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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610872131.8 (22)申请日 2016.10.05 (71)申请人 南宁邃丛赋语科技开发有限责任公 司 地址 530105 广西壮族自治区南宁市广西- 东盟经济技术开发区侨光路98号大地 明珠小区2幢1单元1001号房 (72)发明人 不公告发明人 (74)专利代理机构 长沙星耀专利事务所 43205 代理人 许伯严 (51)Int.Cl. A01H 4/00(2006.01) (54)发明名称 一种矮珍珠的组织培养基 (57)摘要 矮珍珠的组织培养基， 包括不同。
2、阶段的三种 培养基， 各种培养基的原料及其成分浓度如下， 初代培养基为： 在ER培养基基础上， 再添加碘酸 钾、 2,4-D和多效唑； 继代培养基为： 在MS培养基 基础上 ， 先将硝酸铵的浓度调整为1200 1300mg/L， 另外再添加尿素、 ABA、 吲哚乙酸、 谷氨 酰胺和活性炭； 生根培养基为： 在N6培养基基础 上， 另外再添加钼酸铵、 TDZ和支链淀粉， 用氢氧 化钠调节pH为7.07.2。 利用本发明所述离体培 养基对矮珍珠进行组织培养， 存活率高， 获得的 矮珍珠幼苗健壮生命力顽强， 移栽后能够快速适 应自然生长条件。 权利要求书1页 说明书3页 CN 106417016 A。
3、 2017.02.22 CN 106417016 A 1.矮珍珠的组织培养基， 其特征在于， 包括不同阶段的三种培养基， 各种培养基的原料 及其成分浓度如下， 初代培养基为： 在ER培养基基础上， 再添加碘酸钾0.10.5mg/L， 添加2,4-D 0.6 0.8mg/L， 添加多效唑1.21.3mg/L； 继代培养基为： 在MS培养基基础上， 先将硝酸铵的浓度调整为12001300mg/L， 另外再 添加尿素100120mg/L， 添加ABA33.5mg/L， 添加吲哚乙酸0.50.8mg/L， 添加谷氨酰胺 5.05.5mg/L， 添加活性炭200300mg/L； 生根培养基为： 在N6培。
4、养基基础上， 另外再添加钼酸铵0.010.02mg/L， 添加TDZ 1.5 2.0mg/L， 添加支链淀粉130150mg/L， 用氢氧化钠调节pH为7.07.2。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 106417016 A 2 一种矮珍珠的组织培养基 技术领域 0001 本发明涉及组织培养技术领域， 具体是矮珍珠的组织培养基。 背景技术 0002 矮珍珠虽属有茎水草， 但茎部却不是直立的， 而是爬行在底部生长。 由于爬行生长 的匍匐枝会呈扩散状蔓延开来， 最后铺满整个底部， 而匍匐枝上的叶片又是浓密地生长， 感 觉起来宛如草坪一般。 一般在种植矮珍珠时了避免柔软的细根无法颐利攀附在底。
5、砂之中， 因此在底砂的选择上应尽量使用较细的砂子。 矮珍珠， 几乎不到1cm高， 绿色匍匐嫩枝附有 短根组织， 对称生长的匙型叶片长0.8cm宽0.3cm， 叶尖较钝， 稍呈锯齿状， 叶柄几乎与叶片 等长。 气生叶腺可长出短茎的白色单瓣花， 直径0.3cm， 有5片花瓣、 4株雄蕊。 虽然生长蔓延 颇为缓慢， 但是， 可以长得很浓密， 其一旦长好后的密植度， 犹如碧绿的草原， 是一种装饰性 非常强的前景草。 然而， 矮珍珠传统的育苗繁殖方法产量降低， 病毒积累严重， 品种退化， 品 质和产量大幅度下降， 种植效益下降。 组培快繁技术已在很多植物上作为经济、 高效的繁殖 方法应用， 周期短、 繁。
6、殖系数高、 成本低， 并不受时间和空间的制约。 发明内容 0003 本发明针对现有技术的不足， 满足人工快速繁育、 大面积丰产栽培的需要， 提供一 种矮珍珠的组织培养基。 0004 为了实现上述目的， 本发明采用了以下技术方案： 0005 矮珍珠的组织培养基， 包括不同阶段的三种培养基， 各培养基的原料及其成分浓 度如下， 0006 初代培养基为： 在ER培养基基础上， 再添加碘酸钾0.10.5mg/L， 添加2,4-D 0.6 0.8mg/L， 添加多效唑1.21.3mg/L； 0007 继代培养基为： 在MS培养基基础上， 先将硝酸铵的浓度调整为12001300mg/L， 另 外再添加尿素。
7、100120mg/L， 添加ABA33.5mg/L， 添加吲哚乙酸0.50.8mg/L， 添加谷氨 酰胺5.05.5mg/L， 添加活性炭200300mg/L； 0008 生根培养基为： 在N6培养基基础上， 另外再添加钼酸铵0.010.02mg/L， 添加TDZ 1.52.0mg/L， 添加支链淀粉130150mg/L， 用氢氧化钠调节pH为7.07.2。 0009 与现有技术相比较， 本发明具备的有益效果： 0010 本发明培养基针对矮珍珠生长特点而设计， 能够满足矮珍珠组织培养各个阶段的 营养需要， 利用本发明所述离体培养基对矮珍珠进行组织培养， 存活率高， 获得的矮珍珠幼 苗健壮生命力。
8、顽强， 移栽后能够快速适应自然生长条件， 有效地提高矮珍珠的繁殖系数， 为 矮珍珠商业化生产提供充足的种苗源。 与播种繁殖相比， 组织培养法能有效缩短育苗周期， 能够在室内大量连续地生产， 实现工厂化、 专业化和规模化， 提高种苗的载培成活率， 提高 产量和品质。 说 明 书 1/3 页 3 CN 106417016 A 3 具体实施方式 0011 下面通过实施例对本发明的技术方案作进一步阐述。 0012 实施例1 0013 矮珍珠的组织培养基， 包括不同阶段的三种培养基， 各培养基的原料及其成分浓 度如下， 0014 初代培养基为： 在ER培养基基础上， 再添加碘酸钾0.1mg/L， 添加2。
9、,4-D 0.6mg/L， 添加多效唑1.2mg/L； 0015 继代培养基为： 在MS培养基基础上， 先将硝酸铵的浓度调整为1200mg/L， 另外再添 加尿素100mg/L， 添加ABA3mg/L， 添加吲哚乙酸0.5mg/L， 添加谷氨酰胺5.0mg/L， 添加活性炭 200mg/L； 0016 生根培养基为： 在N6培养基基础上， 另外再添加钼酸铵0.01mg/L， 添加TDZ 1.5mg/ L， 添加支链淀粉130mg/L， 用氢氧化钠调节pH为7.07.2。 0017 实施例2 0018 矮珍珠的组织培养基， 包括不同阶段的三种培养基， 各培养基的原料及其成分浓 度如下， 0019。
10、 初代培养基为： 在ER培养基基础上， 再添加碘酸钾0.5mg/L， 添加2,4-D 0.8mg/L， 添加多效唑1.3mg/L； 0020 继代培养基为： 在MS培养基基础上， 先将硝酸铵的浓度调整为1300mg/L， 另外再添 加尿素120mg/L， 添加ABA 3.5mg/L， 添加吲哚乙酸0.8mg/L， 添加谷氨酰胺5.5mg/L， 添加活 性炭300mg/L； 0021 生根培养基为： 在N6培养基基础上， 另外再添加钼酸铵0.02mg/L， 添加TDZ 2.0mg/ L， 添加支链淀粉150mg/L， 用氢氧化钠调节pH为7.2。 0022 实施例3 0023 矮珍珠的组织培养基。
11、， 包括不同阶段的三种培养基， 各培养基的原料及其成分浓 度如下， 0024 初代培养基为： 在ER培养基基础上， 再添加碘酸钾0.3mg/L， 添加2,4-D 0.7mg/L， 添加多效唑1.25mg/L； 0025 继代培养基为： 在MS培养基基础上， 先将硝酸铵的浓度调整为1250mg/L， 另外再添 加尿素110mg/L， 添加ABA 3.2mg/L， 添加吲哚乙酸0.7mg/L， 添加谷氨酰胺5.2mg/L， 添加活 性炭250mg/L； 0026 生根培养基为： 在N6培养基基础上， 另外再添加钼酸铵0 .015mg/L， 添加TDZ 1.8mg/L， 添加支链淀粉140mg/L，。
12、 用氢氧化钠调节pH为7.1。 0027 实施例4 0028 矮珍珠的组织培养方法， 包括如下步骤： 0029 (1)获取外植体并消毒 0030 选取健壮植株新生的幼嫩枝芽， 自来水洗涤枝芽表面污垢尘土， 先酒精浸泡， 再升 汞消毒， 最后无菌水冲洗干净后得到消毒外植体， 0031 (2)初代培养 说 明 书 2/3 页 4 CN 106417016 A 4 0032 将消毒外植体分割成带芽茎段， 然后接入初代培养基中培养3236天获得不定 芽， 0033 初代培养条件为： 温度为242， 湿度为6368， 光照时间为810小时/天， 光 照强度为220025001x， 初代培养第17天， 每。
13、天施加超声场12小时， 超声场功率为8 12W/cm2， 超声场频率为2022KHz， 初代培养第815天， 每天施加超声场45小时， 超声场 功率为1518W/cm2， 超声场频率为2526KHz； 0034 初代培养基为： 在ER培养基基础上， 再添加碘酸钾0.10.5mg/L， 添加2,4-D 0.6 0.8mg/L， 添加多效唑1.21.3mg/L； 0035 (3)继代培养 0036 将不定芽转移至继代培养基中培养4045天获得继代培养苗， 0037 继代培养条件为： 温度为242， 湿度为7075， 光照时间为1012小时/天， 光照强度为280032001x， 0038 继代培养。
14、基为： 在MS培养基基础上， 先将硝酸铵的浓度调整为12001300mg/L， 另 外再添加尿素100120mg/L， 添加ABA33.5mg/L， 添加吲哚乙酸0.50.8mg/L， 添加谷氨 酰胺5.05.5mg/L， 添加活性炭200300mg/L； 0039 (4)生根培养 0040 将继代培养苗转移至生根培养基中培养2025天得到矮珍珠幼苗， 0041 生根培养条件为： 温度为302， 湿度为4050， 光照时间为1215小时/天， 光照强度为350042001x， 0042 生根培养基为： 在N6培养基基础上， 另外再添加钼酸铵0.010.02mg/L， 添加TDZ 1.52.0mg/L， 添加支链淀粉130150mg/L， 用氢氧化钠调节pH为7.07.2； 0043 (5)炼苗和移栽 0044 生根培养结束后， 打开培养瓶盖， 在自然光下进行开瓶练苗57天， 然后将矮珍珠 幼苗用清水多次冲洗去除残留培养基， 移栽至自然水体中。 说 明 书 3/3 页 5 CN 106417016 A 5 。