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1、(10)授权公告号 CN 101213998 B (45)授权公告日 2011.03.16 CN 101213998 B *CN101213998B* (21)申请号 200810058022.8 (22)申请日 2008.01.10 A23F 3/14(2006.01) A23L 1/29(2006.01) A61K 36/8988(2006.01) A61P 31/18(2006.01) (73)专利权人 王乐观 地址 665000 云南省普洱市思茅区德仁巷普 洱天福经贸公司 (72)发明人 王乐观 (74)专利代理机构 昆明正原专利代理有限责任 公司 53100 代理人 徐玲菊 CN 1。
2、792202 A,2006.06.28, 权利要求 1-8. CN 1650727 A,2005.08.10, 权利要求 1-3. (54) 发明名称 抗 HIV 病毒、 提高人体免疫力的保健普洱茶 (57) 摘要 本发明提供一种抗 HIV 病毒、 提高人体免疫 力的保健普洱茶， 由下列质量比的原料组成 ： 普 洱茶3050， 石斛1020， 人参1020， 茯苓510， 天麻1020， 灵芝818。 它 是一种后发酵茶， 在发酵过程中除添加生物酶营 养液外， 还添加灵芝、 天麻类真菌物质， 以及能提 神补气的药物成分， 除具有减缓免疫细胞的损伤， 促进受损免疫细胞的恢复， 调整肠道吸收环境，。
3、 改 善人体免疫系统， 胃肠道吸收等功效外， 更重要的 是它对艾滋病病毒 HIV 具有很强的抑制作用， 根 据临床观察， 本发明能减少患者服用抗艾滋病病 毒药物的毒副反应发生率， 特别是消化道症状和 肝毒性， 提高患者服药的依从性， 并能明显增加人 体 CD4 免疫细胞数量， 且无毒副作用， 从而提高抗 病毒治疗的疗效。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 徐彦 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书 1 页 说明书 9 页 CN 101213998 B1/1 页 2 1. 一种抗 HIV 病毒、 提高人体免疫力的保健普洱茶， 其特征在于由下列质量比的。
4、原料 组成 ： 普洱茶 30 50 石斛 10 20 人参 10 20 茯苓 5 10 天麻 10 20 灵芝 8 18 ； 经过下列方法制得 ： A、 先将石斛、 人参、 茯苓、 天麻、 灵芝原料分别经过下列方法提取 ： 将原料粉碎成粉末 状， 用水浸泡 3 5 小时， 于 80温度下加热 2 4 小时， 过滤， 浓缩滤液， 得浓度为 30 50的提取液 ； B、 将普洱茶与生物酶营养液按 1 0.1 0.3 的质量比进行混合后， 再与 A 步骤所得 各提取物的全量进行混合， 其中， 生物酶营养液由下列质量百分比的组分组成 ： 水解蛋白酶 0.1 0.3 葡萄糖 10 35 鲜果汁 15 3。
5、0 水 余量 ； C、 将B步骤所得混合物装入箱内， 在混合物堆内温度为40-65条件下， 发酵20-25天， 即得保健普洱茶 ； D、 将步骤 C 所得发酵保健普洱茶制成保健品类的散茶、 碎茶、 饼茶、 沱茶、 糖块茶、 袋泡 茶， 即得抗艾滋病病毒 HIV、 提高人体免疫功能的保健普洱茶产品。 2.根据权利要求1所述的一种抗HIV病毒、 提高人体免疫力的保健普洱茶， 其特征在于 所述 C 步骤的装箱发酵采用高度为 0.8-1 米的矩形或圆形或多边形箱体， 并在箱口封盖的 情况下进行发酵。 3.根据权利要求1所述的一种抗HIV病毒、 提高人体免疫力的保健普洱茶， 其特征在于 所述 B 步骤的。
6、水解蛋白酶为菠萝蛋白酶、 木瓜蛋白酶中的一种 ； 鲜果汁为梨汁、 苹果汁、 桃 子汁、 西瓜汁、 菠萝汁、 芒果汁、 葡萄汁、 西蕃莲汁、 哈密瓜汁、 木瓜汁、 橙汁、 石榴汁中的一种 或几种。 4.根据权利要求1所述的一种抗HIV病毒、 提高人体免疫力的保健普洱茶， 其特征在于 所述 B 步骤的生物酶营养液的 pH 值为 4.5 6.5。 5.根据权利要求1所述的一种抗HIV病毒、 提高人体免疫力的保健普洱茶， 其特征在于 所述保健普洱茶通过现有技术的常规方法提取后， 再采用现有技术的常规方法将所得提取 物制备成药剂学上允许的胶囊剂、 片剂、 冲剂、 口服液的口服制剂， 或者制备成药剂学上允。
7、 许的注射液、 注射用粉针剂、 注射用乳液的注射制剂。 权 利 要 求 书 CN 101213998 B1/9 页 3 抗 HIV 病毒、 提高人体免疫力的保健普洱茶 技术领域 0001 本发明涉及一种抗艾滋病病毒 (HIV) 的保健普洱茶， 及其在制备防治艾滋病药物 中的应用。 背景技术 0002 艾滋病因其传播速度快、 范围广， 以及到目前为止， 尚无有效的药物对其进行控制 与预防， 因而成为当今社会影响最大的病毒性传染病， 是危及人类身体健康的重大疾病之 一。 近年来世界各国都注重对艾滋病防治药物的研究， 并加大了研究投入， 但仍然未取得突 破性进展。 虽然有的采用高效抗逆转录病毒疗法，。
8、 以改善患者的病症， 增加CD4细胞数量， 减 少病毒， 但因其存在治疗费用昂贵， 毒副作用大， 不能阻断 HIV 的早期感染过程， HIV 变异快 等诸多问题， 难于让患者承受， 同时也难于获得有效的预防疫苗和治疗药物。 另外现有的防 治艾滋病的中草药， 也存在人体差异大， 疗效不显著， 防治效果不一等诸多问题。 因此， 防止 HIV 变异， 治疗 AIDS( 获得性免疫缺陷综合症 ) 病变的高效低毒药物， 仍然是世界性研究抗 HIV 药物的重大课题。 0003 普洱茶是我国茶饮料家族中的重要一员， 其独特的发酵加工工艺， 赋予普洱茶醇 厚、 香浓、 汤色艳丽的特色， 让普洱茶在富含茶叶固有。
9、的丰富营养成分如儿茶素、 单宁、 芳香 油、 维生素 C、 B、 D 以及微量元素外， 还含有多种防治疾病， 有利于增强人体免疫力， 提高人 体健康水平的有益物质。但迄今为此， 尚未见普洱茶在制备防治艾滋病药物及保健品中应 用的报导， 也未见具有防治艾滋病病毒 HIV 的保健普洱茶产品的报导。 发明内容 0004 本发明的目的就是提供一种抗艾滋病病毒 HIV、 提高人体免疫功能的保健普洱茶。 0005 本发明的目的是这样实现的 ： 一种抗艾滋病病毒 HIV、 提高人体免疫功能的保健 普洱茶， 其特征在于由下列质量比的原料组成 ： 0006 普洱茶 30 50 0007 石斛 10 20 000。
10、8 人参 10 20 0009 茯苓 5 10 0010 天麻 10 20 0011 灵芝 8 18。 0012 所述保健普洱茶经过下列方法制得 ： 0013 A、 先将石斛、 人参、 茯苓、 天麻、 灵芝原料分别经过下列方法提取 ： 将原料粉碎成粉 末状， 用水浸泡 3 5 小时， 于 80温度下加热 2 4 小时， 过滤， 浓缩滤液， 得浓度为 30 50的提取液 ； 0014 B、 将普洱茶与生物酶营养液按 1 0.1 0.3 的质量比进行混合后， 再与 A 步骤 所得各提取物的全量进行混合， 其中， 生物酶营养液由下列质量百分比的组分组成 ： 说 明 书 CN 101213998 B2。
11、/9 页 4 0015 水解蛋白酶 0.1 0.3 0016 葡萄糖 10 35 0017 鲜果汁 15 30 0018 水 余量 ； 0019 C、 将 B 步骤所得混合物装入箱内， 在混合物堆内温度为 40-65条件下， 发酵 20-25 天， 即得保健普洱茶 ； 0020 D、 将步骤 C 所得发酵保健普洱茶制成保健品类的散茶、 碎茶、 饼茶、 沱茶、 糖块茶、 袋泡茶， 即得抗艾滋病病毒 HIV、 提高人体免疫功能的保健普洱茶产品。 0021 所述 C 步骤的装箱发酵采用高度为 0.8-1 米的矩形或圆形或多边形箱体， 并在箱 口封盖的情况下进行， 以提高发酵效果， 满足发酵卫生要求。。
12、 0022 所述 B 步骤的水解蛋白酶为菠萝蛋白酶、 木瓜蛋白酶中的一种 ； 鲜果汁为梨汁、 苹 果汁、 桃子汁、 西瓜汁、 菠萝汁、 芒果汁、 葡萄汁、 西蕃莲汁、 哈密瓜汁、 木瓜汁、 橙汁、 石榴汁 中的一种或几种。 0023 所述 B 步骤的生物酶营养液的 pH 值为 4.5 6.5。 0024 所述发酵过程中的湿度控制以物料含水量为 10 30为限， 含水量的多与少， 又 决定于晒青毛茶及其它原料自身的含水量以及发酵过程中物料的水分含量。 0025 所述普洱茶为云南大叶种茶的晒青毛茶 ( 又名 ： 普洱生茶 )。 0026 所述保健普洱茶还可采用本申请人于 2006 年 1 月 11。
13、 日申请的专利号为 200610010625.1， 名称为 “一种用生物酶发酵普洱茶的方法” 的中国专利之方法及分层台架 进行发酵而得， 即 ： 0027 A、 将石斛、 人参、 茯苓、 天麻、 灵芝原料粉碎成粉末状， 与普洱茶充分混合后， 得混 合物 ； 0028 B、 将 A 步骤的混合物、 水和生物酶营养液按下列质量比进行混合 ； 0029 1 0.4 0.6 0.1 0.3 0030 其中， 生物酶营养液由下列质量百分比的组分组成 ： 0031 水解蛋白酶 0.1 0.3 0032 葡萄糖 10 35 0033 鲜果汁 15 30 0034 水 余量 ； 0035 C、 将混合后的上述。
14、茶叶混合物堆放到分层的台架上， 控制每层茶叶高度为 40-70cm ； 0036 D、 在茶堆温度为 40-65条件下， 发酵 20-25 天， 即得保健普洱茶 ； 0037 E、 用现有的常规加工方法制成保健品类的散茶、 碎茶、 饼茶、 沱茶、 糖块茶、 袋泡 茶， 即得抗艾滋病病毒 HIV、 提高人体免疫功能的保健普洱茶产品。 0038 其中的分层台架由立体框架和间隔设置于立体框架上的水平台板构成， 水平台板 设为固定台板， 或者抽拉式活动台板 ； 立体框架设置为矩形框架或者三角形框架或者圆柱 形框架或者多边形框架， 框架上间隔设置水平支撑件， 支撑件上放置固定或者活动台板 ； 框 架上的。
15、两两水平支撑件或者水平台板的间距为 70-85cm。 0039 上述所得保健普洱茶可与其他防治艾滋病的药物组合制成复方保健品类的散茶、 说 明 书 CN 101213998 B3/9 页 5 碎茶、 饼茶、 沱茶、 糖块茶、 袋泡茶。 0040 所述保健普洱茶可通过现有技术的常规方法提取后， 再采用现有技术的常规方法 将所得提取物制备成药剂学上允许的口服制剂如胶囊剂、 片剂、 冲剂、 口服液等。 0041 所述保健普洱茶提取物可通过现有技术的常规方法制备成药剂学上允许的注射 制剂如注射液、 注射用粉针剂、 注射用乳液等。 0042 所述保健普洱茶提取物可与其他防治艾滋病的药物组合制成药剂学上允。
16、许的复 方口服制剂或者复方注射制剂。 0043 所述药物为中草药或者西药。 0044 采用的使用量成人可以是 ： 0045 直接用保健普洱茶制成的保健类产品为 5 10 克 / 次， 每日 1 3 次。 0046 用保健普洱茶提取物制成的保健类产品为 0.15 0.2 克 / 次， 每日 1 3 次。 0047 本发明提供的保健普洱茶中的中药成分中， 天麻其性甘平润， 具有息风止痉， 通 络止痛的作用 ； 灵芝其性温， 味苦涩， 能滋补强体， 扶正固本、 促进新陈代谢及延缓衰老， 强 化人体免疫系统， 提高人体对疾病的抵抗能力 ； 石斛其味甘、 淡， 性微寒， 能提高人体内的 SOP( 超氯歧。
17、化酶 )， 降低 CPO( 过氯化脂质 ) ； 人参其性味甘微苦、 温， 具有固脱生津、 安神养 血的作用 ； 茯苓其性味甘淡、 平， 具有渗湿利水， 益脾和胃宁心安神的功效。 0048 本发明提供的保健普洱茶是一种后发酵茶， 在发酵过程中除添加生物酶营养液 外， 还添加灵芝、 天麻类真菌物质， 以及能提神补气的药物成分， 使之起到意想不到的效果， 该保健普洱茶除具有普洱茶自身的功效外， 更重要的是它对艾滋病病毒 HIV 具有很强的抑 制作用， 并能明显增加人体 CD4 免疫细胞数量， 且无毒副作用。 具体实施方式 0049 实施例 1 0050 按下列质量比取料 ： 0051 普洱生茶 30。
18、0 公斤 0052 石斛 200 公斤 0053 人参 100 公斤 0054 茯苓 100 公斤 0055 天麻 120 公斤 0056 灵芝 180 公斤 0057 经过本申请人的在先发明专利方法， 即 ： 0058 A、 将石斛、 人参、 茯苓、 天麻、 灵芝原料粉碎成粉末状， 与普洱茶充分混合后， 得混 合物 ； 0059 B、 将 A 步骤的 1 吨混合物与 0.4 吨水和 0.1 吨 pH 值为 4.5 的生物酶营养液进行 混合， 其中生物酶营养液由下列组分在常温下均匀混合而成的 ： 0060 菠萝蛋白酶 0.1 公斤 0061 葡萄糖 10 公斤 0062 苹果汁 15 公斤 0。
19、063 水 74.9 公斤 说 明 书 CN 101213998 B4/9 页 6 0064 C、 将 B 步骤所得混合物以每层 40cm 的高度堆放到台架上的台板上 ； 0065 D、 将台架置于发酵室内， 控制台架台板上茶堆温度 40， 发酵 25 天， 即得保健普 洱茶 ； 0066 E、 用现有的常规加工方法将 D 步骤所得保健普洱茶制成保健品类的饼茶， 即得抗 艾滋病病毒 HIV、 提高人体免疫功能的保健普洱茶产品。 0067 实施例 2 0068 按下列质量比取料 ： 0069 普洱生茶 500 公斤 0070 石斛 100 公斤 0071 人参 170 公斤 0072 茯苓 50。
20、 公斤 0073 天麻 100 公斤 0074 灵芝 80 公斤 0075 经过本申请人的在先发明专利方法， 即 ： 0076 A、 将石斛、 人参、 茯苓、 天麻、 灵芝原料粉碎成粉末状， 与普洱茶充分混合后， 得混 合物 ； 0077 B、 将 A 步骤的 1 吨混合物与 0.6 吨水和 0.3 吨 pH 值为 6.5 的生物酶营养液进行 混合， 其中生物酶营养液由下列组分在常温下均匀混合而成的 ： 0078 木瓜蛋白酶 0.3 公斤 0079 葡萄糖 30 公斤 0080 苹果汁 30 公斤 0081 水 39.7 公斤 0082 C、 将 B 步骤所得混合物以每层 70cm 的高度堆放。
21、到台架上的台板上 ； 0083 D、 将台架置于发酵室内， 控制台架台板上茶堆温度 60， 发酵 22 天， 即得保健普 洱茶 ； 0084 E、 用现有的常规加工方法将 D 步骤所得保健普洱茶制成保健品类的袋装茶， 即得 抗艾滋病病毒 HIV、 提高人体免疫功能的保健普洱茶产品。 0085 实施例 3 0086 按下列质量比取料 ： 0087 普洱茶 400 公斤 0088 石斛 140 公斤 0089 人参 150 公斤 0090 茯苓 70 公斤 0091 天麻 150 公斤 0092 灵芝 90 公斤 0093 经过下列方法 ： 0094 A、 先将石斛、 人参、 茯苓、 天麻、 灵芝。
22、原料分别经过下列方法提取 ： 将原料粉碎成粉 末状， 用水浸泡 3 小时， 于 80温度下加热 4 小时， 过滤， 浓缩滤液， 得浓度为 30的提取 液 ； 说 明 书 CN 101213998 B5/9 页 7 0095 B、 将 400 公斤普洱茶与 80 公斤 pH 值为 5.5 的生物酶营养液进行混合后， 再与 A 步骤所得各提取物的全量进行混合， 其中， 生物酶营养液由下列质量百分比的组分组成 ： 0096 木瓜蛋白酶 0.2 公斤 0097 葡萄糖 20 公斤 0098 鲜果汁 25 公斤 0099 水 54.8 公斤 0100 C、 将B步骤所得混合物装入高度为0.8米的矩形箱体。
23、内， 并在箱口封盖的情况下， 控制混合物堆内温度为 40条件下， 发酵 25 天， 即得保健普洱茶 ； 0101 D、 将 C 步骤所得保健普洱茶用现有技术的方法压制成沱茶， 或者用下列现有技术 的方法提取 ： 将保健普洱茶粉碎成粉末状， 用水浸泡 3 小时， 于 80温度下加热 4 小时， 过 滤， 浓缩滤液， 得浓度为 80的提取液， 配入适量糖液后， 制成口服液。 0102 实施例 4 0103 按下列质量比取料 ： 0104 普洱茶 320 公斤 0105 石斛 110 公斤 0106 人参 200 公斤 0107 茯苓 60 公斤 0108 天麻 200 公斤 0109 灵芝 110。
24、 公斤 0110 经过下列方法 ： 0111 A、 先将石斛、 人参、 茯苓、 天麻、 灵芝原料分别经过下列方法提取 ： 将原料粉碎成粉 末状， 用水浸泡 5 小时， 于 80温度下加热 2 小时， 过滤， 浓缩滤液， 得浓度为 50的提取 液 ； 0112 B、 将 320 公斤普洱茶与 96 公斤 pH 值为 6 的生物酶营养液进行混合后， 再与 A 步 骤所得各提取物的全量进行混合， 其中， 生物酶营养液由下列质量百分比的组分组成 ： 0113 菠萝蛋白酶 0.3 公斤 0114 葡萄糖 15 公斤 0115 鲜果汁 30 公斤 0116 水 54.7 公斤 0117 C、 将B步骤所得。
25、混合物装入高度为1米的圆形箱体内， 并在箱口封盖的情况下， 控 制混合物堆内温度为 65条件下， 发酵 20 天， 即得保健普洱茶 ； 0118 D、 将 C 步骤所得保健普洱茶用下列现有技术的方法提取 ： 将保健普洱茶粉碎成粉 末状， 用水浸泡4小时， 于80温度下加热3小时， 过滤， 浓缩滤液， 将所得滤饼进行干燥后， 装入囊材中， 得胶囊。 0119 为表明本发明的保健普洱茶具有抗艾滋病病毒 HIV 的功效， 下面将通过检测的试 验数据加以验证 ： 0120 I、 材料和方法 0121 一、 测定药物 0122 检测试验用的样品采用实施例3所得浓度为80的提取液。 取该提取液作为待测 说。
26、 明 书 CN 101213998 B6/9 页 8 样品， 并将其溶解于 RPMI-1640 完全培养基中， 0.22m 滤膜过滤除菌， 4保存， 贮存浓度 为 5.0mg/ml。 0123 二、 试剂和溶液 0124 (1) 试剂 0125 HEPES(N-2(2-Hydroxyothyl)piperazine-N -(2-ethanesufonic acid)、 MTT(3， (4， 5-dimethylthiazol-2-y1)-2， 5-diphenyl tetrazolium bromide)、 DMF(N， N -Dimethyl formamine)、 青 霉 素 (Penic。
27、illin)、 硫 酸 链 霉 素 (Streptomycin sulfate)、 谷 氨 酰 胺 (Glutamine) 均购自 Sigma 公司 ； 2- 巯基乙醇 (2-ME， 2-Mercaptoethan01) 为 Bio-Rad 公司 产品。RPMI-1640 和新生小牛血清为 Gibeo 公司产品。 0126 (2) 培养基 0127 RPMI-1640 完全培养基， 含有 10新生小牛血清， 2mM L- 谷氨酰胺， 10mM HEPES， 50M2- 巯基乙醇， 100,000IU 青霉素， 100g/ml 链霉素。 0128 三、 细胞和病毒 0129 人 T 淋 巴 细 。
28、胞 系 C8166、 MT-4 以 及 HIV-1 实 验 株 HIV-1IIIB均 由 英 国 MedicalResearchCouncil.AIDS Reagent Project 惠赠。所有细胞和病毒均以含 10小牛 血清的 RPMI-1640 完全培养基进行培养。按常规方法制备 HIV-1IIIB， 滴定并计算出病毒的 TCID50。病毒贮存液分装后， 置 -70保存。细胞和病毒按常规方法冻存和复苏。 0130 四、 HIV-1 感染性滴定 0131 HIV-1IIIB按 Johnson&Byington(1990) 所述方法改良进行滴定， 简述如下 ： 将 HIV-1 贮存液在 96。
29、 孔板上作 4 倍稀释， 10 个梯度， 每梯度 6 个重复孔， 同时设置对照孔 6 孔。每孔 ： 加入 C8166 细胞 50l， 每孔终体积为 200l。37， 5 CO2培养。第 3 天补加 新鲜 RPMI-1640 完全培养基 1001l， 第 7 天在倒置显微镜下观察每孔中 HIV-1 诱导的细 胞病变效应 (Cytopathic Effect， CPE)， 以每孔是否有合胞体 (Syncytium) 的形成确定 ： 按 Reed&Muench 方法计算病毒的 TCID50(50 Tissue Culture Infection Dose)。 0132 五、 对 C8166 细胞的毒。
30、性实验 0133 4105/ml C8166细胞悬液100l与不同的待测药物溶液混合， 设3个重复孔。 同 时设置不含药物的对照孔， 37， 5 CO2培养 3 天， 采用 MTT 比色法检测细胞毒性。ELx800 酶标仪测定OD值， 测定波长为595nm， 参考波长为630 nm。 计算得到CC50值(50Cytotoxic Concentration)， 即对 50的正常 T 淋巴细胞系 C8166 产生毒性时的药物浓度。 0134 六、 对 HIV-1IIIB致细胞病变 (CPE) 的抑制实验 0135 将 8105/ml C8166 细胞 50l/ 孔接种到含有 100l/ 孔梯度倍比。
31、稀释药物的 96 孔细胞培养板上， 然后加入 50l 的 HIV-1IIIB稀释上清， 1300 TCID50/ 孔。设 3 个重复 孔。同时设置不含药物的正常细胞对照孔。AZT 为阳性药物对照。37， 5 CO2培养 3 天， 倒置显微镜下 (100) 计数合胞体的形成。EC50(50 EffectiveConcentration) 为抑制合 胞体形成 50时的药物浓度。 0136 七、 对 HIV-1IIIB感染 MT-4 细胞死亡的保护实验 0137 在 96 孔细胞培养板上， 对每种药物进行 5 倍倍比稀释， 每个稀释度设 4 孔， 共 6 个 稀释度。每孔 100l。同时设置不含药物。
32、的未感染或感染 HIV-1IIIB的细胞对照组。AZT 作 为阳性对照药物。每个稀释度中的 2 孔分别滴加 MT-4 细胞悬液和 HIV-1IIIB上清各 50l。 说 明 书 CN 101213998 B7/9 页 9 另 2 孔滴加 MT-4 细胞悬液 100l。每孔终体积为 200l。置 37， 5 CO2培养箱中培养。 感染后第 3 天补加 100l 新鲜培养基。第 5 天用 MTT 方法用 ELx800 酶标仪测定 OD595/630nm 值。计算药物对细胞生长的抑制率和对 HIV-1IIIB感染细胞的保护率。CC50为对 50的宿主 细胞产生毒性的药物浓度 ； EC50为保护 50。
33、的 HIV-1IIIB感染细胞存活时的药物浓度。 0138 八、 计算公式 0139 根据实验结果绘制剂量反应曲线， 按 Reed&Muench 法计算出化合物抑制病毒的 50有效浓度 (EC50)， 50抑制细胞生长浓度 (CC50) 及抗 HIV-1 活性的治疗指数 TI 值 (Therapeutic index) 为 ： TI CC50/EC50。 0140 1、 细胞生长存活率 ( ) 实验孔 OD 值 / 对照孔 OD 值 100 0141 2、 HIV-1 致细胞病变的抑制率 ( ) (1- 实验孔合胞体数 / 对照孔合胞体 数 )100 0142 3、 化合物对 HIV-1 感染。
34、细胞的保护率 ( ) ( 实验孔 OD 值 -HIV 感染细胞对照 孔 OD 值 )/( 正常细胞对照孔 OD 值 HIV 感染细胞对照孔 0D 值 )100 0143 II、 结果 0144 一、 保健普洱茶提取物的细胞毒性作用 0145 保健普洱茶提取物对 C8166 细胞的毒性作用的实验数据见表 1、 图 1。 0146 CC50( 保健普洱茶提取物第一次实验 ) ： 378.26g/ml ； CC50( 保健普洱茶提取物第 二次实验 ) ： 377.83g/ml ； CC50(AZT) 为 ： 1389.95g/ml。 0147 二、 保健普洱茶提取物对 HIV-1IIIB诱导 C81。
35、66 细胞病变的抑制作用 0148 保健普洱茶提取物对 HIV-1IIIB诱导 C8166 细胞病变的抑制作用实验数据见表 2、 图 2。 0149 EC50( 保健普洱茶提取物第一次实验 ) ： 11.62g/ml ； EC50( 保健普洱茶提取物第 二次实验 ) ： 11.53g/ml ； EC50(AZT) 为 ： 4.01g/ml 0150 三、 保健普洱茶提取物对 HIV-1IIIB感染 MT-4 细胞死亡的保护实验 0151 保健普洱茶提取物对 HIV-1IIIB感染 MT-4 细胞死亡的保护实验数据见表 3、 图 3。 0152 CC50( 保健普洱茶提取物第一次实验 ) ： 9。
36、3g/ml ； CC50( 保健普洱茶提取物第二次 实验 ) ： 93.15g/ml， EC50( 保健普洱茶提取物第一次实验 ) ： 19.88g/ml ； EC50( 保健普洱 茶提取物第二次实验 ) ： 13.62g/ml。CC50(AZT) 1g/ml ； EC50(AZT) 为 0.0036g/ml。 0153 III、 实验结果 0154 保健普洱茶提取物细胞毒性和抗 HIV-1 活性结汇总表见表 4。 0155 IV、 结论 0156 保健普洱茶提取物对 C8166 细胞有一定的毒性， CC50为 377.83 378.26g/ml， 对 HIV-1 诱导 C8166 细胞形成合。
37、胞体抑制活性较好 ； EC50为 11.53 11.62g/ml， 治疗指 数 (TI) 为 32.55 32.76。保健普洱茶提取物对 HIV-1 感染 MT-4 细胞具有一定保护作用， 其 EC50为 13.62 19.88g/ml， 治疗指数 (TI) 值为 4.68 6.84。说明该保健普洱茶具 有体外抗 HIV-1 活性， 其治疗指数为 32.55 32.76。对 HIV-1 感染 MT-4 细胞有一定的保 护作用。 0157 为表明本发明的保健普洱茶具有治疗艾滋病病毒 HIV 的疗效， 下面将通过临床观 察其效果 ： 说 明 书 CN 101213998 B8/9 页 10 015。
38、8 一、 一般资料 0159 选择符合国家免费抗艾滋病病毒治疗医学入选标准的患者 80 例， 其中， 男性 60 例， 女性 20 例， 年龄在 19-65 岁之间， 平均 24.5 岁， 随机将 80 例患者分为二组， 对照组 40 例单服抗艾滋病病毒的药物， 试验组 40 例在服与对照组相同的抗艾滋病病毒药物的同时， 加服本发明实施例 1 提供的饼茶。两者在临床表现、 性别、 年龄等方面经统计学分析， 无显 著性差异 (P 0.05)。 0160 二、 治疗方法 0161 所有患者抗病毒治疗方案均采用标准一线方案， 即国家免费艾滋病抗病毒治疗手 册 (D4T+3TC+NVP 或 EFV)，。
39、 试验组加服本发明实施例 1 提供的饼茶， 一次 5 克， 开水冲泡， 每 日 3 次， 总疗程 4 个月。 0162 三、 观察指标 0163 观察指标包括临床症状、 体征和化验指标。了解患者药物毒副反应情况和评估疗 效。每月监测体重、 全血细胞计数、 血糖、 肌酐、 ALT 等， 每 2 月监测 CD4+细胞数。 0164 四、 结果 0165 试验组毒副反应发生率明显低于对照组， 特别是消化道症状和肝毒性发生率， 两 组对照有明显差异 (P 0.05)， 详见表 1。试验组 CD4+细胞计数上升率高于对照组， 详见 表 2。 0166 表 1 毒副反应发生情况 0167 组别消化道症状肝。
40、毒性皮疹周围神经炎 骨髓抑制 试验组 (40 例 )10 例 (25 )2 例 (5 )4 例 (20 )2 例 (5 )0 例 对照组 (40 例 )24 例 (60 )10 例 (25 )6 例 (15 )2 例 (5 )0 例 0168 (P 0.05) 0169 表 2 疗效评估 0170 组别CD4+细胞计数上升率 机会性感染再发 试验组 (40 例 ) 36 例 (90 ) 最高上升 426/mm30 例 对照组 (40 例 ) 24 例 (70 )8 例 (20 ) 0171 (P 0.05) 0172 五、 讨论 0173 保健普洱茶中的成分能减缓免疫细胞的损伤， 促进受损免疫细胞的恢复， 调整肠 道吸收环境等作用， 并能改善人体免疫系统， 胃肠道吸收。从本次病例研究结果看， 保健普 洱茶能减少患者服用抗艾滋病病毒药物的毒副反应发生率， 特别是消化道症状和肝毒性， 提高患者服药的依从性， 从而提高抗病毒治疗的疗效。本试验组 CD4+细胞计数上升率高于 说 明 书 CN 101213998 B9/9 页 11 对照组。 说 明 书 。