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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610353375.5 (22)申请日 2016.05.25 (71)申请人 湖北省农业科学院农产品加工与核 农技术研究所 地址 430070 湖北省武汉市洪山区南湖大 道5号 (72)发明人 郭鹏 王轶 程薇 (74)专利代理机构 北京超凡志成知识产权代理 事务所(普通合伙) 11371 代理人 吴开磊 (51)Int.Cl. A23K 10/12(2016.01) A23K 10/37(2016.01) A23K 10/33(2016.01) A23K 10/30(20。
2、16.01) A23K 10/18(2016.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/245(2006.01) C12R 1/25(2006.01) C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称 对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法 (57)摘要 本发明公开了一种对菌糠进行复合发酵制 作饲料的方法, 首先对植物乳杆菌、 植物乳杆菌 植物亚种、 泡菜乳杆菌、 干酪乳杆菌以及枯草芽 孢杆菌进行培养, 形成植物乳杆菌菌剂、 植物乳 杆菌植物亚种菌剂、 泡菜乳杆菌菌剂、 干酪乳杆 菌菌剂以及枯草芽孢杆菌菌剂。 然后将植物乳杆 菌菌剂、。
3、 植物乳杆菌植物亚种菌剂、 泡菜乳杆菌 菌剂、 干酪乳杆菌菌剂以及枯草芽孢杆菌菌剂混 合配置成菌糠饲料发酵复合菌剂。 再在新鲜菌糠 原料中添加糖蜜、 玉米粉以及豆粕粉并进行混 合, 接入菌糠饲料发酵复合菌剂, 进行发酵。 该方 法能够提高菌糠的纤维品质, 防止菌糠腐败变 质, 提高菌糠的利用效率, 得到一种营养丰富、 适 口性好、 安全性较高的牲畜饲料。 权利要求书2页 说明书8页 CN 105961826 A 2016.09.28 CN 105961826 A 1.一种对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 其特征在于, 包括以下步骤: 对植物乳杆菌、 植物乳杆菌植物亚种、 泡菜乳杆菌、 干酪乳。
4、杆菌以及枯草芽孢杆菌进行 培养, 分别形成植物乳杆菌菌剂、 植物乳杆菌植物亚种菌剂、 泡菜乳杆菌菌剂、 干酪乳杆菌 菌剂以及枯草芽孢杆菌菌剂; 将所述植物乳杆菌菌剂、 所述植物乳杆菌植物亚种菌剂、 所述泡菜乳杆菌菌剂、 所述干 酪乳杆菌菌剂以及所述枯草芽孢杆菌菌剂混合配置成菌糠饲料发酵复合菌剂; 以及 在新鲜菌糠原料中添加糖蜜、 玉米粉以及豆粕粉并进行混合, 接入所述菌糠饲料发酵 复合菌剂, 进行发酵。 2.根据权利要求1所述的对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 其特征在于, 对所述植 物乳杆菌、 所述植物乳杆菌植物亚种、 所述泡菜乳杆菌、 所述干酪乳杆菌以及所述枯草芽孢 杆菌进行培养是将植物。
5、乳杆菌种子、 植物乳杆菌植物亚种种子、 泡菜乳杆菌种子、 干酪乳杆 菌种子以及枯草芽孢杆菌种子分别接入对应的植物乳杆菌培养基、 植物乳杆菌植物亚种培 养基、 泡菜乳杆菌培养基、 干酪乳杆菌培养基以及枯草芽孢杆菌培养基在无菌条件下进行 培养。 3.根据权利要求2所述的对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 其特征在于, 对所述植 物乳杆菌、 所述植物乳杆菌植物亚种、 所述泡菜乳杆菌、 所述干酪乳杆菌以及所述枯草芽孢 杆菌进行培养的温度为3037, 时间为4550h。 4.根据权利要求2所述的对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 其特征在于, 所述植物 乳杆菌培养基、 所述植物乳杆菌植物亚种培养基以及所。
6、述泡菜乳杆菌培养基均由蛋白胨9 11g、 酵母粉23g、 蔗糖911g、 磷酸氢二钾0.81.2g、 乙酸钠24g、 柠檬酸二胺1.5 2.5g、 七水硫酸镁0.10.3g、 硫酸锰0.040.06g以及自来水9001100g在PH6.56.8和 118125的条件下灭菌1218min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得到。 5.根据权利要求2所述的对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 其特征在于, 所述干酪 乳杆菌培养基是由酪蛋白胨911g、 肉汤提取物911g、 酵母粉46g、 葡萄糖1822g、 吐 温80 0.81.2g、 磷酸氢二钾1.52.5g、 乙酸钠46g、 柠檬酸二胺1.52.5。
7、g、 七水硫酸镁 0.10.3g、 硫酸锰0.040.06g以及自来水9001100g在PH6.26.5和118125的条件 下灭菌1218min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得到。 6.根据权利要求2所述的对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 其特征在于, 所述枯草 芽孢杆菌培养基是由蛋白胨46g、 牛肉浸取物2.54g、 氯化钠46g、 琼脂1317g以及自 来水9001100g在PH6.87.2和118125的条件下灭菌1218min后, 再在无菌条件下 冷却至室温而得到。 7.根据权利要求1所述的对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 其特征在于, 所述菌糠 饲料发酵复合菌剂由以下质量百分。
8、比含量的菌剂混合而成: 所述植物乳杆菌菌剂30 50、 所述泡菜乳杆菌菌剂1020、 所述干酪乳杆菌菌剂510、 所述植物乳杆菌植物 亚种菌剂1535以及所述枯草芽孢杆菌菌剂16。 8.根据权利要求1所述的对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 其特征在于, 在所述新 鲜菌糠原料中添加的所述糖蜜、 所述玉米粉以及所述豆粕粉的质量依次为所述新鲜菌糠原 料质量的0.52.0、 12、 35。 9.根据权利要求1所述的对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 其特征在于, 进行发酵 权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 105961826 A 2 是将所述新鲜菌糠原料、 所述糖蜜、 所述玉米粉以及所述豆粕。
9、粉混合得到的混合物堆放在 发酵槽内, 加入所述菌糠饲料发酵复合菌剂, 直至所述混合物高度距离所述发酵槽的槽口5 10cm, 进行封闭压实, 发酵36天。 10.根据权利要求9所述的对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 其特征在于, 所述混 合物每3040cm厚度均匀喷洒一次所述菌糠饲料发酵复合菌剂并调节至水分质量百分比 含量为6065。 权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 105961826 A 3 对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法 技术领域 0001 本发明涉及饲料技术领域, 具体而言, 涉及一种对菌糠进行复合发酵制作饲料的 方法。 背景技术 0002 食用菌菌糠是食用菌栽培过程中收获子。
10、实体后剩余的栽培废料, 是重要的生物质 资源。 近些年来, 我国食用菌产业迅猛发展, 食用菌工厂化生产企业数量和生产规模也日益 增大, 产生的菌糠资源量也越来越大。 据统计, 我国食用菌总产量超过2800万吨, 占世界总 产量的75以上, 每年产生3000多万吨菌糠。 目前, 这些菌糠资源仅有少量被作为原料生产 有机肥、 饲料和作为食用菌栽培基料二次利用, 大部分被当作废弃物焚烧或露天堆弃, 不仅 浪费资源, 还对环境造成严重污染。 菌糠中含有大量未被食用菌分解的木质纤维素, 结构坚 韧, 质地粗糙, 适口性较差, 同时因含有菌丝体、 蛋白质等营养物质, 极易腐败变质, 不宜直 接作为饲料原料。
11、利用, 需要经过适当地发酵处理。 发明内容 0003 本发明的目的在于提供一种对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 其能够提高菌 糠的纤维品质, 防止菌糠腐败变质, 提高菌糠的利用效率, 得到一种营养丰富、 适口性好、 安 全性较高的牲畜饲料。 0004 本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。 0005 一种对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 首先是对植物乳杆菌、 植物乳杆菌植 物亚种、 泡菜乳杆菌、 干酪乳杆菌以及枯草芽孢杆菌进行培养, 形成植物乳杆菌菌剂、 植物 乳杆菌植物亚种菌剂、 泡菜乳杆菌菌剂、 干酪乳杆菌菌剂以及枯草芽孢杆菌菌剂。 接着将植 物乳杆菌菌剂、 植物乳杆菌植物亚。
12、种菌剂、 泡菜乳杆菌菌剂、 干酪乳杆菌菌剂以及枯草芽孢 杆菌菌剂混合配置成菌糠饲料发酵复合菌剂。 之后在新鲜菌糠原料中添加糖蜜、 玉米粉以 及豆粕粉并进行混合, 接入菌糠饲料发酵复合菌剂, 进行发酵。 0006 进一步地, 本发明较佳的实施例中, 对上述植物乳杆菌、 植物乳杆菌植物亚种、 泡 菜乳杆菌、 干酪乳杆菌以及枯草芽孢杆菌进行培养是将植物乳杆菌种子、 植物乳杆菌植物 亚种种子、 泡菜乳杆菌种子、 干酪乳杆菌种子以及枯草芽孢杆菌种子分别接入对应的植物 乳杆菌培养基、 植物乳杆菌植物亚种培养基、 泡菜乳杆菌培养基、 干酪乳杆菌培养基以及枯 草芽孢杆菌培养基在无菌条件下进行培养。 0007 。
13、进一步地, 本发明较佳的实施例中, 对上述植物乳杆菌、 植物乳杆菌植物亚种、 泡 菜乳杆菌、 干酪乳杆菌以及枯草芽孢杆菌进行培养的温度为3037, 时间为4550h。 0008 进一步地, 本发明较佳的实施例中, 上述植物乳杆菌培养基、 植物乳杆菌植物亚种 培养基以及泡菜乳杆菌培养基均由蛋白胨911g、 酵母粉23g、 蔗糖911g、 磷酸氢二钾 0.81.2g、 乙酸钠24g、 柠檬酸二胺1.52.5g、 七水硫酸镁0.10.3g、 硫酸锰0.04 0.06g以及自来水9001100g在PH6.56.8和118125的条件下灭菌1218min后, 再在 说 明 书 1/8 页 4 CN 10。
14、5961826 A 4 无菌条件下冷却至室温而得到。 0009 进一步地, 本发明较佳的实施例中, 上述干酪乳杆菌培养基是由酪蛋白胨911g、 肉汤提取物911g、 酵母粉46g、 葡萄糖1822g、 吐温800.81.2g、 磷酸氢二钾1.5 2.5g、 乙酸钠46g、 柠檬酸二胺1.52.5g、 七水硫酸镁0.10.3g、 硫酸锰0.040.06g以 及自来水9001100g在PH6.26.5和118125的条件下灭菌1218min后, 再在无菌条 件下冷却至室温而得到。 0010 进一步地, 本发明较佳的实施例中, 上述枯草芽孢杆菌培养基是由蛋白胨46g、 牛肉浸取物2.54g、 氯化钠。
15、46g、 琼脂1317g以及自来水9001100g在PH6.87.2和 118125的条件下灭菌1218min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得到。 0011 进一步地, 本发明较佳的实施例中, 上述菌糠饲料发酵复合菌剂由以下质量百分 比含量的菌剂混合而成: 植物乳杆菌菌剂3050、 泡菜乳杆菌菌剂1020、 干酪乳杆菌 菌剂510、 植物乳杆菌植物亚种菌剂1535以及枯草芽孢杆菌菌剂16。 0012 进一步地, 本发明较佳的实施例中, 在上述新鲜菌糠原料中添加的糖蜜、 玉米粉以 及豆粕粉的质量依次为新鲜菌糠原料质量的0.52.0、 12、 35。 0013 进一步地, 本发明较佳的实施例中,。
16、 上述进行发酵是将新鲜菌糠原料、 糖蜜、 玉米 粉以及豆粕粉混合得到的混合物堆放在发酵槽内, 加入菌糠饲料发酵复合菌剂, 直至混合 物高度距离发酵槽的槽口510cm, 进行封闭压实, 发酵36天。 0014 进一步地, 本发明较佳的实施例中, 上述混合物每3040cm厚度均匀喷洒一次菌 糠饲料发酵复合菌剂并调节至水分质量百分比含量为6065。 0015 本发明实施例的一种对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法的有益效果是: 通过将 培养的植物乳杆菌菌剂、 植物乳杆菌植物亚种菌剂、 泡菜乳杆菌菌剂、 干酪乳杆菌菌剂以及 枯草芽孢杆菌菌剂进复配形成菌糠饲料发酵复合菌剂, 其中含有的乳杆菌菌剂成分使得新 。
17、鲜的菌糠发酵后, 味道酸香, 牲畜适口性进一步提高, 同时也能抑制有害杂菌生长, 提高原 料安全性。 菌糠饲料发酵复合菌剂中含量有枯草芽孢杆菌菌剂的成分, 枯草芽孢杆菌为好 氧益生细菌, 菌糠发酵过程中可以很快利用发酵体系中的氧气, 创造厌氧或微好氧环境, 为 植物乳杆菌、 泡菜乳杆菌、 干酪乳杆菌、 植物乳杆菌植物亚种等乳酸菌快速增殖创造有利条 件, 不易被其他杂菌污染。 此外, 枯草芽孢杆菌本身为益生菌, 可以提高发酵饲料的营养; 再 者, 枯草芽孢杆菌本身具有分解木质纤维素是能力, 在发酵早期的增殖可以部分降解菌糠 中的粗纤维, 对提高饲料品质具有积极作用。 因此, 通过将培养的植物乳杆。
18、菌菌剂、 植物乳 杆菌植物亚种菌剂、 泡菜乳杆菌菌剂、 干酪乳杆菌菌剂以及枯草芽孢杆菌菌剂进复配形成 菌糠饲料发酵复合菌剂来对新鲜的菌糠进行发酵, 使得各种菌剂之间能够协同作用, 大大 提高菌糠中易被吸收的营养成分的含量, 大量分解木质纤维, 形成营养丰富、 安全性较高的 牲畜饲料。 具体实施方式 0016 为使本发明实施例的目的、 技术方案和优点更加清楚, 下面将对本发明实施例中 的技术方案进行清楚、 完整地描述。 实施例中未注明具体条件者, 按照常规条件或制造商建 议的条件进行。 所用试剂或仪器未注明生产厂商者, 均为可以通过市售购买获得的常规产 品。 说 明 书 2/8 页 5 CN 1。
19、05961826 A 5 0017 下面对本发明实施例的柑橘用有机-无机复混肥及其制备方法进行具体说明。 0018 一种对菌糠进行复合发酵制作饲料的方法, 包括以下步骤。 0019 第一步, 微生物菌种的培养: 0020 对植物乳杆菌、 植物乳杆菌植物亚种、 泡菜乳杆菌、 干酪乳杆菌以及枯草芽孢杆菌 进行培养, 形成植物乳杆菌菌剂、 植物乳杆菌植物亚种菌剂、 泡菜乳杆菌菌剂、 干酪乳杆菌 菌剂以及枯草芽孢杆菌菌剂。 0021 具体地, 植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的培养: 将植物乳杆菌种子在无 菌条件下接入到植物乳杆菌培养基中, 并在3037的温度条件下静止培养。
20、4550h, 得到 植物乳杆菌菌剂。 植物乳杆菌培养基由蛋白胨911g、 酵母粉23g、 蔗糖911g、 磷酸氢二 钾0.81.2g、 乙酸钠24g、 柠檬酸二胺1.52.5g、 七水硫酸镁0.10.3g、 硫酸锰0.04 0.06g以及自来水9001100g在PH6.56.8和118125的条件下灭菌1218min后, 再在 无菌条件下冷却至室温而得到。 0022 植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.Plantarum)的培养: 将 植物乳杆菌植物亚种种子在无菌条件下接入到植物乳杆菌植物亚种培养基中, 并在3037 的温度条件下静止培养4550h,。
21、 得到植物乳杆菌植物亚种菌剂。 植物乳杆菌植物亚种培 养基由蛋白胨911g、 酵母粉23g、 蔗糖911g、 磷酸氢二钾0.81.2g、 乙酸钠24g、 柠 檬酸二胺1.52.5g、 七水硫酸镁0.10.3g、 硫酸锰0.040.06g以及自来水9001100g在 PH6.56.8和118125的条件下灭菌1218min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得到。 0023 泡菜乳杆菌(Lactobacillus kimchii)的培养: 将泡菜乳杆菌种子在无菌条件下 接入到泡菜乳杆菌培养基中, 并在3037的温度条件下静止培养4550h, 得到泡菜乳杆 菌菌剂。 泡菜乳杆菌培养基由蛋白胨911g、。
22、 酵母粉23g、 蔗糖911g、 磷酸氢二钾0.8 1.2g、 乙酸钠24g、 柠檬酸二胺1.52.5g、 七水硫酸镁0.10.3g、 硫酸锰0.040.06g以 及自来水9001100g在PH6.56.8和118125的条件下灭菌1218min后, 再在无菌条 件下冷却至室温而得到。 0024 干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)的培养: 将干酪乳杆菌种子在无菌条件下接 入到泡菜乳杆菌培养基中, 并在3037的温度条件下静止培养4550h, 得到干酪乳杆菌 菌剂。 干酪乳杆菌培养基是由酪蛋白胨911g、 肉汤提取物911g、 酵母粉46g、 葡萄糖18 22g、 吐温80 0。
23、.81.2g、 磷酸氢二钾1.52.5g、 乙酸钠46g、 柠檬酸二胺1.52.5g、 七 水硫酸镁0.10.3g、 硫酸锰0.040.06g以及自来水9001100g在PH6.26.5和118125 的条件下灭菌1218min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得到。 0025 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的培养: 将枯草芽孢杆菌种子在无菌条件下 接入到枯草芽孢杆菌培养基中, 并在3037的温度条件下静止培养4550h, 得到枯草芽 孢杆菌菌剂。 枯草芽孢杆菌培养基是由蛋白胨46g、 牛肉浸取物2.54g、 氯化钠46g、 琼 脂1317g以及自来水9001100g在PH6。
24、.87.2和118125的条件下灭菌1218min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得到。 0026 通过上述对应的培养基对植物乳杆菌、 植物乳杆菌植物亚种、 泡菜乳杆菌、 干酪乳 杆菌以及枯草芽孢杆菌进行培养, 从而得到发酵效果非常好的植物乳杆菌菌剂、 植物乳杆 菌植物亚种菌剂、 泡菜乳杆菌菌剂、 干酪乳杆菌菌剂以及枯草芽孢杆菌菌剂, 同时, 在无菌 条件下接入菌种, 使得其不会被其他杂菌污染, 从而使得最终能够具有更好的发酵效果。 说 明 书 3/8 页 6 CN 105961826 A 6 0027 第二步, 配置菌糠饲料发酵复合菌剂: 0028 将上述步骤中得到的植物乳杆菌菌剂、 植物乳。
25、杆菌植物亚种菌剂、 泡菜乳杆菌菌 剂、 干酪乳杆菌菌剂以及枯草芽孢杆菌菌剂混合配置成菌糠饲料发酵复合菌剂。 0029 具体地, 菌糠饲料发酵复合菌剂由以下质量百分比含量的菌剂混合而成: 植物乳 杆菌菌剂3050、 泡菜乳杆菌菌剂1020、 干酪乳杆菌菌剂510、 植物乳杆菌植物 亚种菌剂1535以及枯草芽孢杆菌菌剂16。 0030 通过将不同种类菌剂按照不同的比例进行混合, 使得各种菌剂之间能够相互配 合, 共同作用与需要发酵的菌糠原料, 并且各个菌剂之间能够在上述比例下协同作用, 达到 最好的发酵效果, 在发酵过程中, 能够有效抑制有害杂菌的生长, 提高原料的安全性, 并且 将原料中不易吸收。
26、的营养成分转化为容易吸收的成分, 从而提高饲料的品质。 0031 第三步, 菌糠原料的发酵: 0032 在新鲜菌糠原料中添加糖蜜、 玉米粉以及豆粕粉并进行混合, 接入菌糠饲料发酵 复合菌剂, 进行发酵。 0033 具体地, 首先, 对菌糠原料进行预处理, 即将工厂废弃的水分质量百分比为53 58的新鲜菌糠中的污染和霉变的菌糠以及其他杂质(如木棒、 塑料膜等)去掉, 再将新鲜 菌糠使用粉碎机进行粉碎。 其中, 在收集和处理过程中要保持清洁。 通过对菌糠原料的预处 理, 使得能够除掉菌糠中的有害成分以及不能够进行发酵的杂质, 并且将菌糠粉碎后有利 于后续菌糠的发酵的充分进行, 从而能够提高最终形成。
27、的菌糠饲料的质量和有效营养成 分。 其中, 新鲜菌糠可以选择金针菇菌糠、 杏鲍菇菌糠或者蘑菇菌糠等。 0034 其次, 在新鲜菌糠原料中按新鲜菌糠原料的质量百分比含量计添加0.52.0糖 蜜、 12玉米粉以及35豆粕粉。 通过在新鲜菌糠原料中添加上述含量的糖蜜、 玉米粉 以及豆粕粉有利于平衡新鲜菌糠原料中的营养成分, 并且有利于发酵过程更好地进行, 从 而得到品质更优良的菌糠饲料。 0035 然后, 将新鲜菌糠原料、 糖蜜、 玉米粉以及豆粕粉混合得到的混合物堆放在发酵槽 内, 加入菌糠饲料发酵复合菌剂, 具体地, 在发酵槽底铺上环保塑料膜, 其上铺入一层30- 40cm厚的混合物, 用喷雾器均。
28、匀喷洒菌糠饲料发酵复合菌剂, 菌糠饲料发酵复合菌剂的质 量为铺入的混合物的质量的0.51, 并调节混合物的水分百分比含量至6065, 然 后压实。 如果水分不足60, 则喷洒清洁自来水, 如果水分含量高于65, 则增加晒干的菌 糠原料, 直至水分百分比含量达到6065。 第二层: 重复以上步骤; 第三层: 重复以上步 骤; 最后, 直至混合物高度距离发酵槽口510cm, 用塑料膜覆盖封好, 压实, 发酵36天, 即 得菌糠饲料原料。 0036 通过将含有新鲜菌糠原料的混合物分成多层进行喷洒菌糠饲料发酵复合菌剂, 并 且调节每层的水分百分比含量和压实, 再利用进行塑料膜封好进行发酵, 使得整个发。
29、酵过 程的效果较好。 0037 此外, 其发酵时间也可以维持12个月, 作为菌糠饲料原料的保存方法, 使菌糠饲 料原料不易被有害杂菌污染, 现取现用。 本发明实施例所得的菌糠饲料原料还可以和其他 饲料进行适当比例配合使用, 进行混合造粒后作为牛、 羊等的日粮。 0038 以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。 0039 实施例1 说 明 书 4/8 页 7 CN 105961826 A 7 0040 本实施例中, 首先, 将植物乳杆菌种子在无菌条件下接入到植物乳杆菌培养基中, 并在35的温度条件下静止培养48h, 得到植物乳杆菌菌剂。 植物乳杆菌培养基由蛋白胨 10g、 酵母粉。
30、2g、 蔗糖9g、 磷酸氢二钾0.8g、 乙酸钠2g、 柠檬酸二胺1.5g、 七水硫酸镁0.1g、 硫 酸锰0.04g以及自来水900g在PH6.56.8和118的条件下灭菌12min后, 再在无菌条件下 冷却至室温而得到。 0041 将植物乳杆菌植物亚种种子在无菌条件下接入到植物乳杆菌植物亚种培养基中, 并在35的温度条件下静止培养49h, 得到植物乳杆菌植物亚种菌剂。 植物乳杆菌植物亚种 培养基由蛋白胨9g、 酵母粉3g、 蔗糖9g、 磷酸氢二钾1.2g、 乙酸钠4g、 柠檬酸二胺2.5g、 七水 硫酸镁0.3g、 硫酸锰0.04g以及自来水1100g在PH6.56.8和1125的条件下灭。
31、菌13min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得到。 0042 将泡菜乳杆菌种子在无菌条件下接入到泡菜乳杆菌培养基中, 并在37的温度条 件下静止培养45h, 得到泡菜乳杆菌菌剂。 泡菜乳杆菌培养基由蛋白胨9g、 酵母粉2g、 蔗糖 9g、 磷酸氢二钾0.8g、 乙酸钠2、 柠檬酸二胺1.5g、 七水硫酸镁0.1g、 硫酸锰0.04g以及自来水 1000g在PH6.56.8和121的条件下灭菌13min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得到。 0043 将干酪乳杆菌种子在无菌条件下接入到泡菜乳杆菌培养基中, 并在35的温度条 件下静止培养48h, 得到干酪乳杆菌菌剂。 干酪乳杆菌培养基是由酪蛋白胨。
32、9g、 肉汤提取物 10g、 酵母粉5g、 葡萄糖20g、 吐温80 0.8g、 磷酸氢二钾1.5g、 乙酸钠4g、 柠檬酸二胺1.5g、 七 水硫酸镁0.1g、 硫酸锰0.04以及自来水900g在PH6.26.5和120的条件下灭菌16min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得到。 0044 将枯草芽孢杆菌种子在无菌条件下接入到枯草芽孢杆菌培养基中, 并在35的温 度条件下静止培养48h, 得到枯草芽孢杆菌菌剂。 枯草芽孢杆菌培养基是由蛋白胨4g、 牛肉 浸取物2.5g、 氯化钠4g、 琼脂13g以及自来水900g在PH6.87.2和118的条件下灭菌14min 后, 再在无菌条件下冷却至室温。
33、而得到。 0045 其次, 按照植物乳杆菌菌剂43、 泡菜乳杆菌菌剂15、 干酪乳杆菌菌剂8、 植物 乳杆菌植物亚种菌剂30以及枯草芽孢杆菌菌剂4的质量百分比比例进行混合, 得到菌 糠饲料发酵复合菌剂。 0046 然后, 将工厂废弃的水分质量百分比为5358的新鲜金针菇菌糠中的污染和霉 变的菌糠以及其他杂质(如木棒、 塑料膜等)去掉, 再将新鲜金针菇菌糠使用粉碎机进行粉 碎。 再在粉碎后的新鲜金针菇菌糠原料中按新鲜金针菇菌糠原料的质量百分比含量计添加 1糖蜜、 1.5玉米粉以及4豆粕粉。 之后, 在发酵槽底铺上环保塑料膜, 其上铺入一层 35cm厚的新鲜金针菇菌糠原料与糖蜜、 玉米粉以及豆粕粉。
34、的混合物, 用喷雾器均匀喷洒菌 糠饲料发酵复合菌剂, 菌糠饲料发酵复合菌剂的质量为铺入的混合物的质量的0.75, 并 调节混合物的水分百分比含量至6065, 然后压实。 第二层: 重复以上步骤; 第三层: 重复 以上步骤; 最后, 直至混合物高度距离发酵槽口510cm, 用塑料膜覆盖封好, 压实, 发酵4 天, 即得菌糠饲料原料。 0047 实施例2 0048 本实施例中, 首先, 将植物乳杆菌种子在无菌条件下接入到植物乳杆菌培养基中, 并在30的温度条件下静止培养50h, 得到植物乳杆菌菌剂。 植物乳杆菌培养基由蛋白胨 10g、 酵母粉2.5g、 蔗糖10g、 磷酸氢二钾1g、 乙酸钠3g、。
35、 柠檬酸二胺2g、 七水硫酸镁0.2g、 硫酸 说 明 书 5/8 页 8 CN 105961826 A 8 锰0.05g以及自来水1000g在PH6.56.8和121的条件下灭菌15min后, 再在无菌条件下冷 却至室温而得到。 0049 将植物乳杆菌植物亚种种子在无菌条件下接入到植物乳杆菌植物亚种培养基中, 并在35的温度条件下静止培养49h, 得到植物乳杆菌植物亚种菌剂。 植物乳杆菌植物亚种 培养基由蛋白胨10g、 酵母粉2.5g、 蔗糖10g、 磷酸氢二钾1g、 乙酸钠3g、 柠檬酸二胺2g、 七水 硫酸镁0.2g、 硫酸锰0.05g以及自来水1000g在PH6.56.8和121的条件。
36、下灭菌15min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得到。 0050 将泡菜乳杆菌种子在无菌条件下接入到泡菜乳杆菌培养基中, 并在37的温度条 件下静止培养45h, 得到泡菜乳杆菌菌剂。 泡菜乳杆菌培养基由蛋白胨10g、 酵母粉2.5g、 蔗 糖10g、 磷酸氢二钾1g、 乙酸钠3g、 柠檬酸二胺2g、 七水硫酸镁0.2g、 硫酸锰0.05g以及自来水 1000g在PH6.56.8和121的条件下灭菌15min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得到。 0051 将泡菜乳杆菌种子在无菌条件下接入到泡菜乳杆菌培养基中, 并在35的温度条 件下静止培养48h, 得到干酪乳杆菌菌剂。 干酪乳杆菌培养基是由酪。
37、蛋白胨10g、 肉汤提取物 10g、 酵母粉5g、 葡萄糖20g、 吐温80 1g、 磷酸氢二钾2g、 乙酸钠3g、 柠檬酸二胺2g、 七水硫酸 镁0.2g、 硫酸锰0.05以及自来水1000g在PH6.26.5和121的条件下灭菌15min后, 再在无 菌条件下冷却至室温而得到。 0052 将枯草芽孢杆菌种子在无菌条件下接入到枯草芽孢杆菌培养基中, 并在35的温 度条件下静止培养48h, 得到枯草芽孢杆菌菌剂。 枯草芽孢杆菌培养基是由蛋白胨5g、 牛肉 浸取物3g、 氯化钠5g、 琼脂15g以及自来水1000g在PH6.87.2和121的条件下灭菌15min 后, 再在无菌条件下冷却至室温而。
38、得到。 0053 其次, 按照植物乳杆菌菌剂50、 泡菜乳杆菌菌剂16、 干酪乳杆菌菌剂5、 植物 乳杆菌植物亚种菌剂27以及枯草芽孢杆菌菌剂2的质量百分比比例进行混合, 得到菌 糠饲料发酵复合菌剂。 0054 然后, 将工厂废弃的水分质量百分比为5358的新鲜金针菇菌糠中的污染和霉 变的菌糠以及其他杂质(如木棒、 塑料膜等)去掉, 再将新鲜金针菇菌糠使用粉碎机进行粉 碎。 再在粉碎后的新鲜杏鲍菇菌糠原料中按新鲜杏鲍菇菌糠原料的质量百分比含量计添加 0.5糖蜜、 2玉米粉以及5豆粕粉。 之后, 在发酵槽底铺上环保塑料膜, 其上铺入一层 38cm厚的新鲜杏鲍菇菌糠原料与糖蜜、 玉米粉以及豆粕粉的。
39、混合物, 用喷雾器均匀喷洒菌 糠饲料发酵复合菌剂, 菌糠饲料发酵复合菌剂的质量为铺入的混合物的质量的1, 并调节 混合物的水分百分比含量至6065, 然后压实。 第二层: 重复以上步骤; 第三层: 重复以上 步骤; 最后, 直至混合物高度距离发酵槽口510cm, 用塑料膜覆盖封好, 压实, 发酵6天, 即 得菌糠饲料原料。 0055 实施例3 0056 本实施例中, 首先, 将植物乳杆菌种子在无菌条件下接入到植物乳杆菌培养基中, 并在35的温度条件下静止培养48h, 得到植物乳杆菌菌剂。 植物乳杆菌培养基由蛋白胨 9.5g、 酵母粉3g、 蔗糖11g、 磷酸氢二钾1g、 乙酸钠2g、 柠檬酸二。
40、胺2g、 七水硫酸镁0.2g、 硫酸 锰0.06g以及自来水1000g在PH6.56.8和123的条件下灭菌14min后, 再在无菌条件下冷 却至室温而得到。 0057 将植物乳杆菌植物亚种种子在无菌条件下接入到植物乳杆菌植物亚种培养基中, 说 明 书 6/8 页 9 CN 105961826 A 9 并在32的温度条件下静止培养49h, 得到植物乳杆菌植物亚种菌剂。 植物乳杆菌植物亚种 培养基由蛋白胨11g、 酵母粉3g、 蔗糖11g、 磷酸氢二钾1g、 乙酸钠3g、 柠檬酸二胺2g、 七水硫 酸镁0.2g、 硫酸锰0.05g以及自来水1000g在PH6.56.8和121的条件下灭菌16mi。
41、n后, 再 在无菌条件下冷却至室温而得到。 0058 将泡菜乳杆菌种子在无菌条件下接入到泡菜乳杆菌培养基中, 并在37的温度条 件下静止培养45h, 得到泡菜乳杆菌菌剂。 泡菜乳杆菌培养基由蛋白胨10g、 酵母粉2.5g、 蔗 糖10g、 磷酸氢二钾1g、 乙酸钠3g、 柠檬酸二胺2.5g、 七水硫酸镁0.25g、 硫酸锰0.04g以及自 来水1000g在PH6.56.8和122的条件下灭菌15min后, 再在无菌条件下冷却至室温而得 到。 0059 将泡菜乳杆菌种子在无菌条件下接入到泡菜乳杆菌培养基中, 并在37的温度条 件下静止培养48h, 得到干酪乳杆菌菌剂。 干酪乳杆菌培养基是由酪蛋白。
42、胨9g、 肉汤提取物 9g、 酵母粉5g、 葡萄糖19g、 吐温80 1.5g、 磷酸氢二钾2g、 乙酸钠3g、 柠檬酸二胺2.5g、 七水硫 酸镁0.2g、 硫酸锰0.05以及自来水1050g在PH6.26.5和120的条件下灭菌13min后, 再在 无菌条件下冷却至室温而得到。 0060 将枯草芽孢杆菌种子在无菌条件下接入到枯草芽孢杆菌培养基中, 并在35的温 度条件下静止培养48h, 得到枯草芽孢杆菌菌剂。 枯草芽孢杆菌培养基是由蛋白胨5.5g、 牛 肉浸取物2.5g、 氯化钠4g、 琼脂16g以及自来水950g在PH6.87.2和123的条件下灭菌 16min后, 再在无菌条件下冷却至。
43、室温而得到。 0061 其次, 按照植物乳杆菌菌剂48、 泡菜乳杆菌菌剂18、 干酪乳杆菌菌剂8、 植物 乳杆菌植物亚种菌剂23以及枯草芽孢杆菌菌剂3的质量百分比比例进行混合, 得到菌 糠饲料发酵复合菌剂。 0062 然后, 将工厂废弃的水分质量百分比为5358的新鲜金针菇菌糠中的污染和霉 变的菌糠以及其他杂质(如木棒、 塑料膜等)去掉, 再将新鲜金针菇菌糠使用粉碎机进行粉 碎。 再在粉碎后的新鲜杏鲍菇菌糠原料中按新鲜杏鲍菇菌糠原料的质量百分比含量计添加 1.5糖蜜、 1.5玉米粉以及4.5豆粕粉。 之后, 在发酵槽底铺上环保塑料膜, 其上铺入一 层38cm厚的新鲜杏鲍菇菌糠原料与糖蜜、 玉米。
44、粉以及豆粕粉的混合物, 用喷雾器均匀喷洒 菌糠饲料发酵复合菌剂, 菌糠饲料发酵复合菌剂的质量为铺入的混合物的质量的0.75, 并调节混合物的水分百分比含量至6065, 然后压实。 第二层: 重复以上步骤; 第三层: 重 复以上步骤; 最后, 直至混合物高度距离发酵槽口510cm, 用塑料膜覆盖封好, 压实, 发酵5 天, 即得菌糠饲料原料。 0063 此外, 将以同样方法进行封存但未接种菌糠饲料发酵复合菌剂的金针菇菌糠与本 实施例1中的方法中进行处理的金针菇菌糠作对比, 同时对二者做PH值的测试, 使用本方法 进行处理的金针菇菌糠20h后PH值低于4.0, 最低达到3.4。 而未接种菌糠饲料发。
45、酵复合菌剂 的金针菇菌糠PH值始终大于5。 PH值迅速降低后, 不易被杂菌例如长霉菌等污染。 同时对两 种菌糠饲料进行色谱成分分析, 本实施例中的方法中进行处理的金针菇菌糠饲料与未接种 菌糠饲料发酵复合菌剂的金针菇菌糠饲料相比, 其丁酸含量减少, 从而使得臭味得到控制, 同时乳酸含量增加, 从而使得发酵后的味道酸香, 增强了口感适应性, 可以促进动物进食。 0064 综上所述, 通过将培养的植物乳杆菌菌剂、 植物乳杆菌植物亚种菌剂、 泡菜乳杆菌 菌剂、 干酪乳杆菌菌剂以及枯草芽孢杆菌菌剂进复配形成菌糠饲料发酵复合菌剂, 使用菌 说 明 书 7/8 页 10 CN 105961826 A 10 。
46、糠饲料发酵复合菌剂对菌糠原料进行发酵, 其中含有的乳杆菌菌剂成分使得新鲜的菌糠发 酵后, 味道酸香, 牲畜适口性进一步提高, 同时也能抑制有害杂菌生长, 提高原料安全性。 其 中的枯草芽孢杆菌菌剂的成分, 可以在菌糠发酵过程中可以很快利用发酵体系中的氧气, 创造厌氧或微好氧环境, 为植物乳杆菌、 泡菜乳杆菌、 干酪乳杆菌、 植物乳杆菌植物亚种等 乳酸菌快速增殖创造有利条件, 不易被其他杂菌污染。 此外, 枯草芽孢杆菌本身为益生菌, 可以提高发酵饲料的营养; 再者, 枯草芽孢杆菌本身具有分解木质纤维素是能力, 在发酵早 期的增殖可以部分降解菌糠中的粗纤维, 对提高饲料品质具有积极作用。 因此, 。
47、通过将培养 的植物乳杆菌菌剂、 植物乳杆菌植物亚种菌剂、 泡菜乳杆菌菌剂、 干酪乳杆菌菌剂以及枯草 芽孢杆菌菌剂进复配形成菌糠饲料发酵复合菌剂来对新鲜的菌糠进行发酵, 使得各种菌剂 之间能够协同作用, 大大提高菌糠中易被吸收的营养成分的含量, 大量分解木质纤维, 形成 营养丰富、 安全性较高的牲畜饲料。 0065 以上所描述的实施例是本发明一部分实施例, 而不是全部的实施例。 本发明的实 施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围, 而是仅仅表示本发明的选定实施 例。 基于本发明中的实施例, 本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的 所有其他实施例, 都属于本发明保护的范围。 说 明 书 8/8 页 11 CN 105961826 A 11 。