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1、10申请公布号CN104137733A43申请公布日20141112CN104137733A21申请号201410166498922申请日20140423A01G1/04200601C05G3/00200601G01N21/31200601G01N5/0020060171申请人安徽大学地址230601安徽省合肥市经济开发区九龙路111号申请人阜南县健生源食用菌开发有限公司72发明人李能树何炎炘张志强74专利代理机构安徽合肥华信知识产权代理有限公司34112代理人余成俊54发明名称一种富硒杏鲍菇的栽培及成份检测方法57摘要本发明公开了一种富硒杏鲍菇的裁培及成分检测方法,本发明的栽培方法包括培养基。
2、配制、装袋、灭菌、接种、发菌、催蕾、出菇、采收等步骤,通过对温度、湿度、光照、通风等主要栽培条件的控制,使杏鲍菇富硒达到周年生产、全年上市,提高产量,增加经济效益,且增加杏鲍菇的富硒能力,提高杏鲍菇的食疗价值。本发明成分检测包括硒元素、氨基酸、总糖三种成分的测定,富硒杏鲍菇每公斤含硒量为富硒能力最好达到了600UG/G,并未超过人体极限吸收范围800UG/D中毒界限。51INTCL权利要求书3页说明书7页附图1页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书3页说明书7页附图1页10申请公布号CN104137733ACN104137733A1/3页21一种富硒杏鲍菇的裁培方法,其特。
3、征在于包括以下步骤1配制培养基A、称取以下重量份的原料玉米芯4050、杂木屑2535、麸皮1520、营养颗粒510、石灰12、白糖12、石膏粉051、亚硒酸钠0000100002;B、将无霉变的玉米芯粉碎成黄豆粒大小,待用;C、取亚硒酸钠和白糖混合均匀,然后加入适量的水中在拌和机中搅拌12MIN使之充分溶解,然后加入玉米芯、杂木屑、麸皮、营养颗粒、石灰、石膏粉搅拌46MIN,使培养料充分吸收水份;D、将拌匀后的培养基在水泥地面摊放2436H,中间翻堆12次;2装袋将培养基装入1733厘米聚丙烯袋,每袋装培养基1520公斤,装袋时压实,上好颈圈,塞上硅胶塞,并用打孔器在菌袋上打810厘米深的孔;。
4、3灭菌高压灭菌,压力为0102MPA,时间为23H,待压力表指针降到0时出锅;4接种待到袋温冷却到45以下时接种,抽出袋中塑料棒,在孔洞中加入谷粒菌种;5发菌发菌在培养室进行,温度2325,湿度6570,时间2527天;6催蕾将菌棒移入菇房出菇架上培养,用打孔器在菌袋上打若干个0406CM深的孔,温度2325,湿度8085,培养三天;再在温度1215,湿度8590,用光照强度700800LUX,培养710天现蕾;7出菇待菇蕾长到黄豆大小时,选留23个生长健壮菇蕾;二天后选留12个菇朵形好的小菇留下培养;待菇长到如乒乓球大小时,提高湿度到9095,加大通风量,每天34次,每次3040MIN;8采。
5、收待菌盖直径46CM,菌柄长1012CM时,菌盖平展,边缘向内稍巻,菌褶初步形成,但未弹射孢子,有78分成熟时,采收。2根据权利要求1所述的富硒杏鲍菇的裁培方法,其特征在于,所述营养颗粒的制备方法如下A、称取以下重量份的原料畜禽粪便2030、蚯蚓粪510、菜籽饼1015、中药渣48、椰壳粉36、咖啡渣2545、蹄角粉23、骨粉23、炉渣灰1525、沙漠砂812、紫砂岩1015、浮石510、绿泥石48、烟草粉35、蓖麻叶粉24、茶枯粉2545、桉叶油13、竹醋液46、废糖蜜35、沼气废液2445、营养液1015;B、取沙漠砂、紫砂岩、浮石、绿泥石混合均匀,粉碎,过50100目筛,780840煅烧。
6、12H,自然冷却至室温,待用;C、取畜禽粪便、蚯蚓粪、菜籽饼、中药渣、椰壳粉、咖啡渣、蹄角粉、骨粉、炉渣灰混合均匀,再加入适量的水充分搅拌均匀,控制含水量为5060,在2832下堆肥发酵57天,然后加入竹醋液、废糖蜜和沼气废液,搅拌均匀,在2530下继续发酵36天,最后加入营养液,搅拌均匀,在2428下继续发酵24天,发酵完成后将发酵料低温烘干,粉碎,过50100目筛,待用;D、将上述过筛的发酵料与步骤B制得的粉末混合均匀,再加入余下原料,搅拌均匀,制粒,烘干即可。3根据权利要求2所述的富硒杏鲍菇的裁培方法,其特征在于,所述营养液是含有以下浓度成分的水溶液磷酸二氢铵510G/L、过磷酸钙36G。
7、/L、尿素24G/L、硫酸铜23MG/L、氯化锰48MG/L、硫酸亚铁3050MG/L、钼酸钠23MG/L、硼酸12MG/L、腐植酸钾12G/L、浒苔硒多糖1015MG/L。4如权利要求1所述的富硒杏鲍菇的成分检测方法。5根据权利要求4所述的富硒杏鲍菇的成分检测方法,其特征在于,所述杏鲍菇的硒权利要求书CN104137733A2/3页3成分测定方法如下1杏鲍菇子实体吸光度测定将生长完整的子实体标记放好,作为样品,将样品先除杂蒸馏水冲洗三次,50烘干,冷却粉碎研磨称量,因为本次试验中,所得样品烘干后质量较少,所以称取量也酌情减少,精确称取025样品细粉,加入体积比HNO3HCLO321组成的混合。
8、酸液5ML,浸泡溶解,水浴锅100水浴,直到其中粉末完全溶解,混酸液澄清,酸液稀释至50ML,取10ML稀释液,放入锥形瓶中,加入5EDTA2NA5ML混合,然后以稀硝酸调节PH至2,加入1的邻苯二胺溶液3ML摇晃震荡一分钟,放置2H后,甲苯10ML萃取震摇1MIN,取甲苯层在335NM处测吸光度;2标准硒溶液吸光度测定亚硒酸钠以10HNO3100ML溶解,取10ML液体以250ML容量瓶10HNO3稀释到250ML,得到4UG/ML的标准硒溶液;随后分别从标准硒溶液中,取0ML、4ML、8ML、12ML、16ML、20ML、24ML硒标准液,以容量瓶和10HNO3稀释定容到50ML;取10M。
9、L稀释液,放入锥形瓶中,加入5EDTA2NA5ML混合,然后以稀硝酸调节PH至2,加入1的邻苯二胺溶液3ML摇晃震荡一分钟,放置2H后,甲苯10ML萃取震摇1MIN,取甲苯层在335NM处测吸光度,做出标准线性曲线;3硒含量的分析将子实体中测得的吸光度带入标准硒溶液吸光度的线性曲线方程中,可得到硒元素的具体含量。6根据权利要求4所述的富硒杏鲍菇的成分检测方法,其特征在于,所述杏鲍菇的氨基酸成分测定方法如下1杏鲍菇样品前处理将杏鲍菇样品清洗干净,晾干,分离菌柄和菌盖,将菌柄和菌盖分别放入DHG9240A型电热恒温鼓风干燥箱中110干燥至恒重,冷却,置于研钵中研磨成细粉状,过60目筛,贮于干燥器内。
10、备用;2氨基酸含量测定将上述不同的实验材料碾碎,过80目筛,准确称取分析样品100MG,放入水解管,向管内加6MOL/L盐酸1520ML,抽真空,充2000G/的高纯度氮气,如此重复3次,在氮气状态下将管口封住并置于110水解22H后取出冷却,水解液过滤,用去离子水冲洗,再全部转移到100ML容量瓶,定容,吸取滤液1ML放到10ML小烧杯中,在ZK82A型真空干燥箱内,60、008MPA下干燥,用LML01MOL/L盐酸溶解上机检测;3游离氨基酸测定称取样品0100G,投入试管内,用80乙醇置于80水浴中提取,目的是蒸馏去酒精,等样品呈现糊状,加乙醚5ML,马上塞试管塞,充分振荡,用50ML分。
11、液漏斗反复抽提2次,收集,转到50ML容量瓶中,定容至刻度,摇匀;取5ML提取液,冷冻离心干燥,加进002MOL/LHCL1ML,用日立83550A型氨基酸自动分析仪测定其含量。7根据权利要求4所述的富硒杏鲍菇的成分检测方法,其特征在于,所述杏鲍菇的总糖成分测定方法如下1杏鲍菇样品预处理权利要求书CN104137733A3/3页4将供试杏鲍菇样品剪成长、宽约5CM小块,在105干燥箱中烘干至发脆,冷却后立即用研磨器研磨,研磨后的样品过80目筛,未能过筛部分经钵内研磨后再次过筛,直至全部样品过筛为止;2杏鲍菇总糖的提取将经过研磨预处理的杏鲍菇样品025G加入100ML蒸馏水中,再加入30ML浓盐。
12、酸100水浴水解3H;水解后冷却用漏斗过滤,以蒸馏水定容至250ML备用;3苯酚硫酸法标准曲线的制作标准储备液的配制精密称取105干燥至恒重的D无水葡萄糖01000G置于100ML容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度摇匀,即配得1MG/ML的的葡萄糖标准储备溶液备用;标准曲线的制备精密吸取葡萄糖标准储备液05、10、15、20、25、30和35ML,分别置于50ML容量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得100、200、300、400、500、600和700G/ML的标准葡萄糖使用液;取20ML刻度试管8支,从07分别编号,各取2ML不同浓度的葡萄糖标准溶液分别加入对应的试管中,然后按顺序向试管内加入10M。
13、L6苯酚溶液,摇匀,再从管液正面以520S时间加入50ML浓硫酸,摇匀冷却室温放置1520分钟,以20ML蒸馏水取代标准葡萄糖使用液,根据标准曲线制备方法显色后作为空白,在485NM波长下比色测定,以糖含量为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线,求出标准直线方程。权利要求书CN104137733A1/7页5一种富硒杏鲍菇的栽培及成份检测方法技术领域0001本发明涉及生物领域,特别涉及一种富硒杏鲍菇的栽培及成份检测方法。背景技术0002杏鲍菇,中文名刺芹侧耳;商品名杏鲍菇;别名雪耷、雪莺干贝燕。杏鲍菇菌肉肥厚,脆嫩、味道鲜美,具有淡淡的杏仁味,适合烹饪各种佳肴。与其他一般品种的平菇、香菇、鸡腿菇。
14、等的区别是组织紧密、富有弹性、采摘后保存的时间较一般菇要长。由此被誉为“平菇之王”;杏鲍燕的营养十分丰富,高蛋白,低脂肪,含有18种氨基酸,其中8种是人体必需氨基酸,且都是L型,易被人体吸收利用,它可与肉类、禽蛋相匹美。中医认为,杏鲍燕有益气、杀虫和美容作用,可促进人体对脂类物质的消化吸收和胆固醇的溶解,对肿瘤也有一定的预防和抑制作用。它还含有利尿,健脾胃、助消化的酶类,具有强身、滋补、增强免疫力的功能。100克干菇中粗蛋白的含量25、脂肪14、粗纤维69、氨基酸总量占16644、维生素E76毫克及转、磷、铁等矿物元素。杏鲍菇还含有大量寡糖,是灰树花的15倍、金针燕的35倍、真姬菇的2倍,它与。
15、胃肠中的双岐杆菌起作用,具有很好的促进消化、吸收功能,有整理肠胃及美容的效果,更是老年人和心血管疾病与肥胖症患者理想的营养保健食品,因而极受人们的欢迎。0003硒是人体必需的14种微量元素之一,它具有抑制体内细胞氧化、增强机体免疫力、抗衰老等作用。缺硒能诱发心血管疾病、肿瘤、克山病等。摄硒量过多,容易发生硒中毒营养学家指出,除膳食纤维外,食用菌含有人体所需的全部营养物质,一个成年人每天吃100克食用菌,能获得1517G优质蛋白;能获得600MG钙,相当于日需要量的80;可满足人体每日热需要量的11,但食用菌中硒的含量低于5吗/KG。食用菌的不同品种对硒元素的吸收或富集能力是不同的。通过选择杏鲍。
16、菌菇品种及其培养料中加入无机硒,通过加硒技术驯化杏鲍菌真菌吸收和富集能力,菌丝体转化所产生的食用菌,含硒量丰富,符合国家食品中硒限量卫生标准GB1310591,这称之为生物转化富硒食用菌,而不是在食用菌中加入硒制剂的强化食品。生物转化富硒食用菌是补硒壮体一举多得的极好功能性食品,具有良好的开发前景。0004杏鲍菌菇是近几年新引进开发的珍稀菇品种。但当前市售杏鲍燕以传统裁培技术方式生产,一是硒含量低,通常仅为5/ZG/KG,不能成为食疗保健产品,附加值低;二是不能常年生产,仅在每年3到6月,10到12月利用自然温度出菇,而在夏冬二季只能仃产,无法常年均衡上市。发明内容0005针对现有技术中存在的。
17、不足之处,本发明提供一种富硒杏鲍菇的栽培及成份检测方法。0006为实现上述目的,本发明采用的技术方案如下0007一种富硒杏鲍菇的裁培方法,包括以下步骤说明书CN104137733A2/7页600081配制培养基A、称取以下重量份的原料玉米芯4050、杂木屑2535、麸皮1520、营养颗粒510、石灰12、白糖12、石膏粉051、亚硒酸钠0000100002;B、将无霉变的玉米芯粉碎成黄豆粒大小,待用;C、取亚硒酸钠和白糖混合均匀,然后加入适量的水中在拌和机中搅拌12MIN使之充分溶解,然后加入玉米芯、杂木屑、麸皮、营养颗粒、石灰、石膏粉搅拌46MIN,使培养料充分吸收水份;D、将拌匀后的培养基。
18、在水泥地面摊放2436H,中间翻堆12次;00092装袋将培养基装入1733厘米聚丙烯袋,每袋装培养基1520公斤,装袋时压实,上好颈圈,塞上硅胶塞,并用打孔器在菌袋上打810厘米深的孔;00103灭菌高压灭菌,压力为0102MPA,时间为23H,待压力表指针降到0时出锅;00114接种待到袋温冷却到45以下时接种,抽出袋中塑料棒,在孔洞中加入谷粒菌种;00125发菌发菌在培养室进行,温度2325,湿度6570,时间2527天;00136催蕾将菌棒移入菇房出菇架上培养,用打孔器在菌袋上打若干个0406CM深的孔,温度2325,湿度8085,培养三天;再在温度1215,湿度8590,用光照强度7。
19、00800LUX,培养710天现蕾;00147出菇待菇蕾长到黄豆大小时,选留23个生长健壮菇蕾;二天后选留12个菇朵形好的小菇留下培养;待菇长到如乒乓球大小时,提高湿度到9095,加大通风量,每天34次,每次3040MIN;00158采收待菌盖直径46CM,菌柄长1012CM时,菌盖平展,边缘向内稍巻,菌褶初步形成,但未弹射孢子,有78分成熟时,采收。0016所述营养颗粒的制备方法如下A、称取以下重量份的原料畜禽粪便2030、蚯蚓粪510、菜籽饼1015、中药渣48、椰壳粉36、咖啡渣2545、蹄角粉23、骨粉23、炉渣灰1525、沙漠砂812、紫砂岩1015、浮石510、绿泥石48、烟草粉3。
20、5、蓖麻叶粉24、茶枯粉2545、桉叶油13、竹醋液46、废糖蜜35、沼气废液2445、营养液1015;B、取沙漠砂、紫砂岩、浮石、绿泥石混合均匀,粉碎,过50100目筛,780840煅烧12H,自然冷却至室温,待用;C、取畜禽粪便、蚯蚓粪、菜籽饼、中药渣、椰壳粉、咖啡渣、蹄角粉、骨粉、炉渣灰混合均匀,再加入适量的水充分搅拌均匀,控制含水量为5060,在2832下堆肥发酵57天,然后加入竹醋液、废糖蜜和沼气废液,搅拌均匀,在2530下继续发酵36天,最后加入营养液,搅拌均匀,在2428下继续发酵24天,发酵完成后将发酵料低温烘干,粉碎,过50100目筛,待用;D、将上述过筛的发酵料与步骤B制得。
21、的粉末混合均匀,再加入余下原料,搅拌均匀,制粒,烘干即可。0017所述营养液是含有以下浓度成分的水溶液磷酸二氢铵510G/L、过磷酸钙36G/L、尿素24G/L、硫酸铜23MG/L、氯化锰48MG/L、硫酸亚铁3050MG/L、钼酸钠23MG/L、硼酸12MG/L、腐植酸钾12G/L、浒苔硒多糖1015MG/L。0018本发明杏鲍菇的硒成分测定方法如下00191杏鲍菇子实体吸光度测定0020将生长完整的子实体标记放好,作为样品,将样品先除杂蒸馏水冲洗三次,50烘干,冷却粉碎研磨称量,因为本次试验中,所得样品烘干后质量较少,所以称取量也酌情减说明书CN104137733A3/7页7少,精确称取0。
22、25样品细粉,加入加入体积比HNO3HCLO321组成的混合酸液5ML,浸泡溶解,水浴锅100水浴,直到其中粉末完全溶解,混酸液澄清,酸液稀释至50ML,取10ML稀释液,放入锥形瓶中,加入5EDTA2NA5ML混合,然后以稀硝酸调节PH至2,加入1的邻苯二胺溶液3ML摇晃震荡一分钟,放置2H后,甲苯10ML萃取震摇1MIN,取甲苯层在335NM处测吸光度;00212标准硒溶液吸光度测定0022亚硒酸钠以10HNO3100ML溶解,取10ML液体以250ML容量瓶10HNO3稀释到250ML,得到4UG/ML的标准硒溶液;随后分别从标准硒溶液中,取0ML、4ML、8ML、12ML、16ML、2。
23、0ML、24ML硒标准液,以容量瓶和10HNO3稀释定容到50ML;取10ML稀释液,放入锥形瓶中,加入5EDTA2NA5ML混合,然后以稀硝酸调节PH至2,加入1的邻苯二胺溶液3ML摇晃震荡一分钟,放置2H后,甲苯10ML萃取震摇1MIN,取甲苯层在335NM处测吸光度,做出标准线性曲线;00233硒含量的分析0024将子实体中测得的吸光度带入标准硒溶液吸光度的线性曲线方程中,可得到硒元素的具体含量。0025本发明杏鲍菇的氨基酸成分测定方法如下00261杏鲍菇样品前处理0027将杏鲍菇样品清洗干净,晾干,分离菌柄和菌盖,将菌柄和菌盖分别放入DHG9240A型电热恒温鼓风干燥箱中110干燥至恒。
24、重,冷却,置于研钵中研磨成细粉状,过60目筛,贮于干燥器内备用;00282氨基酸含量测定0029将上述不同的实验材料碾碎,过80目筛,准确称取分析样品100MG,放入水解管,向管内加6MOL/L盐酸1520ML,抽真空,充2000G/M2的高纯度氮气,如此重复3次,在氮气状态下将管口封住并置于110水解22H后取出冷却,水解液过滤,用去离子水冲洗,再全部转移到100ML容量瓶,定容,吸取滤液1ML放到10ML小烧杯中,在ZK82A型真空干燥箱内,60、008MPA下干燥,用LML01MOL/L盐酸溶解上机检测;00303游离氨基酸测定0031称取样品0100G,投入试管内,用80乙醇置于80水。
25、浴中提取,目的是蒸馏去酒精,等样品呈现糊状,加乙醚5ML,马上塞试管塞,充分振荡,用50ML分液漏斗反复抽提2次,收集,转到50ML容量瓶中,定容至刻度,摇匀;取5ML提取液,冷冻离心干燥,加进002MOL/LHCL1ML,用日立83550A型氨基酸自动分析仪测定其含量。0032本发明杏鲍菇的总糖成分测定方法如下00331杏鲍菇样品预处理0034将供试杏鲍菇样品剪成长、宽约5CM小块,在105干燥箱中烘干至发脆,冷却后立即用研磨器研磨,研磨后的样品过80目筛,未能过筛部分经钵内研磨后再次过筛,直至全部样品过筛为止;00352杏鲍菇总糖的提取0036将经过研磨预处理的杏鲍菇样品025G加入100。
26、ML蒸馏水中,再加入30ML浓盐酸100水浴水解3H。水解后冷却用漏斗过滤,以蒸馏水定容至250ML备用;说明书CN104137733A4/7页800373苯酚硫酸法标准曲线的制作0038标准储备液的配制精密称取105干燥至恒重的D无水葡萄糖01000G置于100ML容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度摇匀,即配得1MG/ML的的葡萄糖标准储备溶液备用;0039标准曲线的制备精密吸取葡萄糖标准储备液05、10、15、20、25、30和35ML,分别置于50ML容量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得100、200、300、400、500、600和700G/ML的标准葡萄糖使用液。取20ML刻度试管8支,从0。
27、7分别编号,各取2ML不同浓度的葡萄糖标准溶液分别加入对应的试管中,然后按顺序向试管内加入10ML6苯酚溶液,摇匀,再从管液正面以520S时间加入50ML浓硫酸,摇匀冷却室温放置1520分钟,以20ML蒸馏水取代标准葡萄糖使用液,根据标准曲线制备方法显色后作为空白,在485NM波长下比色测定,以糖含量为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线,求出标准直线方程。0040本发明的有益效果00411通过使用本培养基栽培,增加杏鲍菇的富硒能力。00422通过本发明使无机硒转化以氨基酸螯合物形态存在,是优良的生物源硒,提升具有富硒保健的杏鲍菇产品,既具有食疗作用又是日常佳肴而便于消费者接受。00433本发。
28、明的栽培方法,培养基配制装袋灭菌接种发菌催蕾出菇采收和对温度、湿度、光照、通风等主要栽培条件的控制,使杏鲍菇富硒达到周年生产、全年上市,提高产量,增加经济效益。00444富硒杏鲍菇每公斤含硒量为富硒能力最好达到了600UG/G,并未超过人体极限吸收范围800UG/D中毒界限。符合国标GB131051991食品中硒限量卫生标准。同时硒源品质和含量得到改善、提高,而成为优质补硒保健食品。附图说明0045图1为实施例2测定硒的标准曲线。0046图2为实施例4葡萄糖标准曲线。具体实施方式0047以下通过实施例进一步对本发明进行描述。0048实施例1富硒杏鲍菇的裁培方法00491配制培养基A、称取以下重。
29、量份的原料玉米芯50、杂木屑30、麸皮17、营养颗粒8、石灰1、白糖1、石膏粉1、亚硒酸钠00001;B、将无霉变的玉米芯粉碎成黄豆粒大小,待用;C、取亚硒酸钠和白糖混合均匀,然后加入适量的水中在拌和机中搅拌1MIN使之充分溶解,然后加入玉米芯、杂木屑、麸皮、营养颗粒、石灰、石膏粉搅拌5MIN,使培养料充分吸收水份;D、将拌匀后的培养基在水泥地面摊放24H,中间翻堆2次;00502装袋将培养基装入1733厘米聚丙烯袋,每袋装培养基15公斤,装袋时压实,上好颈圈,塞上硅胶塞,并用打孔器在菌袋上打10厘米深的孔;00513灭菌高压灭菌,压力为01MPA,时间为3H,待压力表指针降到0时出锅;005。
30、24接种待到袋温冷却到45以下时接种,抽出袋中塑料棒,在孔洞中加入谷粒菌种;说明书CN104137733A5/7页900535发菌发菌在培养室进行,温度2325,湿度6570,时间2527天;00546催蕾将菌棒移入菇房出菇架上培养,用打孔器在菌袋上打若干个05CM深的孔,温度2325,湿度8085,培养三天;再在温度1215,湿度8590,用光照强度700800LUX,培养710天现蕾;00557出菇待菇蕾长到黄豆大小时,选留23个生长健壮菇蕾;二天后选留12个菇朵形好的小菇留下培养;待菇长到如乒乓球大小时,提高湿度到95,加大通风量,每天34次,每次30MIN;00568采收待菌盖直径46。
31、CM,菌柄长10CM时,菌盖平展,边缘向内稍巻,菌褶初步形成,但未弹射孢子,有78分成熟时,采收。0057上述营养颗粒的制备方法如下A、称取以下重量份的原料畜禽粪便25、蚯蚓粪8、菜籽饼12、中药渣6、椰壳粉4、咖啡渣35、蹄角粉25、骨粉2、炉渣灰2、沙漠砂10、紫砂岩15、浮石8、绿泥石6、烟草粉4、蓖麻叶粉3、茶枯粉35、桉叶油2、竹醋液5、废糖蜜4、沼气废液35、营养液12;B、取沙漠砂、紫砂岩、浮石、绿泥石混合均匀,粉碎,过80目筛,820煅烧15H,自然冷却至室温,待用;C、取畜禽粪便、蚯蚓粪、菜籽饼、中药渣、椰壳粉、咖啡渣、蹄角粉、骨粉、炉渣灰混合均匀,再加入适量的水充分搅拌均匀。
32、,控制含水量为55,在30下堆肥发酵6天,然后加入竹醋液、废糖蜜和沼气废液,搅拌均匀,在28下继续发酵4天,最后加入营养液,搅拌均匀,在26下继续发酵3天,发酵完成后将发酵料低温烘干,粉碎,过100目筛,待用;D、将上述过筛的发酵料与步骤B制得的粉末混合均匀,再加入余下原料,搅拌均匀,制粒,烘干即可。0058上述营养液是含有以下浓度成分的水溶液磷酸二氢铵8G/L、过磷酸钙4G/L、尿素3G/L、硫酸铜25MG/L、氯化锰5MG/L、硫酸亚铁40MG/L、钼酸钠2MG/L、硼酸15MG/L、腐植酸钾2G/L、浒苔硒多糖10MG/L。0059实施例2杏鲍菇的硒成分测定方法00601杏鲍菇子实体含硒。
33、量的测定0061将生长完整的子实体标记放好,作为样品,将样品先除杂蒸馏水冲洗三次,50烘干,冷却粉碎研磨称量,因为本次试验中,所得样品烘干后质量较少,所以称取量也酌情减少,精确称取025样品细粉,加入加入体积比HNO3HCLO321组成的混合酸液5ML,浸泡溶解,水浴锅100水浴,直到其中粉末完全溶解,混酸液澄清,酸液稀释至50ML,取10ML稀释液,放入锥形瓶中,加入5EDTA2NA5ML混合,然后以稀硝酸调节PH至2,加入1的邻苯二胺溶液3ML摇晃震荡一分钟,放置2H后,甲苯10ML萃取震摇1MIN,取甲苯层在335NM处测吸光度;00622标准硒溶液吸光度测定0063亚硒酸钠以10HNO。
34、3100ML溶解,取10ML液体以250ML容量瓶10HNO3稀释到250ML,得到4UG/ML的标准硒溶液;随后分别从标准硒溶液中,取0ML、4ML、8ML、12ML、16ML、20ML、24ML、30ML硒标准液,以容量瓶和10HNO3稀释定容到50ML;取10ML稀释液,放入锥形瓶中,加入5EDTA2NA5ML混合,然后以稀硝酸调节PH至2,加入1的邻苯二胺溶液3ML摇晃震荡一分钟,放置2H后,甲苯10ML萃取震摇1MIN,取甲苯层在335NM处测吸光度,做出标准线性曲线图1;取0,02,04,06,08,10,12,14ML硒标准应用液于大试管中,相当与分别含硒0,1,2,3,4,5,。
35、6,78,经样品消化和硒含量测定步骤后,得到其335NM说明书CN104137733A6/7页10处的吸收值,以硒含量为横坐标,吸收值为纵坐标作图。以335NM处的吸收值Y对含量X进行回归,得到回归方程为Y02027X01654,R09127。00643硒含量的分析0065将子实体中测得的吸光度带入标准硒溶液吸光度的线性曲线方程中,可得到硒元素含量达到了600UG/G,并未超过人体极限吸收范围800UG/D中毒界限。0066实施例3杏鲍菇的氨基酸成分测定方法00671杏鲍菇样品前处理0068将杏鲍菇样品清洗干净,晾干,分离菌柄和菌盖,将菌柄和菌盖分别放入DHG9240A型电热恒温鼓风干燥箱中1。
36、10干燥至恒重,冷却,置于研钵中研磨成细粉状,过60目筛,贮于干燥器内备用;00692氨基酸含量测定0070将上述不同的实验材料碾碎,过80目筛,准确称取分析样品100MG,放入水解管,向管内加6MOL/L盐酸1520ML,抽真空,充2000G/M2的高纯度氮气,如此重复3次,在氮气状态下将管口封住并置于110水解22H后取出冷却,水解液过滤,用去离子水冲洗,再全部转移到100ML容量瓶,定容,吸取滤液1ML放到10ML小烧杯中,在ZK82A型真空干燥箱内,60、008MPA下干燥,用LML01MOL/L盐酸溶解上机检测,见表1;0071007200733游离氨基酸测定0074称取样品0100。
37、G,投入试管内,用80乙醇置于80水浴中提取,目的是蒸馏去酒精,等样品呈现糊状,加乙醚5ML,马上塞试管塞,充分振荡,用50ML分液漏斗反复抽提2次,收集,转到50ML容量瓶中,定容至刻度,摇匀;取5ML提取液,冷冻离心干燥,加进002MOL/LHCL1ML,用日立83550A型氨基酸自动分析仪测定其含量,见表2。说明书CN104137733A107/7页1100750076实施例4杏鲍菇的总糖成分测定方法00771杏鲍菇样品预处理0078将供试杏鲍菇样品剪成长、宽约5CM小块,在105干燥箱中烘干至发脆,冷却后立即用研磨器研磨,研磨后的样品过80目筛,未能过筛部分经钵内研磨后再次过筛,直至全。
38、部样品过筛为止;00792杏鲍菇总糖的提取0080将经过研磨预处理的杏鲍菇样品025G加入100ML蒸馏水中,再加入30ML浓盐酸100水浴水解3H。水解后冷却用漏斗过滤,以蒸馏水定容至250ML备用;00813苯酚硫酸法标准曲线的制作0082标准储备液的配制精密称取105干燥至恒重的D无水葡萄糖01000G置于100ML容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度摇匀,即配得1MG/ML的的葡萄糖标准储备溶液备用;0083标准曲线的制备精密吸取葡萄糖标准储备液05、10、15、20、25、30和35ML,分别置于50ML容量瓶中,加水至刻度,摇匀。即得100、200、300、400、500、600和700。
39、G/ML的标准葡萄糖使用液,取20ML刻度试管8支,从07分别编号,各取2ML不同浓度的葡萄糖标准溶液分别加入对应的试管中,然后按顺序向试管内加入10ML6苯酚溶液,摇匀,再从管液正面以520S时间加入50ML浓硫酸,摇匀冷却室温放置1520分钟,以20ML蒸馏水取代标准葡萄糖使用液,根据标准曲线制备方法显色后作为空白,在485NM波长下比色测定,以糖含量为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线图2,求出标准直线方程Y09651X,R09943;得到杏鲍菇菌柄总糖含量为1955,杏鲍菇菌盖总糖含量为1410。说明书CN104137733A111/1页12图1图2说明书附图CN104137733A12。