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1、(10)授权公告号 CN 102498935 B (45)授权公告日 2013.10.23 CN 102498935 B *CN102498935B* (21)申请号 201110311512.6 (22)申请日 2011.10.14 A01G 1/04(2006.01) C05G 1/00(2006.01) (73)专利权人 福建农林大学 地址 350002 福建省福州市仓山区建新镇金 山学区 (72)发明人 刘斌 赵坤 黄一帆 陈颖 (74)专利代理机构 福州元创专利商标代理有限 公司 35100 代理人 蔡学俊 CN 1043610 A,1990.07.11, 说明书第 1 第 8-16。
2、 行， 第 2 页第 4-18 行 . CN 101372701 A,2009.02.25,说明书第1页 第 （1） 、（2） 、（3） 段 . 杜书旺等 . 生长发育条件 ； 原种、 栽培种制 作技术 .金针菇栽培技术 . 中原农民出版 社 ,2006,5， 8, 21-24. 冯昆等 . 金针菇多糖提取条件的优化 .黑 龙江八一农垦大学学报 .2005, 第 17 卷 ( 第 5 期 ),73-76. (54) 发明名称 一种利用食品加工剩余物制备金针菇营养液 的方法 (57) 摘要 本发明提供了一种利用食品加工剩余物制备 金针菇营养液的方法。所述方法以金针菇为出发 菌株， 经斜面、 一级。
3、摇瓶扩大培养得到摇瓶一级 种 ； 再以甘蔗渣为金针菇固态发酵培养基的主要 原料， 接种摇瓶一级种， 然后取出已长满菌丝体的 固体培养基， 粉粹， 得到金针菇发酵菌质 ； 然后用 热水浸提法获得富含金针菇多糖和氨基酸的提取 液， 并制成浓缩液 ； 最后将该浓缩液调配成营养 液。本发明利用加工剩余物， 获得大量的所需产 物， 用热水提取法能获得富含金针菇多糖、 氨基酸 的浓缩液， 解决了加工剩余物作为下脚料直接排 放的污染问题， 同时合理利用资源， 部分代替金针 菇子实体进行应用。本发明的一种金针菇营养液 的制备方法， 工艺稳定可靠， 适合于工业化生产。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 。
4、审查员 栾德琴 权利要求书 1 页 说明书 5 页 附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书5页 附图1页 (10)授权公告号 CN 102498935 B CN 102498935 B *CN102498935B* 1/1 页 2 1. 一种利用食品加工剩余物制备金针菇营养液的方法， 其特征在于 ： 所述方法包括以 下步骤 ： （1） 液体培养 ： 以金针菇为出发菌株， 经斜面、 一级摇瓶扩大培养得到摇瓶一级种 ； （2） 固态发酵 ： 以甘蔗渣为金针菇固态发酵培养基的主要原料， 接种摇瓶一级种， 然后 取出已长满菌丝体的固体培养基， 粉粹。
5、， 得到菌丝粉， 即为金针菇发酵菌质 ； （3） 金针菇发酵菌质用热水浸提法获得富含金针菇多糖和氨基酸的提取液， 并制成浓 缩液 ； 最后将该浓缩液调配成营养液 ； 步骤 （1）中所述一级摇瓶扩大培养中一级摇瓶培养基的配制为 ： 胡萝卜渣 1-3%， 麸 皮 0.5-1.5%， KH2PO4 0.1%， MgSO4 0.05%， 余量为水， 上述百分比均表示重量比， 起始 pH 为 6.0-8.0 ； 培养条件为 ： 110-180rpm 培养 5-10d， 温度 20-25 ； 步骤 （2） 所述金针菇固态发酵培养基的配方按重量比为 ： 甘蔗渣 60-90%， 麸皮 10-40%， pH 5。
6、-8， 原料混匀后加入水至 60-80% ； 培养条件为 ： 培养 13-22 天， 温度 20-25 ； 步骤 （3） 所述热水浸提法的步骤包括 ： a、 在金针菇发酵菌质中加入 10-20 倍重量的水， 置 55-60水浴中提取 1-2h， 抽滤 ； 再 将滤渣重复提取、 抽滤 1-2 次， 合并所有提取液 ； b、 将提取液在 55-60， 0.07-0.095MPa 低温真空下浓缩， 至测得可溶性固形物为 5-10%， 得浓缩液 ； C、 将所述浓缩液离心， 去除其中的不溶物质， 即得金针菇营养液。 权 利 要 求 书 CN 102498935 B 2 1/5 页 3 一种利用食品加工。
7、剩余物制备金针菇营养液的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种利用食品加工剩余物制备金针菇营养液的方法。 背景技术 0002 金针菇又名金菇、 朴菇、 冬菇等， 是世界著名的食药两用菌及观赏菌。金针菇肉质 脆嫩， 味道鲜美， 干品气味芳香， 营养丰富。干金针菇中含多糖 1 2， 蛋白质 8.39 11.80， 富含 VB1、 VB2、 尼克酸和 VC 等多种维生素 , 且富含钙、 磷、 铁等多种矿物质。另外， 金针菇含有多种生物活性成分， 能有效地增强机体的抵抗力， 促进体内新陈代谢， 增强机体 对癌细胞的抗御能力， 降地胆固醇， 降血脂， 防治肝脏、 心脑血管疾病和肠胃道溃疡的功能。 我国。
8、是最早进行人工固体栽培金针菇子实体的国家， 然而传统的人工固体栽培周期长， 受 环境影响因素大， 品质不稳定， 产量低， 无法满足市场需求， 且生产成本较高。 而金针菇发酵 获得菌丝体具有较大的优越性， 其培养周期短， 质量稳定， 产量增加快， 且营养价值高于子 实体， 能够实现工业化生产， 满足市场需求。利用菌丝体代替子实体来提取有效成分， 在食 品和医药方面的应用已成为一个新的趋势。 目前在该领域的技术上存在培养基成本相对较 高的问题。 0003 我国加工厂众多， 加工剩余物往往被企业丢弃， 这样既造成了资源的大量浪费， 又 严重地污染了环境。 目前， 尚未见以加工剩余物作为培养基发酵金针。
9、菇， 并制成营养液的报 道。 发明内容 0004 本发明的目的在于提供一种利用食品加工剩余物制备金针菇营养液的方法。 该方 法以胡萝卜渣、 甘蔗渣等食品加工剩余物作为培养基， 发酵并制备金针菇营养液。 解决了加 工剩余物作为下脚料直接排放的污染问题， 同时合理利用资源， 使金针菇发酵的成本更低。 0005 本发明采取的技术方案如下 ： 0006 本发明的一种利用食品加工剩余物制备金针菇营养液的方法， 该方法包括以下步 骤 ： 0007 （1） 液体培养 ： 以金针菇为出发菌株， 经斜面、 一级摇瓶扩大培养得到摇瓶一级 种 ； 0008 （2） 固态发酵 ： 以甘蔗渣为金针菇固态发酵培养基的主要。
10、原料， 接种摇瓶一级种， 然后取出已长满菌丝体的固体培养基， 粉粹， 得到富含菌丝粉， 即为金针菇发酵菌质 ； 0009 （3） 金针菇发酵菌质用热水浸提法获得富含金针菇多糖和氨基酸的提取液， 并制 成浓缩液 ； 最后将该浓缩液调配成营养液。 0010 步骤 （1） 中所述一级摇瓶扩大培养中一级摇瓶培养基的配制为 ： 胡萝卜渣 1-3%， 麸皮 0.5-1.5%， KH2PO4 0.1%， MgSO4 0.05%， 余量为水， 上述百分比均表示重量比， 起始 pH 为 6.0-8.0 ； 培养条件为 ： 110-180rpm 培养 5-10d， 温度 20-25。 0011 步骤 （2）所述金。
11、针菇固态发酵培养基的配方按重量比为 ： 甘蔗渣 60-90%， 麸皮 说 明 书 CN 102498935 B 3 2/5 页 4 10-40%， pH 5-8， 原料混匀后加入水至 60-80% ； 培养条件为 ： 培养 13-22 天， 温度 20-25。 0012 步骤 （3） 所述热水浸提法包括如下步骤 ： 0013 a、 在金针菇发酵菌质中加入 10-20 倍重量的水， 置 55-60水浴中提取 1-2h， 抽 滤 ； 再将滤渣重复提取、 抽滤 1-2 次， 合并所有提取液 ； 0014 b、 将提取液在 55-60， 0.07-0.095MPa 低温真空下浓缩， 至测得可溶性固形物。
12、为 5-10%， 得浓缩液 ； 0015 C、 将所述浓缩液离心， 去除其中的不溶物质， 即得金针菇营养液。 0016 本发明是一种利用胡萝卜渣、 甘蔗渣等食品加工剩余物制备金针菇营养液的方 法， 以金针菇为出发菌株， 利用胡萝卜渣和麸皮作培养基进行液体发酵， 获得大量的金针菇 液体菌种 ； 然后将液体菌种接种到以甘蔗渣和麸皮为主的固体培养基上扩大培养 ； 用热水 浸提法获得富含金针菇多糖、 氨基酸的提取液， 并制成浓缩液 ； 最后将此浓缩液中的多糖、 氨基酸等功能成分进行测定。 0017 将本发明的金针菇营养液液， 加入3倍体积95%乙醇， 进行醇析， 将醇析液置于5 冰箱中， 静置 12h。
13、， 充分沉淀活性多糖。4000r/min 离心 20min， 取沉淀， 倒掉上清液， 将沉淀 用蒸馏水复溶。以葡萄糖为标准品， 按照张惟杰主编的 复合多糖生化研究技术（1987 年） 中的苯酚硫酸法测定粗多糖含量。 将本发明的金针菇营养液液， 盐酸水解后， 利用氨基酸 自动分析仪测定氨基酸含量。其结果如下 ： 0018 1、 金针菇营养液中多糖含量的测定结果 0019 根据上述方法测得的标准曲线如图 1 所示， 其回归方程为 ： A490=15.137C-0.0024 ； 相关系数 r=0.9973。其中， A 为吸光度， C 为葡萄糖浓度。实验表明， 在葡萄糖质量浓度为 0.01 0.07m。
14、g/ml 时， 吸光度值与葡萄糖质量浓度呈现良好的线性关系。利用标准曲线计 算可得出， 金针菇营养原液中粗多糖含量为 2.0%。金针菇多糖是金针菇的主要生物活性成 分， 具有免疫调节、 抗肿瘤和抗衰老等作用。金针菇营养原液中多糖含量较高， 这为功能研 究打下基础。 0020 2、 金针菇营养液中氨基酸含量的测定结果 0021 表 1 营养液中氨基酸质量浓度 0022 说 明 书 CN 102498935 B 4 3/5 页 5 0023 营养液中氨基酸的含量， 特别是人体必需氨基酸的含量直接影响其营养价值。金 针菇营养液中氨基酸含量可达 557.07 mg/100ml， 且氨基酸种类较齐全。由。
15、表 1 可看出， 金 针菇含有多种氨基酸， 种类较齐全。其中含有 8 种人体必需氨基酸。测定的必需氨基酸中 以苏氨酸 (Thr) 含量最高， 为 44.37mg/100ml， 占全部氨基酸含量的 8.0%。亮氨酸 (Leu) 含 量位居第二， 39.89mg/100ml， 占全部氨基酸含量的 7.2%。另外， 非必需氨基酸中的谷氨酸 (Glu)和天门冬氨酸(Asp)在金针菇营养原液中含量也很高。 谷氨酸含量为85.62mg/ml,占 全部氨基酸含量的 15.4% ； 天门冬氨酸含量为 73.2mg/ 100ml， 占全部氨基酸含量的 13.1%。 谷氨酸和天冬氨酸均为鲜味类氨基酸， 其相应的钠。
16、盐具有强烈的鲜味， 可作为清凉饮料及 其它食品的调味剂。 特别是谷氨酸， 属于抗体内代谢的基本氨基酸， 是连接糖代谢和氨基酸 代谢的关键环节之一。在氨代谢中可与酮发生氨基转移作用， 从而合成其它氨基酸。此外， 谷氨酸是抗体中参与脑组织代谢的唯一氨基酸， 人体的脑组织只能氧化谷氨酸。 0024 本发明利用加工剩余物， 获得大量的所需产物， 用热水提取法能获得富含金针菇 多糖、 氨基酸的浓缩液， 解决了加工剩余物作为下脚料直接排放的污染问题， 同时合理利用 资源， 部分代替金针菇子实体进行应用。 本发明的一种金针菇营养液的制备方法， 工艺稳定 可靠， 适合于工业化生产。 附图说明 0025 图 1。
17、 为葡萄糖标准曲线。 具体实施方式 0026 本发明的一种利用胡萝卜渣、 甘蔗渣等食品加工剩余物制备金针菇营养液的方 法， 包括以下步骤 ： 0027 1 金针菇的液体、 固体发酵 ： 0028 1.1 将金针菇保存种用马铃薯培养基 （PDA 培养基） 进行活化、 复壮， 置 21-26恒 温箱静止培养 6-10 天， 直至菌丝长满斜面， 得到斜面菌种， 置冰箱中冷藏备用 ； 所述的 PDA 说 明 书 CN 102498935 B 5 4/5 页 6 培养基的配方为 ： 去皮马铃薯 20%， 蔗糖 2%， 琼脂 2.2%， KH2PO4 0.1%， MgSO4 0.05%， pH 自然 ； 。
18、0029 1.2 将 PDA 斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养， 得到液体发酵菌种 ； 所述的摇瓶培 养基的配方为胡萝卜渣 1-3%， 麸皮 0.5-1.5%， KH2PO4 0.1%， MgSO4 0.05%， 加水定容至所需 体积， 起始pH为6.0-8.0 ； 培养条件为 ： 以100-160mL/250mL装液量， 接入1cm2的斜面菌种， 旋转式摇床 110-180rpm 培养 5-10d， 温度 20-25 ； 0030 1.3 将液体发酵菌种转接入装有固体发酵培养基的蘑菇瓶进行扩大培养 ； 所述的 固体发酵培养基配方为 ： 甘蔗渣 60-90%， 麸皮 10-40%， pH 5-8。
19、， 混匀后加入水至 60-80%， 装 入蘑菇瓶。培养条件为 ： 以 60-80% 体积装瓶量， 接入 2-10% 的液体菌种， 培养 13-22 天， 温 度 20-25。 0031 2 浓缩液的制备 ： 0032 2.1 取出已长满菌丝体的固体培养基， 用粉碎机充分粉粹， 得到富含菌丝的粉 A。 0033 2.2 将粉 A 加入 10-20 倍重量的水， 置 55-60水浴中提取 1-2h， 经抽滤机抽滤得 提取液 C 和滤渣 B ； 将该滤渣 B 再重复提取、 抽滤 1-2 次， 得提取液 D。 0034 2.3 合并所述提取液 C 和提取液 D， 55-60， 0.07-0.095MP。
20、a 低温真空浓缩至可溶 性固形物为 5-10%， 得浓缩液。 0035 2.4 将所述浓缩液 3000-4500r/min 离心 10-25min， 去除其中的不溶物质， 即得金 针菇营养液。 0036 为充分公开本发明的利用胡萝卜渣等食品加工剩余物制备金针菇营养液的方法， 下面结合实施例加以说明。 0037 实施例 1 0038 利用胡萝卜渣等食品加工剩余物制备金针菇营养液的方法， 包括以下步骤 ： 0039 1金针菇的液体、 固体发酵 ： 0040 1.1 将金针菇保存种用马铃薯培养基 （PDA 培养基） 进行活化、 复壮， 置 (241) 恒温箱静止培养 7 天， 得到斜面菌种， 置冰箱。
21、中冷藏备用 ； 0041 1.2 将 PDA 斜面种用摇瓶培养基进行扩大培养， 得到生产摇瓶一级种 ； 所述的摇瓶 培养基的配方为胡萝卜渣 2.4%， 麸皮 0.6%， KH2PO4 0.1%， MgSO4 0.05%， 加水定容至所需体 积， 起始 pH 为 7.0 ； 培养条件为 ： 以 120mL/250mL 装液量。接入 1cm2的斜面菌种， 旋转式摇 床 120rpm 培养 7d， 温度 (241) ； 0042 1.3 将液体发酵菌种转接入装有固体发酵培养基的蘑菇瓶进行扩大培养 ； 所述的 固体发酵培养基配方为 ： 甘蔗渣 30g， 麸皮 10g， pH 自然， 混匀后加入水至培养。
22、基挤出微量 水， 装入蘑菇瓶。培养条件为 ： 以 75% 体积装瓶量， 接入 5% 的液体菌种， 培养 18 天， 温度 (231)。 0043 2浓缩液的制备 ： 0044 2.1 取出已长满菌丝体的固体培养基， 用粉碎机充分粉粹， 得到富含菌丝的粉 E。 0045 2.2将粉E加入13倍重量的水， 置(581)水浴中提取1.5h， 经抽滤机抽滤得提 取液 G 和滤渣 F ； 将该滤渣 F 再重复提取、 抽滤 1 次， 得提取液 H。 0046 2.3 合并所述提取液 G 和提取液 H， (581)， 0.09MPa 低温真空浓缩至可溶性固 形物为 10%， 得浓缩液。 0047 2.4 将所述浓缩液 4000r/min 离心 20min， 去除其中的不溶物质， 即得金针菇营养 说 明 书 CN 102498935 B 6 5/5 页 7 液。 0048 所得产品呈黄色 ； 含有丰富的多糖和必需、 非必需氨基酸， 多糖含量达 2mg/mL， 氨 基酸含量可达 557.07 mg/100ml。 0049 以上所有培养基配方中的化学原料均为分析纯。 说 明 书 CN 102498935 B 7 1/1 页 8 图 1 说 明 书 附 图 CN 102498935 B 8 。