技术领域
本发明属于酵素生产技术领域，具体涉及一种诺丽果益生菌酵素及其制备方法。
背景技术
酵素指通过微生物对水果蔬菜发酵，提取的一种含生物活性成分的液体。上述生物活性成分包括酶但是不限于酶，包括活性抗氧化成分、生物质化素等，来自发酵参与菌和用于发酵的食材。
合理制作的酵素，所萃取的植物活性物质都是来自于食材，且发酵参与菌更是人体微生态系统的组成部分。因此，酵素的副作用几乎为零，强大的功效，极小的副作用，近年来一直呈爆炸性增长趋势。
诺丽果中是海滨木巴戟的果实。其果实具有富含人体细胞体细胞之成份，目前对诺丽果的开发还是处于早期阶段，例如进一步开发有诺丽果酒和诺丽果汁(CN103881882A)、诺丽果浆(CN103393027A)、诺丽果醋(CN101514319)等，但这些产品对原料中营养物质成分的提取不够充分。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种诺丽果益生菌酵素及其制备方法，解决了传统诺丽果应用途径窄的问题。
本发明所采用的技术方案为：
一种诺丽果益生菌酵素的制备方法，包括以下步骤：
S1将诺丽果500-800KG、哈密瓜50-100KG、火龙果100-150KG、黄精50-70KG、赤砂糖50KG加入发酵设备中；
S2向发酵设备中继续加入酵母菌5-10g和发酵乳杆菌5-10g进行初发酵，发酵时间为1-3个月；初发酵结束后加入副干酪乳杆菌5-10g、植物乳杆菌5-10g进行第二次发酵，发酵时间5-7个月；第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌5-10g继续第三次发酵3-5个月；第三次发酵结束后加入醋酸菌5-10g继续第四次发酵5-7个月；
S3四阶段发酵结束后，检测pH稳定在2.7-3.8之间，酒精度＜0.5％时，发酵完成；
S4将发酵完成的发酵液进行过滤；
S5静置纯化：将过滤后的发酵液静置纯化，当酒精度＜0.5％、乳酸菌总数≥1×106CFU/ml时纯化完成，得到诺丽果益生菌酵素原液。
所述S2中初发酵时，发酵过程定期搅拌，需氧、常温发酵，第二次发酵、第三次发酵和第四次发酵时，隔绝空气进行厌氧发酵。
发酵设备为发酵桶。
采用以上制备方法制得的诺丽果益生菌酵素。
诺丽果益生菌酵素原液进行灌装得到终产品。
灌装条件：控制室内洁净度达到10万级规定要求，车间工人进入车间前必须洗手、更衣、消毒，严格按灌装机及旋盖机的操作规程进行操作，在灌装进行中随时检查灌装量，封口质量等环节，确保产品符合标准技术要求。在灌装前后将设备及管道进行彻底清洗和消毒；灌装为瓶装，瓶及瓶盖清洗：瓶子先用纯净水翻转冲洗，再用洁净压缩空气吹干，盖子用消毒柜进行消毒处理，保证达到无菌要求。
优选以下技术方案：在S2中，专用发酵桶为850个，每个发酵桶容量1200升(每次加入原料总量1000kg左右)，电子称2台，每发酵桶装料量1吨，发酵温度为常温，车间密封，保持洁净，常温发酵，发酵时间为24个月。
在S5中，静置纯化罐为50个，每个静置纯化罐容量为30吨，使用材质为食品级塑料材质。
灌装时，灌装机的型号为TD-8，灌装机的数量为2套；旋盖机的型号TD-SP1，旋盖机的数量为2套，灌装速度为2000瓶/小时，瓶器为30ml玻璃瓶。
瓶及瓶盖清洗时，理瓶器2台；全自动翻转冲瓶机2台，全自动翻转冲瓶机的型号为CP-15；消毒柜1台，消毒柜的型号为ZTP-390。
与现有技术相比，本发明的有益技术效果是：
本发明以诺丽果、哈密瓜、火龙果、黄精为主要原料，原料的营养成分在科学合理的搭配上更加丰富，在益生菌的发酵作用下，同时严格控制益生菌的种类、用量以及发酵时长，保证原料的发酵更加充分，发酵过程分为四个阶段且根据不同阶段的特性分别加入不同的菌种，使发酵具有层次更加合理；特别是二次发酵阶段，自然发酵，不再增加糖源，最终使得原料中的营养物质、活性物质、抗氧化物质能够完全释放分解出来，最终得到一种营养丰富、可抑制肥胖、延缓衰老的诺丽果益生菌酵素，增加了诺丽果益生菌酵素营养价值。
本发明制得的诺丽果益生菌酵素不含任何食品添加剂，安全健康，无毒副作用，可放心享用，适宜于各类人群；解决了传统诺丽果、哈密瓜、火龙果、黄精应用途径窄、产品形态单一问题。
具体实施方式
下面结合实施例来说明本发明的具体实施方式，但以下实施例只是用来详细说明本发明，并不以任何方式限制本发明的范围。
以下实施例中原料加入发酵桶之前经过清洗、吹干、紫外消毒、粉碎。
实施例1：一种诺丽果益生菌酵素的制备方法，包括以下步骤：
S1将诺丽果700KG、哈密瓜50KG、火龙果150KG、黄精50KG、赤砂糖50KG加入发酵桶中；
S2向发酵桶中继续加入酵母菌10g和发酵乳杆菌10g进行初发酵，发酵过程每天搅拌，需氧、常温发酵，发酵时间为2个月；初发酵结束后加入副干酪乳杆菌10g、植物乳杆菌10g进行第二次发酵，发酵时间6个月；第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌10g继续第三次发酵4个月；第三次发酵结束后加入醋酸菌10g继续第四次发酵6个月；
第二次发酵、第三次发酵、第四次发酵时，发酵过程发酵桶覆膜密封，隔绝空气进行厌氧发酵。
S3四阶段发酵结束后，检测pH稳定在2.7-3.8之间，酒精度＜0.5％时，发酵完成；
S4将发酵完成的发酵液进行过滤；
S5静置纯化：将过滤后的发酵液静置纯化，当酒精度＜0.5％、乳酸菌总数≥1×106CFU/ml时纯化完成，得到诺丽果益生菌酵素原液。
实施例2：一种诺丽果益生菌酵素的制备方法，包括以下步骤：
S1将诺丽果800KG、哈密瓜50KG、火龙果100KG、黄精50KG、赤砂糖50KG加入发酵桶中；
S2向发酵桶中继续加入酵母菌5g和发酵乳杆菌10g进行初发酵，发酵过程每天搅拌，需氧、常温发酵，发酵时间为1个月；初发酵结束后加入副干酪乳杆菌5g、植物乳杆菌10g进行第二次发酵，发酵时间7个月；第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌5g继续第三次发酵3个月；第三次发酵结束后加入醋酸菌5-10g继续第四次发酵7个月；
第二次发酵、第三次发酵、第四次发酵时，发酵过程发酵桶覆膜密封，隔绝空气进行厌氧发酵。
S3四阶段发酵结束后，检测pH稳定在2.7-3.8之间，酒精度＜0.5％时，发酵完成；
S4将发酵完成的发酵液进行过滤；
S5静置纯化：将过滤后的发酵液静置纯化，当酒精度＜0.5％、乳酸菌总数≥1×106CFU/ml时纯化完成，得到诺丽果益生菌酵素原液。
实施例3：一种诺丽果益生菌酵素的制备方法，包括以下步骤：
S1将诺丽果500KG、哈密瓜100KG、火龙果150KG、黄精70KG、赤砂糖50KG加入发酵桶中；
S2向发酵桶中继续加入酵母菌10g和发酵乳杆菌5g进行初发酵，发酵过程每天搅拌，需氧、常温发酵，发酵时间为3个月；初发酵结束后加入副干酪乳杆菌10g、植物乳杆菌5g进行第二次发酵，发酵时间5个月；第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌8g继续第三次发酵5个月；第三次发酵结束后加入醋酸菌5-10g继续第四次发酵5个月；
第二次发酵、第三次发酵、第四次发酵时，发酵过程发酵桶覆膜密封，隔绝空气进行厌氧发酵。
S3四阶段发酵结束后，检测pH稳定在2.7-3.8之间，酒精度＜0.5％时，发酵完成；
S4将发酵完成的发酵液进行过滤；
S5静置纯化：将过滤后的发酵液静置纯化，当酒精度＜0.5％、乳酸菌总数≥1×106CFU/ml时纯化完成，得到诺丽果益生菌酵素原液。
实施例4：一种诺丽果益生菌酵素的制备方法，包括以下步骤：
S1将诺丽果600KG、哈密瓜80KG、火龙果120KG、黄精60KG、赤砂糖50KG加入发酵桶中；
S2向发酵桶中继续加入酵母菌8g和发酵乳杆菌8g进行初发酵，发酵过程每天搅拌，需氧、常温发酵，发酵时间为2个月；初发酵结束后加入副干酪乳杆菌8g、植物乳杆菌8g进行第二次发酵，发酵时间6个月；第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌8g继续第三次发酵5个月；第三次发酵结束后加入醋酸菌8g继续第四次发酵6个月；
第二次发酵、第三次发酵、第四次发酵时，发酵过程发酵桶覆膜密封，隔绝空气进行厌氧发酵。
S3四阶段发酵结束后，检测pH稳定在2.7-3.8之间，酒精度＜0.5％时，发酵完成；
S4将发酵完成的发酵液进行过滤；
S5静置纯化：将过滤后的发酵液静置纯化，当酒精度＜0.5％、乳酸菌总数≥1×106CFU/ml时纯化完成，得到诺丽果益生菌酵素原液。
实施例1-4得到诺丽果益生菌酵素原液后，需按国标GB/T31121检测微生物指标、重金属指标达标，其他指标达到行业标准T/CBFIA08003-2016，然后诺丽果益生菌酵素原液经专用管道输送至灌装车间，灌装得到诺丽果益生菌酵素成品。
效果实验：对实施例1-3所制得的诺丽果益生菌酵素进行大鼠抑制肥胖功效验证。
肥胖模型
实验对象及饲料：SD大鼠，SPF级，均为雄性，体重70-90g.
高脂饲料：由猪油(15％自制)、蛋黄粉(8％自制)、胆固醇(1.5％)、胆盐(0.5％)、基础饲料(75％)组成。
方法
适应性饲养5d后，随机分为5组，每组8只。以其中一组为基础对照组(B基础对照组)，其余4组为高脂模型组(HD组)。高脂饲料喂养模型组1周后，将4个模型组大鼠随机分为实验组1(HD-1组)，实验组2(HD-2组)，实验组3(HD-3组)，模型对照组(HD-0组)；B组给予基础饲料，HD0-3组给予高脂饲料，HD-1、HD-2、HD-3各组每日灌胃按体重给予0.7g/KG对应实施例1-3中制得的诺丽果益生菌酵素，B组和HD-0组以等容蒸馏水灌胃，连续30d。每5d检测空腹体重1次；30d后实验结束处死大鼠后，剥离大鼠肾周脂肪垫、附睾脂肪垫称重，计算脂体比。
实施例1-3制得的诺丽果益生菌酵素对大鼠体重的影响，各组大鼠体质量变化比较
*表示与同列B组比较具显著性差异(P＜0.05)；#表示与同列HD-0组比较具显著性差异(P＜0.05)
由上表可知，适应性喂养后随机分组，除B组外，各HD组大鼠质量无明显差异。每5d对大鼠质量进行称量，高脂饲料喂养大鼠过程中，HD-0组大鼠质量均高于基础对照组(P＜0.05)，表明高脂饮食肥胖大鼠模型建立成功。
HD-1、HD-2、HD-3组与HD-0组自15d后，大鼠质量存在明显差异(P＜0.05)。
实施例1-3制得的诺丽果益生菌酵素对大鼠体内脂肪重量的影响
各组大鼠脂肪质量变化比较
组别 附睾脂肪垫/g 肾周脂肪垫/g 脂体比/％ B 2.45±0.19* 2.21±0.57* 1.89±1.13* HD-0 5.90±1.54 6.83±1.57 4.13±0.86 HD-1 2.76±0.49* 2.73±0.29* 2.26±0.50* HD-2* 4.33±0.71* 3.30±0.68* 2.94±0.78* HD-3 4.46±1.34* 3.37±1.21* 3.03±1.99*
*表示与HD-0组比较具有显著性差异(P＜0.05)
由表可知，实验结束时HD模型组大鼠体内脂肪重量均高于B组。HD-1，HD-2，HD-3组大鼠肾周脂肪垫、附睾脂肪垫湿重均显著低于HD-0组，且三组脂体比也显著低于H-0组，具有显著性差异(P＜0.05)。说明实施例1-3所制得的诺丽果益生菌酵素对大鼠体内脂肪重量有显著影响具有显著抑制肥胖改善脂体比的效果，且以实施例1制得的诺力果益生菌酵素效果最为显著。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其他修改或者等同替换，只要不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。