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1、10申请公布号CN104193757A43申请公布日20141210CN104193757A21申请号201410243175522申请日20140603C07D493/0420060171申请人浙江工业大学地址310014浙江省杭州市下城区潮王路18号72发明人王宇光朱冰春余丽华74专利代理机构杭州天正专利事务所有限公司33201代理人黄美娟俞慧54发明名称一种含硒苯并双呋喃类化合物及其制备和应用57摘要本发明公开了一种含硒苯并双呋喃类化合物及其制备和应用，所述含硒苯并双呋喃类化合物的结构如式XA、式XB或式XC所示，其中，R1为酮基、酯基或氰基，R2为C1C6的烷基、C1C6的卤代烷基、或。
2、芳基。所述含硒苯并双呋喃类化合物的制备路线如下所示。所述的含硒苯并双呋喃类化合物具有良好的单胺氧化酶抑制活性，可用于制备单胺氧化酶抑制剂。51INTCL权利要求书3页说明书12页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书3页说明书12页10申请公布号CN104193757ACN104193757A1/3页21一种含硒苯并双呋喃类化合物，其结构如式X所示其中，R1为酮基、酯基或氰基；R为O或NNH2或NNHCOR2，其中R2为C1C6的烷基、C1C6的卤代烷基、或芳基。2如权利要求1所述的含硒苯并双呋喃类化合物，其特征在于所述的酮基为COR3，其中R3为C1C3的烷基；所述的酯基。
3、为COOR4，其中R4为C1C4的烷基。3如权利要求1或2所述的含硒苯并双呋喃类化合物，其特征在于所述的芳基为苯基。4如权利要求1或2所述的含硒苯并双呋喃类化合物，其特征在于所述含硒苯并双呋喃类化合物为下列之一权利要求书CN104193757A2/3页35一种制备如权利要求1所述的含硒苯并双呋喃类化合物的方法，当R为O时，所述的含硒苯并双呋喃类化合物如式XA所示，其制备方法包括如下步骤1在DMF中，化合物I与化合物III在碳酸钾的作用下于室温反应36小时，反应完全后经分离纯化得到相应的化合物II；2在甲苯中，化合物II在1,8二氮杂环5,4,0十一烯7DBU作用下搅拌回流反应610小时，反应完。
4、全后经分离纯化得到式XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物；式II或式III中，R1的定义同式XA，Y为CL或BR。6一种制备如权利要求1所述的含硒苯并双呋喃类化合物的方法，当R为NNH2，所述含硒苯并双呋喃类化合物的结构如式XB所示，其制备方法包括如下步骤1在DMF中，化合物I与化合物III在碳酸钾的作用下于室温反应36小时，反应完全后经分离纯化得到相应的化合物II；2在甲苯中，化合物II在1,8二氮杂环5,4,0十一烯7DBU作用下搅拌回流反应610小时，反应完全后经分离纯化得到式XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物；3在乙醇中，式XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物与水合肼在氮气保护下回流反应812小。
5、时，反应完全后经分离纯化得到式XB所示的含硒苯并双呋喃类化合物；式II或式III中，R1的定义同式XA或式XB，Y为CL或BR。7一种制备如权利要求1所述的含硒苯并双呋喃类化合物的方法，当R为NNHCOR2，所述含硒苯并双呋喃类化合物的结构如式XC所示，其制备方法包括如下步骤权利要求书CN104193757A3/3页41在DMF中，化合物I与化合物III在碳酸钾的作用下于室温反应36小时，反应完全后经分离纯化得到相应的化合物II；2在甲苯中，化合物II在1,8二氮杂环5,4,0十一烯7DBU作用下搅拌回流反应610小时，反应完全后经分离纯化得到式XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物；3在乙醇中，式。
6、XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物与水合肼在氮气保护下回流反应812小时，反应完全后经分离纯化得到式XB所示的含硒苯并双呋喃类化合物；4将式XB所示的含硒苯并双呋喃类化合物溶于除水二氯甲烷中，加入三乙胺充分搅拌，然后在冰水浴条件下加入式IV所示的酰氯，充分搅拌后转入室温反应25小时，反应完全后经分离纯化得到式XC所示的含硒苯并双呋喃类化合物；式II或式III或式IV中，R1和R2的定义同式XA、式XB或式XC，Y为CL或BR。8如权利要求1所述的含硒苯并双呋喃类化合物在制备单胺氧化酶抑制剂中的应用。9如权利要求8所述的应用，其特征在于所述的单胺氧化酶抑制剂为MAOA抑制剂。权利要求书CN1041。
7、93757A1/12页5一种含硒苯并双呋喃类化合物及其制备和应用技术领域0001本发明涉及一种含硒苯并双呋喃类化合物及其制备和应用，尤其是在制备单胺氧化酶抑制剂中的应用。背景技术0002苯并呋喃，也称为香豆酮、氧茚、苯并呋喃，是一类重要的天然有机化合物，很多天然产物都含有苯并呋喃的结构,是大量天然产物和候选药物的核心结构，它们的多种生物活性主要包括激动雌激素受体亚型ER、拮抗甲状腺素受体THR和H3受体以及抑制组蛋白去乙酰化酶HDAC等,它们在防治阿尔茨海默病、骨质疏松症、心律失常、帕金森病以及肿瘤等方面发挥重要作用FELDER,CCETALJOURNALOFPHARMACOLOGYANDEX。
8、PERIMENTALTHERAPEUTICS,1998,2841,291297；TWYMAN,LJETALTETRAHEDRONLETTERS,1999,4052,93839384；FLYNN,BLETALORGLETT,2001,35,651654；GAISINA,INETALJMEDCHEM,2009,527,18531863；MCCALLION,GDETALCURRENTORGANICCHEMISTRY,1999,31,6776；ICHIRO,HETALBIOORGMEDCHEMLETT,2004,1413,34113414。0003硒是人体必需的一种微量元素，对维持人体正常生理功能起着。
9、关键作用。研究表明，硒与癌症、艾滋病、冠心病、贫血症、关节炎、糖尿病等40多种疾病的发生、发展有关，具有广泛的生物学活性。临床实践与流行病学研究显示硒对抑制肿瘤的发展有保护作用，并通过多种机制产生抗癌作用，肿瘤细胞的许多发育模式都直接或间接地接受硒化合物调控CN103288818A。0004单胺氧化酶MONOAMINEOXIDASE,MAO,EC1434全名为单胺氧化还原酶，在19世纪30年代由BALSCHKO发现，是对神经递质代谢起重要作用的一种酶。它在大脑和周围神经组织中催化一些生物体产生的胺，氧化脱氨产生过氧化氢。1968年，JOHNSTON根据单胺氧化酶对其不可逆抑制剂CLORGYLI。
10、NE氯吉兰的敏感度将其分成A和B两个亚类，单胺氧化酶A对CLORGYLINE敏感，而单胺氧化酶B不敏感。进一步研究表明单胺氧化酶在代谢多巴胺的过程中，伴随产生自由基和过氧化氢等内源性物质，其表达量的异常与帕金森病，抑郁症和攻击性行为有着极其密切的关系。随着人们生活节奏的逐渐加快，精神压力不断增加，抑郁症的发病率正迅速攀升，预计至2020年，将成为世界上仅次于冠心病的第二大疾病。这一疾病的引发可能与单胺氧化酶MAO的异常有关，而单胺氧化酶抑制剂MAOI是一类特异性抑制体内MAO活性的药物，曾在50年代首个被用来治疗抑郁症。其机理是通过抑制MAO，减少中枢神经系统内单胺类神经递质的降解，相对增加中。
11、枢单胺类递质的浓度，提高情绪，产生抗抑郁作用。临床用过的单氨氧化酶抑制剂有肼类的苯乙肼PHENELZINE，1、异烟肼ISONICOTINYLHYDRAZIDE,2、异丙烟肼IPRONIAZID,3、尼亚拉胺NIALAMIDE,4等，非肼类以反苯环丙胺TRANYLCYPROMINE,5为代表结构如下所示。由于这些药物大部分毒副作用较大，且对单胺氧化酶的作用效果单一，所以寻求低毒，效果良好的MAOI成为当今研究的新目标。说明书CN104193757A2/12页600050006本发明将有机硒和苯并双呋喃两种“活性源”同时引入到一个分子结构中，合成了一种含硒苯并双呋喃类化合物，其具有良好的单胺氧化。
12、酶抑制活性，可用于制备单胺氧化酶抑制剂。发明内容0007本发明的第一个目的在于提供一种具有良好的单胺氧化酶抑制活性的含硒苯并双呋喃类化合物。0008本发明的第二个目的是提供所述含硒苯并双呋喃类化合物的制备方法。0009本发明的第三个目的是提供所述含硒苯并双呋喃类化合物在制备单胺氧化酶抑制剂中的应用。0010下面对本发明实现上述发明目的所采用的技术方案做具体说明。0011本发明提供了一种含硒苯并双呋喃类化合物，其结构如式X所示00120013其中，R1为酮基、酯基或氰基；0014R为O或NNH2或NNHCOR2，其中R2为C1C6的烷基、C1C6的卤代烷基、或芳基。0015进一步，所述的酮基为C。
13、OR3，其中R3为C1C3的烷基；所述的酯基为COOR4，其中R4为C1C4的烷基。0016进一步，所述的芳基为苯基。0017进一步，所述的C1C6的卤代烷基为C1C6的氯代烷基或溴代烷基。0018本发明为方便表示，将所述含硒苯并双呋喃类化合物分为以下三类0019说明书CN104193757A3/12页70020式XA、XB、XC中，R1、R2的定义同式X。0021具体的，本发明优选所述含硒苯并双呋喃类化合物为下列之一00220023本发明还提供了一种制备所述含硒苯并双呋喃类化合物的方法，具体如下0024当R为O时，式XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物的制备方法包括如下步骤0025说明书CN10。
14、4193757A4/12页800261在DMF中，化合物I与化合物III在碳酸钾的作用下于室温反应36小时，反应完全后经分离纯化得到相应的化合物II；00272在甲苯中，化合物II在1,8二氮杂环5,4,0十一烯7DBU作用下搅拌回流反应610小时，反应完全后经分离纯化得到式XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物；0028式II或式III中，R1的定义同式XA，Y为CL或BR。0029进一步，步骤1中，化合物I、化合物III、碳酸钾的投料摩尔比为110152025。0030进一步，步骤2中，化合物II与DBU的投料摩尔比为11015。0031当R为NNH2时，式XB所示的含硒苯并双呋喃类化合物的制备。
15、方法包括如下步骤003200331在DMF中，化合物I与化合物III在碳酸钾的作用下于室温反应36小时，反应完全后经分离纯化得到相应的化合物II；00342在甲苯中，化合物II在1,8二氮杂环5,4,0十一烯7DBU作用下搅拌回流反应610小时，反应完全后经分离纯化得到式XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物；00353在乙醇中，式XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物与水合肼在氮气保护下回流反应812小时，反应完全后经分离纯化得到式XB所示的含硒苯并双呋喃类化合物；0036式II或式III中，R1的定义同式XA或式XB，Y为CL或BR。0037进一步，步骤3中，式XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物与水合肼。
16、的投料摩尔比为11550。0038当R为NNHCOR2时，式XC所示的含硒苯并双呋喃类化合物的制备方法包括如下步骤0039说明书CN104193757A5/12页900401在DMF中，化合物I与化合物III在碳酸钾的作用下于室温反应36小时，反应完全后经分离纯化得到相应的化合物II；00412在甲苯中，化合物II在1,8二氮杂环5,4,0十一烯7DBU作用下搅拌回流反应610小时，反应完全后经分离纯化得到式XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物；00423在乙醇中，式XA所示的含硒苯并双呋喃类化合物与水合肼在氮气保护下回流反应812小时，反应完全后经分离纯化得到式XB所示的含硒苯并双呋喃类化合物；。
17、00434将式XB所示的含硒苯并双呋喃类化合物溶于除水二氯甲烷中，加入三乙胺充分搅拌，然后在冰水浴条件下加入式IV所示的酰氯，充分搅拌后转入室温反应25小时，反应完全后经分离纯化得到式XC所示的含硒苯并双呋喃类化合物；0044式II或式III或式IV中，R1和R2的定义同式XA、式XB或式XC，Y为CL或BR。0045进一步，步骤4中，式XB所示的含硒苯并双呋喃类化合物、三乙胺、式IV所示的酰氯的投料摩尔比为113161115。0046本发明提供的苯并双呋喃类化合物具有良好的单胺氧化酶抑制活性，尤其是MAOA抑制活性，故可用于制备单胺氧化酶尤其是MAOA抑制剂。0047本发明的有益效果在于提供。
18、了一种新的具有良好的单胺氧化酶抑制活性，尤其是MAOA抑制活性的苯并双呋喃类化合物。具体实施方式0048为进一步理解本发明，下列实施例阐述了更详细的细节，但本发明的保护范围并不仅限于此0049实施例1苯并双呋喃类化合物XA1的合成0050说明书CN104193757A6/12页1000511、在装有磁力搅拌子、回流冷凝管的圆底烧瓶中投入05135G化合物10MMOL并用10MLDMF溶解，再加入0346G25MMOL碳酸钾，室温下反应十分钟后，加入12MMOL，0164G溴丙酮，继续搅拌反应5H。TLC检测反应完全后，加入30ML二氯甲烷,再用大量水洗80ML5直至除去DMF，分出有机相，用无。
19、水硫酸镁干燥，浓缩，经薄板层析E/P乙酸乙酯石油醚15分离得到苯并呋喃化合物1，收率80。00522、将步骤1得到的苯并呋喃化合物108MMOL溶于15ML甲苯，再缓慢滴加0146G096MMOL1,8二氮杂环5,4,0十一烯7DBU，在搅拌下回流反应6H。TLC检测反应完全后，抽干甲苯，加入30ML二氯甲烷，用饱和食盐水洗涤80ML3，分出有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩，经薄板层析E/P15分离得到含硒苯并呋喃化合物XA1，产率为65，结构表征如下00531HNMR400MHZ,CDCL3785782M,2H,768752M,5H,761755M,4H,750745M,5H,519513M,。
20、1H,373367M,1H,348343M,1H,332327M,1H,313308M,1H,222S,3H；IRMAXCM12060,1664,1634,1442,1348,1213,1099,1022,930,859,737,6930054实施例2苯并双呋喃类化合物XA2的合成005500561、在装有磁力搅拌子、回流冷凝管的圆底烧瓶中投入05135G化合物10MMOL并将其溶于10MLDMF中，再加入0276G20MMOL碳酸钾，室温下反应十分钟后，加入15MMOL,0251G溴乙酸乙酯，继续搅拌反应35H。TLC检测反应完全后，后续处理如实施例1步骤1，分离得到白色固体苯并呋喃化合物3。
21、，收率为89。00572、将步骤1得到的苯并呋喃化合物3089MMOL溶于15ML甲苯，后续步骤如实例1步骤2，即可得到含硒苯并呋喃化合物XA2，产率为78，结构表征如下00581HNMR400MHZ,CDCL3780778M,2H,763S,1H,757749M,5H,747741M,5H,726724M,3H,517510M,1H,436431Q,J72HZ,2H,371365M,1H,347342M,1H,332328M,1H,313307M,1H,128T,J72HZ,3H；13CNMR100MHZ,CDCL31940,1597,1529,1403,1376,1332,1329,130。
22、3,1301,12993,12986,12985,1292,12864,12860,12822,12813,1275,1240,1230,1200,1095,841,613,3219,3212,140IRMAXCM13052,3029,2975,1715,1639,1602,1425,1370,1321,1257,1231,1208,1149,1049,1035,903,862,801,753,733,646,589,532,4说明书CN104193757A107/12页1167MSESIM/Z583MH0059实施例3苯并双呋喃类化合物XA3的合成006000611、在装有磁力搅拌子、回流冷。
23、凝管的圆底烧瓶中投入05135G化合物10MMOL并将其溶于10MLDMF中，再加入25MMOL，0346G碳酸钾，室温下反应十分钟后，加入0106G14MMOL氯乙氰，继续搅拌反应6H。TLC检测反应完全后，后续处理如实施例1步骤1，分离得到苯并呋喃化合物3，收率75。00622、将步骤1得到的苯并呋喃化合物3075MMOL溶于15ML甲苯，后续步骤如实例1步骤2，即可得到含硒苯并呋喃化合物XA3，产率为70，结构表征如下00631HNMR400MHZ,CDCL3789768M,7H,765S,1H,764749M,5H,746738M,3H,519513M,1H,372366M,1H,34。
24、8343M,1H,333329M,1H,315308M,1HIRMAXCM13030,2920,2221,1659,1598,1445,1396,765,696MSESIM/Z536MH0064实施例4含硒苯并双呋喃类化合物XB1的合成00650066将0582G10MMOL含硒苯并双呋喃化合物XA2溶于20ML无水乙醇中，再加入0125G2MMOL80的水合肼，在氮气的保护下，回流反应8H。TLC检测反应完全后，抽干乙醇，加入40ML二氯甲烷，用饱和食盐水洗涤80ML3，分出有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩，经薄板层析将得到含硒苯并双呋喃衍生物XB1，产率为80，结构表征如下00671HNMR。
25、400MHZ,CDCL3752734M,9H,729722M,7H,547S,2H,520513M,1H,433Q,J72HZ,2H,377371M,1H,352346M,1H,335330M,1H,314309M,1H,127T,J72HZ,3H；13CNMR100MHZ,CDCL31596,1582,1520,1405,1365,1331,1300,1298,1297,1293,1288,1287,1286,12834,12825,1278,12761,12755,1270,1241,1221,1102,841,614,3267,3248,141IRMAXCM13440,3030,2825。
26、,1716,1645,1478,1442,1374,1298,1226,1200,1141,1109,1072,1022,968,859,738,693MSESIM/Z597MH0068实施例5含硒苯并双呋喃类化合物XB2的合成0069说明书CN104193757A118/12页120070将0535G10MMOL含硒苯并双呋喃化合物XA3溶于20ML无水乙醇中，0250G4MMOL80的水合肼，在氮气的保护下，回流反应12H。TLC检测反应完全后，抽干乙醇，加入20ML二氯甲烷，用饱和食盐水洗涤80ML3，分出有机相用无水硫酸镁干燥，浓缩，经薄板层析将得到含硒苯并双呋喃衍生物XB2，产率为8。
27、5，结构表征如下00711HNMR400MHZ,CDCL3790783M,4H,778769M,3H,763S,1H,762751M,5H,747737M,3H,551S,2H,521514M,1H,376369M,1H,350345M,1H,334329M,1H,314308M,1HIRMAXCM13442,3029,2921,2222,1592,1396,762,698MSESIM/Z550MH0072实施例6含硒苯并双呋喃类化合物XC1的合成00730074将0596G10MMOL化合物XB1溶于30ML无水二氯甲烷中，加入0152G15MMOL三乙胺，室温下搅拌十分钟，在冰水浴条件下滴。
28、加溶于3ML无水二氯甲烷的新蒸乙酰氯0102G13MMOL，搅拌十五分钟后，转室温下反应3H。TLC检测反应完全后，用饱和食盐水洗涤80ML3，分出有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩，经薄板层析E/P13分离得到含酰肼结构的苯并双呋喃化合物XC1，白色固体，产率为90，结构表征如下00751HNMR400MHZ,CDCL3837S,1H,757755M,2H,751750M,4H,745740M,3H,734732M,3H,726722M,3H,716S,1H,517510M,1H,438431M,J72HZ,2H,378371M,1H,351345M,1H,330327M,1H,310305M,。
29、1H,242S,3H,127T,J72HZ,3H；13CNMR100MHZ,CDCL31729,1595,1581,1519,1461,1404,1364,1333,1301,1298,12964,12959,1292,12862,12858,1284,1281,1275,1270,1240,1219,1111,1101,840,613,3255,3233,206,140IRMAXCM13435,3029,2927,1717,1668,1581,1439,1375,1299,1226,1201,1142,1097,1020,968,739,693,540MP9798MSESIM/Z639MH0。
30、076实施例7含硒苯并双呋喃类化合物XC2的合成0077说明书CN104193757A129/12页130078将0596G10MMOL化合物XB1溶于30ML无水二氯甲烷中，加入0142G14MMOL三乙胺，室温下搅拌十分钟，在冰水浴条件下滴加溶于3ML无水二氯甲烷的新蒸苯甲酰氯0155G11MMOL，搅拌十五分钟后，转室温下反应4H。TLC检测反应完全后，用饱和食盐水洗涤80ML3，分出有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩，经薄板层析E/P13分离得到含酰肼结构的苯并双呋喃化合物XC2，白色固体，产率为90，结构表征如下00791HNMR400MHZ,CDCL3803S,1H,772S,1H,7。
31、56740M,12H,738727M,5H,724721M,3H,521514M,1H,439433Q,J72HZ,2H,378374M,1H,352347M,1H,330324M,1H,312304M,1H,129T,J72HZ,3HIRMAXCM13440,3056,2925,1716,1645,1578,1478,1442,1374,1300,1263,1226,1200,1141,1108,1073,1022,968,861,738,693,589MP105107MSESIM/Z701MH0080实施例8含硒苯并双呋喃类化合物XC3的合成00810082将0596G10MMOL化合物X。
32、B1溶于30ML无水二氯甲烷中，加入0162G16MMOL三乙胺，室温下搅拌十分钟，在冰水浴条件下滴加溶于3ML无水二氯甲烷的新蒸氯乙酰氯0136G12MMOL，搅拌十五分钟后，转室温下反应5H。TLC检测反应完全后，用饱和食盐水洗涤80ML3，分出有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩，经薄板层析E/P13分离得到含酰肼结构的苯并双呋喃化合物XC2，白色固体，产率为85，结构表征如下00831HNMR400MHZ,CDCL3857S,1H,773755M,4H,753737M,6H,737724M,5H,702S,1H,515M,1H,439432M,J72HZ,2H,399S,2H,378370M。
33、,1H,352347M,1H,331327M,1H,312306M,1H,129T,J72HZ,3H；IRMAXCM13052,2925,1715,1645,1598,1425,1370,1301,1260,1231,1208,1145,1102,1049,1035,903,862,801,753,733,646,589,532,467MSESIM/Z673MH0084实施例9含硒苯并双呋喃类化合物XC4的合成0085说明书CN104193757A1310/12页140086将0549G10MMOL化合物XB2溶于30ML无水二氯甲烷中，加入0152G15MMOL三乙胺，室温下搅拌十分钟，在冰。
34、水浴条件下滴加溶于3ML无水二氯甲烷的新蒸乙酰氯0102G13MMOL，搅拌十五分钟后，转室温下反应3H。TLC检测反应完全后，用饱和食盐水洗涤80ML3，分出有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩，经薄板层析E/P13分离得到含酰肼结构的苯并双呋喃化合物XC4，产率为88，结构表征如下00871HNMR400MHZ,CDCL3838S,1H,772768M,2H,764755M,4H,750739M,6H,735727M,4H,518513M,1H,370364M,1H,347342M,1H,332328M,1H,314308M,1H,241S,3HIRMAXCM13434,3029,2960,29。
35、26,2220,1662,1590,1440,761,695MSESIM/Z592MH0088实施例10含硒苯并双呋喃类化合物XC5的合成00890090将0549GG10MMOL化合物XB2溶于30ML无水二氯甲烷中，加入0142G14MMOL三乙胺，室温下搅拌十分钟，在冰水浴条件下滴加溶于3ML无水二氯甲烷的新蒸苯甲酰氯0155G11MMOL，搅拌十五分钟后，转室温下反应4H。TLC检测反应完全后，用饱和食盐水洗涤80ML3，分出有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩，经薄板层析E/P13分离得到含酰肼结构的苯并双呋喃化合物XC5，产率为80，结构表征如下00911HNMR400MHZ,CDCL3。
36、822S,1H,778771M,3H,766752M,10H,746735M,5H,732729M,3H,522515M,1H,379375M,1H,750346M,1H,331326M,1H,313309M,1HIRMAXCM13436,3028,2928,2218,1645,1580,14410,1308,757,697MSESIM/Z654MH0092实施例11单胺氧化酶抑制活性检测00931样品配制0094将实施例110制备的化合物XA1XA3、XB1XB2、XC1XC5溶于二甲基亚砜DMSO中，分别配成10、50、75、100、150MMOL/L浓度梯度的样品液，记为样品110。00。
37、952含硒苯并双呋喃类化合物X对单胺氧化酶A抑制活性检测方法0096分别向10份装有381L硼酸缓冲液PH84的EP管中加入10L浓度5MG/ML单胺氧化酶AMAOA和4L步骤1配制的样品110，混合，再将混合物在38水说明书CN104193757A1411/12页15浴中反应3H，然后分别再次向上述10份EP管中加入25L式XI所示的探针73氨基丙氧基4甲基香豆素20MMOL/ML和25L的牛血清蛋白BSA,浓度60MG/ML，并将EP管放在38水浴中继续反应3H。与其同时需检测未加抑制剂的酶的酶活，即向装有385L硼酸缓冲液PH84的EP管中加入10L单胺氧化酶AMAOA，在38水浴中反应。
38、3H，再加入25L探针20MMOL/ML和25L的BSA同样也在38水浴中反应3H。00970098最后在每个EP管微量离心管中取出100L加入96孔板中并用全功能荧光分光光度计EX/EM365/460NMSPECTRAMAXM,美国分子仪器公司检测样品。根据所测的荧光值计算样品110的IC50，化合物X对单胺氧化酶A活性抑制测试结果见表1。0099化合物的抑制效果用半数抑制浓度IC50来表示。IC50是指“反应”被抑制一半时抑制剂的浓度，化合物抑制能力越强，该数值越低。0100IC50可以用以下方法计算01011检测并计算只加酶与探针缓冲液的平均荧光强度FM；01022计算含有不同浓度梯度抑。
39、制剂的各组分酶的平均荧光强度要扣除背景值；01033根据不同浓度梯度抑制剂的各组分酶的荧光强度做抑制剂的浓度C与荧光强度F之间关系的直线回归，建立得到方程FACB通过回归直线确定方程系数A和截踞B；01044根据方程，求F1/2FM下的对应的抑制剂浓度，即可求出抑制率为50时的抑制剂浓度，即为IC50。01053含硒苯并双呋喃类化合物X对单胺氧化酶B抑制活性测试0106将MAOA换成MAOB，其他操作同步骤2，结果见表1。0107表1实施例110制备的含硒苯并双呋喃类化合物X对单胺氧化酶A和B的抑制活性01080109说明书CN104193757A1512/12页160110A抑制活性用IC50表示，每个样品做3个平行组，取5个浓度梯度；0111B对酶的选择性用SI表示，SISELECTIVITYINDEXIC50MAOA/IC50MAOB0112从表1可以看出，化合物XA1XA3、XB1XB2、XC1XC5对单胺氧化酶A有较强的抑制活性，其中化合物XA3、XB2、XC4、XC5抑制活性更强；化合物XA1XA3、XB1XB2、XC1XC5对单胺氧化酶B有抑制活性，其中化合物XC4XC5有较强的抑制活性。说明书CN104193757A16。