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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201610034210.1 (22)申请日 2016.01.19 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 105596257 A (43)申请公布日 2016.05.25 (73)专利权人 杨凌普天农业科技有限公司 地址 712100 陕西省咸阳市杨陵区神农路 创业大厦419室 (72)发明人 张国强 张严磊 (74)专利代理机构 浙江永鼎律师事务所 33233 代理人 陈龙 (51)Int.Cl. A61K 8/9789(2017.01) A61Q 19/08(200。
2、6.01) A61Q 19/10(2006.01) A61Q 19/00(2006.01) (56)对比文件 CN 101242850 A,2008.08.13, WO 2006/029221 A2,2006.03.16, 审查员 顾瑜尉 (54)发明名称 文冠果叶的抗氧化活性物、 提取方法及在化 妆品中的应用 (57)摘要 本发明属于植物提取技术领域, 涉及一种文 冠果叶的抗氧化活性物、 提取方法及在化妆品中 的应用。 解决了现有技术对文冠果叶利用效率低 下的技术问题。 它包括以下步骤: A、 取新鲜文冠 果叶, 干燥后得到干燥文冠果叶; B、 将步骤A中得 到的文冠果叶用有机溶剂萃取, 萃。
3、取液过滤后得 到提取液; C、 将步骤B中的提取液进行浓缩得到 浓缩液, 浓缩液干燥后得到文冠果叶的抗氧化活 性物, 可用于化妆品中。 本发明的活性物具有抗 氧化作用, 能用于化妆品中。 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 CN 105596257 B 2018.07.27 CN 105596257 B 1.一种文冠果叶的抗氧化活性物提取方法, 其特征在于, 包括以下步骤: A、 取新鲜文冠果叶, 干燥后得到干燥文冠果叶; B、 将步骤A中得到的文冠果叶用有机溶剂萃取, 萃取液过滤后得到提取液; C、 将步骤B中的提取液进行浓缩得到浓缩液, 浓缩液干燥后得到文冠果叶的抗氧化活 性物, 在步骤。
4、A中, 所述的干燥文冠果叶采用室内阴干的方法制得, 干燥文冠果叶粉碎至60 目, 在步骤B中, 所述的有机溶剂为乙醇溶液, 采用加热回流的方法进行萃取, 乙醇溶液为 95V/V的乙醇水溶液, 加热回流的加热时间为3h, 干燥文冠果叶与有机溶剂的重量比为1: 1, 萃取次数为3次, 萃取液合并后得到提取液, 在步骤C中, 浓缩采用真空浓缩, 干燥采用冷 冻干燥。 2.根据权利要求1所述的文冠果叶的抗氧化活性物提取方法制得的文冠果叶的抗氧化 活性物。 3.根据权利要求1所述的提取方法制得的文冠果叶的抗氧化活性物在化妆品中的应 用。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 105596257 B 。
5、2 文冠果叶的抗氧化活性物、 提取方法及在化妆品中的应用 技术领域 0001 本发明属于植物提取技术领域, 涉及一种文冠果, 尤其涉及一种文冠果叶的抗氧 化活性物、 提取方法及在化妆品中的应用。 背景技术 0002 文冠果(学名: Xanthoceras sorbifolium Bunge), 无患子科、 文冠果属落叶灌木 或小乔木, 高可达5米; 小枝褐红色粗壮, 叶连柄长可达30厘米; 小叶对生, 两侧稍不对称, 顶 端渐尖, 基部楔形, 边缘有锐利锯齿, 两性花的花序顶生, 雄花序腋生, 直立, 总花梗短, 花瓣 白色, 基部紫红色或黄色, 花盘的角状附属体橙黄色, 花丝无毛; 蒴果长达。
6、6厘米; 种子黑色 而有光泽。 春季开花, 秋初结果。 0003 文冠果原产中国西北地区, 主要分布在陕西、 山西、 河北、 内蒙等省, 有较高的食 用、 药用、 观赏等经济价值。 有祛风湿、 消肿止痛等功效, 临床上主要用于治疗风湿性关节 炎、 风湿内热、 皮肤风热、 小儿遗尿等症, 并作为药用部位列入了1977年版的中国药典。 另 外, 文冠果适应性很强, 耐干旱、 瘠薄, 根系发达, 萌蘖力强, 生长快、 结实早、 产量高、 寿命 长、 经济价值大, 是珍贵的观赏兼重要的木本油料树种。 目前文冠果被国家列为木本燃料油 能源主要树种, 其选育推广受到国家高度重视, 大力发展文冠果势在必行。。
7、 0004 全国现有文冠果栽培面积达5.35万hm2, 目前对其开发利用以种仁榨油为主。 文冠 果叶子含有多种化学成分(马养民, 王佩, 文冠果叶化学成分的研究J.中成药, 2010, 32 (10), 1750-1753) 且具有消炎止痛、 止血消肿的作用。 目前, 对文冠果叶的开发利用以茶叶 为主, 如中国专利文献公开了一种文冠果叶茶及其应用 申请号: 201310217440.8, 一种 以文冠果叶为主要原料, 采用红茶加工工艺制作的饮养茶申请号: 201110238087.2, 一种 含有文冠果皂甙生物活性物质的茶叶专利号:200710018943.7。 发明内容 0005 本发明的目。
8、的是针对上述问题, 提供一种易于实施的文冠果叶的抗氧化活性物提 取方法。 0006 本发明的另一目的是提供一种文冠果叶的抗氧化活性物。 0007 本发明的再一目的是提供一种能用于化妆品的文冠果叶的抗氧化活性物。 0008 为达到上述目的, 本发明采用了下列技术方案: 一种文冠果叶的抗氧化活性物提 取方法, 包括以下步骤: 0009 A、 取新鲜文冠果叶, 干燥后得到干燥文冠果叶; 0010 B、 将步骤A中得到的文冠果叶用有机溶剂萃取, 萃取液过滤后得到提取液; 有机溶 剂可以是1-4碳原子的醇、 乙醚、 石油醚、 乙酸乙酯等。 0011 C、 将步骤B中的提取液进行浓缩得到浓缩液, 浓缩液干。
9、燥后得到文冠果叶的抗氧 化活性物。 0012 在上述的文冠果叶的抗氧化活性物提取方法中, 在步骤A中, 所述的干燥文冠果叶 说 明 书 1/4 页 3 CN 105596257 B 3 采用室内阴干的方法制得, 在步骤B中, 所述的有机溶剂为乙醇溶液, 在步骤C中, 浓缩采用 真空浓缩, 干燥采用冷冻干燥。 0013 在上述的文冠果叶的抗氧化活性物提取方法中, 在步骤B中, 所述的乙醇溶液为 30-95V/V的乙醇水溶液。 0014 在上述的文冠果叶的抗氧化活性物提取方法中, 在步骤B中, 采用加热回流的方法 进行萃取, 乙醇溶液为70-95V/V的乙醇水溶液。 0015 在上述的文冠果叶的抗。
10、氧化活性物提取方法中, 在步骤B中, 乙醇溶液为95V/V 的乙醇水溶液。 0016 在上述的文冠果叶的抗氧化活性物提取方法中, 在步骤B中, 加热回流的加热时间 为1-3h, 干燥文冠果叶与有机溶剂的重量比为1:1-1.5。 0017 在上述的文冠果叶的抗氧化活性物提取方法中, 萃取次数为 1-3次, 萃取液合并 后得到提取液。 0018 在上述的文冠果叶的抗氧化活性物提取方法中, 在步骤A中, 干燥文冠果叶粉碎至 40-60目。 0019 根据上述的提取方法制得的文冠果叶的抗氧化活性物。 0020 根据上述的提取方法制得的文冠果叶的抗氧化活性物在化妆品中的应用, 化妆品 可以是洗面奶、 面。
11、膜、 洁面霜等。 0021 与现有的技术相比, 本发明的优点在于: 通过本发明筛选的来源于文冠果叶的抗 氧化活性部位, 能够应用于制备具有抗氧化活性的化妆品如洗面奶、 面膜、 洁面霜等。 附图说明 0022 图1是对比例提供的活性物与VC对照品的DPPH清除率的曲线图; 0023 图2是实施例1提供的活性物与VC对照品的DPPH清除率的曲线图; 0024 图3是实施例2提供的活性物与VC对照品的DPPH清除率的曲线图; 0025 图4是实施例3提供的活性物与VC对照品的DPPH清除率的曲线图; 0026 图5是实施例4提供的活性物与VC对照品的DPPH清除率的曲线图。 具体实施方式 0027 。
12、实施例1 0028 取新鲜的文冠果叶500g, 室内常温下阴干、 粉碎至60目后备用, 加入500g 30体 积比的乙醇水溶液, 加热回流, 回流液过滤后得到提取液, 回流3次, 每次3h, 每次回流料液 比相同, 合并提取液, 提取液真空浓缩, 真空度为0.09MPa, 浓缩后冷冻干燥, 得文冠果叶的 抗氧化活性物。 0029 实施例2 0030 取新鲜的文冠果叶500g, 室内常温下阴干、 粉碎至60目后备用, 加入500g 50体 积比的乙醇水溶液, 加热回流, 回流液过滤后得到提取液, 回流3次, 每次3h, 每次回流料液 比相同, 合并提取液, 提取液真空浓缩, 真空度为0.09MP。
13、a, 浓缩后冷冻干燥, 得文冠果叶的 抗氧化活性物。 0031 实施例3 说 明 书 2/4 页 4 CN 105596257 B 4 0032 取新鲜的文冠果叶500g, 室内常温下阴干、 粉碎至60目后备用, 加入500g 70体 积比的乙醇水溶液, 加热回流, 回流液过滤后得到提取液, 回流3次, 每次3h, 每次回流料液 比相同, 合并提取液, 提取液真空浓缩, 真空度为0.09MPa, 浓缩后冷冻干燥, 得文冠果叶的 抗氧化活性物。 0033 实施例4 0034 取新鲜的文冠果叶500g, 室内常温下阴干、 粉碎至60目后备用, 加入500g 95体 积比的乙醇水溶液, 加热回流, 。
14、回流液过滤后得到提取液, 回流3次, 每次3h, 每次回流料液 比相同, 合并提取液, 提取液真空浓缩, 真空度为0.09MPa, 浓缩后冷冻干燥, 得文冠果叶的 抗氧化活性物。 0035 实施例5 0036 取新鲜的文冠果叶500g, 室内常温下阴干、 粉碎至40目后备用, 加入750g乙酸乙 酯, 加热回流, 回流1h, 回流液过滤后得到提取液, 提取液真空浓缩, 真空度为0.09MPa, 浓缩 后冷冻干燥, 得文冠果叶的抗氧化活性物。 0037 实施例6 0038 取新鲜的文冠果叶500g, 室内常温下阴干、 粉碎至50目后备用, 加入600g石油醚, 加热回流, 回流液过滤后得到提取液。
15、, 回流2次, 每次2h, 每次回流料液比相同, 合并提取液, 提取液真空浓缩, 真空度为0.09MPa, 浓缩后冷冻干燥, 得文冠果叶的抗氧化活性物。 0039 实施例7 0040 取新鲜的文冠果叶500g, 室内常温下阴干、 粉碎至50目后备用, 加入600g石油醚, 加热回流, 回流液过滤后得到提取液, 回流2次, 每次2h, 每次回流料液比相同, 合并提取液, 提取液真空浓缩, 真空度为0.09MPa, 浓缩后冷冻干燥, 得文冠果叶的抗氧化活性物。 0041 对比例 0042 取新鲜的文冠果叶500g, 室内常温下阴干、 粉碎至60目后备用, 加入500g纯净水, 加热回流, 回流液过。
16、滤后得到提取液, 回流3次, 每次3h, 每次回流料液比相同, 合并提取液, 提取液真空浓缩, 真空度为0.09MPa, 浓缩后冷冻干燥, 得文冠果叶的抗氧化活性物。 0043 体外DPPH自由基清除实验 0044 (1)VC对照品及样品溶液的制备: 精密称取VC对照品、 实施例1-4及对比例制备的 文冠果叶的抗氧化活性物各25mg于 25ml容量瓶中, 甲醇溶解并定容至25ml。 分别取其中 2ml溶于 10ml容量瓶中, 甲醇稀释到刻度, 得0.01mg/ml的溶液备用; 0045 再按相同方法分别配制0.04mg/ml、 0.08mg/ml、 0.12mg/ml、 0.16mg/ml、 。
17、0.20mg/ ml浓度梯度的对照品及样品工作液。 0046 (2)DPPH标准品溶液的制备: 精密称取DPPH标准品12mg, 置于250ml容量瓶中, 甲醇溶解并定容, 得DPPH标准液, 低温避光保存备用。 0047 (3)不同提取部位清除DPPH活性测定: 取2ml DPPH标准液与2ml按步骤(1)制备 的相同浓度值的VC对照品、 实施例1-4 及对比例的溶液混合, 避光反应15min, 517nm处测定 吸光度A 样品。 对0.01mg/ml、 0.04mg/ml、 0.08mg/ml、 0.12mg/ml、 0.16mg/ml、 0.20mg/ml的 浓度梯度依次测定。 0048。
18、 DPPH清除率计算方法: 0049 DPPH清除率A空白A样品/A空白100 说 明 书 3/4 页 5 CN 105596257 B 5 0050 其中空白为4ml的DPPH溶液 0051 实验结果显示: 参照图1-5所示, 实施例1-4及对比例制备的文冠果叶的抗氧化活 性物对DPPH自由基均有一定的清除活性, 其中实施例4提供的活性物对清除DPPH自由 基活性最强, 在浓度为0.2mg/ml时, 对DPPH自由基的清除率可达85.78, 而相同浓度下 VC对照品的清除率为90.21。 0052 应用例 0053 实施例1-7制备的文冠果叶的抗氧化活性物均具有抗氧化活性, 应用于化妆品中。。
19、 0054 尤其是, 实施例4提供的文冠果叶的抗氧化活性物具有良好的抗氧化活性, 在浓度 为0.2mg/l时, 对DPPH自由基的清除率可达85.78。 该活性物来源于天然的植物抗氧化 剂, 且提取过程中使用的提取剂为水及乙醇水溶剂, 对人体无毒无害, 是优良的化妆品添加 剂, 应用于制备具有抗氧化活性的化妆品如洗面奶、 面膜、 洁面霜等。 0055 至于文冠果叶的抗氧化活性物在化妆品中的添加量, 在符合相关行业标准或企业 标准等情况下, 可以根据化妆品不同的种类、 配方、 性能予以制定。 亦可参照VC的添加量予 以制定。 0056 本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。 本发明所属技术领 域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替 代, 但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。 说 明 书 4/4 页 6 CN 105596257 B 6 图1 图2 说 明 书 附 图 1/3 页 7 CN 105596257 B 7 图3 图4 说 明 书 附 图 2/3 页 8 CN 105596257 B 8 图5 说 明 书 附 图 3/3 页 9 CN 105596257 B 9 。