一种培养基及一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410199048.X

申请日:

2014.05.13

公开号:

CN104152370A

公开日:

2014.11.19

当前法律状态:

撤回

有效性:

无权

法律详情:

发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):C12N 1/20申请公布日:20141119|||实质审查的生效IPC(主分类):C12N 1/20申请日:20140513|||公开

IPC分类号:

C12N1/20; C12N1/16; C12R1/46(2006.01)N; C12R1/25(2006.01)N

主分类号:

C12N1/20

申请人:

江苏绿华生物工程有限公司

发明人:

许荣明; 许寅

地址:

225526 江苏省泰州市姜堰区梁徐镇双登科工园

优先权:

专利代理机构:

代理人:

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内容摘要

本发明涉及一种培养基,原料包括酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温-80、柠檬酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L-半胱氨酸,其中原料中还加入麦芽汁和甘露糖。还涉及一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,将培养基在110-130°的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为25-35分钟,之后冷却至30-40°,之后在培养基中加入乳链球菌种子液、植物乳杆菌种子液和生香酵母种子液,在发酵罐中培养60-80小时,发酵罐内的发酵温度为30-40°。优点是:最大程度的模拟酵母菌的自然生长条件,能够促进其快速生长、繁殖、保持存活。

权利要求书

1.  一种培养基,原料包括酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温-80、柠檬酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L-半胱氨酸,其特征在于:其中原料中还加入麦芽汁和甘露糖,所述各原料的质量如下:
麦芽汁 150-250Kg;甘露糖 0.02-0.03Kg;酵母膏 20-30 Kg;蛋白胨 45-55Kg;牛肉膏 45-55Kg;葡萄糖 95-105Kg;吐温-80 4-6Kg;柠檬酸铵 8-12Kg;醋酸铵 20-30 Kg;硫酸镁 0.4-0.6 Kg;硫酸锰 0.2-0.3 Kg;磷酸氢二钾 8-12 Kg;L-半胱氨酸2-3 Kg以及用水定容4500-5500Kg。

2.
  根据权利要求1所述的一种培养基,其特征在于:所述原料中还添加天门冬氨酸 0.005-0.015 Kg;七水硫酸铜 0.2-0.4 Kg;碘化钠 0.002-0.004 Kg;二水钼酸钠 0.01-0.03 Kg;硼酸 0.0005-0.0015 Kg;无水氯化钴 0.01-0.03 Kg;硫酸锌 0.5-1.5 Kg;七水硫酸亚铁 2-4 Kg。

3.
  麦芽汁的制备方法,其特征在于:将40-50Kg的麦芽粉、200-240Kg的水在50-70°的温度下保温3-5小时,然后煮沸5-15分钟,过滤得到麦芽汁。

4.
  一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,其特征在于:将权利要求2所述培养基在110-130°的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为25-35分钟,之后冷却至30-40°,之后在培养基中加入乳链球菌种子液、植物乳杆菌种子液和生香酵母种子液,在发酵罐中培养60-80小时,发酵罐内的发酵温度为30-40°。

5.
  根据权利要求4所述的一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,其特征在于:所述乳链球菌种子液的体积为4-6升。

6.
  根据权利要求4所述的一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,其特征在于:所述植物乳杆菌种子液的体积为4-6升。

7.
  根据根据权利要求4所述的一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,其特征在于:所述生香酵母种子液的体积为4-6升。

说明书

一种培养基及一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法
技术领域
本发明涉及一种培养基,还涉及应用此培养基进行一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,属于微生物制备领域。 
背景技术
目前,乳酸菌与酵母菌混合培养,其发酵生产配方大多为人工模拟其生长环境简单配制而成(酵母膏 25Kg,蛋白胨 50Kg,牛肉膏 50Kg,葡萄糖 100Kg,吐温-80 5Kg,柠檬酸铵 10Kg,醋酸钠 25Kg,硫酸镁 0.5Kg,硫酸锰 0.25Kg,磷酸氢二钾 10Kg,L-半胱氨酸 2.5Kg),这种模拟生长环境人工简单配制的培养基虽能基本满足乳酸菌酵母菌天然生长状态的营养需求,但其应该来说更适用于乳酸菌,而对酵母菌来说是有欠缺的。因此,应该提供一种新的技术方案解决上述问题。 
发明内容
本发明的目的是:提供一种培养基及一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法。 
为实现上述目的,本发明采用的技术方案是: 
一种培养基,原料包括酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温-80、柠檬酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L-半胱氨酸,其中原料中还加入麦芽汁和甘露糖,所述各原料的质量如下:麦芽汁 150-250Kg;甘露糖 0.02-0.03Kg;酵母膏 20-30 Kg;蛋白胨 45-55Kg;牛肉膏 45-55Kg;葡萄糖 95-105Kg;吐温-80 4-6Kg;柠檬酸铵 8-12Kg;醋酸铵 20-30 Kg;硫酸镁 0.4-0.6 Kg;硫酸锰 0.2-0.3 Kg;磷酸氢二钾 8-12 Kg;L-半胱氨酸2-3 Kg以及用水定容4500-5500Kg。
原料中还添加天门冬氨酸 0.005-0.015 Kg;七水硫酸铜 0.2-0.4 Kg;碘化钠 0.002-0.004 Kg;二水钼酸钠 0.01-0.03 Kg;硼酸 0.0005-0.0015 Kg;无水氯化钴 0.01-0.03 Kg;硫酸锌 0.5-1.5 Kg;七水硫酸亚铁 2-4 Kg。 
麦芽汁的制备方法,将40-50Kg的麦芽粉、200-240Kg的水在50-70°的温度下保温3-5小时,然后煮沸5-15分钟,过滤得到麦芽汁。 
一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,将培养基在110-130°的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为25-35分钟,之后冷却至30-40°,之后在培养基中加入乳链球菌种子液、植物乳杆菌种子液和生香酵母种子液,在发酵罐中培养60-80小时,发酵罐内的发酵温度为30-40°。 
乳链球菌种子液的体积为4-6升。 
植物乳杆菌种子液的体积为4-6升。 
生香酵母种子液的体积为4-6升。 
由于上述技术方案的应用,本发明与现有技术相比具有如下优点: 
最大程度的模拟酵母菌的自然生长条件,能够促进其快速生长、繁殖、保持存活。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述。 
实施例一: 
一种培养基,原料包括酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温-80、柠檬酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L-半胱氨酸,其中原料中还加入麦芽汁和甘露糖,所述各原料的质量如下:麦芽汁 150Kg;甘露糖 0.02Kg;酵母膏 20 Kg;蛋白胨 45Kg;牛肉膏 45Kg;葡萄糖 95Kg;吐温-80 4Kg;柠檬酸铵 8Kg;醋酸铵 20 Kg;硫酸镁 0.4 Kg;硫酸锰 0.2 Kg;磷酸氢二钾 8 Kg;L-半胱氨酸2 Kg以及用水定容4500Kg。
原料中还添加天门冬氨酸 0.005 Kg;七水硫酸铜 0.2 Kg;碘化钠 0.002 Kg;二水钼酸钠 0.01 Kg;硼酸 0.0005 Kg;无水氯化钴 0.01 Kg;硫酸锌 0.5 Kg;七水硫酸亚铁 2 Kg。 
麦芽汁的制备方法,将40Kg的麦芽粉、200Kg的水在50°的温度下保温3小时,然后煮沸5分钟,过滤得到麦芽汁。 
一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,将培养基在110°的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为25分钟,之后冷却至30°,之后在培养基中加入4升乳链球菌种子液、4升植物乳杆菌种子液和4升生香酵母种子液,在发酵罐中培养60小时,发酵罐内的发酵温度为30°。此发明能最大程度的模拟酵母菌的自然生长条件,能够促进其快速生长、繁殖、保持存活。 
实施例二: 
本发明一种培养基,原料包括酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温-80、柠檬酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L-半胱氨酸,其中原料中还加入麦芽汁和甘露糖,所述各原料的质量如下:
麦芽汁 200Kg;甘露糖 0.025Kg;酵母膏 25 Kg;蛋白胨 50Kg;牛肉膏 50Kg;葡萄糖 100Kg;吐温-80 5Kg;柠檬酸铵 10Kg;醋酸铵 25Kg;硫酸镁 0.5 Kg;硫酸锰 0.25 Kg;磷酸氢二钾 10 Kg;L-半胱氨酸2.5 Kg以及用水定容5000Kg。
原料中还添加天门冬氨酸 0.01 Kg;七水硫酸铜 0.3 Kg;碘化钠 0.003Kg;二水钼酸钠 0.02Kg;硼酸 0.001 Kg;无水氯化钴 0.02 Kg;硫酸锌 1Kg;七水硫酸亚铁 3 Kg。 
麦芽汁的制备方法,将45Kg的麦芽粉、220Kg的水在60°的温度下保温4小时,然后煮沸10分钟,过滤得到麦芽汁。 
一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,将培养基在120°的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为30分钟,之后冷却至35°,之后在培养基中加入5升乳链球菌种子液、5升植物乳杆菌种子液和生5升香酵母种子液,在发酵罐中培养70小时,发酵罐内的发酵温度为35°。此发明最大程度的模拟酵母菌的自然生长条件,能够促进其快速生长、繁殖、保持存活。 
实施例三: 
本发明一种培养基,原料包括酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温-80、柠檬酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L-半胱氨酸,其中原料中还加入麦芽汁和甘露糖,所述各原料的质量如下:
麦芽汁 250Kg;甘露糖 0.03Kg;酵母膏 30 Kg;蛋白胨 55Kg;牛肉膏 55Kg;葡萄糖 105Kg;吐温-80 6Kg;柠檬酸铵12Kg;醋酸铵 30 Kg;硫酸镁 0.6 Kg;硫酸锰 0.3 Kg;磷酸氢二钾 12 Kg;L-半胱氨酸3 Kg以及用水定容5500Kg。
原料中还添加天门冬氨酸 0.015 Kg;七水硫酸铜 0.4 Kg;碘化钠 0.004 Kg;二水钼酸钠 0.03 Kg;硼酸 0.0015 Kg;无水氯化钴 0.03 Kg;硫酸锌 1.5 Kg;七水硫酸亚铁 4 Kg。 
麦芽汁的制备方法,将50Kg的麦芽粉、240Kg的水在70°的温度下保温5小时,然后煮沸15分钟,过滤得到麦芽汁。 
一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,将培养基在130°的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为35分钟,之后冷却至40°,之后在培养基中加入6升乳链球菌种子液、6升植物乳杆菌种子液和6升生香酵母种子液,在发酵罐中培养80小时,发酵罐内的发酵温度为40°。此发明能最大程度的模拟酵母菌的自然生长条件,能够促进其快速生长、繁殖、保持存活。
根据以上实施例,乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母的菌数存货对比表如下: 

上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点,其目的在于让熟悉此项技术的 人士能够了解本发明的内容并据以实施,并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰,都应涵盖在本发明的保护范围之内。 

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1、10申请公布号CN104152370A43申请公布日20141119CN104152370A21申请号201410199048X22申请日20140513C12N1/20200601C12N1/16200601C12R1/46200601C12R1/2520060171申请人江苏绿华生物工程有限公司地址225526江苏省泰州市姜堰区梁徐镇双登科工园72发明人许荣明许寅54发明名称一种培养基及一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法57摘要本发明涉及一种培养基,原料包括酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温80、柠檬酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L半胱氨酸,其中原料中还加入麦芽。

2、汁和甘露糖。还涉及一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,将培养基在110130的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为2535分钟,之后冷却至3040,之后在培养基中加入乳链球菌种子液、植物乳杆菌种子液和生香酵母种子液,在发酵罐中培养6080小时,发酵罐内的发酵温度为3040。优点是最大程度的模拟酵母菌的自然生长条件,能够促进其快速生长、繁殖、保持存活。51INTCL权利要求书1页说明书3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页10申请公布号CN104152370ACN104152370A1/1页21一种培养基,原料包括酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温。

3、80、柠檬酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L半胱氨酸,其特征在于其中原料中还加入麦芽汁和甘露糖,所述各原料的质量如下麦芽汁150250KG;甘露糖002003KG;酵母膏2030KG;蛋白胨4555KG;牛肉膏4555KG;葡萄糖95105KG;吐温8046KG;柠檬酸铵812KG;醋酸铵2030KG;硫酸镁0406KG;硫酸锰0203KG;磷酸氢二钾812KG;L半胱氨酸23KG以及用水定容45005500KG。2根据权利要求1所述的一种培养基,其特征在于所述原料中还添加天门冬氨酸00050015KG;七水硫酸铜0204KG;碘化钠00020004KG;二水钼酸钠001003KG;。

4、硼酸0000500015KG;无水氯化钴001003KG;硫酸锌0515KG;七水硫酸亚铁24KG。3麦芽汁的制备方法,其特征在于将4050KG的麦芽粉、200240KG的水在5070的温度下保温35小时,然后煮沸515分钟,过滤得到麦芽汁。4一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,其特征在于将权利要求2所述培养基在110130的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为2535分钟,之后冷却至3040,之后在培养基中加入乳链球菌种子液、植物乳杆菌种子液和生香酵母种子液,在发酵罐中培养6080小时,发酵罐内的发酵温度为3040。5根据权利要求4所述的一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方。

5、法,其特征在于所述乳链球菌种子液的体积为46升。6根据权利要求4所述的一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,其特征在于所述植物乳杆菌种子液的体积为46升。7根据根据权利要求4所述的一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,其特征在于所述生香酵母种子液的体积为46升。权利要求书CN104152370A1/3页3一种培养基及一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法技术领域0001本发明涉及一种培养基,还涉及应用此培养基进行一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,属于微生物制备领域。背景技术0002目前,乳酸菌与酵母菌混合培养,其发酵生产配方大多为人工模拟其生长。

6、环境简单配制而成(酵母膏25KG,蛋白胨50KG,牛肉膏50KG,葡萄糖100KG,吐温805KG,柠檬酸铵10KG,醋酸钠25KG,硫酸镁05KG,硫酸锰025KG,磷酸氢二钾10KG,L半胱氨酸25KG),这种模拟生长环境人工简单配制的培养基虽能基本满足乳酸菌酵母菌天然生长状态的营养需求,但其应该来说更适用于乳酸菌,而对酵母菌来说是有欠缺的。因此,应该提供一种新的技术方案解决上述问题。发明内容0003本发明的目的是提供一种培养基及一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法。0004为实现上述目的,本发明采用的技术方案是一种培养基,原料包括酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温80、柠檬。

7、酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L半胱氨酸,其中原料中还加入麦芽汁和甘露糖,所述各原料的质量如下麦芽汁150250KG;甘露糖002003KG;酵母膏2030KG;蛋白胨4555KG;牛肉膏4555KG;葡萄糖95105KG;吐温8046KG;柠檬酸铵812KG;醋酸铵2030KG;硫酸镁0406KG;硫酸锰0203KG;磷酸氢二钾812KG;L半胱氨酸23KG以及用水定容45005500KG。0005原料中还添加天门冬氨酸00050015KG;七水硫酸铜0204KG;碘化钠00020004KG;二水钼酸钠001003KG;硼酸0000500015KG;无水氯化钴001003KG;硫。

8、酸锌0515KG;七水硫酸亚铁24KG。0006麦芽汁的制备方法,将4050KG的麦芽粉、200240KG的水在5070的温度下保温35小时,然后煮沸515分钟,过滤得到麦芽汁。0007一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,将培养基在110130的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为2535分钟,之后冷却至3040,之后在培养基中加入乳链球菌种子液、植物乳杆菌种子液和生香酵母种子液,在发酵罐中培养6080小时,发酵罐内的发酵温度为3040。0008乳链球菌种子液的体积为46升。0009植物乳杆菌种子液的体积为46升。0010生香酵母种子液的体积为46升。0011由于上述技术方案的应用,本。

9、发明与现有技术相比具有如下优点说明书CN104152370A2/3页4最大程度的模拟酵母菌的自然生长条件,能够促进其快速生长、繁殖、保持存活。具体实施方式0012下面结合实施例对本发明作进一步描述。0013实施例一一种培养基,原料包括酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温80、柠檬酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L半胱氨酸,其中原料中还加入麦芽汁和甘露糖,所述各原料的质量如下麦芽汁150KG;甘露糖002KG;酵母膏20KG;蛋白胨45KG;牛肉膏45KG;葡萄糖95KG;吐温804KG;柠檬酸铵8KG;醋酸铵20KG;硫酸镁04KG;硫酸锰02KG;磷酸氢二钾8KG;L半胱氨酸2KG。

10、以及用水定容4500KG。0014原料中还添加天门冬氨酸0005KG;七水硫酸铜02KG;碘化钠0002KG;二水钼酸钠001KG;硼酸00005KG;无水氯化钴001KG;硫酸锌05KG;七水硫酸亚铁2KG。0015麦芽汁的制备方法,将40KG的麦芽粉、200KG的水在50的温度下保温3小时,然后煮沸5分钟,过滤得到麦芽汁。0016一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,将培养基在110的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为25分钟,之后冷却至30,之后在培养基中加入4升乳链球菌种子液、4升植物乳杆菌种子液和4升生香酵母种子液,在发酵罐中培养60小时,发酵罐内的发酵温度为30。此发明能最。

11、大程度的模拟酵母菌的自然生长条件,能够促进其快速生长、繁殖、保持存活。0017实施例二本发明一种培养基,原料包括酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温80、柠檬酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L半胱氨酸,其中原料中还加入麦芽汁和甘露糖,所述各原料的质量如下麦芽汁200KG;甘露糖0025KG;酵母膏25KG;蛋白胨50KG;牛肉膏50KG;葡萄糖100KG;吐温805KG;柠檬酸铵10KG;醋酸铵25KG;硫酸镁05KG;硫酸锰025KG;磷酸氢二钾10KG;L半胱氨酸25KG以及用水定容5000KG。0018原料中还添加天门冬氨酸001KG;七水硫酸铜03KG;碘化钠0003KG;二。

12、水钼酸钠002KG;硼酸0001KG;无水氯化钴002KG;硫酸锌1KG;七水硫酸亚铁3KG。0019麦芽汁的制备方法,将45KG的麦芽粉、220KG的水在60的温度下保温4小时,然后煮沸10分钟,过滤得到麦芽汁。0020一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,将培养基在120的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为30分钟,之后冷却至35,之后在培养基中加入5升乳链球菌种子液、5升植物乳杆菌种子液和生5升香酵母种子液,在发酵罐中培养70小时,发酵罐内的发酵温度为35。此发明最大程度的模拟酵母菌的自然生长条件,能够促进其快速生长、繁殖、保持存活。0021实施例三本发明一种培养基,原料包括酵母。

13、膏、蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、吐温80、柠檬酸铵、醋酸钠、硫酸镁、硫酸钠、硫酸氢二钾和L半胱氨酸,其中原料中还加入麦芽汁和甘露糖,所说明书CN104152370A3/3页5述各原料的质量如下麦芽汁250KG;甘露糖003KG;酵母膏30KG;蛋白胨55KG;牛肉膏55KG;葡萄糖105KG;吐温806KG;柠檬酸铵12KG;醋酸铵30KG;硫酸镁06KG;硫酸锰03KG;磷酸氢二钾12KG;L半胱氨酸3KG以及用水定容5500KG。0022原料中还添加天门冬氨酸0015KG;七水硫酸铜04KG;碘化钠0004KG;二水钼酸钠003KG;硼酸00015KG;无水氯化钴003KG;硫酸锌15KG;七。

14、水硫酸亚铁4KG。0023麦芽汁的制备方法,将50KG的麦芽粉、240KG的水在70的温度下保温5小时,然后煮沸15分钟,过滤得到麦芽汁。0024一种乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母混合培养的方法,将培养基在130的高温下进行灭菌处理,灭菌时间为35分钟,之后冷却至40,之后在培养基中加入6升乳链球菌种子液、6升植物乳杆菌种子液和6升生香酵母种子液,在发酵罐中培养80小时,发酵罐内的发酵温度为40。此发明能最大程度的模拟酵母菌的自然生长条件,能够促进其快速生长、繁殖、保持存活。根据以上实施例,乳链球菌、植物乳杆菌、生香酵母的菌数存货对比表如下上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点,其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施,并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰,都应涵盖在本发明的保护范围之内。说明书CN104152370A。

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