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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610917551.3 (22)申请日 2016.10.20 (71)申请人 中国中医科学院中药研究所 地址 100700 北京市东城区东直门内南小 街16号 (72)发明人 陈士林 董林林 徐江 王瑞 高月 (74)专利代理机构 北京华进京联知识产权代理 有限公司 11606 代理人 王赛 (51)Int.Cl. A01N 35/02(2006.01) A01P 3/00(2006.01) (54)发明名称 尖孢镰刀菌杀菌剂及柠檬醛的应用 (57)摘要 本发明涉及一种尖孢。
2、镰刀菌杀菌剂, 活性成 分包括柠檬醛。 本发明还涉及一种柠檬醛的应 用, 将该柠檬醛作为活性成分, 用于防治尖孢镰 刀菌。 权利要求书1页 说明书4页 附图2页 CN 106538531 A 2017.03.29 CN 106538531 A 1.一种尖孢镰刀菌杀菌剂, 其特征在于, 活性成分包括柠檬醛。 2.如权利要求1所述的尖孢镰刀菌杀菌剂, 其特征在于, 包括溶剂, 该柠檬醛溶解或分 散在该溶剂中。 3.如权利要求2所述的尖孢镰刀菌杀菌剂, 其特征在于, 该溶剂为水、 乙醇、 甲醇及二甲 基亚砜中的至少一种。 4.如权利要求2所述的尖孢镰刀菌杀菌剂, 其特征在于, 该柠檬醛在该杀菌剂中的。
3、浓度 大于或等于4gL-1。 5.如权利要求2所述的尖孢镰刀菌杀菌剂, 其特征在于, 该柠檬醛在该杀菌剂中的浓度 大于或等于10gL-1。 6.如权利要求1所述的尖孢镰刀菌杀菌剂, 其特征在于, 由柠檬醛及溶剂组成。 7.一种柠檬醛的应用, 其特征在于, 将该柠檬醛作为活性成分, 用于防治尖孢镰刀菌。 8.如权利要求7所述的柠檬醛的应用, 其特征在于, 将该柠檬醛溶解或分散在溶剂中。 9.如权利要求8所述的柠檬醛的应用, 其特征在于, 该溶剂为水、 乙醇、 甲醇及二甲基亚 砜(DMSO)中的至少一种。 10.如权利要求8所述的柠檬醛的应用, 其特征在于, 该柠檬醛的浓度大于或等于4gL -1。。
4、 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 106538531 A 2 尖孢镰刀菌杀菌剂及柠檬醛的应用 技术领域 0001 本发明涉及根腐病防治领域, 特别涉及一种尖孢镰刀菌杀菌剂及柠檬醛的应用。 背景技术 0002 根腐病害是作物栽培中最普遍、 危害性最大的病害之一, 通过对中药材根腐病病 原菌进行鉴定研究后, 发现尖孢镰刀菌为主要致病菌。 尖孢镰刀菌(fusarium oxysporium) 为半知菌类镰孢菌属真菌。 病原以菌丝在土壤中或者病根上越冬, 成为再侵染源。 根腐病主 要为害幼苗根或茎基部, 病原菌定植后即可开始发病, 植株染病初期, 仅在个别支根和须根 染病, 并出现水渍状。 。
5、随后病变逐渐向主根扩展, 主根感病后, 植株早期表现症状不明显或 无症状出现。 其后随着根部腐烂程度的加剧, 根表皮呈现褐至黑褐色腐烂, 组织破碎, 仅留 下丝状褐色维管束, 由于根部表皮被破坏, 造成其吸收水分和养分功能减弱, 地上部位得不 到充分养分, 植株呈现出根尖微卷上翘, 生长缓慢, 新叶发黄等症状, 从而直接影响中药材 的产量和质量, 造成巨大的经济损失。 目前, 化学农药因其对有害生物速效、 操作方便及适 应性广等特点广泛应用于根腐病的防治, 相对的, 农药使用混乱、 高毒高残留等问题日益突 出。 发明内容 0003 有鉴于此, 确有必要提供一种安全、 有效、 低毒的尖孢镰刀菌杀。
6、菌剂, 以及柠檬醛 的应用。 0004 一种尖孢镰刀菌杀菌剂, 活性成分包括柠檬醛。 0005 一种柠檬醛的应用, 将该柠檬醛作为活性成分, 用于防治尖孢镰刀菌。 0006 本发明提出了柠檬醛防治中药材根腐病原菌尖孢镰刀菌的新用途, 该柠檬醛可以 用于尖孢镰刀菌杀菌剂。 柠檬醛是一种萜类化合物, 无色或微黄色液体, 呈柠檬香味, 易提 取, 天然存在于柠檬草油、 山苍子油, 柠檬油、 柑橘类叶油中, 另外, 从工业香叶醇(及橙花 醇)用酮催化剂减压气相脱氢可支取柠檬醛。 柠檬醛溶于油类、 丙二醇和乙醇, 不溶于甘油 和水。 柠檬醛无毒、 可食用, 因此使用柠檬醛防治根腐病病原菌尖孢镰刀菌, 具。
7、有安全、 有 效、 低毒的效果。 附图说明 0007 图1为对尖孢镰刀菌抑菌作用的检测实验示意图。 0008 图2为柠檬醛溶液对尖孢镰刀菌的抑菌效果测试数据图。 0009 图3至图7为不同浓度的柠檬醛溶液对尖孢镰刀菌的抑菌效果照片。 具体实施方式 0010 以下将结合附图详细说明本发明实施例尖孢镰刀菌杀菌剂, 以及柠檬醛的应用。 0011 本发明实施例提供一种尖孢镰刀菌杀菌剂, 该杀菌剂的活性成分包括柠檬醛。 在 说 明 书 1/4 页 3 CN 106538531 A 3 该杀菌剂中, 柠檬醛可单独作为活性成分。 在其他实施例中, 该尖孢镰刀菌杀菌剂还可以包 括其他活性成分, 该柠檬醛可与所。
8、述其他活性成分进行配伍共同防治尖孢镰刀菌。 0012 该尖孢镰刀菌杀菌剂具体可以为柠檬醛溶液, 包括柠檬醛及溶剂, 该柠檬醛溶解 或分散在该溶剂中。 该溶剂只要能够溶解或分散该柠檬醛, 并且对于柠檬醛对尖孢镰刀菌 的抑菌作用没有不利影响即可, 可以为常见的溶剂, 如水、 乙醇、 甲醇及二甲基亚砜(DMSO) 中的至少一种。 在优选的实施例中, 利用震荡仪充分震荡, 混合柠檬醛和水, 形成分散液, 该 尖孢镰刀菌杀菌剂为柠檬醛分散于水中形成的分散液。 由于柠檬醛在水中不溶而易挥发, 相对于溶解在有机溶剂中形成溶液, 实验证明柠檬醛分散液具有更好的尖孢镰刀菌杀菌作 用。 0013 该柠檬醛在该杀菌。
9、剂中的浓度优选为大于4gL-1, 更优选为大于10gL-1。 0014 本发明实施例还提供一种尖孢镰刀菌杀菌剂, 该尖孢镰刀菌杀菌剂由所述柠檬醛 及所述溶剂组成。 0015 本发明实施例还提供一种柠檬醛的应用, 具体为将该柠檬醛作为活性成分, 用于 防治尖孢镰刀菌。 在应用该柠檬醛防治尖孢镰刀菌时, 该柠檬醛溶解在溶剂中, 形成柠檬醛 溶液。 0016 该柠檬醛溶液包括柠檬醛及溶剂, 该柠檬醛溶解或分散在该溶剂中。 该溶剂只要 能够溶解或分散该柠檬醛, 并且对于柠檬醛对尖孢镰刀菌的抑菌作用没有不利影响即可, 可以为常见的溶剂, 如水、 乙醇、 甲醇及二甲基亚砜(DMSO)中的至少一种。 该柠檬。
10、醛作为活 性成分, 用于防治尖孢镰刀菌的浓度优选为大于4gL-1, 更优选为大于10gL-1。 0017 本发明实施例所使用的实验方法如无特殊说明, 均为常规方法。 本发明实施例中 所使用的材料及试剂, 如无特殊说明, 均可从商业途径得到。 0018 实施例1-8 0019 将柠檬醛在水中配成浓度为4、 6、 8、 10gL-1的分散液, 分别得到4gL-1柠檬醛分 散液(杀菌剂1)、 6gL-1柠檬醛分散液(杀菌剂2)、 8gL-1柠檬醛分散液(杀菌剂3)、 10gL -1柠檬醛分散液(杀菌剂4)。 0020 所用尖孢镰刀菌由中国中医科学院中药研究所保存。 采用杀菌剂1-4对尖孢镰刀 菌进行。
11、抑菌作用检测实验, 验证不同浓度的柠檬醛溶液对尖孢镰刀菌的影响。 0021 具体为, 取20mL灭菌的马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基液体加入无菌培养皿中, 待 液体凝固后吸取400 L的1108cfuml-1尖孢镰刀菌悬浮液均匀涂布在凝固的PDA上, 同时 将4片直径为8mm的灭菌滤纸圆片均匀黏于培养皿中。 请参阅图1, A表示灭菌滤纸圆片, B表 示尖孢镰刀菌涂布区。 应用杀菌剂1-4制作4种培养皿, 每种培养皿的4片灭菌滤纸圆片上滴 加相同的杀菌剂。 0022 对比例 0023 制作用于对照的培养皿, 制作方法与实施例1-4相同, 区别仅在于, 培养皿的4片灭 菌滤纸圆片上仅滴加水。 0。
12、024 实验结果 0025 实施例1-4及对比例的培养皿置于28培养箱培养相同时间, 具体为2至3天。 待对 比例菌落长满培养皿的平板, 进行实验结果记录。 每钟培养皿重复测试3次。 观察并记录有 无抑菌带产生并测量尖孢镰刀菌菌落直径, 实验结果如表1及图2-图3所示。 表1中平均一栏 说 明 书 2/4 页 4 CN 106538531 A 4 为重复3次实验的抑菌圈直径的平均值。 0026 表1.柠檬醛分散液对尖孢镰刀菌的抑菌效果 0027 0028 请参阅图3至图7, 通过对培养相同时间后的实施例1-4及对比例的培养皿拍摄光 学照片, 可以更直观的观察不同浓度的柠檬醛溶液对尖孢镰刀菌的抑。
13、菌效果。 图3至图7与 培养皿的对应关系如表2所示。 0029 表2.培养皿与图3至图7对应关系表 0030 0031 从上述实验数据可以看到, 本发明实施例提供的杀菌剂对根腐病病原菌尖孢镰刀 菌有抑菌作用, 且抑制效果与柠檬醛的浓度有关。 将抗菌效果的判定标准设置为: 抗菌圈直 径大于20mm为极敏感; 15-20mm为高敏感; 10-15mm为中敏感; 7-9mm为低敏感; 小于7mm为不 敏感。 从实验结果可以看到, 当杀菌剂中柠檬醛浓度大于或等于4gL-1且小于10gL-1时, 抑菌圈直径约为10-12mm, 表现为中敏感。 当杀菌剂中柠檬醛浓度大于或等于10gL-1时, 培 养皿上无。
14、菌落出现, 表现为极敏感。 对比例水对病原菌表现为不敏感, 结果表明柠檬醛对根 腐病原菌尖孢镰刀菌有抑制作用。 0032 使用柠檬醛溶液防治根腐病原真菌尖孢镰刀菌, 高效、 低毒, 当柠檬醛的浓度大于 或等于4gL-1且小于10gL-1时, 抑菌圈直径为10-12mm, 表现为中敏感。 当柠檬醛的浓度 说 明 书 3/4 页 5 CN 106538531 A 5 大于或等于10gL-1时, 培养皿上无菌落出现, 表现为极敏感。 0033 本发明实施例提出了柠檬醛防治中药材根腐病原菌尖孢镰刀菌的新用途, 该柠檬 醛可以用于尖孢镰刀菌杀菌剂。 柠檬醛是一种萜类化合物, 无色或微黄色液体, 呈柠檬香。
15、 味, 易提取, 天然存在于柠檬草油、 山苍子油, 柠檬油、 柑橘类叶油中, 另外, 从工业香叶醇 (及橙花醇)用酮催化剂减压气相脱氢可支取柠檬醛。 柠檬醛无毒、 可食用, 因此使用柠檬醛 防治根腐病病原菌尖孢镰刀菌, 具有安全、 有效、 低毒的效果。 柠檬醛溶液对根腐病原菌尖 孢镰刀菌有抑制作用。 当柠檬醛浓度大于10gL-1时, 对病原菌极敏感, 完全抑制培养皿上 菌落生长, 具有良好的防治效果。 0034 另外, 本领域技术人员还可在本发明精神内做其他变化, 当然, 这些依据本发明精 神所做的变化, 都应包含在本发明所要求保护的范围之内。 说 明 书 4/4 页 6 CN 106538531 A 6 图1 图2 图3 图4 说 明 书 附 图 1/2 页 7 CN 106538531 A 7 图5 图6 图7 说 明 书 附 图 2/2 页 8 CN 106538531 A 8 。