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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610680421.2 (22)申请日 2016.08.17 (71)申请人 吴招杰 地址 325200 浙江省温州市瑞安市马屿镇 上都村 (72)发明人 吴招杰 (74)专利代理机构 北京轻创知识产权代理有限 公司 11212 代理人 谈杰 (51)Int.Cl. A61K 35/616(2015.01) A61P 1/04(2006.01) A23L 17/00(2016.01) A23L 33/00(2016.01) (54)发明名称 一种海参肠提取物的制备方法 (5。
2、7)摘要 本发明涉及一种制备海参肠提取物的方法， 包括如下步骤： (1)海参肠预处理： 收集新鲜的海 参肠， 采用预处理剂A和B进行预处理， 预处理剂A 为质量分数8-12的水不溶性葡聚糖混悬液， 预 处理剂B为质量分数0.5-1.5的还原型谷胱甘 肽水溶液， 具体预处理操作为： 先采用预处理剂A 于常温下预处理1-2h， 料液比为1:2-3， 再用预处 理剂B于常温下搅拌预处理2-3h， 然后静置 45min-1h， 料液比为1:1-2， 或者将预处理剂A与 预处理剂B以体积比1:1混合均匀， 然后加入新鲜 的海参肠， 于常温下搅拌处理2-2.5h， 然后静置 0.5-1h， 料液比1:2；。
3、 (2)海参肠的均质； (3)一次 酶解； (4)二次酶解； (5)超滤； (6)纳滤； (7)浓缩 干燥。 本发明制备的海参肠提取物杂质和重金属 含量低， 营养价值高。 权利要求书1页 说明书5页 CN 106309497 A 2017.01.11 CN 106309497 A 1.一种海参肠提取物的制备方法， 其特征在于： 所述制备方法包括如下步骤： (1)海参肠预处理： 收集新鲜的海参肠， 采用预处理剂A和B进行预处理， 预处理剂A为质 量分数8-12的水不溶性葡聚糖混悬液， 所述预处理剂B为质量分数0.5-1.5的还原型谷 胱甘肽水溶液， 具体预处理操作为： 先采用预处理剂A于常温下预。
4、处理1-2h， 料液比为1:2- 3， 再用预处理剂B于常温下搅拌预处理2-3h， 然后静置45min-1h， 料液比为1:1-2， 或者将预 处理剂A与预处理剂B以体积比1:1混合均匀， 然后加入新鲜的海参肠， 于常温下搅拌处理2- 2.5h， 然后静置0.5-1h， 料液比1:2， 预处理完毕后固液分离备用； (2)海参肠的均质： 将步骤(1)预处理后的海参肠置于高压均质机中， 加入适量的水， 进 行均质， 得到海参肠均质液； (3)一次酶解： 将步骤(2)所得海参肠均质液升温至35-45， 调pH值至6.5-7.5， 加入适 量食品级脂肪酶， 搅拌均匀， 酶解0.5-1h， 对海参肠进行。
5、脱脂， 然后升温至75灭活3-5min， 然后冷却至常温静置1-2h， 去除上清液油脂层； (4)二次酶解： 将步骤(3)处理后的一次酶解液升温至40-50， 调pH值6.5-7.0， 加入适 量的复合食品级蛋白酶酶解2-3h， 所述复合食品级蛋白酶由复合风味蛋白酶和中性蛋白酶 组成， 酶解后加热至80灭酶10-15min， 然后离心分离， 得海参肠二次酶解上清液； (5)超滤： 将海参肠二次酶解上清液用截留分子量为5000-8000Da的超滤膜超滤得超滤 透过液； (6)纳滤： 将步骤(6)的超滤透过液用适量纯水稀释， 然后用纳滤膜进行透析浓缩， 超滤 透过液透析浓缩至稀释前体积的0.25-。
6、0.35倍得纳滤浓缩液， 所述纳滤膜的截留分子量为 150-300Da； (7)浓缩干燥： 纳滤浓缩液进一步真空浓缩至固形物含量为30-40， 然后经冷冻干燥 得粉末状海参肠提取物。 2.根据权利要求1所述的海参肠提取物的制备方法， 其特征在于： 步骤(1)中预处理剂A 为质量分数10的水不溶性葡聚糖混悬液， 所述预处理剂B为质量分数1.0的还原型谷胱 甘肽水溶液。 3.根据权利要求1所述的海参肠提取物的制备方法， 其特征在于： 步骤(2)中高压均质 的温度35-65， 压力120-400Mpa， 循环均质至少两次。 4.根据权利要求1所述的海参肠提取物的制备方法， 其特征在于： 所述食品级脂。
7、肪酶的 酶活为2万U/g， 酶用量为新鲜海参肠质量的0.2-0.8。 5.根据权利要求1所述的海参肠提取物的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(4)中复合 风味蛋白酶和中性蛋白酶的酶活力比为2-3:1， 酶总用量为新鲜海参肠质量的0.6-1.0。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 106309497 A 2 一种海参肠提取物的制备方法 技术领域 0001 本发明涉及一种制备海参肠提取物的方法。 背景技术 0002 海参属于珍贵海味之一， 其体内含50多种对人体生理活动有益的营养成分， 其中 蛋白质含量较高， 微量元素种类丰富， 能够延续人体衰老， 补肾益气， 强精健髓， 消除疲劳， 更。
8、具有抗凝血、 抗肿瘤、 抗菌、 抗病毒及提高免疫力的作用。 近年来， 加工海参的企业也越来 越多， 海参加工过程中的下脚料-海参肠中所含有的营养成分， 不亚于体壁。 其干肠含钒率 为百万份之12份， 比其躯体中含钒率约高3倍。 其具有温中补虚止痛之功效， 能治疗胃及十 二指肠溃疡。 0003 海参肠资源的利用日渐引起了重视， 很多企业将海参肠人工去沙后， 清洗， 冷风干 燥或者冷冻干燥， 然后打磨或者超微粉碎， 制成胶囊产品。 但该种胶囊产品未对海参肠做生 物处理， 吸收利用率低， 营养价值大打折扣。 另外， 在原料的处理上还存在： 海参肠的人工去 沙泥效率低及泥沙不彻底， 用水清洗脱盐不彻底。
9、， 致使产品中重金属含量及盐分超标的问 题。 发明内容 0004 本发明的目的在于解决现有技术的不足， 提供一种制备海参肠提取物的方法， 该 方法制备的海参肠提取物营养成分丰富， 易于吸收利用， 杂质和重金属含量低。 0005 本发明解决其技术问题所采用的技术方案是： 0006 一种海参肠提取物的制备方法， 所述制备方法包括如下步骤： 0007 (1)海参肠预处理： 收集新鲜的海参肠， 采用预处理剂A和B进行预处理， 预处理剂A 为质量分数8-12的水不溶性葡聚糖混悬液， 所述预处理剂B为质量分数0.5-1.5的还原 型谷胱甘肽水溶液， 具体预处理操作为： 先采用预处理剂A于常温下预处理1-2。
10、h， 料液比为 1:2-3， 再用预处理剂B于常温下搅拌预处理2-3h， 然后静置45min-1h， 料液比为1:1-2， 或者 将预处理剂A与预处理剂B以体积比1:1混合均匀， 然后加入新鲜的海参肠， 于常温下搅拌处 理2-2.5h， 然后静置0.5-1h， 料液比1:2， 预处理完毕后固液分离备用； 0008 海参肠中富含泥沙、 重金属、 盐分， 要想获得高品质的海参肠提取物， 需要充分去 除上述杂质， 本发明的设计构思如下： (1)水不溶性葡聚糖混悬液是大分子的水混悬液， 大 分子葡聚糖本身有团聚絮凝的效果， 可以充分吸附或絮凝海参肠中的污泥和重金属杂质等 杂质， 尤其是对重金属的去除效。
11、果极佳， 采用葡聚糖混悬液预处理剂预处理后， 海参肠的伸 展性都上佳， 后续均质、 酶解的效果大大改善， 另外， 葡聚糖安全无毒， 残留的葡聚糖反而有 增加免疫力、 改善免疫功能的功效， 提高海参肠提取物的营养价值； (2)还原型谷胱甘肽水 溶液具有良好的活化细胞和组织的功能， 可以改善细胞或组织内的活性氧和渗透压， 维持 海参肠细胞和组织较长时间的新鲜健康状态， 大大改善后续酶处理的效果， 谷胱甘肽也安 全无毒， 残留的谷胱甘肽反而有改善免疫系统、 解毒的功能， 提高海参肠提取物的营养价 说 明 书 1/5 页 3 CN 106309497 A 3 值， 提高成品的品质， 将海参肠提取物中可。
12、能存在的重金属危害风险进一步降低或消除。 0009 (2)海参肠的均质： 将步骤(1)预处理后的海参肠置于高压均质机中， 加入适量的 水， 进行均质， 得到海参肠均质液； 0010 (3)一次酶解： 将步骤(2)所得海参肠均质液升温至35-45， 调pH值至6.5-7.5， 加 入适量食品级脂肪酶， 搅拌均匀， 酶解0.5-1h， 对海参肠进行脱脂， 然后升温至75灭活3- 5min， 然后冷却至常温静置1-2h， 去除上清液油脂层； 通过脂肪酶酶解去除海参肠中的脂 肪， 可以改善海参肠提取物的品质， 延长海参肠提取物的保质期。 0011 (4)二次酶解： 将步骤(3)处理后的一次酶解液升温至。
13、40-50， 调pH值6.5-7.0， 加 入适量的复合食品级蛋白酶酶解2-3h， 所述复合食品级蛋白酶由复合风味蛋白酶和中性蛋 白酶组成， 酶解后加热至80灭酶10-15min， 然后离心分离， 得海参肠二次酶解上清液； 通 过酶解将海参肠中的蛋白质充分降解成氨基酸和小分子多肽， 便于海参肠提取物的吸收与 利用， 利用率高， 营养价值高。 0012 (5)超滤： 将海参肠二次酶解上清液用截留分子量为5000-8000Da的超滤膜超滤得 超滤透过液； 0013 (6)纳滤： 将步骤(6)的超滤透过液用适量纯水稀释， 然后用纳滤膜进行透析浓缩， 超滤透过液透析浓缩至稀释前体积的0.25-0.35。
14、倍得纳滤浓缩液， 所述纳滤膜的截留分子 量为150-300Da； 通过纳滤对海参肠提取物脱盐处理， 获得的海参肠提取物盐分低， 口感好。 0014 (7)浓缩干燥： 纳滤浓缩液进一步真空浓缩至固形物含量为30-40， 然后经冷冻 干燥得粉末状海参肠提取物。 0015 优选的， 步骤(1)中预处理剂A为质量分数10的水不溶性葡聚糖混悬液， 所述预 处理剂B为质量分数1.0的还原型谷胱甘肽水溶液。 0016 优选的， 步骤(2)中高压均质的温度35-65， 压力120-400Mpa， 循环均质至少两 次。 0017 优选的， 所述食品级脂肪酶的酶活为2万U/g， 酶用量为新鲜海参肠质量的0.2- 。
15、0.8。 0018 优选的， 所述步骤(4)中复合风味蛋白酶和中性蛋白酶的酶活力比为2-3:1， 酶总 用量为新鲜海参肠质量的0.6-1.0。 0019 本发明的有益效果是： 本发明制备的海参肠提取物营养成分丰富， 易于吸收利用， 吸收利用率高， 杂质和重金属含量低， 营养价值高。 具体实施方式 0020 下面通过具体实施例， 对本发明的技术方案作进一步的具体说明。 0021 实施例1： 0022 一种海参肠提取物的制备方法， 所述制备方法包括如下步骤： 0023 (1)海参肠预处理： 收集新鲜的海参肠， 采用预处理剂A和B进行预处理， 预处理剂A 为质量分数8的水不溶性葡聚糖混悬液， 所述预。
16、处理剂B为质量分数0.5的还原型谷胱 甘肽水溶液， 具体预处理操作为： 先采用预处理剂A于常温下预处理2h， 料液比为1:2， 再用 预处理剂B于常温下搅拌预处理2h， 然后静置45minh， 料液比为1:1； 0024 (2)海参肠的均质： 将步骤(1)预处理后的海参肠置于高压均质机中， 加入适量的 说 明 书 2/5 页 4 CN 106309497 A 4 水， 进行均质， 得到海参肠均质液， 高压均质温度35-45， 压力120Mpa， 循环均质三两次； 0025 (3)一次酶解： 将步骤(2)所得海参肠均质液升温至35， 调pH值至6.5， 加入适量 食品级脂肪酶， 搅拌均匀， 酶解。
17、1h， 对海参肠进行脱脂， 然后升温至75灭活3min， 然后冷却 至常温静置1h， 去除上清液油脂层， 所述食品级脂肪酶的酶活为2万U/g， 酶用量为新鲜海参 肠质量的0.2； 0026 (4)二次酶解： 将步骤(3)处理后的一次酶解液升温至40， 调pH值6.5， 加入适量 的复合食品级蛋白酶酶解2h， 所述复合食品级蛋白酶由复合风味蛋白酶和中性蛋白酶组 成， 酶解后加热至80灭酶10min， 然后离心分离， 得海参肠二次酶解上清液， 复合风味蛋白 酶和中性蛋白酶的酶活力比为2:1， 酶总用量为新鲜海参肠质量的0.6； 0027 (5)超滤： 将海参肠二次酶解上清液用截留分子量为5000-。
18、2000Da的超滤膜超滤得 超滤透过液； 0028 (6)纳滤： 将步骤(6)的超滤透过液用适量纯水稀释， 然后用纳滤膜进行透析浓缩， 超滤透过液透析浓缩至稀释前体积的0.25倍得纳滤浓缩液， 所述纳滤膜的截留分子量为 150-200Da； 0029 (7)浓缩干燥： 纳滤浓缩液进一步真空浓缩至固形物含量为30， 然后经冷冻干燥 得粉末状海参肠提取物。 0030 实施例2 0031 一种海参肠提取物的制备方法， 所述制备方法包括如下步骤： 0032 (1)海参肠预处理： 收集新鲜的海参肠， 采用预处理剂A和B进行预处理， 预处理剂A 为质量分数12的水不溶性葡聚糖混悬液， 所述预处理剂B为质量。
19、分数1.5的还原型谷胱 甘肽水溶液， 具体预处理操作为： 先采用预处理剂A于常温下预处理1h， 料液比为1:3， 再用 预处理剂B于常温下搅拌预处理3h， 然后静置45min， 料液比为1:1； 0033 (2)海参肠的均质： 将步骤(1)预处理后的海参肠置于高压均质机中， 加入适量的 水， 进行均质， 得到海参肠均质液， 高压均质的温度60-65， 压力400Mpa， 循环均质两次； 0034 (3)一次酶解： 将步骤(2)所得海参肠均质液升温至45， 调pH值至7.5， 加入适量 食品级脂肪酶， 搅拌均匀， 酶解1h， 对海参肠进行脱脂， 然后升温至75灭活5min， 然后冷却 至常温静置。
20、2h， 去除上清液油脂层； 食品级脂肪酶的酶活为2万U/g， 酶用量为新鲜海参肠质 量的0.8； 0035 (4)二次酶解： 将步骤(3)处理后的一次酶解液升温至40-50， 调pH值6.5-7.0， 加 入适量的复合食品级蛋白酶酶解2-3h， 所述复合食品级蛋白酶由复合风味蛋白酶和中性蛋 白酶组成， 酶解后加热至80灭酶10-15min， 然后离心分离， 得海参肠二次酶解上清液； 复 合风味蛋白酶和中性蛋白酶的酶活力比为3:1， 酶总用量为新鲜海参肠质量的1.0； 0036 (5)超滤： 将海参肠二次酶解上清液用截留分子量为6000-8000Da的超滤膜超滤得 超滤透过液； 0037 (6)。
21、纳滤： 将步骤(6)的超滤透过液用适量纯水稀释， 然后用纳滤膜进行透析浓缩， 超滤透过液透析浓缩至稀释前体积的0.35倍得纳滤浓缩液， 所述纳滤膜的截留分子量为 200-300Da； 0038 (7)浓缩干燥： 纳滤浓缩液进一步真空浓缩至固形物含量为40， 然后经冷冻干燥 得粉末状海参肠提取物。 说 明 书 3/5 页 5 CN 106309497 A 5 0039 实施例3： 0040 一种海参肠提取物的制备方法， 所述制备方法包括如下步骤： 0041 (1)海参肠预处理： 收集新鲜的海参肠， 采用预处理剂A和B进行预处理， 预处理剂A 为质量分数10的水不溶性葡聚糖混悬液， 所述预处理剂B。
22、为质量分数1.0的还原型谷胱 甘肽水溶液， 具体预处理操作为： 将预处理剂A与预处理剂B以体积比1:1混合均匀， 然后加 入新鲜的海参肠， 于常温下搅拌处理2.5h， 然后静置1h， 料液比1:2， 预处理完毕后固液分离 备用； 0042 (2)海参肠的均质： 将步骤(1)预处理后的海参肠置于高压均质机中， 加入适量的 水， 进行均质， 得到海参肠均质液， 高压均质的温度40-45， 压力180Mpa， 循环均质三次； 0043 (3)一次酶解： 将步骤(2)所得海参肠均质液升温至40， 调pH值至7.0， 加入适量 食品级脂肪酶， 搅拌均匀， 酶解1h， 对海参肠进行脱脂， 然后升温至75灭。
23、活5min， 然后冷却 至常温静置2h， 去除上清液油脂层； 食品级脂肪酶的酶活为2万U/g， 酶用量为新鲜海参肠质 量的0.5； 0044 (4)二次酶解： 将步骤(3)处理后的一次酶解液升温至45， 调pH值6.8， 加入适量 的复合食品级蛋白酶酶解2.5h， 所述复合食品级蛋白酶由复合风味蛋白酶和中性蛋白酶组 成， 酶解后加热至80灭酶12min， 然后离心分离， 得海参肠二次酶解上清液； 复合风味蛋白 酶和中性蛋白酶的酶活力比为2.5:1， 酶总用量为新鲜海参肠质量的0.75； 0045 (5)超滤： 将海参肠二次酶解上清液用截留分子量为6000Da的超滤膜超滤得超滤 透过液； 004。
24、6 (6)纳滤： 将步骤(6)的超滤透过液用适量纯水稀释， 然后用纳滤膜进行透析浓缩， 超滤透过液透析浓缩至稀释前体积的0.3倍得纳滤浓缩液， 所述纳滤膜的截留分子量为 220Da； 0047 (7)浓缩干燥： 纳滤浓缩液进一步真空浓缩至固形物含量为35， 然后经冷冻干燥 得粉末状海参肠提取物。 0048 本发明实施例1-3制备得到的海参肠提取物的质量指标如表1所示： 0049 表1实施例13获得的海参肠提取物的质量指标 0050 0051 综上所述， 本发明制备的海参肠提取物营养成分丰富， 氨基酸态氮含量非常高， 营 养价值高， 易于吸收利用， 吸收利用率高， 杂质含量低， 重金属未检出。 以上所述的实施例只 是本发明的一种较佳的方案， 并非对本发明作任何形式上的限制， 在不超出权利要求所记 说 明 书 4/5 页 6 CN 106309497 A 6 载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。 说 明 书 5/5 页 7 CN 106309497 A 7 。