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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810998790.5 (22)申请日 2018.08.30 (71)申请人 辽宁省风沙地改良利用研究所 地址 123000 辽宁省阜新市细河区中华路 东段55号 (72)发明人 于树涛 孙泓希 于国庆 史普想 王虹 任亮 尤淑丽 崔雪艳 赵立仁 王海新 于洪波 (74)专利代理机构 沈阳圣群专利事务所(普通 合伙) 21221 代理人 张立新 (51)Int.Cl. A01H 1/04(2006.01) A01G 31/00(2018.01) (54)发明名称 一种室内筛。
2、选花生耐寒种植的方法 (57)摘要 本发明公开了一种室内筛选花生耐寒种植 的方法， 包括以下步骤：（1） 种子精选上；（2） 沙子 处理： 选择河沙， 经粗筛处理后， 进行高压灭菌， 蒸馏水完全浇透后置于2培养箱中进行预冷处 理；（3） 萌发处理： 25下用蒸馏水浸种12h， 水份 充分浸没种子；（4） 耐寒处理： 浸种后的种子播种 在饱含水份的沙子中， 单粒播种， 种子间距离大 于3cm， 种子覆盖沙子0.5cm1cm左右， 2培养箱 中培养2d4d；（5） 耐寒鉴定： 转入25培养箱中 正常发芽至7d， 以发芽率和芽长/种长的比值作 为耐寒性标准。 本发明利用沙培法结合低温胁迫 花生发芽，。
3、 模拟花生萌发期受到的低温胁迫， 对 花生种质进行耐寒资源筛选， 该方法接近田间生 产。 权利要求书1页 说明书5页 CN 109122305 A 2019.01.04 CN 109122305 A 1.一种室内筛选花生耐寒种质的方法， 其特征在于包括以下步骤： （1） 种子精选： 选择整齐一致、 饱满度好， 无损伤、 无裂纹、 无大小粒， 色泽鲜艳的花生种仁作种子， 种 仁出芽率达95%以上； （2） 沙子处理： 选择河沙， 经粗筛处理后， 进行高压灭菌， 蒸馏水完全浇透后置于2培养箱中进行预 冷处理； （3） 萌发处理： 25下用蒸馏水浸种12h， 水份充分浸没种子； （4） 耐寒处理： 。
4、浸种后的种子播种在饱含水份的沙子中， 单粒播种， 种子间距离大于3cm， 种子覆盖沙 子0.5cm1cm 左右， 2培养箱中培养2d4d； （5） 耐寒鉴定： 转入25培养箱中正常发芽至7d， 以发芽率和芽长/种长的比值作为耐寒性标准。 2.根据权利要求1所述的一种室内筛选花生耐寒种质的方法， 其特征在于， 所述耐寒性 标准为： 发芽率在86%100%时耐寒性最强， 发芽率在61%85%时耐寒性强， 发芽率在46%60% 时耐寒性中等， 发芽率在31%45%时耐寒性弱， 30%以下时发芽率耐寒性最弱； 芽长/种长 1.0耐寒性最强， 1.0芽长/种长0.5耐寒性强， 0.5芽长/种长0.1 耐。
5、寒性弱， 芽长/种 长0.1耐寒性最弱。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 109122305 A 2 一种室内筛选花生耐寒种植的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种花生选育方法， 尤其是涉及一种室内筛选花生耐寒种质的方法。 背景技术 0002 花生是我国重要的油料作物和经济作物， 并且花生在我国种植范围较广， 北方已 种植到黑龙江省第一积温带， 然而在我国东北花生产区， 5月播种遇寒流， 低温天气易使花 生发生大面积低温冷害而烂种， 生理表现为代谢弱， 生长缓慢， 根系吸水减少， 蒸腾作用减 弱， 导致补种或毁种， 导致严重减产。 所以为了减少花生播种后由于低温造成的损失， 有必。
6、 要通过品种筛选， 找到具有播种后抵御极端天气的种质资源， 为耐寒花生新品种选育提供 依据。 0003 花生耐寒资源筛选最贴近生产的方法是在春季以早播试验进行， 这样筛选出来的 资源与生产实际相符合， 但是受季节影响， 每年只能在东北的春季方能开展， 如果外界温度 变化不稳定， 试验结果也不同。 因此， 许多科研工作者采用室内水培方法进行耐寒资源筛 选， 该方法是采用低温培养箱、 层析柜等仪器进行， 然而， 本课题组多年进行室内耐寒花生 水培筛选， 发现该方法重复性较差， 获得的试验数据不稳定， 并且与田间早播试验结果也存 在较大差异。 所以， 急需寻找一种适合室内进行筛选花生耐寒种质的方法，。
7、 加快耐寒花生新 品种选育。 发明内容 0004 本发明的目的是提供一种室内筛选花生耐寒种质的方法， 该方法利用沙培法结合 低温胁迫花生发芽， 模拟花生萌发期受到的低温胁迫， 对花生种质进行耐寒资源筛选， 该方 法接近田间生产。 0005 为了解决现有技术存在的问题， 本发明采用的技术方案如下： 一种室内筛选花生耐寒种质的方法， 包括以下步骤： （1） 种子精选： 选择整齐一致、 饱满度好， 无损伤、 无裂纹、 无大小粒， 色泽鲜艳的花生种仁作种子， 种 仁出芽率达95%以上； （2） 沙子处理： 选择河沙， 经粗筛处理后， 进行高压灭菌， 蒸馏水完全浇透后置于2培养箱中进行预 冷处理； （3。
8、） 萌发处理： 25下用蒸馏水浸种12h， 水份充分浸没种子； （4） 耐寒处理： 浸种后的种子播种在饱含水份的沙子中， 单粒播种， 种子间距离大于3cm， 种子覆盖沙 子0.5cm1cm 左右， 2培养箱中培养2d4d； （5） 耐寒鉴定： 说 明 书 1/5 页 3 CN 109122305 A 3 转入25培养箱中正常发芽至7d， 以发芽率和芽长/种长的比值作为耐寒性标准。 0006 所述耐寒性标准为： 发芽率在86%100%时耐寒性最强， 发芽率在61%85%时耐寒性 强， 发芽率在46%60%时耐寒性中等， 发芽率在31%45%时耐寒性弱， 30%以下时发芽率耐寒 性最弱； 芽长/种。
9、长1.0耐寒性最强， 1.0芽长/种长0.5耐寒性强， 0.5芽长/种长0.1 耐寒性弱， 芽长/种长0.1耐寒性最弱。 0007 本发明所具有的优点与有益效果是： 本发明一种室内筛选花生耐寒种质的方法， 是由25下用蒸馏水浸种12h， 而后转入2 预冷的饱含水份的沙子容器中， 2低温处理2d4d， 而后转入25培养箱中正常发芽至 7d， 以发芽率和芽长/种长的比值作为抗寒性标准， 对花生萌发期的耐寒性进行鉴定。 本发 明由于是利用沙培法结合低温胁迫花生发芽， 模拟花生萌发期受到的低温胁迫， 对花生种 质进行耐寒资源筛选， 该方法接近田间生产。 本发明通过两年早播试验结果， 获得耐寒与不 耐寒。
10、花生种质， 采用水培法、 沙培法和土培法进行对比试验， 最终确定以沙培法进行室内筛 选与早播试验结果接近， 该方法最符合生产实际。 具体实施方式 0008 为了进一步说明本发明， 下面结合实施例对本发明进行详细地描述， 但不能将它 们理解为对本发明保护范围的限定。 0009 本发明一种室内筛选花生耐寒种质的方法， 包括以下步骤： （1） 种子精选： 选择整齐一致、 饱满度好， 无损伤、 无裂纹、 无大小粒， 色泽鲜艳的花生种仁作种子， 种 仁出芽率达95%以上； （2） 沙子处理： 选择河沙， 经粗筛处理后， 进行高压灭菌， 蒸馏水完全浇透后置于2培养箱中进行预 冷处理； （3） 萌发处理： 。
11、25下用蒸馏水浸种12h， 水份充分浸没种子； （4） 耐寒处理： 浸种后的种子播种在饱含水份的沙子中， 单粒播种， 种子间距离大于3cm， 种子覆盖沙 子0.5cm1cm左右， 2培养箱中培养2d6d； （5） 耐寒鉴定： 转入25培养箱中正常发芽至7d， 以发芽率和芽长/种长的比值作为耐寒性标准。 0010 结合田间早播试验， 明确花生耐寒标准。 0011 发芽率标准为： 发芽率在86%100%时耐寒性最强， 发芽率在61%85%时耐寒性强， 发芽率在46%60%时耐寒性中等， 发芽率在31%45%时耐寒性弱， 30%以下时发芽率耐寒性最 弱。 芽长/种长标准为： 芽长/种长1.0耐寒性最。
12、强， 1.0芽长/种长0.5耐寒性强， 0.5芽 长/种长0.1 耐寒性弱， 芽长/种长0.1耐寒性最弱。 0012 田间试验： 1、 试验材料的田间重复性鉴定： 供试材料38份 （表1） ， 试验地点在辽宁省风沙地改良利用研究所旱作农业基地 （121 说 明 书 2/5 页 4 CN 109122305 A 4 70 E， 42 06 N） 进行。 设置不同播期， 分别于2016年设置3次播期： 4月15日、 4月26日、 5月5 日， 和2017年设置5次播期： 4月24日、 5月1日、 5月8日、 5月15日、 5月19日， 进行重复性验证。 每份材料选30粒种子， 单粒播种， 穴距12。
13、cm， 播种10d后分别进行调查， 记录出苗数。 结合两 年早播试验结果， 以5月1日至5月5日时间段为标准， 此时-5cm地温， 最低温度平均为9。 2016年5月3日， -5cm地温最低温度为5； 2017年5月5日， -5cm地温最低温度为4， 以最后 一次调查的出苗率为准， 候选出处于不同耐寒指标的种质作为试验材料。 0013 表1 早播供试的花生材料 2、 试验材料的室内不同方法筛选： 选择田间候选的6份材料， 采用水培、 沙培和土培方法进行室内低温方法筛选。 0014 （1） 试验品种挑选整齐一致、 饱满度好， 无损伤、 无裂纹、 无大小粒， 色泽鲜艳的花 生种仁作种子， 籽仁出芽。
14、率达95%以上， 每个品种选择30粒种子， 3次重复， 25培养箱下用 蒸馏水浸种12h， 以水没过种子为宜。 0015 （2） 预处理： 设置低温培养箱温度为2， 放入充足的蒸馏水备用， 同时用于水培 法。 0016 沙子处理： 选择河沙， 经粗筛处理后， 进行高压灭菌， 置于塑料盒中， 蒸馏水完全浇 透后， 置于2培养箱中进行预冷。 0017 土壤处理： 选择耕层土， 经粗筛处理后， 进行高压灭菌， 置于塑料盒中， 处理方法同 沙子， 置于2培养箱中进行预冷。 0018 （3） 不同处理下播种方法： 水培法将浸种后的种子放入铺一层滤纸的培养皿中， 倒入预冷的蒸馏水， 不超过 种子的1/2位。
15、置， 盖好培养皿。 0019 沙培法将浸种后的种子放入预处理的沙子中， 单粒播种， 种子间距离大于 3cm， 种子覆盖沙子0.5cm1cm 左右， 盖好塑料盖。 0020 土培法将浸种后的种子放入预处理的土壤中， 单粒播种， 种子间距离大于 2cm， 种子覆盖沙子1cm左右， 盖好塑料盖。 0021 （4） 胁迫处理方法： 说 明 书 3/5 页 5 CN 109122305 A 5 将以上不同处理的花生置于2培养箱中， 分别低温胁迫2d、 4d和6d， 最后转入25中 正常发芽7d， 分别测定发芽数、 芽长和种长。 0022 （5） 不同处理方法发芽率结果比较： 25中正常发芽7d后， 对低。
16、温胁迫2d和4d的发芽数、 芽长和种长进行测量， 整理3次重 复， 统计结果见表2和表3， 需要说明的是低温胁迫6d处理后， 多数花生出现烂种现象， 所以 这里不做统计。 0023 表2 不同试验方法下低温胁迫2d和4d下发芽率 表2结果表明， 与田间出苗率为标准， 从水培、 沙培和土培三种方法变化趋势来看， 水培 芽率一直较高， 难以区分不耐寒资源； 土培芽率来看， 发芽率普遍较低， 难以区分耐寒资源， 以上两种方法均与实际相差较多； 而从沙培数值变化情况来看， 变化趋势较为稳定， 且与田 间出苗率范围相吻合。 0024 表3 不同试验方法下低温胁迫2d和4d下芽长/种长 表3结果表明， 与。
17、田间出苗率为标准， 从水培、 沙培和土培三种方法变化趋势来看， 水培 与土培变化不稳定， 而沙培整体变化较为稳定。 0025 通过水培、 沙培和土培方法比较， 最终候选出沙培法可在室内进行耐寒种质的筛 选。 0026 、 耐寒标准的确定 依据本发明早播试验与室内沙培法获得的出苗率结果， 推算出耐寒花生的标准为： 发 芽率在86%100%时耐寒性最强， 发芽率在61%85%时耐寒性强， 发芽率在46%60%时耐寒性 中等， 发芽率在31%45%时耐寒性弱， 30%以下时发芽率耐寒性最弱。 0027 从室内沙培法获得的芽长和种长的比值， 推算出花生耐寒标准为： 芽长/种长 1.0耐寒性最强， 1.0芽长/种长0.5耐寒性强， 0.5芽长/种长0.1 耐寒性弱， 芽长/种 长0.1耐寒性最弱。 说 明 书 4/5 页 6 CN 109122305 A 6 0028 以上所述仅是本发明的优选实施方式， 应当指出， 对于本技术领域的普通技术人 员来说， 在不脱离本发明原理的前提下， 还可以做出若干改进和润饰， 这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。 说 明 书 5/5 页 7 CN 109122305 A 7 。