技术领域
本发明涉及一种花脸香菇抗疲劳口服液及其制备方法与应用，属于保健品加工技术领域。
背景技术
疲劳是机体复杂的生理生化变化过程，表现为身体与精神状态的下降，并导致工作能力 及工作效率的降低。随着现代社会生活节奏的加快、工作压力的增大，使人们都普遍处于疲 劳的亚健康状态，疲劳越来越成为影响人们生活质量的重要因素。因此通过服用具有保健功 能的口服液这种方便快捷的方式来延缓疲劳的产生和(或)加速疲劳的消除将会越来越受人 们的青睐。
花脸香菇，又名紫花脸、紫米汤菌、紫菌子、紫晶蘑、紫花脸香菇、丁香蘑和花脸香蘑， 是黑龙江省极具地方特色的自然资源之一。该菌含有40％以上的粗蛋白和众多氨基酸种类， 其中必需氨基酸占18％左右。花脸香菇子实体含有多种有利于人体抗氧化、增强免疫和抗衰 老的硒、锌、铬和铁等必需微量元素。此外，丰富的蛋白多糖含量是花脸香菇的又一显著特 征。有研究表明，香菇蛋白多糖能够显著提高机体内肌糖原和肝糖原的储备量，降低运动后 乳酸堆积和血尿素氮的增量，加速体内血尿素氮的清除速率，延缓疲劳产生，加速疲劳消除。
枸杞子富含特殊生物活性功能成分，如隐黄质、玉米黄质、酸浆果红素、甜菜碱、东莨 菪碱、牛磺酸、γ-氨基丁酸和枸杞多糖等。其中，枸杞多糖被认为是枸杞子主要的功能保健 因子，也是枸杞子功效研究报道中最多的一个组分，具有保肝、抗高温、抗辐射、抗脂质过 氧化、延缓衰老、抗癌抑瘤、降血糖、免疫调节及抗疲劳等作用。
芦荟富含多种抗氧化物质，如芦丁等黄酮类植物化学物，还有维生素E、维生素C、β- 胡萝卜素等维生素，以及多种氨基酸、多糖、不饱和脂肪酸和其它抗氧化物质。因此芦荟在 抗自由基氧化、阻止膜的脂质过氧化和保护细胞结构完整方面具有显著作用。近年来，很多 研究都表明自由基的大量产生是引起疲劳产生的重要原因。剧烈运动会导致自由基增加，对 细胞膜造成氧化损伤产生疲劳感。精神疲劳的产生也和自由基相关，当自由基破坏细胞膜的 功能，机体运送氧气的能力就下降，大脑的供氧就会不足，时间长了就会引起记忆力下降等 症状。因此，抗疲劳与抗氧化作用之间密切相关。
牛磺酸是一种β-氨基酸，为一种重要的细胞保护剂，其主要生物作用是能够维护膜结构 的稳定和调节渗透平衡，对细胞膜的脂质过氧化具有防护作用。研究表明，牛磺酸可与胰岛 素受体结合，促进肌肉组织对葡萄糖、必需氨基酸的摄取和利用，加速糖酵解，增加糖原异 生。由于牛磺酸易于在肠胃中吸收，无毒副作用，不会给运动机体带来健康危害因素，因此 具有开发成抗疲劳运动食品的良好潜力。
左旋肉碱是一种天然存在的类维生素的营养素，与动物体内的脂肪酸代谢密切相关，具 有多种生理功能，其中包括抗疲劳作用。其抗疲劳的作用机理主要与左旋肉碱能够增加肌糖 苷原储备，减少运动后肌糖原消耗，抑制乳酸生成，加速乳酸和尿素氮清除有关。左旋肉碱 可以通过增加脂肪酸氧化供能减少肌糖原的无氧酵解，抑制乳酸生成，同时加速消除运动中 积累的乳酸，而延缓运动性疲劳的产生。
发明内容
为解决现有技术的不足，本发明提供了一种花脸香菇抗疲劳口服液及其制备方法，采用 的技术方案如下：
本发明的目的在于提供一种花脸香菇抗疲劳口服液，该口服液是以花脸香菇50-80wt％、 枸杞子10-30wt％、芦荟10-20wt％、牛磺酸10-50mg/100ml、左旋肉碱10-100mg/100ml和蜂蜜 3-5g/100ml为原料制成。
优选地，所述花脸香菇抗疲劳口服液，是以花脸香菇70wt％、枸杞子20wt％、芦荟10wt％、 牛磺酸45mg/100ml、左旋肉碱80mg/100ml和蜂蜜5g/100ml为原料制成。
以上所述任一花脸香菇抗疲劳口服液在制备花脸香菇抗疲劳口服液和抗疲劳口服液中的 应用。
本发明的另一目的在于提供一种花脸香菇抗疲劳口服液的制备方法及应用，该方法是将 花脸香菇和枸杞子进行低温破碎处理，加水超声浸提后加入经过低温破碎处理的芦荟，浓缩 后加入牛磺酸、左旋肉碱和蜂蜜，混合均匀后灭菌装瓶，步骤如下：
1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后进行称重备用；
2)将步骤1)称量好的花脸香菇进行切块处理，然后加入枸杞子，进行低温破碎处理， 获得预处理混合液；
3)向步骤2)所得的预处理混合浆液中加水进行超声浸提，过滤后向滤渣中加水超声浸 提，过滤后合并两次滤液，获得滤液混合液；
4)将称量好的芦荟去除表皮，低温破碎处理制备成芦荟浆液，将芦荟浆液加入到步骤3) 所得滤液混合液中，混合均匀后进行浓缩，获得浓缩液；
5)向步骤4)所得浓缩液中加入牛磺酸、左旋肉碱和蜂蜜，混合均匀，灭菌后装瓶。
优选地，所述方法，步骤如下：
1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后按照质量比为5:3:2-8:1:1进行称重备用；
2)将步骤1)称量好的花脸香菇进行切块处理，然后加入枸杞子，在温度低于30℃以下 进行低温破碎处理，获得预处理混合液；
3)向步骤2)所得的预处理混合浆液中加水进行超声浸提，过滤后向滤渣中加水超声浸 提，过滤后合并两次滤液，获得滤液混合液；
4)将称量好的芦荟去除表皮，在温度低于30℃以下进行低温破碎处理制备成芦荟浆液， 将芦荟浆液加入到步骤3)所得滤液混合液中，混合均匀后进行浓缩，获得浓缩液；
5)向步骤4)所得浓缩液中加入牛磺酸、左旋肉碱和蜂蜜，混合均匀，灭菌后装瓶；所 述牛磺酸、左旋肉碱和蜂蜜添加量为每100mL浓缩液中添加10mg-50mg牛磺酸、 10mg-100mg左旋肉碱和3g-5g蜂蜜。
经优选，所述低温破碎，是破碎至浆状。
经优选，所述过滤，是用真空泵进行固液分离。
经优选，步骤4)所述浓缩，是在60℃-70℃下浓缩至的10倍-25倍。
经优选，所述灭菌，为90℃下高温瞬时灭菌45s-60s。
经优选，所述方法，具体步骤为：
1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后按照质量比为5:3:2-8:1:1进行称重备用；
2)将步骤1)称量好的花脸香菇进行切块处理，然后加入枸杞子，在温度低于30℃以下 将花脸香菇和枸杞子破碎成浆状，获得预处理混合液；
3)向步骤2)所得的预处理混合浆液中加入其体积10倍-20倍、50℃-60℃的水，超声功 率300-600W，进行超声浸提2-3次，每次30min-60min，过滤后向滤渣中加入体积5倍 -10倍、50℃-60℃的水，超声功率300-600W，超声浸提2-3次，每次30min-60min，过 滤后合并两次滤液，获得滤液混合液；
4)将称量好的芦荟去除表皮，低温破碎处理制备成芦荟浆液，将芦荟浆液加入到步骤3) 所得滤液混合液中，混匀后在60℃-70℃下浓缩至花脸香菇、枸杞子和芦荟低温破碎 浆液总体积的10倍-25倍，获得浓缩液；
5)向步骤4)所得浓缩液中加入牛磺酸、左旋肉碱和蜂蜜，混合均匀，在90℃下高温瞬 时灭菌45s-60s后装瓶；所述牛磺酸、左旋肉碱和蜂蜜添加量为每100mL浓缩液中添加 10mg-50mg牛磺酸、10mg-100mg左旋肉碱和3g-5g蜂蜜。
经进一步优选，所述方法，具体步骤为：
1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后按照质量比为7：2：1进行称重备用；
2)将步骤1)称量好的花脸香菇进行切块处理，然后加入枸杞子，27℃下将花脸香菇和 枸杞子破碎成浆状，获得预处理混合液；
3)向步骤2)所得的预处理混合浆液中加入其体积15倍、60℃的水，超声功率500W，进 行超声浸提2次，每次50min，过滤后向滤渣中加入体积7倍、60℃的水，超声功率500W， 超声浸提2次，每次50min，过滤后合并两次滤液，获得滤液混合液；
4)将称量好的芦荟去除表皮，低温破碎处理制备成芦荟浆液，将芦荟浆液加入到步骤3) 所得滤液混合液中，混匀后在60℃下浓缩至花脸香菇、枸杞子和芦荟低温破碎浆液总 体积的15倍，获得浓缩液；
5)向步骤4)所得浓缩液中加入牛磺酸、左旋肉碱和蜂蜜，混合均匀，灭菌后装瓶；所 述牛磺酸、左旋肉碱和蜂蜜添加量为每100mL浓缩液中添加45mg牛磺酸、80mg左旋 肉碱和5g蜂蜜。
以上所述任一方法在制备花脸香菇抗疲劳口服液中的应用。
以上所述任一方法在制备抗疲劳口服液中的应用。
以上所述任一方法在制备花脸香菇抗疲劳口服液和抗疲劳口服液中的应用。
本发明有益效果：
1、本发明制备的花脸香菇抗疲劳口服液，以花脸香菇为主料，枸杞子和芦荟为辅料，花 脸香菇和枸杞子含有丰富的植物多糖，具有显著的抗疲劳功效，而芦荟中的多种活性物质具 有抗氧化功能，能够间接起到抗疲劳作用。该产品原料易获得，成本低；流程简单，不破坏 食物的营养，不产生副作用；不添加任何防腐剂，以蜂蜜为辅料，改善产品口感；同时添加 牛磺酸和左旋肉碱，加强本产品延缓疲劳产生，加速疲劳消除的抗疲劳的功效，适用各类人 群。
2、该技术在加工过程中避免了长时间高温处理对原料营养成分的破坏。首先，植物原料 破碎处理均在30℃以下进行，以免操作过程中仪器生热对原料造成的影响。其次，香菇和枸 杞营养成分采用50-60℃水浴超声浸提的方法，不同于煮沸法浸提，该方法对原料成分和最后 产品的风味影响小，并且比复合酶解法对营养素的提取率更高。再次，芦荟作为辅料去除了 纤维素含量较多的表皮，肉质部分柔嫩多汁且营养丰富，打浆破碎后汁液均匀细腻，不需浸 提、过滤等工艺，直接加入，牛磺酸和左旋肉碱在灭菌前添加，最大程度保留了其原有的营 养物质并且简化了工艺。
3、本发明制备的香菇抗疲劳口服液延长小鼠力竭游泳时间，降低了血乳酸含量、血清尿 素氮含量，增加了肝糖原含量。高剂量组效果最为显著，较空白对照组力竭游泳时间延长了 44.4％，血乳酸减少了35.7％，血清尿素氮减少了25.1％，肝糖原含量增加了130.5％，表明本 发明香菇抗疲劳口服液具有抗疲劳的作用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受实施例的限制。
以下实施例中所用材料、试剂、方法和仪器，未经特殊声明，均为本领域常规材料、试 剂、方法和仪器，本领域技术人员均可通过商业渠道获得。
实施例1
本实施例提供了一种花脸香菇抗疲劳口服液的配方及制备方法。
配方为：花脸香菇70g、枸杞子20g、芦荟10g、牛磺酸45mg/100ml、左旋肉碱80mg/100ml 和蜂蜜5g/100ml为原料制成。
具体步骤如下：
(1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后分别称取70g、20g和10g；
(2)取花脸香菇切块处理，加入枸杞子27℃条件打浆破碎(低温破碎)；
(3)向混合物中加入其15倍体积60℃水，超声功率500W，超声浸提2次，每次50min， 过滤；
(4)向过滤后的滤渣中加入其7倍体积的60℃水，超声功率500W，超声浸提2次，每次 50min，然后再次过滤。将过滤后获得的滤液与步骤(3)过滤后获得的滤液混合均匀；
(5)取芦荟去除表皮后于27℃条件打浆破碎，然后加入步骤(4)混合液中，混合均匀；
(6)将步骤(5)混合液在60℃下浓缩至花脸香菇、枸杞子和芦荟低温破碎后浆液总体积之和 的15倍；
(7)每100ml浓缩液中添加45mg牛磺酸、80mg左旋肉碱和5g蜂蜜，混合均匀；
(8)通过90℃高温瞬时灭菌45-60s，最后装瓶。
实施例2
本实施例提供了一种花脸香菇抗疲劳口服液的配方及制备方法。
配方为：花脸香菇50g、枸杞子30g、芦荟20g、牛磺酸50mg/100ml、左旋肉碱60mg/100ml 和蜂蜜5g/100ml为原料制成。
具体步骤如下：
(1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后分别称取50g、30g和20g；
(2)取花脸香菇切块处理，加入枸杞子27℃条件打浆破碎；
(3)向混合物中加入其15倍体积60℃水，超声功率500W，超声浸提2次，每次50min， 过滤；
(4)向过滤后的滤渣中加入其7倍体积的60℃水，超声功率500W，超声浸提2次，每次 50min，然后再次过滤。将过滤后获得的滤液与步骤(3)过滤后获得的滤液混合均匀；
(5)取芦荟去除表皮后于27℃条件打浆破碎，然后加入步骤(4)混合液中，混合均匀；
(6)将步骤(5)混合液在60℃下浓缩至花脸香菇、枸杞子和芦荟低温破碎后浆液总体积 之和的15倍；
(7)每100ml浓缩液中添加50mg牛磺酸、60mg左旋肉碱和5g蜂蜜，混合均匀；
(8)通过90℃高温瞬时灭菌45-60s，最后装瓶。
实施例3
本实施例提供了一种花脸香菇抗疲劳口服液的配方及制备方法。
配方为：花脸香菇80g、枸杞子10g、芦荟10g、牛磺酸30mg/100ml、左旋肉碱90mg/100ml 和蜂蜜5g/100ml为原料制成。
具体步骤如下：
(1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后分别称取80g、10g和10g；
(2)取花脸香菇切块处理，加入枸杞子27℃条件打浆破碎；
(3)向混合物中加入其15倍体积60℃水，超声功率500W，超声浸提2次，每次50min， 过滤；
(4)向过滤后的滤渣中加入其7倍体积的60℃水，超声功率500W，超声浸提2次，每次 50min，然后再次过滤。将过滤后获得的滤液与步骤(3)过滤后获得的滤液混合均匀；
(5)取芦荟去除表皮后于27℃条件打浆破碎，然后加入步骤(4)混合液中，混合均匀；
(6)将步骤(5)混合液在60℃下浓缩至花脸香菇、枸杞子和芦荟低温破碎后浆液总体积 之和的15倍；
(7)每100ml浓缩液中添加30mg牛磺酸、90mg左旋肉碱和5g蜂蜜，混合均匀；
(8)通过90℃高温瞬时灭菌45-60s，最后装瓶。
实施例4
本实施例提供了一种花脸香菇抗疲劳口服液的配方及制备方法。
配方为：花脸香菇50g、枸杞子30g、芦荟20g、牛磺酸10mg/100ml、左旋肉碱10mg/100ml 和蜂蜜3g/100ml为原料制成。
具体步骤如下：
(1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后分别称取50g、30g和20g；
(2)取花脸香菇切块处理，加入枸杞子27℃条件打浆破碎；
(3)向混合物中加入其10倍体积50℃水，超声功率300W，超声浸提3次，每次30min， 过滤；
(4)向过滤后的滤渣中加入其5倍体积的50℃水，超声功率300W，超声浸提3次，每次 30min，然后再次过滤。将过滤后获得的滤液与步骤(3)过滤后获得的滤液混合均匀；
(5)取芦荟去除表皮后于27℃条件打浆破碎，然后加入步骤(4)混合液中，混合均匀；
(6)将步骤(5)混合液在70℃下浓缩至花脸香菇、枸杞子和芦荟低温破碎后浆液总体积 之和的10倍；
(7)每100ml浓缩液中添加10mg牛磺酸、10mg左旋肉碱和3g蜂蜜，混合均匀；
(8)通过90℃高温瞬时灭菌45-60s，最后装瓶。
实施例5
本实施例提供了一种花脸香菇抗疲劳口服液的配方及制备方法。
配方为：花脸香菇70g、枸杞子20g、芦荟10g、牛磺酸50mg/100ml、左旋肉碱100mg/100ml 和蜂蜜5g/100ml为原料制成。
具体步骤如下：
(1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后分别称取70g、20g和10g；
(2)取花脸香菇切块处理，加入枸杞子在30℃以下打浆破碎；
(3)向混合物中加入其20倍体积50℃水，超声功率600W，超声浸提2次，每次60min， 过滤；
(4)向过滤后的滤渣中加入其10倍体积的50℃水，超声功率600W，超声浸提2次，每 次60min，然后再次过滤。将过滤后获得的滤液与步骤(3)过滤后获得的滤液混合均匀；
(5)取芦荟去除表皮后于30℃条件打浆破碎，然后加入步骤(4)混合液中，混合均匀；
(6)将步骤(5)混合液在60℃下浓缩至花脸香菇、枸杞子和芦荟低温破碎后浆液总体积 之和25倍；
(7)每100ml浓缩液中添50mg牛磺酸、100mg左旋肉碱和5g蜂蜜，混合均匀；
(8)通过90℃高温瞬时灭菌45-60s，最后装瓶。
实施例6
本实施例对花脸香菇抗疲劳口服液的功能性进行了评价。
在以下实验中所称的抗疲劳口服液为实施例1制备得到的产品，实施例2-5也可以得到 与实施例1类似的结果，只是效果略微逊于实施例1。
一、实验方法：
1.模型建立方法
取健康雄性小鼠，实验前适应5d，随机分成4组：低剂量组小鼠每只每次给药0.1ml， 每天一次；中剂量组小鼠每只每次给药0.2ml，每天一次；高剂量组小鼠每只每次给药0.3ml， 每天一次；对照组小鼠每只每次给予0.3ml生理盐水，每天一次；各组小鼠均每天定时灌胃 给药。连续灌胃30d，建模期间自由饮食和饮水。
2.小鼠负重游泳实验
末次灌胃30min后称质量，每只小鼠尾部负自身体质量5％铅皮，置于游泳槽内，水深 40cm，水温25℃，记录自游泳开始至死亡时间。
3.血乳酸测定
末次灌胃30min后负自身体质量2％铅皮在水温27℃的水中游泳60min，安静15min后 拔眼球取血，测定血乳酸含量。
4.肝糖原测定
末次给样30min,在温度为30℃的水中游泳90min,立即处死,取肝脏经生理盐水漂 洗后用滤纸吸干,精确称取肝脏100mg用试剂盒测定。
5血清尿素氮测定
末次给样30min，在温度为30℃的水中游泳90min，采血测定。
二、实验结果
1、抗疲劳口服液对小鼠负重游泳时间的影响
疲劳的最直接和最客观的表现是运动耐力的下降，负重游泳获得实验数据一直以来被用 来反映运动耐力的重要指。表1结果表明，连续灌胃30d后，随着剂量的增加小鼠负重游泳 时间呈递增趋势，中、高剂量组比对照组明显延长，差异有统计学意义。研究结果证明抗疲 劳口服液具有良好的抗疲劳活性。
表1各组小鼠负重游泳时间实验结果(n＝10)
2、抗疲劳口服液对小鼠运动后血乳酸的影响
由表2可知，高、中剂量的血乳酸水平明显低于对照组(P<0.05)，各剂量组血乳酸含量 无显著性差异(P>0.05)。长时间的剧烈运动将导致机体相对缺氧和糖酵解作用加快，进而产 生大量的乳酸，因此，其水平反映了机体的有氧代谢能力。运动结束后15-50min是血乳酸恢 复时间，该实验结果说明抗疲劳口服液具有减少乳酸生成或加速乳酸消除的作用，达到延缓 疲劳产生或加速疲劳消除的作用。
表2各组小鼠血乳酸实验结果(n＝10)
3、抗疲劳口服液对小鼠运动后肝糖原储备量的影响
肝糖原是机体重要的能量储备，当糖原耗竭将会影响运动的持久力，因此肝糖原作为反 应疲劳程度的重要指标。表3结果表明，各剂量组小鼠的肝糖原含量均高于空白对照组，且 达到了显著差异水平，说明抗疲劳口服液能显著提高小鼠肝糖原含量，增强抗疲劳能力。
表3各组小鼠肝糖原实验结果(n＝10)
4、抗疲劳口服液对小鼠运动后血清尿素氮的影响
剧烈运动中，血清尿素氮的增加是由机体动用蛋白质和氨基酸分解供能而产生的。较大 负荷运动后，血清尿素氮明显增加，且蛋白质分解代谢加强不仅发生在不适运动时，还会延 续到运动后的休息期，血中尿素氮在运动后较长时间持续升高。由表4可见，三个剂量组与 空白对照组相比，血清尿素含量明显下降，高剂量组显著低于对照组(P<0.05)，说明抗疲劳 口服液能抑制运动后血清尿素氮升高的作用。
表4各组小鼠血清尿素氮实验结果(n＝10)
三、结论
本发明制备的香菇抗疲劳口服液延长小鼠力竭游泳时间，降低了血乳酸含量、血清尿素 氮含量，增加了肝糖原含量。高剂量组效果最为显著，较空白对照组力竭游泳时间延长了 44.4％，血乳酸减少了35.7％，血清尿素氮减少了25.1％，肝糖原含量增加了130.5％，表明香 菇抗疲劳口服液具有抗疲劳的作用。
实施例7：对照实验
本实施例将按照实施例1的配方和方法制备的口服液与利用现有技术中常用方法(加热浸 煮法、复合酶解法)和实施例1简化法制备的抗疲劳口服液进行比较，通过对比营养成分含量、 小鼠抗疲劳效果来说明本发明工艺方法步骤所产生的有益效果。实验方法及结果如下。
一、实验方法
1.处理组1：加热煮沸制备抗疲劳口服液
配方为：花脸香菇70g、枸杞子20g、芦荟10g、牛磺酸45mg/100ml、左旋肉碱80mg/100ml 和蜂蜜5g/100ml为原料制成。
具体步骤如下：
(1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后分别称取70g、20g和10g；
(2)取花脸香菇切块处理，芦荟去除表皮，加入枸杞子常规条件(不设置温度)打浆破 碎；
(3)向混合物中加入其15倍体积水浸泡4h，加热煮沸保持2h，过滤；
(4)将滤渣、牛磺酸和左旋肉碱混合后，加入其7倍体积的水，加热煮沸并保持90min， 然后再次过滤。将过滤后获得的滤液与步骤(3)过滤后获得的滤液混合均匀；
(5)将步骤(4)混合液在60℃下浓缩至花脸香菇、枸杞子和芦荟低温破碎后浆液总体积 之和的15倍；
(7)每100ml浓缩液中添加5g蜂蜜，混合均匀；
(8)通过90℃高温瞬时灭菌45-60s，最后装瓶。
2.处理组2：混合酶解法制备抗疲劳口服液
配方为：花脸香菇70g、枸杞子20g、芦荟10g、牛磺酸45mg/100ml、左旋肉碱80mg/100ml 和蜂蜜5g/100ml为原料制成。
具体步骤如下：
(1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后分别称取70g、20g和10g；
(2)取花脸香菇切块处理，芦荟去除表皮，加入枸杞子常规条件(不设置温度)打浆破 碎；
(3)向混合物中加入1g纤维素酶和0.5g木瓜蛋白酶，加入其40倍体积的水，50℃条件 下酶解3h。再升温至95℃保持20min进行灭酶。
(4)将步骤(3)酶解反应物过滤除渣。
(5)将步骤(4)滤液在60℃下浓缩至花脸香菇、枸杞子和芦荟低温破碎后浆液总体积之 和的15倍；
(6)每100ml浓缩液中添50mg牛磺酸、100mg左旋肉碱和5g蜂蜜，混合均匀；
(7)通过90℃高温瞬时灭菌45-60s，最后装瓶。
3.处理组3：实施例1简化方法制备抗疲劳口服液
配方为：花脸香菇70g、枸杞子20g、芦荟10g、牛磺酸45mg/100ml、左旋肉碱80mg/100ml 和蜂蜜5g/100ml为原料制成。
具体步骤如下：
(1)将花脸香菇、枸杞子和芦荟清洗沥干后分别称取70g、20g和10g；
(2)取花脸香菇切块处理，芦荟去除表皮，加入枸杞子常规条件(不设置温度)打浆破 碎；
(3)向混合物中加入其20倍体积60℃水，超声功率500W，超声浸提2次，每次60min， 过滤；
(4)向过滤后的滤渣中加入其10倍体积的60℃水，超声功率500W，超声浸提2次，每 次60min，然后再次过滤。将过滤后获得的滤液与步骤(3)过滤后获得的滤液混合均匀；
(5)将步骤(4)混合液在60℃下浓缩至花脸香菇、枸杞子和芦荟低温破碎后浆液总体积 之和25倍；
(6)每100ml浓缩液中添50mg牛磺酸、100mg左旋肉碱和5g蜂蜜，混合均匀；
(7)通过90℃高温瞬时灭菌45-60s，最后装瓶。
4.多糖含量测定
多糖含量测定采用苯酚-硫酸法。
5.蛋白含量测定
蛋白含量测定采用考马斯亮蓝发。
6.氨基酸含量测定
使用日立L-8900自动氨基酸分析仪进行测定。
7.维生素C含量测定
采用2，4-二硝基苯肼比色法测定VC含量。
8.模型建立方法
取健康雄性小鼠，实验前适应5d，随机分成4组：对照组小鼠每只给药0.3ml实施例1 方法制备抗疲劳口服液，每天一次；处理组1组小鼠每只每次给药0.3ml加热煮沸制备抗疲 劳口服液，每天一次；处理组2组小鼠每只每次给药0.3ml混合酶解法制备抗疲劳口服液， 每天一次；处理组3组小鼠每只每次给药0.3ml实施例简化方法制备抗疲劳口服液，每天一 次；各组小鼠均每天定时灌胃给药。连续灌胃30d，建模期间自由饮食和饮水。
9.小鼠负重游泳实验
同实施例6。
10.血乳酸测定
同实施例6。
11.肝糖原测定
同实施例6。
12.血清尿素氮测定
同实施例6。
二、实验结果
1、不同方法制备抗疲劳口服液中营养素含量测定
由表5可知，实施例方法制备的抗疲劳口服液其多糖、蛋白质含量、氨基酸含量和维生 素C含量都明显高于处理组，着说明采用该实施例1方法能更有效的提取原料中的营养成分， 并且降低营养物质在加工过程中的损失。
表5不同方法制备抗疲劳口服液中营养素含量测定结果
2、不同方法制备抗疲劳口服液对小鼠抗疲劳的影响
由表6可知，不同方法制备的抗疲劳口服液抗疲劳效果不同，对照组小鼠与处理组1、 处理组2和处理组3的小鼠相比其负重游泳时间更长、血乳酸含量更少、肝糖原含量更高并 且血清尿素氮含量也共更高，该结果说明采用实施例1方法制备的口服液含有更多的活性成 分，其抗疲劳效果最显著。
表6不同方法制备抗疲劳口服液对小鼠抗疲劳的影响(n＝10)
三、结论
根据以上实验结果，采用本发明工艺方法制备的口服液在成品营养素含量和抗疲劳效果 上均优于加热煮沸法、复合酶解法和实施例1简化法制备的口服液。本发明配方中的植物原 料破碎处理均在30℃以下进行，避免了操作过程中仪器生热对原料造成的影响，同时采用 50-60℃水浴超声浸提的方法，不同于煮沸法浸提，本发明方法对原料成分和最后产品的风味 影响小，营养成分的损失小，并且比复合酶解法对营养素提取率更高。除去表皮的芦荟打浆 后直接加入，牛磺酸和左旋肉碱在灭菌前添加，最大程度保留了其原有的营养物质并且简化 了工艺。
虽然本发明已以较佳的实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的 人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可以做各种改动和修饰，因此本发明的保护范围应 该以权利要求书所界定的为准。