含有共轭亚油酸的饲料组合物及其应用.pdf

摘要
申请专利号：	CN201310661716.1	申请日：	20131209
公开号：	CN103689238A	公开日：	20140402
当前法律状态：		有效性：	有效
法律详情：
IPC分类号：	A23K1/16	主分类号：	A23K1/16
申请人：	重庆市畜牧科学院
发明人：	黄金秀,齐仁立,肖融,王瑞生,刘作华
地址：	402460 重庆市荣昌县昌州大道中段770号
优先权：	CN201310661716A
专利代理机构：	北京元本知识产权代理事务所	代理人：	黎昌莉
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内容摘要

本发明涉及畜牧领域，特别涉及饲料组合物，所述饲料组合物由质量百分比为1％～2％共轭亚油酸和余量的基础饲料组成；所述基础饲料包括玉米、豆粕、小麦麸、大豆油、石粉、磷酸氢钙、食盐等；本饲料的系列配方和不同生长阶段的猪配套使用，保证了猪肉的良好品质。

权利要求书

1.饲料组合物，其特征在于：由质量百分比为1％～2％共轭亚油酸和余量的基础饲料组成。 2.根据权利要求1所述的饲料组合物，其特征在于：所述共轭亚油酸的质量百分比为1％、1.5％或2％。 3.根据权利要求1所述的饲料组合物，其特征在于：所述基础饲料为基础饲料A，按照重量份计算由以下组分组成：玉米70.30份；豆粕14.00份；小麦麸11.50份；大豆油2.00份；石粉0.71份；磷酸氢钙0.50份；食盐0.30份；预混料0.69份。 4.根据权利要求1所述的饲料组合物，其特征在于：所述基础饲料为基础饲料B，按照重量份计算由以下组分组成：玉米72.60份，豆粕11.00份，小麦麸12.50份，大豆油2.00份，石粉0.71份，磷酸氢钙0.10份，食盐0.30份，赖氨酸0.10份，预混料0.69份。 5.根据权利要求1所述的饲料组合物，其特征在于：所述共轭亚油酸为CLA-60，所述共轭亚油酸的纯度按质量百分比算为61.2％。 6.根据权利要求4所述的饲料组合物，其特征在于：所述饲料组合物分为饲料组合物A和饲料组合物B，所述饲料组合物A专用于30-60公斤猪，所述饲料组合物B专用于60-90公斤猪，所述饲料组合物A中含有所述基础饲料A，所述饲料组合物B中含有所述基础饲料。 7.权利要求1所述的组合物在制备提高约60公斤级猪背最长肌I型和2a型肌纤维mRNA表达量的饲料中的应用。 8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述组合物中含有质量百分数为1.5％的共轭亚油酸。 9.权利要求1所述的组合物在制备提高约90公斤级猪背最长肌I型和2a型肌纤维mRNA表达量的饲料中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述组合物中含有质量百分数为2.0％的共轭亚油酸。

说明书

技术领域

本发明涉及畜牧领域，特别涉及饲料组合物。

背景技术

亚油酸是组成脂肪的多种脂肪酸中的一种。亚油酸既是人和动物不可缺少的脂肪酸之一，又是人和动物无法合成的一种物质，必须从食物中摄取。共轭亚油酸(Conjugated linoleicacid,以下简称CLA)是亚油酸的同分异构体，是一系列在碳9、11或10、12位具有双键的亚油酸的位置和几何异构体，是普遍存在于人和动物体内的营养物质。大量的科学研究证明，共轭亚油酸具有抗肿瘤、抗氧化、抗动脉粥样硬化、提高免疫力、提高骨骼密度、防治糖尿病等多种重要生理功能；而且还能降低动物和人体胆固醇以及甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇、还可以降低动物和人体脂肪、增加肌肉。关于CLA调控猪肉品质的机制，目前研究主要集中于脂肪沉积方面。CLA降低体脂沉积的作用机制主要包括： ①降低前脂肪细胞的增殖和分化。②抑制脂肪的合成，主要通过影响脂肪合成过程中一些代谢酶活性(如脂肪酸合成酶等)及关键调节因子(如固醇调节元件结合蛋白1等)的基因表达来实现。③促进脂肪的分解。④通过抑制硬脂酰 -CoA去饱和酶的基因表达来降低SCD活性、抑制多不饱和脂肪酸的生成，以改变肉中脂肪酸组成。

然而，肉质是个复杂而又综合的概念，其内涵非常广，因此可以推测CLA 调控猪肉品质的作用机制不是单方面的，而是多方面的。肉品质主要决定于肌肉本身的形态结构和化学组成。肌纤维作为肌肉组织的主要组成部分，其类型及组成是肌肉生长和肉品质的生化和分子生物学基础，它不仅决定猪骨骼肌的生长发育，而且还影响猪肉的生理生化特性、感官品质及宰后鲜肉的品质。由此可见，肌纤维类型与肉品质密切相关。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供饲料组合物，其对猪背最长肌 I型和2a型肌纤维mRNA表达量影响显著。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

饲料组合物，由质量百分比为1％～2％共轭亚油酸和余量的基础饲料组成。

进一步，所述的饲料组合物，所述共轭亚油酸的质量百分比为1％、1、5％和 2％。

进一步，所述的饲料组合物，所述基础饲料按照重量份计算由以下组分组成：玉米70.30份；豆粕14.00份；小麦麸11.50份；大豆油2.00份；石粉0.71 份；磷酸氢钙0.50份；食盐0.30份；预混料a0.69份；其中，预混料a是按照如下比例配制的：铜(CuSO4·5H2O)80mg，铁(FeSO4·7H2O)100mg，锌 (ZnSO4·7H2O)100mg，锰(MnSO4·H2O)40mg，硒(Na2SeO3)0.3mg，碘(KI)0.3 mg，维生素A1750IU，维生素D3200IU，维生素11IU，维生素K30.5mg，烟酸20mg，维生素B59mg，叶酸0.3mg，维生素B11mg，维生素B23mg，维生素B61.5mg，维生素B1215μg，Biotin0.05mg，氯化胆碱1.0g，Phytaso0.1 mg，抗氧化剂0.5mg。

进一步，所述的饲料组合物，所述基础饲料按照重量份计算由以下组分组成：玉米72.60份，豆粕11.00份，小麦麸12.50份，大豆油2.00份，石粉0.71 份，磷酸氢钙0.10份，食盐0.30份，赖氨酸0.10份，预混料a0.69份。

进一步，所述的饲料组合物，所述共轭亚油酸由棕榈酸C16：016.4份，硬脂酸C18：03.4份，油酸C18：1C917.4份，亚油酸C18：2C9，C12 1.6份，c9t11-CLA28.5份，t10c12-CLA30.0份。所述共轭亚油酸的纯度按质量百分比算为61.2％。

进一步，所述的饲料组合物，其特征在于：所述饲料组合物分为饲料组合物 A和饲料组合物B，所述饲料组合物A专用于30-60公斤猪，所述饲料组合物B 专用于60-90公斤猪，所述饲料组合物A中含有所述基础饲料A，所述饲料组合物B中含有所述基础饲料?。

本发明的目的之二在于提供上述组合物的新应用，该应用为制备猪饲料提供了新的思路。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

所述的组合物在制备提高约60公斤级猪背最长肌I型和2a型肌纤维mRNA 表达量的饲料中的应用。

进一步，所述的应用，所述组合物中含有质量百分数为1.5％的共轭亚油酸。

所述的组合物在制备提高约90公斤级猪背最长肌I型和2a型肌纤维mRNA 表达量的饲料中的应用。

进一步，所述组合物中含有质量百分数为2.0％的共轭亚油酸。

本发明的有益效果：

从理化指标来看：1)本发明根据猪的体重阶段设计了系列饲料配方，均能显著影响生长育肥猪的生长性能，但该作用与猪生长阶段有关，在30～60kg 阶段主要影响F/G，而在60～90kg阶段则主要影响ADG和ADFI。2)系列配方显著降低了90kg猪血清高密度脂蛋白和载脂蛋白A1浓度；同时降低了血清甲状腺素(T4)、三碘甲状腺原氨酸(T3)和皮质醇浓度。3)系列配方显著影响了90kg猪10肋处的膘皮厚、屠宰率、板油重和瘦肉率的影响显著。4)系列配方能提高大理石纹评分和肌内脂肪含量，而降低肉色b值(黄度)。5)系列配方能显著改变了背最长肌和背部脂肪组织的脂肪酸含量，即显著增加了SFA 和CLA的沉积，且c9t11-CLA的沉积能力显著高于t10c12-CLA。

从分子角度来看：1)各配方显著提高了60kg猪背最长肌I型和2a型肌纤维mRNA表达量，而饲粮添加2.0％CLA显著提高了90kg猪背最长肌I型和 2a型肌纤维mRNA表达量。2)背最长肌中MyHC I mRNA表达量在体重60kg时，与肌内脂肪和大理石纹评分呈正相关，而与失水率呈负相关；在体重90kg时，与pH下降速度、肉色a值和大理石纹评分呈正相关。3)背最长肌中MyHC2a mRNA 表达量在体重60kg时，与大理石纹评分呈正相关，在体重90kg时，与肉色a 值、pH下降速度和大理石纹评分呈显著正相关，与肌内脂肪含量有一定正相关。 4)背最长肌中MyHC2b mRNA表达量在体重90kg时，与大理石纹评分和肌内脂肪含量呈显著负相关，与肉色a值也有一定负相关。5)饲粮添加CLA对60kg 猪背最长肌MyoG、MYST、Ca3、CaN和PGC-1基因表达均无显著影响，但添加 1.5％-2.0％CLA显著提高了90kg猪背最长肌MyoG、CaN和PGC-1基因表达，提示这些功能基因可能参与了CLA调控肌纤维类型转化过。

附图说明

图1为不同水平CLA对60kg猪MyHC I mRNA水平的影响。

图2为不同水平CLA对90kg猪MyHC I mRNA水平的影响。

图3为CLA对60kg猪MyHC2a mRNA水平的影响。

图4为不同水平CLA对90kg猪MyHC2a mRNA水平量的影响。

图5为不同水平CLA对60kg猪MyHC2b mRNA表达量的影响。

图6为不同水平CLA对90kg猪MyHC2b mRNA水平的影响。

图7为不同水平CLA对60kg猪MyHC2x mRNA水平的影响。

图8为不同水平CLA对90kg猪MyHC2x mRNA水平的影响。

具体实施方式

第一部分

实施例一

采用单因子试验安排。选择日龄相近、体重约26.76±1.78kg、健康趋势的长×荣杂交猪160头(公母各半)随机分为5个处理组，分别添加配方一至五。CLA-60油的脂肪酸组成详见表1，其纯度为61.2％。

每组8个重复，每个重复4头猪，饲养于一圈栏中。分别配制30～60及 60～90kg两个阶段的基础饲料，所述基础饲料的配比详见表2。各处理组的 CLA-60油等量替代表2中基础饲粮中的大豆油，各基础饲料的其他组分和营养水平一致。

猪只自由采食与饮水，饲养管理按常规进行。分别于平均体重接近60kg 和90kg时，空腹称重后，从每个重复中选取1头接近于平均体重的猪进行颈静脉采血，置于离心管中，静置2-3小时后离心得血清，于-20℃下保存备用；采血后立即屠宰，进行胴体性状和肉质指标测定。

表1CLA-60油的脂肪酸组成

表2基础饲料组成与营养水平

a每千克饲粮中添加：铜(CuSO4·5H2O)80mg，铁(FeSO4·7H2O)100mg，锌(ZnSO4·7H2O)100mg，锰(MnSO4·H2O)40mg，硒(Na2SeO3)03mg，碘(KI)03mg，维生素A1750IU，维生素D3200IU，维生素11IU，维生素K305mg，烟酸20mg，维生素B59mg，叶酸03mg，维生素B11mg，维生素B23mg，维生素B615mg，维生素B1215μg，Biotin005mg，氯化胆碱10g， Phytase01mg，抗氧化剂05mg。

b实测值

30～60kg和60～90kg两个阶段的饲料组合物的脂肪酸组成分别见表3 和表4。由表可知，两个阶段试验的饲料组合物中脂肪酸组成的变化规律较为一致，各阶段的5个配方中试验饲粮中的亚油酸、α-亚麻酸、c9t11-CLA、 t10c12-CLA的组成差异明显，其中亚油酸和α-亚麻酸的含量随饲粮CLA添加量增加逐渐减少；而c9t11-CLA和t10c12-CLA的含量则随饲粮CLA添加量增加不断增加，符合试验设计的目的。其他各项指标在每个饲料配方中变化不大。

表330～60kg阶段各试验饲粮的脂肪酸组成

表460～90kg阶段各试验饲粮的脂肪酸组成

实施例二不同饲料配方对生长育肥猪生长性能的影响

实施例一中的饲料组合物的各配方对猪生长性能的影响结果见表5。由表可知，试验猪的初始体重在各处理间未见显著差异(P=0.7186)。饲粮添加 CLA对30～60kg猪的ADG和ADFI均无显著影响(P≥0.3856)，但ADG随CLA 添加量增加有不断提高趋势，比对照组约高2.26％～3.72％，当所述CLA添加量增至2.0％时又呈下降趋势。所以，所述CLA可显著影响30～60kg猪的F/G(P =0.0488)，其中1.0％添加组最低，显著低于对照组和2.0％添加组，其他各组间差异不显著。CLA对60～90kg猪的F/G无显著影响，但显著影响ADG和ADFI (P≤0.0203)，随CLA添加量增加，ADG和ADFI不断下降。2.0％添加组的ADG 显著低于对照组和0.5％添加组，其他各组间差异不显著。添加0.5％CLA对60～ 90kg猪ADFI无显著影响，但1.0％～2.0％CLA则显著降低了60～90kg猪ADFI，比对照组约低3.60％～13.44％。由上可知，饲粮添加CLA对生长性能的影响与猪的生长阶段有关，在30～60kg阶段主要影响F/G，而在60～90kg阶段则主要影响ADG和ADFI。但从30～90kg阶段的结果来看，饲粮添加CLA对猪ADG 无显著影响(P=0.4171)，但显著影响ADFI和F/G(P≤0.0212)。随CLA 添加量增加，ADFI不断下降，其中2.0％添加组最低，显著低于对照组，低了 9.89％(P=0.0009)。而对于F/G，1.0％添加组最低，显著低于对照组和0.5％添加组。

表5不同饲料配方对生长畜肥猪生长性能的影响结果

AD：，ADFI，F/G分别代表平均H增重、平均H米食量、料重比

综合以上结果说明，饲料组合物中的各配方均影响生长育肥猪的生长性能，综合全期生长性能指标考虑，配方三和配方八的效果最佳。

实施例三不同饲料配方对生长育肥猪血液生化及激素指标的影响

实施例一中的饲料组合物的各配方对60kg猪血清生化指标的影响结果见表6。由表可知，饲料组合物的各配方对60kg猪血清葡萄糖浓度有显著影响(P =0.0039)，其中配方一的浓度最低，显著低于其它组(P≤0.0070)。饲料组合物的各配方对60kg猪血清尿素氮、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A1、载脂蛋白B、总蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比都没有显著影响(P≥0.1323)，但血清尿素氮有降低趋势，而总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白有增加趋势。

表6各配方对60kg猪血清生化指标的影响结果

实施例一中的饲料组合物的不同配方对90kg猪血清生化指标的影响结果见表7。由表7可知，各配方对90kg猪血清葡萄糖、尿素氮、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、载脂蛋白B、总蛋白都没有显著影响(P≥0.2477)，但显著影响了血清高密度脂蛋白和载脂蛋白A1浓度(P≤0.0477)，随饲粮 CLA添加量增加，血清高密度脂蛋白和载脂蛋白A1浓度不断下降。与配方六组比，配方九组和配方十组的血清高密度脂蛋白浓度显著降低了约15.1％(P≤ 0.0155)；对于血清载脂蛋白A1，除配方七组外，其他组均显著低于对照组(P ≤0.0151)。高密度脂蛋白的主要功能是运载肝外组织中的胆固醇和低密度脂蛋白至肝脏，而载脂蛋白A1作用主要有运载脂类物质以及稳定脂蛋白结构，在脂蛋白的代谢中起到促进脂类的运输、调节酶活性以及引导血浆脂蛋白与细胞表面受体结合等重要作用。

表7不同饲料配方对90kg长×荣猪血清生化及激素指标的影响结果

血清白蛋白的主要功能是维持血液正常渗透压或作为脂肪酸的载体参与运送脂肪酸等。由表7可知，各配方组对血清白蛋白浓度有一定影响(P=0.0686)，其中配方九组和配方十组显著低于配方六组(P≤0.0279)。

血清球蛋白具有免疫调节的作用，免疫系统遇到外来的入侵物时会根据入侵物的不同产生不同数量的球蛋白，如果入侵物比较难以消灭，免疫系统刺激淋巴以后就会产生更多的球蛋白直到入侵物被球蛋白消灭为止，故造成球蛋白偏高。由表7可知，配方十组的血清球蛋白浓度显著提高了28.72％(P=0.0067)。

甲状腺素是甲状腺的主要激素，能促进物质代谢和动物生长发育。三碘甲状腺原氨酸(T3)主要是由T4内环脱碘转变而成的。由表7可知，饲粮添加 CLA对血清甲状腺素(T4)浓度无显著影响(P=0.4870)，但有降低趋势。配方八至十显著降低了血清三碘甲状腺原氨酸(T3)浓度，比配方六约低18.86～ 23.43％(P≤0.0284)。

皮质醇是从肾上腺皮质中提取出的是对糖类代谢具有最强作用的肾上腺皮质激素，通常被成为“应激激素”。当机体处于应激状态下，血清皮质醇浓度增加，以维持正常的生理机能。由表7可知，各配方显著降低了血清皮质醇浓度，比配方六组约低21.59％～27.84％(P≤0.0037)，本饲料组合物能缓解猪的应激状态。

实施例四不同配方对生长育肥猪胴体性状的影响

猪60kg的胴体指标测定结果见表8。由表可知，各饲料配方对60kg猪的胴体直长、斜长、肩腰荐结合处和6-7肋间的背膘厚、10肋处和最后肋处的膘皮厚、眼肌面积、板油重及屠宰率均无显著影响(P≥0.1803)，但配方三和配方四对肩腰荐结合处和6-7肋间的背膘厚及10肋处和最后肋处的膘皮厚有降低趋势，而眼肌面积则呈增加趋势。配方二对60kg猪瘦肉率无显著影响，但配方三至五则显著提高了60kg猪瘦肉率(P=0.0002)，比配方一约高 4.58％～7.29％。

表8不同水平CLA对60kg猪胴体指标的影响

猪90kg的胴体指标测定结果见表9。由表可知，配方六至十对胴体直长和斜长无显著影响(P≥0.2124)，对肩腰荐结合处的背膘厚也无显著影响(P =0.0827)，但配方八至十有降低趋势，比配方六组约低12.22％～13.92％。各配方对6-7肋间的背膘厚和10肋处的膘皮厚有显著影响(P≤0.0017)。对于 6-7肋间的背膘厚，配方八至十组均低于配方六组，分别降低了21.84％(P= 0.0004)、7.76％(P=0.1841)和15.80％(P=0.0093)。配方八至十组显著降低了10肋处的膘皮厚，降低了约15.20％～20.95％(P≤0.0200)。各配方对最后肋处的膘皮厚的影响虽不显著(P=0.1407)，但配方八至十组有降低趋势，比对照组约低了12.73％～16.00％。CLA对眼肌面积的影响也不显著(P= 0.1100)，但配方八至十组有增加趋势，比配方六组约高7.70％～10.95％。配方八至十组显著降低了屠宰率和板油重(P≤0.0217)。CLA对瘦肉率的影响显著(P=0.0157)，其中配方八和配方十著高于对照组(P≤0.0244)，其他各组间无显著差异(P≥0.0529)。

综合以上结果说明，综合考虑以配方三和配方八效果最佳。

表9不同水平CLA对90kg猪胴体指标的影响

实施例五不同饲料配方对生长育肥猪肉质指标的影响

猪60kg的肉质指标测定结果见表10。由表可知，各配方对猪肉pH24的影响不显著(P=0.1596)，却显著影响了猪肉pH45(P=0.0090)，与对照组比，配方三、配方四和配方五的pH45分别降低了4.53％(P=0.0344)、2.34％(P= 0.2636)和5.26％(P=0.0130)。各配方对猪肉嫩度、肉色评分、L值和a值均无显著影响(P≥0.1117)，但显著影响b值、大理石纹评分和肌内脂肪含量(P≤0.0456)。对于b值，配方三组最低，显著低于配方一组和配方二组 (P≤0.0304)，其他各组间无显著差异。配方二至四使大理石纹评分提高了 10.82％～32.47％，其中配方四组最高，显著高于配方一组(P=0.0031)。配方二至四显著提高了肌内脂肪含量，提高约44.77％～52.33％(P≤0.0110)。

猪90kg的肉质指标测定结果见表11。由表可知，各配方对猪肉pH45、pH24、失水率、滴水损失、嫩度、肉色评分、L值和a值均无显著影响(P≥0.2135)，但显著影响b值、大理石纹评分和肌内脂肪含量(P≤0.0239)。配方七至十使b值降低了7.61％～15.96％，其中配方八组最低，显著低于配方六组(P= 0.0013)。配方七至十组的大理石纹评分均高于配方一组，约提高了3.29％～ 25.65％，其中配方九组和配方十组达显著水平(P≤0.0080)。配方七至十显著提高了肌内脂肪含量，提高约33.79％～46.58％(P≤0.0204)。

表10不同水平共轭亚油酸对60kg猪肉质指标的影响

表11不同水平共轭亚油酸对90kg猪肉质指标的影响

综合以上结果说明，各饲料配方可在一定程度上改善猪肉品质，主要表现为提高大理石纹评分和肌内脂肪含量，而降低肉色b值(黄度)。

实施例六不同饲料配方对猪肉脂肪酸含量的影响

猪背最长肌脂肪酸含量的测定结果见表12。由表可知，各饲料配方显著影响了背最长肌饱和脂肪酸(SFA)总含量(P=0.0413)，背最长肌SFA总量不断增加，其中配方九和配方十显著高于配方六组(P≤0.0146)。在SFA中， C12：0、C14：0、C15：0和C16：0四种SFA含量均随饲粮CLA浓度增加而显著升高(P≤0.0328)，而C17：0、C18：0、C20：0、C21：0、C22：0、C24：0的含量在各处理间未见显著差异(P≥0.0813)。各配方对背最长肌单不饱和脂肪酸 (MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)的含量均无显著影响(P≥0.3316)。但 MUFA中的C14：1、C16：1和C18：1n9t含量随饲粮CLA浓度加大而不断增加，而 C20：1含量的变化规律正完全相反。在试验所观测的PUFA中，C18：2n6t、 C18：2n6c、C18：3n6、C20：3n3、C20：5n3和C22：6n3的含量均未受饲粮CLA添加的显著影响，C18：3n3、C20：2、C20：4n6则随饲粮CLA添加量的增加显著降低，但c9t11-CLA和t10c12-CLA含量在对照组均未检测出，之后随饲粮CLA 添加量的加大不断增加，且c9t11-CLA增加幅度比t10c12-CLA的大。以上结果表明，配方七至十能改变猪背最长肌脂肪酸组成，主要表现为SFA总量显著增加，同时显著增加背最长肌c9t11-CLA和t10c12-CLA含量，且c9t11-CLA的沉积能力显著高于t10c12-CLA。

猪背部皮下脂肪组织中脂肪酸含量的测定结果见表13。由表可知，各配方对脂肪组织中SFA总量显著增高，其中配方九组SFA总量最高。在SFA中，C12：0、 C14：0、C15：0、C16：0、C18：0、C22：0的含量均出现显著增加(P≤0.0043)，而C20：0和C24：0含量显著降低(P＜0.0001)。脂肪组织中的MUFA总量则随 CLA添加量增加而降低，其中配方十组的MUFA含量最低，比配方六组约低37.92％ (P＜0.0001)。在MUFA中，C17：1、C18：1n9c、C20：1和C24：1的含量均随饲粮CLA浓度增加而呈不同程度下降；而C14：1和C18：1n9t含量在CLA处理组则显著高于对照组(P≤0.0012)；C16：1和C22：1n9含量则在各处理间未见显著差异。脂肪组织中的PUFA总含量在各处理间未见显著差异，但随饲粮CLA 浓度升高而呈下降趋势，当CLA添加量至1.5％时达到最低。在PUFA中， C18：2n6c、C18：3n3、C20：2、C20：4n6、C20：5n3和C22：6n3的含量在CLA处理组均不同程度减少，C18：2n6t、C18：3n6和C20：3n3在各处理组未见显著差异 (P≥0.3551)。与背最长肌的结果相似，c9t11-CLA和t10c12-CLA含量在对照组未检测出，而在CLA处理组的含量随饲粮CLA添加量的增加呈显著增加(P ＜0.0001)。以上结果表明，饲粮添加CLA能改变猪背部脂肪组织中的脂肪酸组成，即SFA总量增加，而MUFA和PUFA降低，但SFA总量的增加主要由MUFA 总量的降低引起；饲粮添加CLA还能显著增加背部脂肪组织中的c9t11-CLA和 t10c12-CLA含量，其中c9t11-CLA的增加量比t10c12-CLA的增加量更多。

表12各配方对90kg猪背最长肌脂肪酸组成的影响(单位：mg/g)

表13各配方对90kg猪背脂脂肪酸组成的影响(单位：mg/g)

第二部分配方对生长育肥猪肌纤维类型及其相关功能基因表达的影响

实施例七不同配方对生长育肥猪肌纤维类型的影响

一不同水平CLA对猪背最长肌MyHCs基因mRNA水平的影响

不同水平CLA对猪背最长肌MyHC I mRNA水平的影响见图1和图2。由图1 可知，在体重60kg时，配方二至五均可不同程度地提高MyHC I mRNA水平，其中配方四组显著高于配方一组(P＜0.05)，其他各组间未见显著差异。由图 2可知，在体重90kg时，配方十组的MyHC I mRNA水平显著高于对照组(P＜ 0.05)，其他各组差异不显著。

不同配方对猪背最长肌MyHC2a mRNA水平的影响见图3-4。由图3可知，在体重60kg时，配方二至四均可不同程度地提高MyHC2a mRNA水平，其中配方四组显著高于配方一组(P＜0.05)，其他各组差异不显著。由图4可知，在体重90kg时，配方十组的MyHC2a mRNA水平显著高于配方六组和配方八组(P ＜0.05)，其他各组间差异不显著。

各配方对猪背最长肌MyHC2b mRNA水平的影响见图5-6。由图可知，在体重60kg和90kg时，饲料组合物中CLA的添加量变化对MyHC2b mRNA水平的影响不显著(P＞0.05)。

不同水平CLA对猪背最长肌MyHC2x mRNA水平的影响见图6-7。由图6可知，在体重60kg时，各配方加CLA对MyHC2x mRNA水平影响不显著(P＞0.05)。由图7可知，在体重90kg时，配方七组MyHC2x mRNA水平显著低于配方六组和配方十组(P＜0.05)。

实施例八

一MyHCs mRNA表达量与肉品质的相关性分析

MyHCs mRNA表达量与肉品质的相关性分析结果见表14。

其中相关性达显著水平(P＜0.05)的有：在体重60kg时，背最长肌中 MyHC I mRNA表达量与肌内脂肪呈显著正相关(r=0.901，P=0.037)，与失水率呈显著负相关(r=-0.941，P=0.017)，与大理石纹评分呈一定正相关 (r=0.851，P=0.068)。MyHC2a mRNA表达量与大理石纹评分呈一定正相关(r=0.830，P=0.082)。MyHC2x mRNA表达量与肉色L值呈显著正相关 (r=0.949，P=0.014)。

表14背最长肌MyHCs mRNA表达量与肉品质的相关性1)

1)*表不P＜0.05

在体重90kg时，背最长肌中MyHC I mRNA表达量与pH下降速度呈显著正相关(r=0.917，P=0.028)，与肉色a值和大理石纹评分呈一定正相关(r= 0.849，P=0.069；r=0.779，P=0.120)。MyHC2a mRNA表达量与肉色a 值、pH下降速度和大理石纹评分呈显著正相关(r=0.936，P=0.019；r=0.889， P=0.044；r=0.946，P=0.015)，与肌内脂肪含量呈一定正相关(r=0.875， P=0.052)。MyHC2b mRNA表达量与大理石纹评分和肌内脂肪含量呈显著负相关(r=-0.947，P=0.015；r=-0.953，P=0.012)，与肉色a值呈一定负相关(r=-0.867，P=0.057)。

实施例九调控肌纤维类型的相关功能基因表达

肌纤维的发育与类型转化受到许多相关功能基因的调控，如生肌蛋白 (Myogenin，MyoG)、肌肉生长抑制素(Myostatin，MYST)、钙激活蛋白酶3 (Calpain3，Ca3)、钙调神经磷酸酶(Caicineurin，CaN)和过氧化物增殖体激活物受体γ协同激活物(Peroxisome proliferators activated Foeeptorγ coactivator-1，PGC-1)等。为此，本研究进一步观测了这些功能基因表达的变化情况。

不同水平CLA对猪背最长肌相关功能基因表达的影响结果见表15和16。在60kg体重时，饲粮添加不同水平CLA对试验所观测的5种功能基因的表达均无显著影响(P≥0.1163，见表15)；但有降低Ca3mRNA水平而提高MyoG 和PGC-1mRNA水平的趋势。

表15不同水平CLA对60kg猪背最长肌相关功能基因表达的影响

由表16可知，在90kg体重时，饲粮添加1.5％-2.0％CLA显著提高了背最长肌MyoG mRNA水平(P≤0.0272)。前人试验表明，MyoG对于维持快慢肌纤维表型起重要作用，在慢肌表达中高，故MyoG基因可能促进肌纤维类型向慢肌的转化。

表16不同水平CLA对90kg猪背最长肌相关功能基因表达的影响

MYST又称生长/分化因子8(GDF-8)，属于分泌蛋白转化因子β(TGF-β) 超家族，主要通过抑制成肌细胞的增殖和分化，对肌肉生长产生负调控。本试验发现，饲粮添加CLA对90kg猪背最长肌MYST mRNA水平无显著影响(P= 0.3538)，但随饲粮CLA添加量增加，MYST mRNA水平呈不断下降趋势(见表16)。该结果可在一定程度上解释CLA提高胴体瘦肉率的原因。

钙激活蛋白酶(Calpain)是一种细胞内钙依赖的中性半胱氨酸蛋白酶，为形式多样的、高度调控的蛋白降解系统。它在哺乳动物的骨骼肌中主要存在三种形式，其中Ca3是肌肉特有的蛋白水解酶。由Ca3基因突变导致的其活性丧失，会使得肌肉萎缩。本研究结果表明，饲粮添加CLA对90kg猪背最长肌Ca3 mRNA水平无显著影响(P=0.3728，见表16)

CaN是一种受Ca2+和钙调素调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶，广泛存在于哺乳动物的组织细胞中，作为Ca2+信号下游的一种效应分子，参与多种细胞功能调节。研究发现，CaN是骨骼肌中所有类型肌纤维肥大的关键调节因子，同时可调节肌纤维类型特异性的基因表达，从而改变肌纤维类型。CaN通路的活化可选择性上调慢肌纤维特异性基因启动子的活性，使肌纤维实现从快到慢的转化。在本试验中，饲粮添加1.0％-2.0％CLA均提高了90kg猪背最长肌CaN mRNA 水平，其中1.5％CLA组和2.0％CLA组显著高于对照组(P≤0.0233，见表 16)，提示CaN基因可能参与了CLA调控肌纤维类型转化的过程中。

PGC-1能通过影响解偶联蛋白及细胞核呼吸因子的表达，诱导线粒体的产生。而不同肌纤维类型所含的线粒体的数量不一样。因此，PGC-1与肌纤维类型的转化有关，可促进肌纤维向慢型的转化。本试验发现，饲粮添加CLA均不同程度地提高了背最长肌PGC-1基因表达，其中1.5％CLA组和2.0％CLA组达显著水平(P≤0.0255，见表16)，这提示PGC-1可能参与了CLA调控肌纤维向慢型的转化过程。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

资源描述

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1、(10)申请公布号 CN 103689238 A (43)申请公布日 2014.04.02 CN 103689238 A (21)申请号 201310661716.1 (22)申请日 2013.12.09 A23K 1/16(2006.01) (71)申请人重庆市畜牧科学院地址 402460 重庆市荣昌县昌州大道中段 770 号 (72)发明人黄金秀齐仁立肖融王瑞生刘作华 (74)专利代理机构北京元本知识产权代理事务所 11308 代理人黎昌莉 (54) 发明名称含有共轭亚油酸的饲料组合物及其应用 (57) 摘要本发明涉及畜牧领域，特别涉及饲料组合物，所述饲料组合物。

2、由质量百分比为 1 2共轭亚油酸和余量的基础饲料组成；所述基础饲料包括玉米、豆粕、小麦麸、大豆油、石粉、磷酸氢钙、食盐等；本饲料的系列配方和不同生长阶段的猪配套使用，保证了猪肉的良好品质。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页说明书 19 页附图 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书1页说明书19页附图4页 (10)申请公布号 CN 103689238 A CN 103689238 A 1/1 页 2 1. 饲料组合物，其特征在于：由质量百分比为 1 2共轭亚油酸和余量的基础饲料组成。 2. 根据权利。

3、要求 1 所述的饲料组合物，其特征在于：所述共轭亚油酸的质量百分比为 1、 1.5或 2。 3. 根据权利要求 1 所述的饲料组合物，其特征在于：所述基础饲料为基础饲料 A，按照重量份计算由以下组分组成：玉米 70.30 份；豆粕 14.00 份；小麦麸 11.50 份；大豆油 2.00 份；石粉 0.71 份；磷酸氢钙 0.50 份；食盐 0.30 份；预混料 0.69 份。 4. 根据权利要求 1 所述的饲料组合物，其特征在于：所述基础饲料为基础饲料 B，按照重量份计算由以下组分组成：玉米 72.60 份，豆粕 11.00 份。

4、，小麦麸 12.50 份，大豆油 2.00 份，石粉 0.71 份，磷酸氢钙 0.10 份，食盐 0.30 份，赖氨酸 0.10 份，预混料 0.69 份。 5.根据权利要求1所述的饲料组合物，其特征在于：所述共轭亚油酸为CLA-60，所述共轭亚油酸的纯度按质量百分比算为 61.2。 6.根据权利要求4所述的饲料组合物，其特征在于：所述饲料组合物分为饲料组合物A 和饲料组合物B，所述饲料组合物A专用于30-60公斤猪，所述饲料组合物B专用于60-90公斤猪，所述饲料组合物 A 中含有所述基础饲料 A，所述饲料组合物 B 中含有所述基础饲料。 7. 权利要。

5、求 1 所述的组合物在制备提高约 60 公斤级猪背最长肌 I 型和 2a 型肌纤维 mRNA 表达量的饲料中的应用。 8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述组合物中含有质量百分数为1.5的共轭亚油酸。 9. 权利要求 1 所述的组合物在制备提高约 90 公斤级猪背最长肌 I 型和 2a 型肌纤维 mRNA 表达量的饲料中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述组合物中含有质量百分数为2.0 的共轭亚油酸。权利要求书 CN 103689238 A 2 1/19 页 3 含有共轭亚油酸的饲料组合物及其应用技术领域 0001 本发明涉及畜牧领域，。

6、特别涉及饲料组合物。背景技术 0002 亚油酸是组成脂肪的多种脂肪酸中的一种。亚油酸既是人和动物不可缺少的脂肪酸之一，又是人和动物无法合成的一种物质，必须从食物中摄取。共轭亚油酸 (Conjugated linoleicacid,以下简称CLA)是亚油酸的同分异构体，是一系列在碳9、 11或10、 12位具有双键的亚油酸的位置和几何异构体，是普遍存在于人和动物体内的营养物质。大量的科学研究证明，共轭亚油酸具有抗肿瘤、抗氧化、抗动脉粥样硬化、提高免疫力、提高骨骼密度、防治糖尿病等多种重要生理功能；而且还能降低动物和人体胆固醇以及甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇、。

7、还可以降低动物和人体脂肪、增加肌肉。关于 CLA 调控猪肉品质的机制，目前研究主要集中于脂肪沉积方面。CLA 降低体脂沉积的作用机制主要包括：降低前脂肪细胞的增殖和分化。抑制脂肪的合成，主要通过影响脂肪合成过程中一些代谢酶活性 ( 如脂肪酸合成酶等 ) 及关键调节因子 ( 如固醇调节元件结合蛋白 1 等 ) 的基因表达来实现。促进脂肪的分解。通过抑制硬脂酰 -CoA 去饱和酶的基因表达来降低 SCD 活性、抑制多不饱和脂肪酸的生成，以改变肉中脂肪酸组成。 0003 然而，肉质是个复杂而又综合的概念，其内涵非常广，因此可以推测 CLA 调控猪肉品质的作用机制不是单方面。

8、的，而是多方面的。肉品质主要决定于肌肉本身的形态结构和化学组成。肌纤维作为肌肉组织的主要组成部分，其类型及组成是肌肉生长和肉品质的生化和分子生物学基础，它不仅决定猪骨骼肌的生长发育，而且还影响猪肉的生理生化特性、感官品质及宰后鲜肉的品质。由此可见，肌纤维类型与肉品质密切相关。发明内容 0004 有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供饲料组合物，其对猪背最长肌 I 型和 2a 型肌纤维 mRNA 表达量影响显著。 0005 为实现上述目的，本发明的技术方案为： 0006 饲料组合物，由质量百分比为 1 2共轭亚油酸和余量的基础饲料组成。 0007 进一步，所述的。

9、饲料组合物，所述共轭亚油酸的质量百分比为 1、 1、 5和 2。 0008 进一步，所述的饲料组合物，所述基础饲料按照重量份计算由以下组分组成：玉米 70.30 份；豆粕 14.00 份；小麦麸 11.50 份；大豆油 2.00 份；石粉 0.71 份；磷酸氢钙 0.50 份；食盐 0.30 份；预混料 a0.69 份；其中，预混料 a 是按照如下比例配制的：铜 (CuSO45H2O)80mg，铁 (FeSO47H2O)100mg，锌 (ZnSO47H2O)100mg，锰 (MnSO4H2O)40mg，硒 (Na2SeO3)0.3mg，。

10、碘 (KI)0.3mg，维生素 A1750IU，维生素 D3200IU，维生素 11IU，维生素 K30.5mg，烟酸 20mg，维生素 B59mg，叶酸 0.3mg，维生素 B11mg，维生素 B23mg，维生素 B61.5mg，维生素 B1215g， Biotin0.05mg，氯化胆碱 1.0g， Phytaso0.1mg，抗氧化剂 0.5mg。 0009 进一步，所述的饲料组合物，所述基础饲料按照重量份计算由以下组分组成：玉米说明书 CN 103689238 A 3 2/19 页 4 72.60 份，豆粕 11.00 份，小麦麸 12.50 。

11、份，大豆油 2.00 份，石粉 0.71 份，磷酸氢钙 0.10 份，食盐 0.30 份，赖氨酸 0.10 份，预混料 a0.69 份。 0010 进一步，所述的饲料组合物，所述共轭亚油酸由棕榈酸 C16 ： 016.4 份，硬脂酸 C18 ： 03.4 份，油酸 C18 ： 1C917.4 份，亚油酸 C18 ： 2C9， C121.6 份， c9t11-CLA28.5 份， t10c12-CLA30.0 份。所述共轭亚油酸的纯度按质量百分比算为 61.2。 0011 进一步，所述的饲料组合物，其特征在于：所述饲料组合物分为饲料组合物 A 和饲料组合物 B，。

12、所述饲料组合物 A 专用于 30-60 公斤猪，所述饲料组合物 B 专用于 60-90 公斤猪，所述饲料组合物 A 中含有所述基础饲料 A，所述饲料组合物 B 中含有所述基础饲料 ?。 0012 本发明的目的之二在于提供上述组合物的新应用，该应用为制备猪饲料提供了新的思路。 0013 为实现上述目的，本发明的技术方案为： 0014 所述的组合物在制备提高约 60 公斤级猪背最长肌 I 型和 2a 型肌纤维 mRNA 表达量的饲料中的应用。 0015 进一步，所述的应用，所述组合物中含有质量百分数为 1.5的共轭亚油酸。 0016 所述的组合物在制备提高约 90 公斤级猪。

13、背最长肌 I 型和 2a 型肌纤维 mRNA 表达量的饲料中的应用。 0017 进一步，所述组合物中含有质量百分数为 2.0的共轭亚油酸。 0018 本发明的有益效果： 0019 从理化指标来看： 1) 本发明根据猪的体重阶段设计了系列饲料配方，均能显著影响生长育肥猪的生长性能，但该作用与猪生长阶段有关，在3060kg阶段主要影响F/G，而在 60 90kg 阶段则主要影响 ADG 和 ADFI。2) 系列配方显著降低了 90kg 猪血清高密度脂蛋白和载脂蛋白 A1 浓度；同时降低了血清甲状腺素 (T4)、三碘甲状腺原氨酸 (T3) 和皮质醇浓度。 3)系列配方显。

14、著影响了90kg猪10肋处的膘皮厚、屠宰率、板油重和瘦肉率的影响显著。4) 系列配方能提高大理石纹评分和肌内脂肪含量，而降低肉色 b 值 ( 黄度 )。5) 系列配方能显著改变了背最长肌和背部脂肪组织的脂肪酸含量，即显著增加了 SFA 和 CLA 的沉积，且 c9t11-CLA 的沉积能力显著高于 t10c12-CLA。 0020 从分子角度来看： 1) 各配方显著提高了 60kg 猪背最长肌 I 型和 2a 型肌纤维 mRNA 表达量，而饲粮添加 2.0 CLA 显著提高了 90kg 猪背最长肌 I 型和 2a 型肌纤维 mRNA 表达量。 2)背最长肌中MyHC I 。

15、mRNA表达量在体重60kg时，与肌内脂肪和大理石纹评分呈正相关，而与失水率呈负相关；在体重90kg时，与pH下降速度、肉色a值和大理石纹评分呈正相关。3) 背最长肌中 MyHC2a mRNA 表达量在体重 60kg 时，与大理石纹评分呈正相关，在体重 90kg时，与肉色a值、 pH下降速度和大理石纹评分呈显著正相关，与肌内脂肪含量有一定正相关。4) 背最长肌中 MyHC2b mRNA 表达量在体重 90kg 时，与大理石纹评分和肌内脂肪含量呈显著负相关，与肉色 a 值也有一定负相关。5) 饲粮添加 CLA 对 60kg 猪背最长肌 MyoG、 MYST、 Ca。

16、3、 CaN 和 PGC-1 基因表达均无显著影响，但添加 1.5 -2.0 CLA 显著提高了 90kg 猪背最长肌 MyoG、 CaN 和 PGC-1 基因表达，提示这些功能基因可能参与了 CLA 调控肌纤维类型转化过。附图说明说明书 CN 103689238 A 4 3/19 页 5 0021 图 1 为不同水平 CLA 对 60kg 猪 MyHC I mRNA 水平的影响。 0022 图 2 为不同水平 CLA 对 90kg 猪 MyHC I mRNA 水平的影响。 0023 图 3 为 CLA 对 60kg 猪 MyHC2a mRNA 水平的影响。 0024 图 4 为。

17、不同水平 CLA 对 90kg 猪 MyHC2a mRNA 水平量的影响。 0025 图 5 为不同水平 CLA 对 60kg 猪 MyHC2b mRNA 表达量的影响。 0026 图 6 为不同水平 CLA 对 90kg 猪 MyHC2b mRNA 水平的影响。 0027 图 7 为不同水平 CLA 对 60kg 猪 MyHC2x mRNA 水平的影响。 0028 图 8 为不同水平 CLA 对 90kg 猪 MyHC2x mRNA 水平的影响。具体实施方式 0029 第一部分 0030 实施例一 0031 采用单因子试验安排。选择日龄相近、体重约26.761.78kg、健康趋势的长。

18、荣杂交猪 160 头 ( 公母各半 ) 随机分为 5 个处理组，分别添加配方一至五。CLA-60 油的脂肪酸组成详见表 1，其纯度为 61.2。 0032 每组8个重复，每个重复4头猪，饲养于一圈栏中。分别配制3060及6090kg 两个阶段的基础饲料，所述基础饲料的配比详见表 2。各处理组的 CLA-60 油等量替代表 2 中基础饲粮中的大豆油，各基础饲料的其他组分和营养水平一致。 0033 猪只自由采食与饮水，饲养管理按常规进行。分别于平均体重接近 60kg 和 90kg 时，空腹称重后，从每个重复中选取 1 头接近于平均体重的猪进行颈静脉采血，置于离心管中，。

19、静置 2-3 小时后离心得血清，于 -20下保存备用；采血后立即屠宰，进行胴体性状和肉质指标测定。 0034 表 1CLA-60 油的脂肪酸组成 0035 0036 表 2 基础饲料组成与营养水平 0037 说明书 CN 103689238 A 5 4/19 页 6 0038 a 每千克饲粮中添加：铜 (CuSO45H2O)80mg，铁 (FeSO47H2O)100mg，锌 (ZnSO4 7H2O)100mg，锰 (MnSO4 H2O)40mg，硒 (Na2SeO3)03mg，碘 (KI)03mg，维生素 A1750IU，维生素 D3200IU，维生。

20、素 11IU，维生素 K305mg，烟酸 20mg，维生素 B59mg，叶酸 03mg，维生素 B11mg，维生素 B23mg，维生素 B615mg，维生素 B1215g， Biotin005mg，氯化胆碱 10g， Phytase01mg，抗氧化剂 05mg。 0039 b 实测值 0040 30 60kg 和 60 90kg 两个阶段的饲料组合物的脂肪酸组成分别见表 3 和表 4。由表可知，两个阶段试验的饲料组合物中脂肪酸组成的变化规律较为一致，各阶段的 5 个配方中试验饲粮中的亚油酸、 - 亚麻酸、 c9t11-CLA、 t10c12-CLA 的组成差异明显。

21、，其中亚油酸和 - 亚麻酸的含量随饲粮 CLA 添加量增加逐渐减少；而 c9t11-CLA 和 t10c12-CLA 的含量则随饲粮 CLA 添加量增加不断增加，符合试验设计的目的。其他各项指标在每个饲料配方中变化不大。 0041 表 330 60kg 阶段各试验饲粮的脂肪酸组成 0042 说明书 CN 103689238 A 6 5/19 页 7 0043 表 460 90kg 阶段各试验饲粮的脂肪酸组成 0044 说明书 CN 103689238 A 7 6/19 页 8 0045 实施例二不同饲料配方对生长育肥猪生长性能的影响 0046 实施例一中的饲料组合物的各配。

22、方对猪生长性能的影响结果见表 5。由表可知，说明书 CN 103689238 A 8 7/19 页 9 试验猪的初始体重在各处理间未见显著差异 (P=0.7186)。饲粮添加 CLA 对 30 60kg 猪的 ADG 和 ADFI 均无显著影响 (P 0.3856)，但 ADG 随 CLA 添加量增加有不断提高趋势，比对照组约高 2.26 3.72，当所述 CLA 添加量增至 2.0时又呈下降趋势。所以，所述 CLA 可显著影响 30 60kg 猪的 F/G(P=0.0488)，其中 1.0添加组最低，显著低于对照组和 2.0添加组，其他各组间差异不显著。CLA 对。

23、60 90kg 猪的 F/G 无显著影响，但显著影响 ADG 和 ADFI(P 0.0203)，随 CLA 添加量增加， ADG 和 ADFI 不断下降。2.0添加组的 ADG 显著低于对照组和 0.5添加组，其他各组间差异不显著。添加 0.5 CLA 对 60 90kg猪ADFI无显著影响，但1.02.0CLA则显著降低了6090kg猪ADFI，比对照组约低 3.60 13.44。由上可知，饲粮添加 CLA 对生长性能的影响与猪的生长阶段有关，在 30 60kg 阶段主要影响 F/G，而在 60 90kg 阶段则主要影响 ADG 和 ADFI。但从 30 90kg 阶段。

24、的结果来看，饲粮添加 CLA 对猪 ADG 无显著影响 (P=0.4171)，但显著影响 ADFI 和 F/G(P 0.0212)。随 CLA 添加量增加， ADFI 不断下降，其中 2.0添加组最低，显著低于对照组，低了 9.89 (P=0.0009)。而对于 F/G， 1.0添加组最低，显著低于对照组和 0.5添加组。 0047 表 5 不同饲料配方对生长畜肥猪生长性能的影响结果 0048 0049 0050 AD ：， ADFI， F/G 分别代表平均 H 增重、平均 H 米食量、料重比 0051 综合以上结果说明，饲料组合物中的各配方均影响生长育肥猪的生长性能，。

25、综合全期生长性能指标考虑，配方三和配方八的效果最佳。 0052 实施例三不同饲料配方对生长育肥猪血液生化及激素指标的影响说明书 CN 103689238 A 9 8/19 页 10 0053 实施例一中的饲料组合物的各配方对60kg猪血清生化指标的影响结果见表6。由表可知，饲料组合物的各配方对 60kg 猪血清葡萄糖浓度有显著影响 (P=0.0039)，其中配方一的浓度最低，显著低于其它组(P0.0070)。饲料组合物的各配方对60kg猪血清尿素氮、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白 A1、载脂蛋白 B、总蛋白、白蛋白、球蛋白。

26、、白球比都没有显著影响 (P 0.1323)，但血清尿素氮有降低趋势，而总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白有增加趋势。 0054 表 6 各配方对 60kg 猪血清生化指标的影响结果 0055 0056 0057 实施例一中的饲料组合物的不同配方对 90kg 猪血清生化指标的影响结果见表 7。由表 7 可知，各配方对 90kg 猪血清葡萄糖、尿素氮、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、载脂蛋白 B、总蛋白都没有显著影响 (P 0.2477)，但显著影响了血清高密度脂蛋白和载脂蛋白 A1 浓度 (P 0.0477)，随饲粮 CLA 添加量增加，血清。

27、高密度脂蛋白和载脂蛋白 A1 浓度不断下降。与配方六组比，配方九组和配方十组的血清高密度脂蛋白浓度显著降低了约 15.1 (P 0.0155) ；对于血清载脂蛋白 A1，除配方七组外，其他组均显著低于对照组 (P 0.0151)。高密度脂蛋白的主要功能是运载肝外组织中的胆固醇和低密度脂蛋白至肝脏，而载脂蛋白 A1 作用主要有运载脂类物质以及稳定脂蛋白结构，在脂蛋白的代谢中起到促进脂类的运输、调节酶活性以及引导血浆脂蛋白与细胞表面受体结合等重要作用。 0058 表 7 不同饲料配方对 90kg 长荣猪血清生化及激素指标的影响结果说明书 CN 103689238 A 。

28、10 9/19 页 11 0059 0060 0061 血清白蛋白的主要功能是维持血液正常渗透压或作为脂肪酸的载体参与运送脂肪酸等。由表7可知，各配方组对血清白蛋白浓度有一定影响(P=0.0686)，其中配方九组和配方十组显著低于配方六组 (P 0.0279)。 0062 血清球蛋白具有免疫调节的作用，免疫系统遇到外来的入侵物时会根据入侵物的不同产生不同数量的球蛋白，如果入侵物比较难以消灭，免疫系统刺激淋巴以后就会产生更多的球蛋白直到入侵物被球蛋白消灭为止，故造成球蛋白偏高。由表 7 可知，配方十组的血清球蛋白浓度显著提高了 28.72 (P=0.0067)。 006。

29、3 甲状腺素是甲状腺的主要激素，能促进物质代谢和动物生长发育。三碘甲状腺原氨酸 (T3) 主要是由 T4 内环脱碘转变而成的。由表 7 可知，饲粮添加 CLA 对血清甲状腺素 (T4) 浓度无显著影响 (P=0.4870)，但有降低趋势。配方八至十显著降低了血清三碘甲状腺原氨酸 (T3) 浓度，比配方六约低 18.86 23.43 (P 0.0284)。 0064 皮质醇是从肾上腺皮质中提取出的是对糖类代谢具有最强作用的肾上腺皮质激素，通常被成为 “应激激素” 。当机体处于应激状态下，血清皮质醇浓度增加，以维持正常的说明书 CN 103689238 A 11 10/1。

30、9 页 12 生理机能。由表 7 可知，各配方显著降低了血清皮质醇浓度，比配方六组约低 21.59 27.84 (P 0.0037)，本饲料组合物能缓解猪的应激状态。 0065 实施例四不同配方对生长育肥猪胴体性状的影响 0066 猪 60kg 的胴体指标测定结果见表 8。由表可知，各饲料配方对 60kg 猪的胴体直长、斜长、肩腰荐结合处和 6-7 肋间的背膘厚、 10 肋处和最后肋处的膘皮厚、眼肌面积、板油重及屠宰率均无显著影响 (P 0.1803)，但配方三和配方四对肩腰荐结合处和 6-7 肋间的背膘厚及 10 肋处和最后肋处的膘皮厚有降低趋势，而眼肌面积则呈增加。

31、趋势。配方二对 60kg猪瘦肉率无显著影响，但配方三至五则显著提高了60kg猪瘦肉率(P=0.0002)，比配方一约高 4.58 7.29。 0067 表 8 不同水平 CLA 对 60kg 猪胴体指标的影响 0068 0069 猪 90kg 的胴体指标测定结果见表 9。由表可知，配方六至十对胴体直长和斜长无显著影响 (P 0.2124)，对肩腰荐结合处的背膘厚也无显著影响 (P=0.0827)，但配方八至十有降低趋势，比配方六组约低 12.22 13.92。各配方对 6-7 肋间的背膘厚和 10 肋处的膘皮厚有显著影响 (P 0.0017)。对于 6-7 肋间的背膘厚，。

32、配方八至十组均低于配方六组，分别降低了 21.84 (P=0.0004)、 7.76 (P=0.1841) 和 15.80 (P=0.0093)。配方八至十组显著降低了 10 肋处的膘皮厚，降低了约 15.20 20.95 (P 0.0200)。各配方对最后肋处的膘皮厚的影响虽不显著 (P=0.1407)，但配方八至十组有降低趋势，比对照组约低了 12.73 16.00。CLA 对眼肌面积的影响也不显著 (P=0.1100)，但配方八至十组有增加趋势，比配方六组约高 7.70 10.95。配方八至十组显著降低了屠宰率和板油重 (P 0.0217)。CLA 对瘦肉率的影响。

33、显著 (P=0.0157)，其中配方八和配方十著高于对照组 (P 0.0244)，其他各组间无显著差异 (P 0.0529)。说明书 CN 103689238 A 12 11/19 页 13 0070 综合以上结果说明，综合考虑以配方三和配方八效果最佳。 0071 表 9 不同水平 CLA 对 90kg 猪胴体指标的影响 0072 0073 实施例五不同饲料配方对生长育肥猪肉质指标的影响 0074 猪 60kg 的肉质指标测定结果见表 10。由表可知，各配方对猪肉 pH24的影响不显著 (P=0.1596)，却显著影响了猪肉 pH45(P=0.0090)，与对照组比，配。

34、方三、配方四和配方五的 pH45分别降低了 4.53 (P=0.0344)、 2.34 (P=0.2636) 和 5.26 (P=0.0130)。各配方对猪肉嫩度、肉色评分、 L 值和 a 值均无显著影响 (P 0.1117)，但显著影响 b 值、大理石纹评分和肌内脂肪含量(P0.0456)。对于b值，配方三组最低，显著低于配方一组和配方二组 (P 0.0304)，其他各组间无显著差异。配方二至四使大理石纹评分提高了 10.82 32.47，其中配方四组最高，显著高于配方一组 (P=0.0031)。配方二至四显著提高了肌内脂肪含量，提高约 44.77 52.33。

35、 (P 0.0110)。 0075 猪90kg的肉质指标测定结果见表11。由表可知，各配方对猪肉pH45、 pH24、失水率、滴水损失、嫩度、肉色评分、 L 值和 a 值均无显著影响 (P 0.2135)，但显著影响 b 值、大理石纹评分和肌内脂肪含量 (P 0.0239)。配方七至十使 b 值降低了 7.61 15.96，其中配方八组最低，显著低于配方六组 (P=0.0013)。配方七至十组的大理石纹评分均高于配方一组，约提高了 3.29 25.65，其中配方九组和配方十组达显著水平 (P 0.0080)。配方七至十显著提高了肌内脂肪含量，提高约 33.79。

36、 46.58 (P 0.0204)。 0076 表 10 不同水平共轭亚油酸对 60kg 猪肉质指标的影响说明书 CN 103689238 A 13 12/19 页 14 0077 0078 表 11 不同水平共轭亚油酸对 90kg 猪肉质指标的影响 0079 0080 0081 综合以上结果说明，各饲料配方可在一定程度上改善猪肉品质，主要表现为提高大理石纹评分和肌内脂肪含量，而降低肉色 b 值 ( 黄度 )。 0082 实施例六不同饲料配方对猪肉脂肪酸含量的影响说明书 CN 103689238 A 14 13/19 页 15 0083 猪背最长肌脂肪酸含量的测定结果见表。

37、12。由表可知，各饲料配方显著影响了背最长肌饱和脂肪酸 (SFA) 总含量 (P=0.0413)，背最长肌 SFA 总量不断增加，其中配方九和配方十显著高于配方六组 (P 0.0146)。在 SFA 中， C12 ： 0、 C14 ： 0、 C15 ： 0 和 C16 ： 0 四种 SFA 含量均随饲粮 CLA 浓度增加而显著升高 (P 0.0328)，而 C17 ： 0、 C18 ： 0、 C20 ： 0、 C21 ： 0、 C22 ： 0、 C24 ： 0的含量在各处理间未见显著差异(P0.0813)。各配方对背最长肌单不饱和脂肪酸 (MUFA) 和多不饱和脂肪酸 (PUF。

38、A) 的含量均无显著影响 (P 0.3316)。但 MUFA 中的 C14 ： 1、 C16 ： 1 和 C18 ： 1n9t 含量随饲粮 CLA 浓度加大而不断增加，而 C20 ： 1 含量的变化规律正完全相反。在试验所观测的 PUFA 中， C18 ： 2n6t、 C18 ： 2n6c、 C18 ： 3n6、 C20 ： 3n3、 C20 ： 5n3 和 C22 ： 6n3 的含量均未受饲粮 CLA 添加的显著影响， C18 ： 3n3、 C20 ： 2、 C20 ： 4n6 则随饲粮 CLA 添加量的增加显著降低，但 c9t11-CLA 和 t10c12-CLA 含量在对照组均未。

39、检测出，之后随饲粮 CLA 添加量的加大不断增加，且 c9t11-CLA 增加幅度比 t10c12-CLA 的大。以上结果表明，配方七至十能改变猪背最长肌脂肪酸组成，主要表现为 SFA 总量显著增加，同时显著增加背最长肌 c9t11-CLA 和 t10c12-CLA 含量，且 c9t11-CLA 的沉积能力显著高于 t10c12-CLA。 0084 猪背部皮下脂肪组织中脂肪酸含量的测定结果见表 13。由表可知，各配方对脂肪组织中 SFA 总量显著增高，其中配方九组 SFA 总量最高。在 SFA 中， C12 ： 0、 C14 ： 0、 C15 ： 0、 C16 ： 0、。

40、C18 ： 0、 C22 ： 0 的含量均出现显著增加 (P 0.0043)，而 C20 ： 0 和 C24 ： 0 含量显著降低 (P 0.0001)。脂肪组织中的 MUFA 总量则随 CLA 添加量增加而降低，其中配方十组的 MUFA 含量最低，比配方六组约低 37.92 (P 0.0001)。在 MUFA 中， C17 ： 1、 C18 ： 1n9c、 C20 ： 1和C24 ： 1的含量均随饲粮CLA浓度增加而呈不同程度下降；而C14 ： 1和C18 ： 1n9t含量在 CLA 处理组则显著高于对照组 (P 0.0012) ； C16 ： 1 和 C22 ： 1n9 含。

41、量则在各处理间未见显著差异。脂肪组织中的 PUFA 总含量在各处理间未见显著差异，但随饲粮 CLA 浓度升高而呈下降趋势，当 CLA 添加量至 1.5时达到最低。在 PUFA 中， C18 ： 2n6c、 C18 ： 3n3、 C20 ： 2、 C20 ： 4n6、 C20 ： 5n3 和 C22 ： 6n3 的含量在 CLA 处理组均不同程度减少， C18 ： 2n6t、 C18 ： 3n6 和 C20 ： 3n3 在各处理组未见显著差异 (P 0.3551)。与背最长肌的结果相似， c9t11-CLA 和 t10c12-CLA 含量在对照组未检测出，而在 CLA 处理组的含量随饲。

42、粮 CLA 添加量的增加呈显著增加 (P 0.0001)。以上结果表明，饲粮添加 CLA 能改变猪背部脂肪组织中的脂肪酸组成，即 SFA 总量增加，而 MUFA 和 PUFA 降低，但 SFA 总量的增加主要由 MUFA 总量的降低引起；饲粮添加 CLA 还能显著增加背部脂肪组织中的 c9t11-CLA 和 t10c12-CLA 含量，其中 c9t11-CLA 的增加量比 t10c12-CLA 的增加量更多。 0085 表 12 各配方对 90kg 猪背最长肌脂肪酸组成的影响 ( 单位： mg/g) 0086 说明书 CN 103689238 A 15 14/19 页。

43、 16 0087 0088 表 13 各配方对 90kg 猪背脂脂肪酸组成的影响 ( 单位： mg/g) 0089 说明书 CN 103689238 A 16 15/19 页 17 0090 0091 第二部分配方对生长育肥猪肌纤维类型及其相关功能基因表达的影响 0092 实施例七不同配方对生长育肥猪肌纤维类型的影响 0093 一不同水平 CLA 对猪背最长肌 MyHCs 基因 mRNA 水平的影响 0094 不同水平 CLA 对猪背最长肌 MyHC I mRNA 水平的影响见图 1 和图 2。由图 1 可知，说明书 CN 103689238 A 17 16/19 页 18 在体重。

44、 60kg 时，配方二至五均可不同程度地提高 MyHC I mRNA 水平，其中配方四组显著高于配方一组 (P 0.05)，其他各组间未见显著差异。由图 2 可知，在体重 90kg 时，配方十组的 MyHC I mRNA 水平显著高于对照组 (P 0.05)，其他各组差异不显著。 0095 不同配方对猪背最长肌 MyHC2a mRNA 水平的影响见图 3-4。由图 3 可知，在体重 60kg 时，配方二至四均可不同程度地提高 MyHC2a mRNA 水平，其中配方四组显著高于配方一组 (P 0.05)，其他各组差异不显著。由图 4 可知，在体重 90kg 时，配方。

45、十组的 MyHC2a mRNA 水平显著高于配方六组和配方八组 (P 0.05)，其他各组间差异不显著。 0096 各配方对猪背最长肌MyHC2b mRNA水平的影响见图5-6。由图可知，在体重60kg和 90kg 时，饲料组合物中 CLA 的添加量变化对 MyHC2b mRNA 水平的影响不显著 (P 0.05)。 0097 不同水平 CLA 对猪背最长肌 MyHC2x mRNA 水平的影响见图 6-7。由图 6 可知，在体重 60kg 时，各配方加 CLA 对 MyHC2x mRNA 水平影响不显著 (P 0.05)。由图 7 可知，在体重 90kg 时，配方七组 My。

46、HC2x mRNA 水平显著低于配方六组和配方十组 (P 0.05)。 0098 实施例八 0099 一 MyHCs mRNA 表达量与肉品质的相关性分析 0100 MyHCs mRNA 表达量与肉品质的相关性分析结果见表 14。 0101 其中相关性达显著水平 (P 0.05) 的有：在体重 60kg 时，背最长肌中 MyHC I mRNA 表达量与肌内脂肪呈显著正相关 (r=0.901， P=0.037)，与失水率呈显著负相关 (r=-0.941， P=0.017)，与大理石纹评分呈一定正相关 (r=0.851， P=0.068)。MyHC2a mRNA 表达量与大理石纹评分呈。

47、一定正相关 (r=0.830， P=0.082)。MyHC2x mRNA 表达量与肉色 L 值呈显著正相关 (r=0.949， P=0.014)。 0102 表 14 背最长肌 MyHCs mRNA 表达量与肉品质的相关性 1) 0103 0104 说明书 CN 103689238 A 18 17/19 页 19 0105 1)* 表不 P 0.05 0106 在体重 90kg 时，背最长肌中 MyHC I mRNA 表达量与 pH 下降速度呈显著正相关 (r=0.917， P=0.028)，与肉色 a 值和大理石纹评分呈一定正相关 (r=0.849， P=0.069 ； r=0.。

48、779， P=0.120)。MyHC2a mRNA 表达量与肉色 a 值、 pH 下降速度和大理石纹评分呈显著正相关 (r=0.936， P=0.019 ； r=0.889， P=0.044 ； r=0.946， P=0.015)，与肌内脂肪含量呈一定正相关 (r=0.875， P=0.052)。MyHC2b mRNA 表达量与大理石纹评分和肌内脂肪含量呈显著负相关 (r=-0.947， P=0.015 ； r=-0.953， P=0.012)，与肉色 a 值呈一定负相关 (r=-0.867， P=0.057)。 0107 实施例九调控肌纤维类型的相关功能基因表达 0108 肌纤维的发育与类型转化受到许多相关功能基因的调控，如生肌蛋白 (Myogenin， MyoG)、肌肉生长抑制素 (Myostatin， MYST)、钙激活蛋白酶 3(Calpain3， Ca3)、钙调神经磷酸酶 (Caicineurin， CaN) 和过氧化物增殖体激活物受体协同激活物 (Peroxis。

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