或R4各自独立地是H、卤素、OH、C1-6烷基、C1-6烷氧基或者卤 素取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基；
以及其N-氧化物或其前体药物，或其可药用的盐、溶剂化物或水合物。
下面描述了本发明的另一些实施方案。应当理解的是，各实施方案中 所给出的特征可以与所给出的其它特征组合，从而提供另一些实施方案。
A是COOR5、OPO(OR5)2、PO(OR5)2、SO2OR5、POR5OR5或1H- 四唑-5-基，R5是H或成酯基团，例如C1-6烷基。A特别是COOR5，例如 COOH。
W是价键、C1、C2或C3亚烷基或C2-3亚链烯基。在一些实施方案中， W是亚乙基。
Y是C6-10芳基或C2-9杂芳基，例如C3-9杂芳基，其任选被1至3个选 自以下的基团取代：卤素、OH、NO2、烷基、烷氧基；卤素取代的烷基和 卤素取代的烷氧基，其中无论是否是被卤素取代的，作为一个基团或作为 烷氧基的一部分的烷基具有1、2、3、4、5或6个碳原子。Y特别是苯基 或C6杂芳基，它们均任选如前所述的那样被取代。所述芳基例如苯基或者 杂芳基可以具有一个取代基，例如单个所述的烷基取代基。实例性的烷基 取代基是乙基。卤素特别是F或Cl。
Z是如上文所述的基团，特别是WO 2004/103306中所给出的杂环基， 例如氮杂环丁烷，特别是在1-和3-位与分子的其余部分连接的氮杂环丁烷。 可提及的还有：吡咯烷和哌啶，二者均在1-和3-位与分子的其余部分连接； 和被形成分子的其余部分的各部分1，4-二取代的哌啶。在一些化合物中， 这些杂环被基团A进行N-取代(1-取代)以及在3-位或者在可能的情况下在 4-位被CR3R4取代。
R1是C6-10芳基或C2-9杂芳基，例如C3-9杂芳基，其任选被C1-6烷基、 C6-10芳基、C6-10芳基C1-4烷基、C3-9杂芳基、C3-9杂芳基C1-4烷基、C3-8环烷基、C3-8环烷基C1-4烷基、C3-8杂环烷基或C3-8杂环烷基C1-4烷基取 代；其中R1的任何芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基可以被1至5个选自 卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和卤素取代的-C1-6烷基或-C1-6烷氧基的基团 取代。R1特别是任选如前所述的那样被取代的苯基或C6杂芳基。在一些 实施方案中，R1具有两个选自以下的取代基：任选被卤素取代的具有1、2、 3、4、5或6个碳原子的烷基(例如三氟甲基)、任选被卤素取代的苯基和任 选被卤素取代的C3-8环烷基(例如环己基)，例如R1可以具有一个任选被卤 素取代的烷基和一个任选被卤素取代的选自苯基和C3-8(例如C6)环烷基的 环状基团。在一些实施方案中，R1是苯基或C6杂芳基，特别是苯基，它 们如前所述的那样被3，4-二取代，例如在3-三氟甲基-4-环己基苯基的情况 中。
R2是H、C1-6烷基、卤素取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基。 因此，无论是否是被卤素取代的，烷基可以具有1、2、3、4、5或6个碳 原子。R2特别是甲基。
R3和R4各自独立地是H、卤素、OH、C1-6烷基、C1-6烷氧基或者卤 素取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基。因此，无论是否是被卤素取代的和/或无 论是否是烷氧基的一部分，烷基可以具有1、2、3、4、5或6个碳原子。 R3和R4例如可以各自独立地是H、卤素、甲基或卤素取代的甲基。R3和 R4特别可以均是H。
可用于本发明的目的的一种优选化合物是1-{4-[1-(4-环己基-3-三氟甲 基-苄基氧基亚氨基)-乙基]-2-乙基-苄基}-氮杂环丁烷-3-甲酸：
可用于本发明的目的的另一些化合物包括：
可提及的还有WO 2004/103306的实施例和表1中的其它化合物。
本发明的化合物可以是可药用的盐的形式。本公开物的可药用的盐可 以通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物来合成。一般而 言，该类盐可以通过将这些化合物的游离酸或碱形式与化学计算量的适宜 的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在二者的混合物中反应来制备；一般而 言，优选非水性介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。合适的盐的 列表参见Remington′s Pharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，US，1985，第1418，将其公开内容在此引入作为参 考；还参见Stahl等人编辑，“Handbook of Pharmaceutical Salts Properties Selection and Use”，Verlag Helvetica Chimica Acta and Wiley-VCH，2002。
因此，本公开物包括所公开的化合物的可药用的盐，其中通过制备其 酸盐或碱盐来修饰母体化合物。例如常规的无毒的盐或季铵盐，其是例如 由无机或有机酸或碱形成的。该类酸加成盐的实例包括乙酸盐、己二酸盐、 藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸 盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸 盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐(glucoheptanoate)、甘油磷酸盐、 半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺 酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、草酸盐、双 羟萘酸盐、果胶酯酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、 丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。碱 盐包括铵盐、碱金属盐如钠盐和钾盐、碱土金属盐如钙盐和镁盐、与有机 碱如二环己基胺、N-甲基-D-葡糖胺形成的盐，以及与氨基酸如精氨酸、赖 氨酸形成的盐等。碱性含氮基团也可以被诸如以下试剂季铵化：低级烷基 卤化物，如甲基、乙基、丙基和丁基-氯、-溴和-碘；二烷基硫酸盐如二甲 基、二乙基、二丁基硫酸盐；和二戊基硫酸盐，长链卤化物如癸基、月桂 基、肉豆蔻基和硬脂基-氯、-溴和-碘，芳烷基卤化物如苄基溴和苯乙基溴 等。
本发明包括本发明的活性药物的前体药物，例如其中一个或多个官能 团被保护或被衍生化，但是能在体内被转换成该官能团，如在可在体内转 化成游离酸的羧酸的酯的情况中，或者在可在体内转化成游离氨基的被保 护的胺的情况中。本文所用的术语“前体药物”特别表示在体内迅速转换成 母体化合物的化合物，例如通过在血液中水解进行转换。在T.Higuchi和 V.Stella，作为新型传递系统的前体药物(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)，A.C.S.学术讨论会丛刊(the A.C.S.Symposium Series)的第14卷， Edward B.Roche编辑，Bioreversible Carriers in Drug Design，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987；H Bundgaard编辑， Design of Prodrugs，Elsevier，1985；和Judkins等人，Synthetic Communications，26(23)，4351-4367(1996)中提供了详细讨论，将其各自引 入本文作为参考。
因此，前体药物包括具有已经被转换成其可逆衍生物的官能团的药物。 该类前体药物典型地通过水解被转换成活性药物。可提及的有下面的实例：
官能团 可逆的衍生物
羧酸 酯，包括例如烷基和酰氧基烷基酯；酰胺
醇 酯，包括例如硫酸酯和磷酸酯以及羧酸(例
如链烷酸)酯
胺 酰胺，氨基甲酸酯，亚胺，烯胺，
羰基(醛，酮) 亚胺，肟，缩醛/缩酮，烯醇酯，唑烷和 噻唑烷(thiazoxolidines)
前体药物还包括可通过氧化或还原反应转化成活性药物的化合物。可 提及的实例有：
氧化活化
·N-和O-脱烷基化
·氧化脱氨
·N-氧化
·环氧化
还原活化
·偶氮还原
·亚砜还原
·二硫化物还原
·生物还原烷基化
·硝基还原。
作为前体药物的代谢活化被提及的还有核苷酸活化、磷酸化活化和脱 羧活化。对于另外的信息，参见“The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action”，R B Silverman(特别是第8章，第497-546页)，将其引 入本文作为参考。
在‘Protective Groups in Organic Chemistry’，J W F McOmie编辑， Plenum Press(1973)和‘Protective Groups in Organic Synthesis’，第2版，T W Greene & P G M Wutz，Wiley-Interscience(1991)中对保护基团的应用 进行了充分描述。
因此，本领域技术人员应当理解的是，虽然本公开物中的化合物的被 保护的衍生物可能不具有所述化合物本身的药理学活性，但是它们可以被 例如胃肠外或口服施用，其后在体内被代谢从而形成有药理学活性的本发 明的化合物。因此，该类衍生物是“前体药物”的实例。在本发明的范围内 包括所述化合物的所有前体药物。
本文所提及的一些基团(尤其是含有杂原子和共轭键的那些)可以以互 变异构形式存在，所有这些互变异构体均包括在本公开物的范围内。更一 般地，许多物质种类可以平衡存在，例如在有机酸以及它们的配对离子的 情况中；相应地，本文对物质种类的提及包括对其所有平衡形式的提及。
本公开物的化合物还可以含有一个或多个不对称碳原子，因此可以表 现出旋光和/或非对映异构现象。所有的非对映异构体均可以用常规技术、 例如色谱法或分级结晶来进行分离。可以通过用常规技术例如分级结晶或 HPCL技术分离所述化合物的外消旋混合物或其它混合物来对各种立体异 构体进行分离。或者，可以通过使适宜的旋光活性原料在不造成外消旋化 或差向异构化的条件下反应或者通过衍生化、例如用纯手性的酸衍生物、 然后用常规方法(例如HPLC，硅胶色谱法)分离非对映体衍生物来制备所 需的旋光异构体。所有的立体异构体均包括在本公开物的范围内。在公开 单个对映体或非对映体的情况下，本公开物还覆盖其它对映体或非对映体， 并且也包括外消旋物；在这一点上，特别是可参考本文所列的具体化合物。
在本公开物的化合物中也可存在几何异构体。本公开物包括由碳-碳双 键周围的取代基排列产生的各种几何异构体及其混合物，并且将该类异构 体表示为Z或E构型，其中术语“Z”表示取代基位于碳-碳双键的同侧，术 语“E”表示取代基位于碳-碳双键的对侧。
因此，本公开物包括所定义的化合物的所有变体，例如所定义的化合 物的任何互变异构体或任何可药用的盐、酯、酸或其它变体和它们的互变 异构体以及在施用后能直接或间接提供上面所定义的化合物或提供能与该 类化合物以平衡形式存在的物质种类的物质。
合成
所述化合物可以如上面提及的专利说明书例如WO 04/103306和US 2005/0014728中所述的那样来合成。
施用&药物制剂
本发明的化合物通常将口服施用、静脉内施用、皮下施用、口含施用、 直肠施用、皮肤施用、鼻施用、气管施用、支气管施用，通过任何其它胃 肠外途径施用，以口服或鼻喷雾形式或通过吸入施用。所述化合物可以以 药物制剂的形式施用，所述药物制剂包含游离化合物形式的或者例如可药 用的无毒的有机或无机酸或碱加成盐形式的前体药物或活性化合物，是可 药用的剂型。根据所治疗的障碍和患者以及施用途径，组合物可以以不同 的剂量施用。
因此，本发明的药物化合物典型地可口服或胃肠外(本文所用的“胃肠 外”是指包括静脉内、肌内、腹膜内、胸骨内、皮下和关节内注射和输注的 施用方式)施用于主体。在较大动物如人的情况中，化合物可以单独施用或 者与可药用的稀释剂、赋形剂或载体联合以组合物的形式施用。
可以改变本发明的药物组合物中活性成分的实际剂量水平以获得对于 特定患者、组合物和施用方式而言有效获得所需治疗响应的活性化合物量。 所选择的剂量水平将取决于具体化合物的活性、施用途径、所治疗的病症 的严重程度以及所治疗的患者的情况和既往医疗史。但是，在低于获得所 需治疗作用所需的水平上开始化合物的剂量并逐渐增加剂量直至获得所需 作用属于本领域的基本技能。
在周围神经病的治疗、预防、控制、改善或缓解症状中，适宜的剂量 水平一般为约0.01至500mg/kg患者体重/天，其可以以单剂量或多剂量施 用。剂量水平可以为约0.1至约250mg/kg/天；例如约0.5至约100mg/kg/ 天。适合的剂量水平可以为约0.01至250mg/kg/天、约0.05至100mg/kg/ 天或约0.1至50mg/kg/天。在该范围内，剂量可以为0.05至0.5、0.5至5 或5至50mg/kg/天。对于口服施用而言，组合物可以以含有1.0至1000 毫克活性成分、特别是1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、 150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0 或1000.0毫克活性成分的片剂的形式被提供。所述化合物可以以每天1至 4次、优选每天1或2次的方案进行施用。可以调整剂量方案以提供最佳 治疗响应。
因此，根据本发明的另一个方面，提供了一种包含与可药用的辅剂、 稀释剂或载体混合的本公开物的化合物的药物组合物。
用于胃肠外注射的本发明的药物组合物适合地包含可药用的无菌的水 性或非水性溶液、分散物、混悬剂或乳剂以及用于在使用前即刻重组成无 菌的可注射溶液或分散物的无菌粉末。适合的水性或非水性载体、稀释剂、 溶剂或基质的实例包括水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等) 以及它们适宜的混合物、植物油(如橄榄油)和可注射的有机酯如油酸乙酯。 可以例如通过使用包衣材料如卵磷脂、在分散物的情况中通过维持所需的 粒度、和通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。
这些组合物还可以含有辅剂如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。可 以通过包含各种抗细菌剂和抗真菌剂例如尼泊金酯、三氯叔丁醇或苯酚山 梨酸来确保防止微生物的作用。还希望包括等张剂如糖或氯化钠。可以通 过包含延迟吸收的物质(例如单硬脂酸铝和明胶)来延长可注射的药物形式 的吸收。
在一些情况中，为了延长药物的作用，希望减慢皮下或肌肉注射的药 物吸收。这可以通过使用水溶性差的结晶或无定形物质的液体混悬液来实 现。然后，药物的吸收速率取决于其溶解速率，其溶解速率又取决于晶体 大小和晶形。或者，通过将药物溶解或混悬于油性基质中来延迟胃肠外施 用的药物形式的吸收。
可注射的储库形式适合通过形成药物在生物可降解的聚合物例如聚丙 交酯-聚乙交酯中的微包封(microencapsule)基质来制备。根据药物与聚合 物的比例以及所用的具体聚合物的性质，可以控制药物的释放速率。其它 生物可降解的聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酐)。可注射的储库制剂还 可以通过将药物包封到与机体组织相容的脂质体或微乳中来制备。可以对 可注射的制剂灭菌，例如通过用截留细菌的滤器过滤或通过在无菌固体组 合物形式(其可在使用前即刻被溶解或分散于无菌水或其它无菌的可注射 媒介物中)中混入灭菌剂来进行灭菌。
用于口服施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在 该类固体剂型中，典型地将活性化合物与至少一种惰性的可药用的赋形剂 或载体如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或一种或多种下面的物质混合：a)填充剂 或增量剂如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；b)粘合剂如羧甲 基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂 如甘油；d)崩解剂如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅 酸盐和碳酸钠；e)溶解阻滞剂如石蜡；f)吸收促进剂如季铵化合物；g)湿润 剂如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯；h)吸收剂如白陶土和膨润土；和i)润滑剂 如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠及其混合 物。在胶囊、片剂和丸剂的情况中，该剂型还可以包含缓冲剂。也可以将 相似类型的固体组合物用作例如使用赋形剂如乳糖或奶糖(milk sugar)以 及高分子量聚乙二醇的软和硬填充明胶胶囊中的填充物。
合适地，口服制剂含有溶出助剂。对溶出助剂的性质没有限制，只要 其是可药用的即可。实例包括非离子型表面活性剂，如蔗糖脂肪酸酯、甘 油脂肪酸酯、脱水山梨醇脂肪酸酯(例如脱水山梨醇三油酸酯)、聚乙二醇、 聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯烷基醚、 甲氧基聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯烷基苯基醚、聚乙二醇脂肪酸酯、聚氧 乙烯烷基胺、聚氧乙烯烷基硫醚、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物、聚氧乙烯甘 油脂肪酸酯、季戊四醇脂肪酸酯、丙二醇单脂肪酸酯、聚氧乙烯丙二醇单 脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯、脂肪酸烷基醇酰胺和烷基胺氧化物； 胆汁酸及其盐(例如鹅脱氧胆酸、胆酸、脱氧胆酸、脱氢胆酸及其盐和它们 的甘氨酸或牛磺酸结合物)；离子型表面活性剂，如月桂基硫酸钠、脂肪酸 皂、烷基磺酸盐、烷基磷酸盐、醚磷酸盐、碱性氨基酸的脂肪酸盐；三乙 醇胺皂、和烷基季铵盐；和两性表面活性剂，如甜菜碱类和氨基羧酸盐。
可以用包衣和壳如肠溶衣和药物配制领域中众所周知的其它包衣对片 剂、糖锭剂(dragee)、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型进行制备。它们可以 任选含有遮光剂并且也可以是仅在肠道的某部分或优选地在肠道的某部分 和/或以延迟方式释放活性成分的组合物。包埋组合物的实例包括聚合物和 蜡。
所述活性化合物也可以为微囊包封形式，如果适宜的话，具有一种或 多种上述赋形剂。
所述活性化合物可以是精细分割的形式，例如其可以被微粉化。
用于口服施用的液体剂型包括可药用的乳剂、溶液、混悬剂、糖浆剂 和酏剂。除活性化合物外，液体剂型还可以含有本领域常用的惰性稀释剂 如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、 苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、l，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽 油、花生油、玉米油、胚油(germ oil)、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、 四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨醇的脂肪酸酯以及它们的混合物。除惰性 稀释剂外，口服组合物还可包括辅剂如湿润剂、乳化剂和混悬剂、甜味剂、 矫味剂和芳香剂。除活性化合物外，混悬剂还可含有助悬剂如乙氧基化的 异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝 (Aluminum metahydroxide)、膨润土、琼脂和西黄蓍胶以及它们的混合物。
用于直肠或阴道施用的组合物优选是栓剂，其可通过将本发明的化合 物与合适的无刺激的赋形剂或载体混合来制备，所述赋形剂或载体如可可 脂、聚乙二醇或在室温下是固体但在体温下为液体、从而在直肠或阴道腔 中熔化并释放活性化合物的栓剂蜡。
本发明的化合物也可以以脂质体的形式施用。如本领域已知的那样， 脂质体一般衍生自磷脂或其它脂质物质。脂质体是由分散在水性介质中的 单层或多层水合液晶形成的。可以使用能形成脂质体的任何无毒的、生理 学上可接受的和可代谢的脂质。除本发明的化合物外，脂质体形式的本发 明的组合物还可以含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂质是磷脂和 磷脂酰胆碱(卵磷脂)，其既可以是天然的，也可以是合成的。形成脂质体 的方法是本领域中已知的，例如，Prescott编辑，Methods in Cell Biology， 第XIV卷，Academic Press，纽约，N.Y.(1976)，第33页及以后页。
有利地，本发明的化合物是口服有效的，具有快速起效的活性和低毒 性。
本发明的化合物可具有以下优点：与现有技术中已知的化合物相比， 它们更有效、毒性更低、更长效、具有更宽的活性谱、效力更强、产生的 副作用更少、更易吸收，或者具有其它有用的药理学性质。
组合治疗
本发明的化合物可以与一种或多种其它治疗剂组合施用。相应地，本 发明提供了一种包含另外的活性剂的药物组合物。本发明还提供了一种包 含本发明的化合物和活性剂的产品；其是组合制剂的形式，在治疗中用于 同时、分别或相继使用。
本发明的组合物或产品特别是可以进一步包含选自以下的治疗剂：例 如，本公开物的化合物可以与可用于治疗周围神经病、例如脱髓鞘性周围 神经病的活性剂组合施用；作为该类第二活性剂的实例，可提及的有免疫 抑制剂(例如，环孢菌素A、环孢菌素G、FK-506、ABT-281、ASM981、 雷帕霉素、40-O-(2-羟基)乙基-雷帕霉素、皮质类固醇、环磷酰胺、硫唑嘌 呤、甲氨蝶呤、来氟米特、咪唑立宾、麦考酚酸莫酯或15-脱氧精胍菌素)、 类固醇(例如，泼尼松或氢化可的松)、免疫球蛋白或1型干扰素。本公开 物的化合物和第二活性剂可以同时或连贯施用。在本公开物的化合物和第 二活性剂同时施用的情况中，它们可以被配制成单个组合物或分开的组合 物。
用途
本发明的化合物可用于治疗多种周围神经病，特别是急性或慢性脱髓 鞘性神经病。因此，本公开物的化合物可用于治疗吉-巴综合征(GBS)、慢 性炎症性脱髓鞘性多发性神经根神经病(CIDP)、伴有传导阻滞的多灶性运 动神经病(MMN)和副蛋白血症脱髓鞘性周围神经病(PDN)中的一种或多 种。所述神经病特别是CIDP。化合物的有效性可能因患者而异。
术语“治疗”包括用以缓解周围神经病的一种或多种症状或用以延迟该 类疾病的进展(例如通过防止或减慢脱髓鞘例如外周脱髓鞘)的处理；其还 包括用以治愈该类疾病、用以使个体进入功能状态和/或维持个体的功能状 态、或用以延长复发时间的处理。
所述化合物的治疗用途可包括防止、控制或降低个体有患病风险的周 围神经病的严重程度的预防性使用以及控制或降低已经存在的疾病的严重 程度的治疗。所述化合物可在症状发作前施用；可在症状发作后施用。其 可被施用于有患周围神经病的风险的个体。
因此，可使用所述化合物的治疗可改善、维护患有周围神经病、疑似 患有周围神经病或具有患周围神经病的风险的患者的医学情况和/或舒适 感或者延迟其恶化。
实施例
用下面的实施例来说明本发明。
实施例1(化合物A的合成)
1-{4-[1-(4-环己基-3-三氟甲基-苄基氧基亚氨基)-乙基]-2-乙基-苄基}- 氮杂环丁烷-3-甲酸(化合物A)
向MnO2(10eq)在二烷中的混悬液中加入1-(3-乙基-4-羟基甲基-苯 基)-乙酮O-(4-环己基-3-三氟甲基-苄基)-肟(1eq)。将所得混合物回流10分 钟。过滤并浓缩后，将残余物溶解于MeOH中并用氮杂环丁烷-3-甲酸(2eq) 和Et3N(1.5eq)处理。将所得混合物在50℃下加热30分钟。冷却至室温 后，分批加入NaBH3CN(3eq)。用制备型LCMS纯化，得到1-{4-[1-(4- 环己基-3-三氟甲基-苄基氧基亚氨基)-乙基]-2-乙基-苄基}-氮杂环丁烷-3-甲 酸；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.24(t，3H)，1.30-1.60(m，5H)，1.74-1.92 (m，5H)，2.28(s，3H)，2.79(q，2H)，2.92(m，1H)，3.68(m，1H)，4.32(m，4H)，， 4.51(s，2H)5.22(s，2H)，7.38(d，1H)，7.50-7.68(m，5H)。MS：(ES+)：517.3 (M+1)+。
实施例2(化合物A对实验性自身免疫性神经炎(Experimental Autoimmune Neuritis)的抑制作用)
将雄性Lewis大鼠(8-10周龄，180-200g，Elevage-Janvier，法国)在12h 光-12h黑暗循环下进行饲养并使其自由进食进水。所有的动物操作均按照 本地的行政区域法定委员会(Administration District Official Committee) 批准的方案进行。进行一切努力将动物数及其痛苦最小化。
EAN诱导
为了进行EAN诱导，通过将100μL含有100μg合成的神经原性 (neuritogenic)P257-81肽的接种物(GeneScript Corporation，Scotch Plains， NJ，USA)皮下注射到两只后爪垫中对大鼠进行免疫。将肽溶解于磷酸盐缓 冲的盐水(PBS)(2mg/mL)中，然后用等体积的含有2mg/mL结核分枝杆菌 的完全弗罗因德佐剂(CFA)乳化，得到1mg/mL的终浓度。
每天如下评估EAN的临床得分：0＝正常，1＝尾部的肌肉强直性降 低，2＝尾部无力(limp tail)，正位平衡受损(impaired righting)，3＝缺乏 正位平衡(absent righting)，4＝步态共济失调，5＝轻度后肢轻瘫，6＝中 度下肢轻瘫，7＝重度下肢轻瘫或后肢截瘫，8＝四肢轻瘫，9＝濒死，和 10＝死亡(Zhang等人，2009A)。
化合物A治疗
在两种混悬液浓度(3和10mg/kg，混悬于1％羧甲基纤维素(CMC， Blanose，Hercules-Aqualon，Diisseldorf，德国)中)下分别对化合物A进行试 验。在诱导后立即胃内施用化合物A的混悬液，然后每天施用一次，直至 第22天(每组5只大鼠)。对于对照EAN大鼠而言，给予同样体积的1％的 在水中的CMC。
免疫组织化学
为了评估PNS中的炎性细胞浸润和病理变化，在第16天，将5只化 合物A-处理的大鼠(在两种浓度下都是如此)和5只对照EAN大鼠处死。用 乙醚将大鼠深度麻醉并用4℃、4％低聚甲醛的PBS溶液进行心内灌注。 迅速取下左侧和右侧坐骨神经并将其于4℃在4％甲醛中后固定(post-fixed) 过夜。将坐骨神经切成两段等长的段，包埋在石蜡中，连续切片(3μm)， 固定在覆盖有硅烷的载玻片上。
在脱蜡后，将坐骨神经的横切片在柠檬酸缓冲液(2.1g柠檬酸钠/L，pH 6)中煮沸(在600W微波炉中)15min。将内源性过氧化物酶用1％H2O2的 甲醇溶液抑制15min。将切片与10％正常猪血清(Biochrom，柏林，德国) 一起孵育以阻断免疫球蛋白的非特异性结合，然后与下面的单克隆抗体一 起孵育：对于T淋巴细胞而言，使用W3/13(1∶50；Serotec，Oxford，UK)， 对于B细胞而言，使用OX22(1∶200；Serotec，Oxford，UK)，对于活性巨噬 细胞而言，使用ED1(1∶100；Serotec，Oxford，UK)。用生物素化的IgG F(ab)2第二抗体片段(兔抗-小鼠或兔抗-山羊；1∶400；DAKO，Hamburg，德 国)使与组织切片结合的抗体可见。随后，将切片与链霉抗生物素-抗生物 素蛋白-生物素复合物(DAKO，Hamburg，德国)一起孵育，然后用二氨基联 苯胺(DAB)底物(Fluka，Neu-Ulm，德国)显影。最后，将切片用Maier′s Hemalum复染色。
为了评价免疫染色数据，计算免疫反应性(IR)面积相对于坐骨神经横 切面面积的百分比。在50×放大下用具有固定参数的Nikon Coolscope (Nikon，Düsseldorf，德国)捕获坐骨神经横切面的图像。用MetaMorph Offline 7.1(Molecular Devices，Toronto，加拿大)对图像进行分析。用色阈 分割选择IR区域，对于所有图像而言，所有参数均是固定的。手动选择 坐骨神经横切面区域。对于每只EAN大鼠而言，对来自两侧的根部和中 部水平的四个横切面进行分析。结果是以IR面积相对于坐骨神经横切面 面积的百分比的算术平均值和均值的标准误差(SEM)的形式给出的。
应用常规的勒克司坚牢蓝(Luxol Fast Blue，LFB)染色来显示髓磷脂。 通过确定的半定量法来比较化合物A和对照EAN大鼠之间的组织学变化。 简言之，对来自EAN大鼠两侧的根部和中部水平的四个横切面进行分析。 由对治疗一无所知的两名观察者对横切面中存在的所有血管周围区域进行 评估，根据下面的尺度对组织学变化程度进行半定量分级：0＝正常的血 管周围区域；1＝与血管临近的轻度细胞浸润；2＝紧挨着血管的细胞浸 润+脱髓鞘；和3＝遍及整个切面的细胞浸润和脱髓鞘。结果是以平均组 织学得分的形式给出的(Hartung等人，1988)。
评估和统计学分析
进行不成对t-检验以比较化合物A和对照EAN大鼠之间的差异 (Graph Pad Prism 4.0，用于windows)。对于所有的统计分析而言，显著性 水平均被设定为p＜0.05。
结果
化合物对EAN的抑制性治疗
通过皮下注射神经原性合成P2肽来诱导EAN。对于抑制性治疗而言， 在免疫接种后立即口服使用1％在水中的CMC(对照组)或化合物A，然后 每天施用一次，直至第22天。在第9天观察到对照EAN大鼠的第一个神 经病学迹象(尾部的肌肉强直性降低)(平均临床得分：0.20±0.13)。在第13 天，在具有最高得分(平均神经病学得分：4.80±0.51)的对照组中，EAN的 神经病学严重程度迅速增加。其后，EAN的严重程度缓慢降低并且到第 22天大鼠完全恢复(平均临床得分：0±0)。在化合物A-处理的EAN大鼠 中，在第14天观察到大大降低的神经病学迹象，在第15天具有最大得分 并且到第19天观察到大鼠完全恢复。因此，相对于水/cmc基质而言，化 合物A治疗几乎防止了EAN临床迹象的发生，显著延迟了其发作，降低 了神经病学严重程度，非常有效地缩短了EAN的持续时间(图1A和1B)。
EAN的另一个特征是疾病发作后的进行性体重减轻。在对照和化合物 A-处理的EAN大鼠中，观察到缓慢和连续的体重增加，直至EAN发作(第 9天)。其后，对照EAN大鼠在免疫接种后从第10天至第18天的神经病 学疾病期间表现出显著的体重减轻，然后在恢复期间体重增加(图2A)。相 反，从第11至第16天，在疾病发作的峰值处，在用化合物A治疗的EAN 大鼠中观察到用较低浓度的化合物A混悬液处理的EAN大鼠的体重减轻 水平降低，再次表明病程严重性大大降低。这种作用在较高剂量的混悬液 中更为显著，在第11和12天之间有小的体重减轻，然后体重增加(图2B)。
抑制性化合物A治疗对EAN坐骨神经组织病理学变化的影响
用免疫组织化学对第16天时对照或化合物A处理的EAN大鼠(n＝5) 的坐骨神经中不同类型的炎性细胞的浸润进行分析。在对照EAN大鼠的 坐骨神经中观察到了T细胞(W3/13+)、B细胞(OX22+)和巨噬细胞(ED1+) 浸润。占优势的浸润细胞是巨噬细胞，其IR面积占横切面上坐骨神经总 面积的约2％。在下面的表1中给出了这些结果。
表1
在EAN大鼠的坐骨神经中，化合物A显著抑制了T细胞、B细胞和 巨噬细胞的浸润。
在化合物A处理的EAN大鼠的坐骨神经中，LFB染色测得的平均组 织学得分明显降低。在下面的表2中给出了这些结果。
表2
试验化合物 平均组织学得分 水基质 1.78 CMC基质 1.75 化合物A(3mg/kg) 0.51 化合物A(10mg/kg) 0.25
这些结果证明，用化合物A进行的抑制性治疗通过大大降低淋巴细胞 和巨噬细胞浸润到外周神经中以及降低局部脱髓鞘几乎防止了EAN和抑 制了下肢轻瘫。