技术领域
本发明属中药领域，涉及治疗更年期综合症的药物。具体涉及一种治疗更年期 综合征的中药复方制剂及其制备方法。
背景技术
更年期综合征(Menopausal Syndrome，MPS)，是指妇女在绝经前后由于卵巢功能 逐渐衰退、雌激素水平下降，出现以植物神经系统功能紊乱为主伴有神经心理症状的 一组症候群，也称围绝经期综合征。
现代医学研究表明：卵巢功能减退，雌激素水平下降，是引起更年期综合征的主 要原因。下丘脑-垂体-卵巢轴的平衡失调，影响植物神经中枢及其支配下的各脏器功能。 雌激素受体(ER)除生殖器官外，广泛存在于全身许多组织和器官中，如乳房、皮肤、 心肌、冠状动脉、主动脉、肝、肾、骨骼、脂肪组织、泌尿系统及中枢、周围神经元 和神经细胞。当体内雌激素水平下降后，其组织和器官可产生功能和组织形态学的变 化，从而出现一系列的症状。临床主要表现为潮热、汗出、失眠、心神不安、烦躁易 怒、月经紊乱、生殖泌尿道萎缩及精神与心理状态的改变。目前临床治疗方法包括药 物疗法、精神疗法、体育疗法和食物疗法等。西医治疗主要采用激素替代疗法(hormone replacement therapy，HRT)，常用的激素有雌激素、孕激素、雄激素和雌孕激素复方制 剂。口服制剂有口服己烯雌酚、尼尔雌醇，雷洛昔芬等，虽然具有一定疗效，但其引 起阴道出血、乳房胀痛等不良反应及中远期致子宫内膜癌、乳腺癌、血栓性疾病等副 作用无法排除，故难以被广大妇女普遍接受，使其应用受到一定的限制。
该病中医称之为“绝经前后诸症”或“经断前后诸症”，中医学传统观点认为其基本病 机，是肾脏虚损，有肾阴虚、肾阳虚之分，以肾阴虚为多见，治法以补肾为根本。在 中医整体观指导下通过辨证论治进行的全身调理能够改善更年期的各种心身症状，最 大限度地减少激素用量，且副作用小，长期服用安全可靠。市售中成药主要有：更年 康片、更年宁丸、补肾宁片、坤宝丸、更年灵胶囊、更年舒片、妇宁康片、舒服神灵、 更年安片等。但这些中成药大多针对更年期综合征的某些症状或某一病因，治疗比较 单一，不便于患者自行购买服用。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗更年期综合症的药物，具体涉及一种治疗妇女更年 期综合征的中药复方制剂及其制备方法。
本发明采用中药材生地黄、知母、山茱萸、当归、炒白芍、夜交藤、百合、淫羊 藿、怀牛膝、茯苓、生龙骨和生牡蛎加药物辅料制成治疗更年期综合症的药物。
本发明药物依据中医病因病机，治法以补肾为本，具有滋阴补肾、养血安神之功， 对更年期综合征出现的心烦焦虑、失眠健忘、情绪起伏无法自控等症状治疗有殊功， 所述药物还有治疗骨质疏松，抗衰老及提高免疫功能作用。
本发明采用的中药材，其中：
生地黄为玄参科多年生草本植物怀庆地黄Rehmannia glutinosa Libosch.f.hueichingensis(Cbao et Schih)Hsiao或地黄R.glutinosa(Gaertn.) Libosch的根。味甘、苦，性寒，入心、肝、肾经。所述药材有清热凉血，养阴生津之 功。
山茱萸为山茱萸科落叶小乔木植物山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc.除去 果核的果肉。味酸、涩，性微温。归肝、肾经。具有补益肝肾，涩精固脱之功。用于 眩晕耳鸣，腰膝酸痛，阳痿遗精，遗尿尿频，崩漏带下，大汗虚脱。
淫羊藿为小檗科植物淫羊藿Epimedium grandiflorum Morr.和箭叶淫羊藿E. sagittatum(S.et Z.)Maxim.或心叶淫羊藿E.brevicornum Maxim.的全草。生用或酥炒 用。味辛、甘，性温。归肝、肾经。有补肾壮阳，祛风除湿之功效。用于阳痿遗精， 筋骨痿软，风湿痹痛，麻木拘挛；更年期高血压。
知母为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides Bge.的干燥根茎。味苦、甘， 寒。归肺、胃、肾经。具有清热泻火，生津润燥之功。用于阴虚火旺，肺肾阴亏所致 的骨蒸潮热、盗汗、心烦等症。
当归为伞形科植物当归Angelica sinensis(Oliv.)Diels.的根。味甘、辛，性温。归 肝、心、脾经。具有补血活血，调经止痛，润肠通便之功。用于血虚诸症，月经不调， 经闭痛经，虚寒腹痛，肠燥便秘等。
炒白芍为毛茛科多年生草本植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的根。味苦、酸， 微寒。归肝、脾经。具有养血敛阴，柔肝止痛，平抑肝阳之功效。用于月经不调、经 行腹痛、崩漏、自汗、盗汗。本品能养血调经，常用于妇科疾病。
夜交藤即首乌藤，为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥藤茎。 味甘，平。归心、肝经。功能养心安神，通络祛风。用于失眠多梦，血虚身痛，风湿 痹痛；外治皮肤瘙痒。
百合为百合科多年生草本植物百合Lilium brownii F.E.Brown var.colchesteri Wils. 和细叶百合Lilium pumilum DC.的肉质鳞茎。味甘，微寒。归肺、心经。具有润肺止咳， 清心安身之功效。用于热病余热未清，虚烦惊悸，失眠多梦等。
茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf的菌核。味甘、淡、平。归心、 脾、肾经。具有利水渗湿，健脾宁心之功。用于水肿尿少，痰饮眩悸，脾虚食少，便 溏泄泻，心神不安，惊悸失眠。
怀牛膝为苋科多年生草本植物牛膝Achyranthes bidentata Blume的根。味苦、 酸，平。归肝、肾经。具有活血祛瘀，补肝肾，强筋骨，利尿通淋，引血下行。用于 淤血阻滞的月经不调、痛经、闭经等妇科疾患。
生龙骨为古代哺乳动物如象类、犀牛类、三趾马等的骨骼化石。味甘、涩，微寒。 归心、肝经。具有平肝潜阳，镇静安神，收敛固涩之功。用于阴虚阳亢所致的烦躁易 怒、头晕目眩等证。
生牡蛎为蛎科动物长牡蛎Ostrea gigas Thunb和大连湾牡蛎O.talienwhanensis Crosse或近江牡蛎O.rivularis Gould的贝壳。捣碎生用；味咸，微寒；归肝、胆、肾 经。具有平肝潜阳，软坚散结，收敛固涩之功。用于阴虚阳亢所致的烦躁不安、心悸失 眠，眩晕耳鸣等证。
本发明在中医理论和临床实践的基础上，运用了正交试验药物筛选，工艺筛选和 临床试验，确定了本发明的理想组方和制备方法。
本发明由下述重量配比的原料药制成：
生地黄3％-12％ 知母1％-6％ 山茱萸2％-10％ 当归2％-10％
炒白芍2％-10％ 夜交藤3％-12％百合2％-10％ 淫羊藿2％-10％
怀牛膝2％-10％ 茯苓5％-15％ 生龙骨10％-30％ 生牡蛎10％-30％
所述的原料药优选重量配比是：
生地黄6％-10％ 知母2％-4％ 山茱萸6％-8％ 当归6％-8％
炒白芍6％-8％ 夜交藤6％-10％ 百合6％-8％ 淫羊藿6％-8％
怀牛膝6％-8％ 茯苓8％-12％ 生龙骨18％-24％ 生牡蛎18％-24％
制备本发明中药复方制剂的原料药的最优选重量配比是：
生地黄7％ 知母3％ 山茱萸6％ 当归6％
炒白芍6％ 夜交藤7％ 百合6％ 淫羊藿6％
怀牛膝6％ 茯苓9％ 生龙骨19％ 生牡蛎19％
将上述各组分制成本发明中药复方的制备方法是：
1).取生龙骨、生牡蛎粉碎成粗粉，备用；
2).取干地黄、知母、山茱萸、当归、炒白芍、夜交藤、百合、淫羊藿、怀牛膝及 上述步骤1中的药粉，加水8-12倍量煎煮2次，每次1-2h，滤过，残渣弃去，滤液浓 缩备用；
3).将步骤2中滤液加乙醇，使含醇量50-70％，沉淀，静止过夜；取上清液浓缩至 无醇味，回收乙醇，沉淀弃去；
4).取茯苓打碎，加水5倍量煎煮2次，每次1-2h，，滤过，残渣弃去，滤液与所述 步骤3的上清液合并，浓缩至1.22-1.35(50℃热测)的清膏，备用；
5).将上述步骤4中所得的清膏制成医学上可以接受的剂型。
所述的医学上可以接受的剂型包括制成口服液、颗粒剂、片剂和胶囊剂。
本发明通过实验动物模型进行了药效学试验：结果显示，能够升高去势大鼠血清 中E2水平，高剂量可明显减低LH水平，并使子宫指数及水摄取量增加百分数升高。 实验结果证实，本发明制剂可弥补雌激素缺点，对妇女更年期综合征有显著疗效，兼 有治疗骨质疏松，抗衰老及提高免疫功能作用，本发明药物稳定性好，生物利用度高， 长期服用，安全有效。
具体实施方式
实施例1
本发明的中药复方制剂制备及工艺选择，其中，
按文献报道，矿贝类药物粉碎后入药无需先煎，本发明上述步骤1的生龙骨、生 牡蛎粉碎成粗粉后，过20-40目筛，直接入药，简化工艺；
上述步骤2中水提条件的选择：生地黄、知母、山茱萸、当归、炒白芍、夜交藤、 百合、淫羊藿和怀牛膝，采用水煎煮提取。按L9(34)正交实验，对加水量、煎煮次 数和煎煮时间3个影响提取效果的因素进行筛选，每个因素3个水平；以马钱苷含量， 淫羊藿苷含量及生膏率为评价指标进行综合评价。
表1是正交试验表头因素水平表。
表1.
样品制备：取处方量药材的1/40九份，按正交试验表进行提取，滤过，滤液浓缩 并定容到100mL。
出膏率测定：精密量取药液20mL，水浴蒸生，置烘箱中105℃烘4小时，取出置 于生燥器中冷却30分钟，称重，计算，即得。
结果表明：提取最佳工艺为：生龙骨、生牡蛎粉碎成20-40目粗粉与其它九味药(除 茯苓)加12倍水量浸泡1小时后进行提取，第一次煎煮60分钟，第二次加8倍量水， 煎煮60分钟。
将步骤2中水煎液浓缩至相当于1g/ml生药量。
醇沉条件的选择：
本发明为保留部分多糖与水溶性成分，以及节省成本，对醇沉浓度做单因素考察， 选择40％、50％、60％浓度，以贵重药山茱萸有效成分马钱苷含量及臣药淫羊藿中淫羊 藿苷含量、生膏率为评价指标进行综合评价，
结果表明：50％乙醇进行沉淀为醇沉最佳工艺。
上述步骤4中的茯苓另煎，茯苓打碎温水浸透后，加5倍量水煎煮两次，分别为2h， 1.5h，合并煎液，滤过，滤液与其余药味醇沉后浓缩液合并；
将合并液浓缩至相对密度为1.10-1.21(60℃)，加入适量助悬剂土温-80及山梨酸 防腐剂，混匀、灌装，灭菌，即得。
实施例2制备口服液
按下述重量比取药材：
生地黄7％ 知母3％ 山茱萸6％ 当归6％
炒白芍6％ 夜交藤7％ 百合6％ 淫羊藿6％
怀牛膝6％ 茯苓9％ 生龙骨19％ 生牡蛎19％
将生龙骨、生牡蛎粉碎成20-40目粗粉与其它九味药(除茯苓)加12倍水量浸泡1小 时后进行提取，第一次煎煮60分钟，第二次加8倍量水，煎煮60分钟，合并煎液，滤 过，滤液减压浓缩，在搅拌下加入乙醇，使含醇量达到50％，放置48h，滤过，滤液浓 缩至无醇味，回收乙醇，浓缩液备用。茯苓打碎温水浸透后，加5倍量水煎煮两次，分 别为2h，1.5h，合并煎液，滤过，滤液与上述浓缩液合并，浓缩至相对密度1.10-1.21， (60℃)的清膏，加入适量防腐剂土温-80或山梨酸，加入纯化水溶解，混匀、灌装， 灭菌，即得。
实施例3制备颗粒剂
按下述重量比取药材：
生地黄10％ 知母4％ 山茱萸8％ 当归8％
炒白芍6％ 夜交藤6％ 百合6％ 淫羊藿6％
怀牛膝8％ 茯苓8％ 生龙骨15％ 生牡蛎15％
将生龙骨、生牡蛎粉碎成20-40目粗粉与其它九味药(除茯苓)加12倍水量浸泡1 小时后进行提取，第一次煎煮60分钟，第二次加8倍量水，煎煮60分钟，合并煎液， 滤过，滤液减压浓缩，在搅拌下加入乙醇，使含醇量达到50％，放置48h，滤过，滤 液浓缩至无醇味，回收乙醇，浓缩得浸膏；取50％的浸膏喷雾干燥得浸膏粉；将茯苓 粉碎过40目筛得茯苓粉；将制得的浸膏粉与茯苓粉于沸腾制粒机中混合，加入剩余的 50％浸膏喷雾制粒，干燥，整粒；将制得的颗粒装袋。
实施例4制备片剂
按下述重量比
生地黄4％ 知母1％ 山茱萸3％ 当归3％
炒白芍4％ 夜交藤4％ 百合4％ 淫羊藿4％
怀牛膝10％ 茯苓13％ 生龙骨25％ 生牡蛎25％
将生龙骨、生牡蛎粉碎成20-40目粗粉与其它九味药(除茯苓)加12倍水量浸泡1 小时后进行提取，第一次煎煮60分钟，第二次加8倍量水，煎煮60分钟，合并煎液， 滤过，滤液减压浓缩，在搅拌下加入乙醇，使含醇量达到50％，放置48h，滤过，滤 液浓缩至无醇味，回收乙醇，浓缩得浸膏；取50％的浸膏喷雾干燥得浸膏粉；将茯苓 粉碎过40目筛得茯苓粉；将制得的浸膏粉与茯苓粉于沸腾制粒机中混合，加入剩余的 50％浸膏喷雾制粒，干燥，整粒；将制得的颗粒压片。
实施例5制备胶囊剂
生地黄5％ 知母3％ 山茱萸4％ 当归4％
炒白芍9％ 夜交藤9％ 百合9％ 淫羊藿9％
怀牛膝6％ 茯苓12％ 生龙骨15％ 生牡蛎15％
将生龙骨、生牡蛎粉碎成20-40目粗粉与其它九味药(除茯苓)加12倍水量浸泡1 小时后进行提取，第一次煎煮60分钟，第二次加8倍量水，煎煮60分钟，合并煎液， 滤过，滤液减压浓缩，在搅拌下加入乙醇，使含醇量达到50％，放置48h，滤过，滤 液浓缩至无醇味，回收乙醇，浓缩得浸膏；取50％的浸膏喷雾干燥得浸膏粉；将茯苓 粉碎过80目筛得茯苓粉；将制得的浸膏粉与茯苓粉于沸腾制粒机中混合，加入剩余的 50％浸膏喷雾制粒，干燥，整粒；将制得的颗粒装胶囊。
实施例6药效学试验
对大鼠去势模型的影响：
1.动物模型：3～4月龄SD健康雌性未孕大鼠，60只，清洁级；按常规方法制得符 合“更年期”表现的动物模型。
2.实验分组：60只大鼠，随机分6组，每组10只，分别为：正常组、模型组、高剂 量组、中剂量组、低剂量组、更年安片组。
3.实验药物：本发明复方口服液(低、中、高剂量组)，其给药剂量分别为14.3g/kg·d、 28.6g/kg·d、57.2g/kg·d(分别为临床等效剂量的1、2、4倍)，阳性对照药：更年安片 (江西济民可信药业有限公司，生产批号：060502)，给药剂量0.97g/kg·d(临床等效 剂量的2倍)；正常组和模型组灌服蒸馏水14ml/kg·d；各组大鼠连续灌胃30d。
4.检测指标与方法：血清E2，FSH，LH，Te水平；子宫指数，
末次给药后1h，麻醉大鼠，腹主动脉取血，分离血清(用放免法检测血清中E2，FSH， LH，Te水平)；取出子宫，常规处理，称出湿重，按下列公式计算脏器系数：
子宫指数＝子宫湿重(mg)/大鼠体重(g)
水摄取增加百分数＝(子宫湿重(g)-子宫生重(g))/大鼠体重(g)
结果显示，与正常组相比，模型组大鼠血清E2、Te均明显降低，其中E2有极显著 性差异(P＜0.01)，FSH、LH明显升高，差异有极显著性(P＜0.01)，表明模型组已经 开始出现了更年期综合征患者的内分泌失调表现。与模型组相比，本复方高、中、低 剂量均可明显升高去势大鼠血清中E2的水平，其中高、中剂量组有显著性差异 (P＜0.05)，中剂量有降低FSH的趋势，低、高剂量可以明显降低LH，高剂量有显著差 异(P＜0.05)；更年安片可明显升高E2水平(P＜0.05)，降低FSH的水平。
表2是实验药物对去势大鼠血清E2，FSH，LH，Te激素水平的影响(x±s)。
表2.
注：与模型组比较：＊P＜0.05 ＊＊P＜0.01
对去势大鼠子宫指数及水摄取增加百分数的影响：
结果显示，与正常组相比，模型组大鼠的子宫指数和水摄取增加百分数显著下降 (P＜0.01)，用药组治疗的大鼠子宫指数比模型组有增加的趋势，其中高、中剂量具有 极显著性差异(P＜0.01)，表明本复方中剂量在增加去势大鼠子宫指数方面，作用优于 更年组；用药组治疗的大鼠水摄取增加百分数比模型组有增加的趋势，其中，中剂量 具有极显著性差异(P＜0.01)，高剂量组及水煎组有显著差异(P＜0.05)。
表3是实验药物对去势大鼠子宫指数及水摄取增加百分数的影响(x±s)。
表3.
注：与模型组比较：＊P＜0.05 ＊＊P＜0.01
实验证实，本发明复方制剂能够升高去势大鼠血清中E2水平，高剂量可明显减低 LH水平，并使子宫指数及水摄取量增加百分数升高。本发明制剂对妇女更年期综合征 有治疗作用。