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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610030276.3 (22)申请日 2016.01.18 A23L 27/24(2016.01) (71)申请人 浙江农林大学 地址 311300 浙江省杭州市临安市环城北路 88 号 (72)发明人 余学军 郑剑 (74)专利代理机构 杭州浙科专利事务所 ( 普通 合伙 ) 33213 代理人 张维润 (54) 发明名称 一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的 方法 (57) 摘要 本发明公开了一种竹笋加工剩余物制备固态 酵素调味品的方法， 其特征在于由以下步骤制备 ： 1） 原料匀浆制备 ； 2） 物料混合 ； 3） 浸提 。
2、； 4） 过滤 ； 5） 培蒸灭菌 ； 6） 发酵 ； 7） 后处理 ； 8） 调配 ； 9） 均 质 ； 10） 脱气 ； 11） 杀菌 ； 12） 干燥。本发明利用笋 蒲头自身的营养物质氨基酸、 膳食纤维、 糖等和高 活性酶， 进行发酵， 并辅以甘草、 箬竹叶增香调味 和抑制杂菌生长， 辅以生姜降低竹笋的寒凉， 得竹 笋酵素液， 将该酵素液与笋蒲头匀浆液， 混匀， 干 燥， 得到固体竹笋酵素调味品。该调味品， 不仅含 有酵素的营养物质和多量的鲜味物质氨基酸， 味 道鲜美， 富含竹笋膳食纤维， 解决了笋蒲头废弃物 污染问题。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (1。
3、2)发明专利申请 权利要求书2页 说明书7页 CN 105533627 A 2016.05.04 CN 105533627 A 1.一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于由以下步骤制备： 1） 原料匀浆制备： 收集竹笋加工的剩余物-新鲜笋蒲头去杂、 清洗干净后预粉碎， 而后 经匀浆机匀浆成0.1-0.3mm的笋蒲头匀浆， 甘草和箬竹叶用水浸泡0.5-1小时捞出， 生姜去 皮洗净切片， 按一定的质量比进行混合， 混合均匀后破碎成0.1-0.3mm的混合匀浆； 2） 物料混合： 按照如下质量比进行混合， 笋蒲头匀浆： 混合匀浆： 水=1000:50-200:300- 600， 制。
4、得混合物料； 3） 浸提： 将混合物料在超声功率750-1500W条件下， 浸提30-50分钟； 4） 过滤： 用板框压滤机或者厢式压滤机对浸提后的混合物料进行过滤， 过滤压力为 0.8-1.5Mpa； 5） 培蒸灭菌： 将过滤后的混合物料进行培蒸灭菌， 强度为在95-115的温度条件下连 续灭菌20-60分钟， 然后冷却至25-30； 6） 发酵： 将活化后制备的酵母菌菌液、 双歧杆菌菌液、 嗜酸乳杆菌菌液、 保加利亚乳杆 菌菌液、 嗜热链球菌菌液按一定的体积比混合， 作为发酵种子液， 将发酵种子液接种于灭菌 冷却后的混合物料中， 在无氧级嫌气发酵罐中进行二级发酵， 控制无氧级嫌气发酵罐中含。
5、 氧量低于5%； 7） 后处理： 发酵结束后， 出罐， 发酵产物先用双联过滤器进行过滤， 滤液于离心机中进 行离心沉降， 收取上清液制得笋蒲头酵素； 8） 调配： 将笋蒲头酵素、 笋蒲头匀浆、 食盐、 麦芽糊精按质量比3-6:2-3:1-2:1-2进行混 合， 混合后在夹层锅中搅拌溶解均匀， 控制固形物含量在45-50%之间， 制得混合浆液； 9） 均质： 将混合浆液用30-40Mpa的压力在均质机中进行均质； 10） 脱气： 采用真空脱气机对均质后的浆液进行脱气处理， 脱气条件为： 温度40-50， 压强为16-25KPa； 11） 杀菌： 采用辐照杀菌， 射线， 辐照剂量9.5KGy； 1。
6、2） 干燥： 采用喷雾干燥器或真空冷冻干燥， 制得固体酵素调味品。 2.如权利要求1所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于 步骤1） 中甘草、 生姜、 箬竹叶的质量比为甘草： 生姜： 箬竹叶=10:50:20。 3.如权利要求1所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于 步骤2） 中笋蒲头匀浆液： 混合匀浆液： 水的质量比为1000： 130： 450。 4.如权利要求1所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于 步骤6） 中酵母菌菌液、 双歧杆菌菌液、 嗜酸乳杆菌菌液、 保加利亚乳杆菌菌液、 嗜热链球菌 菌液的体积比为， 酵母菌。
7、菌液： 双歧杆菌菌液： 嗜酸乳杆菌菌液： 保加利亚乳杆菌菌液： 嗜热 链球菌菌液=1:1:2:2:1。 5.如权利要求1所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于 步骤6） 中的二级发酵包括第一阶段和第二阶段， 所述第一阶段发酵温度为32-34度， 发酵液 PH为6-6.5， 发酵时间为24-48小时； 第二阶段发酵温度为36-38度， 发酵液PH为5-6， 发酵时 间为48-96小时。 6.如权利要求1所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于 步骤6） 中发酵种子液的接种量为发酵物料总重量的4-6%。 7.如权利要求1所述的一种竹笋加工剩余物制备固态。
8、酵素调味品的方法， 其特征在于 权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 105533627 A 2 步骤7） 中离心机转速为2000-5000转/分钟， 离心时间为5-10分钟。 8.如权利要求1所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于 步骤12） 喷雾干燥条件为： 进风温度160-190， 排风温度90-96， 干燥后物料含水量 3.6% ； 真空冷冻干燥条件为： 真空度30-100Pa， 搁板温度前2h， 50-60， 然后36-40， 物料 厚度3-6mm， 冷阱温度零下30到零下40。 权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 105533627 A 3 一种竹。
9、笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法 技术领域 0001 本发明属于食品加工技术领域， 具体涉及一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味 品的方法。 背景技术 0002 调味品是泛指运用于各种调味手段， 调和食品滋味的食品原料。 开门七件事: “柴、 米、 油、 盐、 酱、 醋、 茶” 中3个是调味品， 可见调味品在人们日常生活中的重要性。 现今很多调 味品中生产中滥用食品添加剂， 使得调味品安全性难以保证。 同时， 随着生活水平的提高， 民以食为天的中国人， 现今想到的不仅是好吃， 更注重健康， 这要求调味品朝着复合方便 化、 营养保健化等方向发展。 因此， 研发一种不含添加剂的纯天然的兼具保健功。
10、效的调味品 实是必须。 0003 酵素是指经过发酵的营养素， 以发酵的方法使水果蔬菜等原料先行完成消化步 骤， 得到的产品就是酵素。 酵素进入肠胃后不必再消化， 可以直接被身体吸收， 吸收利用率 高。 因此， 不仅可以减少体内原有酵素的消耗外， 还可以减轻身体各器官的负担。 0004 竹笋富含多种氨基酸、 蛋白质和维生素， 其含量均高于一般水果和蔬菜， 特别是竹 笋中的氨基酸、 膳食纤维、 植物黄酮和微量元素硒、 钼、 铬、 锰等， 具有调节机体代谢、 增进机 体健康的多种功效， 在对肥胖、 高血压、 高脂血症、 心脏病、 白血病、 大肠癌、 肾炎、 水肿、 膀胱 炎等的预防和治疗中， 具有很。
11、强的抑制作用和药理功效。 同时， 竹笋的氨基酸含量丰富， 经 发酵转化之后， 又可产生多种鲜味成分， 因此， 可以用于作为一种天然植物来源的食品增鲜 剂和调味料使用， 其有别于来自水产的提取物嘌呤类鲜味剂， 不会导致痛风等疾病的发生。 0005 目前， 国内外相继出现了水果酵素、 蔬菜酵素、 谷物酵素等产品。 但现有的酵素产 品多是以不同的水果蔬菜或者添加名贵中草药如虫草等进行复合， 复合后通过接种发酵菌 种， 制成酵素初提液， 种类繁多， 成本很高， 难以普及大众， 发酵可控性差， 风味难以调节。 还 有通过添加乳糖或淀粉做载体， 明胶， 羧甲基纤维素钠， 甲基纤维素、 聚乙烯吡咯烷酮等制 。
12、成各种剂型， 该种制备方法， 由于多种赋形剂的添加， 容易造成肠胃功能紊乱， 引起便秘等 不良反应。 还有通过把虫草等多种药食同源的药材同果蔬一起粉碎， 加入酵素液中， 进行再 发酵获得产品， 或者是混合多种果蔬、 淀粉类原料、 米醋等， 不接种菌种， 自然发酵而成酵素 液， 上述制备方法虽然对众多的原料的功效一一陈述， 但是按照药理学的知识来看， 众多的 药材和食材混合起来， 没有明确的配伍说明， 功效方面难以把控， 是否会发生化学反应从而 产生有害物质， 也令人担忧。 发明内容 0006 针对现有技术中存在的问题， 本发明提供一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味 品的方法。 0007 本发明。
13、通过以下技术方案加以实现： 所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于由以下步骤制 说 明 书 1/7 页 4 CN 105533627 A 4 备： 1） 原料匀浆制备： 收集竹笋加工的剩余物-新鲜笋蒲头去杂、 清洗干净后预粉碎， 而后 经匀浆机匀浆成0.1-0.3mm的笋蒲头匀浆， 甘草和箬竹叶用水浸泡0.5-1小时捞出， 生姜去 皮洗净切片， 按一定的质量比进行混合， 混合均匀后破碎成0.1-0.3mm的混合匀浆； 2） 物料混合： 按照如下质量比进行混合， 笋蒲头匀浆： 混合匀浆： 水=1000:50-200:300- 600， 制得混合物料； 3） 浸提： 将混合。
14、物料在超声功率750-1500W条件下， 浸提30-50分钟； 4） 过滤： 用板框压滤机或者厢式压滤机对浸提后的混合物料进行过滤， 过滤压力为 0.8-1.5Mpa； 5） 培蒸灭菌： 将过滤后的混合物料进行培蒸灭菌， 强度为在95-115的温度条件下连 续灭菌20-60分钟， 然后冷却至25-30； 6） 发酵： 将活化后制备的酵母菌菌液、 双歧杆菌菌液、 嗜酸乳杆菌菌液、 保加利亚乳杆 菌菌液、 嗜热链球菌菌液按一定的体积比混合， 作为发酵种子液， 将发酵种子液接种于灭菌 冷却后的混合物料中， 在无氧级嫌气发酵罐中进行二级发酵， 控制无氧级嫌气发酵罐中含 氧量低于5%； 7） 后处理： 。
15、发酵结束后， 出罐， 发酵产物先用双联过滤器进行过滤， 滤液于离心机中进 行离心沉降， 收取上清液制得笋蒲头酵素； 8） 调配： 将笋蒲头酵素、 笋蒲头匀浆、 食盐、 麦芽糊精按质量比3-6:2-3:1-2:1-2进行混 合， 混合后在夹层锅中搅拌溶解均匀， 控制固形物含量在45-50%之间， 制得混合浆液； 9） 均质： 将混合浆液用30-40Mpa的压力在均质机中进行均质， 使得混合浆液更加细腻 和均匀， 有利于成品质量及风味的稳定； 10） 脱气： 采用真空脱气机对均质后的浆液进行脱气处理， 脱气条件为： 40-50， 压强 为16-25Kpa， 该步骤用于防止因氧化作用引起的色泽变化及。
16、营养成分和有效成分损失； 11） 杀菌： 采用辐照杀菌， 射线， 辐照剂量9.5KGy； 12） 干燥： 采用喷雾干燥器或真空冷冻干燥， 制得固体酵素调味品。 0008 所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于步骤1） 中甘 草、 生姜、 箬竹叶的质量比为甘草： 生姜： 箬竹叶=10:50:20。 0009 所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于步骤2） 中笋 蒲头匀浆液： 混合匀浆液： 水的质量比为1000： 130： 450。 0010 所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于步骤6） 中酵 母菌菌液、 双歧杆菌菌液、 嗜。
17、酸乳杆菌菌液、 保加利亚乳杆菌菌液、 嗜热链球菌菌液的体积 比为， 酵母菌菌液： 双歧杆菌菌液： 嗜酸乳杆菌菌液： 保加利亚乳杆菌菌液： 嗜热链球菌菌液 =1:1:2:2:1。 0011 所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于步骤6） 中的 二级发酵包括第一阶段和第二阶段， 所述第一阶段发酵温度为32-34度， 发酵液PH为6-6.5， 发酵时间为24-48小时； 第二阶段发酵温度为36-38度， 发酵液PH为5-6， 发酵时间为48-96小 时。 0012 所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于步骤6） 中发 酵种子液的接种量为发酵物料总重量的。
18、4-6%。 说 明 书 2/7 页 5 CN 105533627 A 5 0013 所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于步骤7） 中离 心机转速为2000-5000转/分钟， 离心时间为5-10分钟。 0014 所述的一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 其特征在于步骤12） 喷 雾干燥条件为： 进风温度160-190， 排风温度90-96， 干燥后物料含水量 3.6% ； 真空冷 冻干燥条件为： 真空度30-100Pa， 搁板温度前2h， 50-60， 然后36-40， 物料厚度3-6mm， 冷 阱温度零下30到零下40。 0015 本发明的创新和实用之处在。
19、于， 利用竹笋加工过程中切下来的废弃物笋蒲头， 依据其自身的营养物质氨基酸、 膳食纤维、 糖等和高活性酶， 进行发酵， 并辅以甘草、 箬竹叶 进行增香调味和抑制部分杂菌生长， 辅以生姜以降低或者消除竹笋的寒凉， 得到具有独特 风味的竹笋酵素液， 然后将该酵素液与笋蒲头匀浆液,混匀， 喷雾干燥或者冷冻干燥， 得到 固体产品， 即竹笋酵素调味料。 该产品， 不仅含有酵素的营养物质和多量的鲜味物质氨基 酸， 同时味道鲜美， 富含竹笋膳食纤维， 来自于有机山珍竹笋， 是一种新型的安全绿色的 酵素调味料产品。 更重要的是， 本发明利用的是竹笋加工过程中切下来的废弃物笋蒲头， 成本极低， 该发明成功的解决。
20、了制约竹笋产业的不可食用的笋蒲头的废弃物污染问题， 变 废为宝， 将其开发了成了一种高附加值的风味独特、 安全可靠的植物酵素调味料产品， 极大 的促进了竹笋产业的环境友好型良性发展,意义深远。 具体实施方式 0016 以下结合具体实施例对本发明作进一步详细说明， 并给出具体实施方式。 0017 实施例1 一种竹笋加工剩余物制备固态酵素调味品的方法， 由以下步骤制备： 1） 原料匀浆制备： 收集竹笋加工的剩余物-新鲜笋蒲头去杂、 清洗干净后预粉碎， 而后经匀浆机匀浆成0.1- 0.3mm的笋蒲头匀浆， 甘草和箬竹叶用水浸泡0.5-1小时捞出， 生姜去皮洗净切片， 按甘草： 生姜： 箬竹叶=10:。
21、50:20的质量比进行混合， 混合均匀后破碎成0.1-0.3mm的混合匀浆； 2） 物 料混合： 按照如下质量比进行混合， 笋蒲头匀浆： 混合匀浆： 水=1000:130:450， 制得混合物 料； 3） 浸提： 将混合物料在超声功率750-1500W条件下， 浸提30-50分钟； 4） 过滤： 用板框压滤 机或者厢式压滤机对浸提后的混合物料进行过滤， 过滤压力为0.8-1.5Mpa； 5） 培蒸灭菌： 将 过滤后的混合物料进行培蒸灭菌， 强度为在95-115的温度条件下连续灭菌20-60分钟， 然 后冷却至25-30； 6） 发酵： 将活化后制备的酵母菌菌液、 双歧杆菌菌液、 嗜酸乳杆菌菌液。
22、、 保加利亚乳杆菌菌液、 嗜热链球菌菌液按酵母菌菌液： 双歧杆菌菌液： 嗜酸乳杆菌菌液： 保 加利亚乳杆菌菌液： 嗜热链球菌菌液=1:1:2:2:1的体积比混合， 作为发酵种子液， 将发酵种 子液接种于灭菌冷却后的混合物料中， 发酵种子液的接种量为发酵物料总重量的5%， 在无 氧级嫌气发酵罐中进行二级发酵， 控制无氧级嫌气发酵罐中含氧量低于5%， 二级发酵包括 第一阶段和第二阶段， 第一阶段发酵温度为32-34度， 发酵液PH为6-6.5， 发酵时间为24-48 小时； 第二阶段发酵温度为36-38度， 发酵液PH为5-6， 发酵时间为48-96小时； 7） 后处理： 发 酵结束后， 出罐， 。
23、发酵产物先用双联过滤器进行过滤， 滤液于离心机中进行离心沉降， 离心 机转速为2000-5000转/分钟， 离心时间为5-10分钟， 收取上清液制得笋蒲头酵素； 8） 调配： 将笋蒲头酵素液、 笋蒲头匀浆液、 食盐、 麦芽糊精按质量比3-6:2-3:1-2:1-2进行混合， 混合 后在夹层锅中搅拌溶解均匀， 控制固形物含量在45-50%之间， 制得混合浆液； 9） 均质： 将混 说 明 书 3/7 页 6 CN 105533627 A 6 合浆液用30-40Mpa的压力在均质机中进行均质， 使得混合浆液更加细腻和均匀， 有利于成 品质量及风味的稳定； 10） 脱气： 采用真空脱气机对均质后的浆。
24、液进行脱气处理， 脱气条件 为： 40-50， 压强为16-25KPa； 11） 杀菌： 采用辐照杀菌， 射线， 辐照剂量9.5KGy； 12） 干燥： 采用喷雾干燥器或真空冷冻干燥， 制得固体酵素调味品， 喷雾干燥条件为： 进风温度160- 190， 排风温度90-96， 干燥后物料含水量 3.6% ； 真空冷冻干燥条件为： 真空度30- 100Pa， 搁板温度前2h， 50-60， 然后36-40， 物料厚度3-6mm， 冷阱温度零下30到零下40 。 0018 实施例2 实施例2的制备方法同实施例1， 不同之处在于步骤2） 中， 笋蒲头匀浆液： 甘薯渣匀浆 液： 混合匀浆液： 水的质量比。
25、为1000： 50： 50： 300； 步骤4） 中的接种量为4%。 0019 实施例3 实施例3的制备方法同实施例1， 不同之处在于步骤2） 中， 笋蒲头匀浆液： 甘薯渣匀浆 液： 混合匀浆液： 水的质量比为1000： 300： 200： 600； 步骤4） 中的接种量为6%。 0020 实验例： 竹笋酵素的减肥功能检验 实验仪器： 高速冷冻离心机(Sigma 3-16K)， 灌胃针， 电子秤， 手术剪， 高压灭菌锅。 0021 动物与实验方法 ： Wistar大鼠， 雄性， 体重22023g， 购自于浙江省疾控中心。 0022 实验分组： 大鼠适应性饲养一周， 随机分为 3 组： 正常组(。
26、n=10)： 给予维持饲料， 灌胃给予蒸馏水(1.5mL/100g) 模型组(n=10)： 给予高脂饲料(70%基础饲料+15%蔗糖+15%猪油)， 灌胃给予蒸馏水 (1.5mL/100g) 剂量组(n=10)： 给予高脂饲料， 灌胃给予实施例1制备的竹笋酵素 (1.5 mL/100g) 实验方法： 适应性饲养一周后， 按大鼠体重随机分为两组， 将其中10只大鼠给予正常饲 料， 作为正常组。 30只大鼠给予高脂饲料， 每周记录体重， 给食量， 撒食量和剩食量。 饲养两 周后， 给予高脂饲料的大鼠按体重增重顺序， 淘汰体重增重较低的1/3肥胖抵抗大鼠。 0023 将筛选出的20只肥胖敏感大鼠分为。
27、模型组和剂量组， 模型组和剂量组继续给予高 脂饲料， 正常组继续给予正常饲料， 剂量组给予竹笋酵素(1.5 mL/100 g)， 模型组和正常组 给予蒸馏水(1.5mL/100g)， 受试样品给予时间为六周。 实验结束后， 称量体重， 称量剩食量， 解剖取肾周围脂肪、 睾丸周围脂肪计算脂/体比。 根据 保健食品检验与评价技术规范 (2003版)， 建立大鼠肥胖模型， 观察正常组、 模型组、 竹笋酵素组大鼠的体重变化、 体内脂肪 变化、 脂/体比、 摄食量以及食物利用率等各指标， 以评价竹笋酵素的减肥作用。 0024 数据处理： 试验数据采用方差分析进行统计处理。 应用SPSS10.0软件进行方。
28、差分 析和t检验， p0.05)， 给予高 脂饲料六周后， 正常组和竹笋酵素组大鼠的末次体重显著低于模型组大鼠体重(P0.05)。 可能原因为： 脂肪重量较多的 大鼠体重会偏重， 脂肪重量较少的大鼠体重也会偏轻， 所以可能导致二者的比值没有显著 性的差异。 0030 本实验研究结果表明， 脂肪重量是大鼠体脂水平和肥胖程度衡量指标之一。 随着 体重的增长， 大鼠体内脂肪重量也相应的提高， 给予高脂饲料模型组大鼠的脂肪重量显著 高于给予正常饲料大鼠的脂肪重量， 可知高脂饲料造成了大鼠体内脂肪的积累。 给予高脂 饲料的同时给予竹笋酵素大鼠的脂肪重量显著低于给予高脂饲料模型组大鼠的脂肪重量， 表明竹笋。
29、酵素可以有效的抑制大鼠体内脂肪的积累。 0031 3.竹笋酵素对大鼠摄食量和食物利用率的影响 由1可见， 正常组、 模型组和竹笋酵素组大鼠摄食量之间差异均无显著性(P0.05)。 0032 本实验研究结果表明， 给予高脂饲料的模型组大鼠与给予正常饲料大鼠摄食量没 有显著性差异， 但高脂饲料的热量要大于正常饲料的热量， 从而引起大鼠机体的肥胖； 给予 竹笋酵素的大鼠摄食量与模型组相比没有显著性差异， 表明给酵素组摄入的热量与模型组 大鼠摄入的热量没有显著性差别， 而给酵素组的体重、 体重增重和脂肪重量却明显低于模 说 明 书 5/7 页 8 CN 105533627 A 8 型组， 表明竹笋酵素。
30、可以有效的抑制大鼠体重和脂肪重量的增长， 从而具有减肥的作用。 0033 4.结论 竹笋酵素对大鼠减肥功能研究的试验结果表明： 试验末期模型对照组体重高于正常 组， 且差异具有显著性 （p0.05） ， 说明肥胖模型成立； 各组大鼠初始体重无显著性差异， 试 验末期， 竹笋酵素组的体重、 体内脂肪重量低于模型对照组且差异具有显著性 （p0.05） ， 酵 素组大鼠的体重增重明显低于模型对照组大鼠且差异具有显著性 （P0.01） ， 而摄食量却无 明显差别， 说明竹笋酵素可以有效抑制大鼠体重增长和脂肪的积累， 动物减肥功能试验结 果阳性， 具有减肥的功效。 0034 竹笋酵素改善胃肠功能检验 实。
31、验材料： 实施例1制备的竹笋酵素， 吗丁啉片 （西安扬森制药有限公司生产， 规格 10mg30片）（10mg吗丁啉片加入蒸馏水100mL制成吗丁啉溶液， 即每毫升溶液含吗丁啉 0.1mg） ， 葡聚糖蓝 2000(Sigma) 仪器： 高速冷冻离心机(Sigma 3-16K)， 灌胃针， 电子秤， 手术剪， 高压灭菌锅， UV- 1800PC型紫外可见分光光度计， 光学显微镜 实验动物： 清洁级昆明种小白鼠60只， 体重 20-24g； 由浙江省疾控中心提供。 0035 试验方法 小鼠小肠推动功能的检测： 取清洁级昆明种小白鼠30只， 禁食24 小时， 随机分为3组， 即对照组， 竹笋酵素组，。
32、 吗丁啉组， 每组10只动物， 用苦味酸标记。 用药组分别给予竹笋酵素 原液(25.0mL/kg) 及吗丁啉溶液 (3.0mg/kg) 灌胃， 对照组给予等量生理盐水灌胃， 90分 钟后各组给予0.4mL墨汁液灌胃。 20分钟后， 颈椎脱臼处死， 打开腹腔分离肠膜， 上端至幽 门、 下端至回盲部剪取肠管， 置于托盘上。 轻轻将小肠拉成直线， 测量肠管长度作为小肠总 长度。 从幽门至墨汁前沿的距离作为 “墨汁在肠内推进距离” 。 用公式计算墨汁推进百分 率。 墨汁推进率()墨汁在肠内推进距离(cm)/小肠全长(cm)100。 根据 保健食品检 验与评价技术规范 (2003版)， 检验其改善胃肠功。
33、能。 0036 小鼠胃排空功能的检测： 将小白鼠30只随机分为竹笋酵素组、 吗丁啉组和对照组， 每组10只， 竹笋酵素组以25.0mL/kg， 吗丁啉组以 3.0mg/kg， 对照组以等容积去离子水， 分 别灌胃给药， 10分钟后灌服2葡聚糖蓝2000溶液， 每只0.5mL。 再经 30 分钟颈椎脱臼处死 动物， 开腹取出全部胃肠， 自幽门括约肌处取胃， 将其内残留色素(葡聚糖蓝2000)充分溶于 5mL去离子水中， 4000rpm离心20分钟， 取上清液， 玻璃棉滤器过滤， 滤液用UV-1800PC型紫外 可见分光光度计于620nm测吸光度， 折算为胃内色素残留量， 并求出各组均值。 以对照。
34、组均 值为 100， 各组均值与其之百分比为相对胃内色素残留率。 根据 保健食品检验与评价技 术规范 (2003版)， 检验其改善胃肠功能。 0037 数据处理： 试验数据采用方差分析进行统计处理。 应用SPSS10.0软件进行方差分 析和t检验， p0.05为差异显著， 有统计学意义。 0038 各组小鼠小肠推动功能比较结果见表2。 0039表 2 各组小鼠小肠推进功能的比较 说 明 书 6/7 页 9 CN 105533627 A 9 与正常对照组比较， P0.01 ； 与吗丁啉组比较， *P0.05。 0040 小鼠胃排空功能比较结果见表3。 0041表3各组小鼠胃内色素残留率比较 与正。
35、常对照组比较， P0.01； 与吗丁啉组比较， *P0.05。 0042 结论 本次试验研究竹笋酵素对动物的小肠推进功能和胃排空功能。 竹笋酵素对动物的小肠 推进功能试验结果表明： 竹笋酵素组动物的小肠墨汁总推进距离和推进率大于正常对照组 （生理盐水组） 且差异具有显著性 （P0.01） ， 竹笋酵素组动物的小肠墨汁总推进距离和推 进率大于吗丁啉组且差异具有显著性 （P0.05） 。 0043 竹笋酵素对动物的胃排空功能试验结果表明： 竹笋酵素组试验动物的胃内色素残 留量和相对胃内色素残留率低于正常对照组 （去离子水组） 且差异具有显著性 （P0.01） ， 竹笋酵素组试验动物的胃内色素残留量和相对胃内色素残留率低于吗丁啉组且差异具有 显著性 （P0.05） 。 0044 以上结果说明： 竹笋酵素能够加速小鼠的胃排空能力， 促进胃动力； 对于小鼠小肠 对食物的吸收也有明显的增强效果， 通过提高小肠的蠕动速度， 达到促进小肠的推进功能 的效果， 在消化系统最重要的胃肠器官， 均有很好的功效。 说 明 书 7/7 页 10 CN 105533627 A 10 。