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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710452393.3 (22)申请日 2017.06.15 (71)申请人 西南大学 地址 400715 重庆市北碚区天生路2号 (72)发明人 明建 李瑶 石芳 (74)专利代理机构 北京华仲龙腾专利代理事务 所(普通合伙) 11548 代理人 李静 (51)Int.Cl. A23L 33/18(2016.01) C07K 1/14(2006.01) C07K 1/30(2006.01) C07K 14/375(2006.01) C12P 21/06(2006.01) 。
2、(54)发明名称 一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方 法 (57)摘要 本发明公开了一种金针菇蛋白抗氧化肽口 服液的加工方法， 该方法利用弱酸浸提蛋白质， 复合蛋白酶酶解蛋白为抗氧化肽， 取金针菇蛋白 抗氧化肽2535份， 加入白砂糖713份、 浓缩果汁 26份、 柠檬酸0.020.05份、 瓜尔豆胶0.050.13 份、 水3545份， 混合均匀即得金针菇蛋白抗氧化 肽口服液。 有益效果为： 本发明口服液具有较好 的抗氧化特性， 能够抑制脂质过氧化反应， 具有 螯合金属离子的能力， 可有效地抑制非金属离子 催化脂质过氧化反应； 营养全面丰富， 易于吸收， 口感佳、 酸甜适中、 风味独特； 。
3、蛋白肽得率高， 纯 度高， 产品批次稳定性好， 具有较大的市场潜力。 权利要求书1页 说明书4页 序列表1页 CN 108497503 A 2018.09.07 CN 108497503 A 1.一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 包括金针菇蛋白的提取、 金针菇蛋白 抗氧化肽的制备、 口服液制备， 其特征在于： 所述的金针菇蛋白的提取步骤为： 将金针菇洗 净切碎， 加入醋酸， 粉粹， 冰浴中超声波细胞破碎80100min， 搅拌80100min， 在35离心 1525min， 取上清液， 分次缓慢加入(NH4)2SO4， 离心， 沉淀物放入透析袋中， 于蒸馏水中透 析， 冻干。 2.根据。
4、权利要求1所述的一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 其特征在于： 所 述的金针菇蛋白的提取的步骤中金针菇与醋酸的固液比为34:1， 醋酸的浓度为36%。 3.根据权利要求1所述的一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 其特征在于： 所 述 的 金 针 菇 蛋 白 抗 氧 化 肽 的 制 备 步 骤 中 抗 氧 化 肽 的 氨 基 酸 序 列 有 HSASYSRYYSVCGYYVSHRGRCYCRCLRCRVLHPGKLCVCVNCSR。 4.根据权利要求1所述的一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 其特征在于： 所 述的金针菇蛋白抗氧化肽的制备步骤为： 金针菇蛋白提取物中以固液比为。
5、1:1525加水混 匀， 调节pH， 加入复合蛋白酶酶解， 灭酶， 离心过滤， 加入活性炭脱色， 离心， 微滤。 5.根据权利要求1所述的一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 其特征在于： 所 述的金针菇蛋白抗氧化肽的制备步骤中复合蛋白酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶， 其质量比 为35:1， 添加量为蛋白溶液的13wt%。 6.根据权利要求1所述的一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 其特征在于： 所 述的金针菇蛋白抗氧化肽的制备步骤中酶解pH为68， 温度为4555， 时间为57h。 7.根据权利要求1所述的一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 其特征在于： 所 述的金针菇蛋白抗氧化。
6、肽的制备步骤中活性炭的重量分数为13% 。 8.根据权利要求1所述的一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 其特征在于： 所 述的金针菇蛋白抗氧化肽的制备步骤中脱色pH为24， 温度为5565， 时间为1.52.5h。 9.根据权利要求1所述的一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 其特征在于： 所 述的金针菇蛋白抗氧化肽的制备步骤中微滤膜为0.40.5 m。 10.根据权利要求1所述的一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 其特征在于： 所述的口服液制备步骤中口服液的配方成分及其重量份为： 金针菇蛋白抗氧化肽2535份、 白砂糖713份、 浓缩果汁26份、 柠檬酸0.020.05份、 。
7、瓜尔豆胶0.050.13份、 水3545份。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 108497503 A 2 一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法 技术领域 0001 本发明涉及食品加工技术领域， 尤其是涉及一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加 工方法。 背景技术 0002 金针菇 （Flammulina velutipes） 又名冬燕、 朴燕、 构菌、 青杠菌、 毛柄金钱菌等， 隶 属担子菌亚门、 层菌纲、 伞菌目、 口蘑科、 金钱菌属。 因其菌柄细长似金针菜， 所以称为金针 菇。 金针菇是秋冬与早春栽培的食用菌， 在自然界中分布很广， 中国、 日本、 俄罗斯、 欧洲、 北 美洲、 澳大。
8、利亚等均有分布。 我国北起黑龙江、 南至云南、 东起江苏、 西至新疆均适合金针菇 的生长。 金针菇脂肪含量低， 含有较高的蛋白质、 糖类和粗纤维， 还富含VB1、 VB2、 Vc等多种维 生素和钙、 磷、 铁等多种矿物质， 营养十分丰富。 金针菇中还含有18种氨基酸， 每100g鲜菇中 含有氨基酸总量达20.9mg， 其中8种人体必需氨基酸占总量的42.2951.17%， 异亮氨酸和谷 氨酸含量最高， 必需氨基酸中精氨酸和赖氨酸含量较高， 较高含量的精氨酸能预防和治疗 肝炎、 胃肠馈病等消化系统疾病， 赖氨酸可以促进儿童生长发育， 增强记忆， 提高智力。 0003 抗氧化肽是天然抗氧化剂的一种。
9、， 具有低毒或无毒、 高效等特点， 是近年来国内外 研究的热点。 抗氧化肽由2-20个氨基酸残基组成， 能抑制生物大分子过氧化或清除体内过 量氧自由基及其产物。 通常其分子较小， 空间构象不稳定， 具有一种或多种生理功能活性。 一些天然抗氧化肽还具有清除重金属和促进过氧化氢分解的作用。 抗氧化肽具有较强的生 物活性和安全性， 在人类食品和药品的应用中具有巨大的发展前景。 0004 现有技术如授权公告号为CN 102846672 B的中国发明专利， 公开了一种金针菇益 智口服液的制备方法， 该制备方法包括以下步骤： 将金针菇、 猴头菇和香菇子实体按质量比 3:2:1-8:1:1 在低温中进行脱水。
10、并粉碎； 向粉碎后的子实体混合物中加入其体积 5-20倍 的 60水超声提取1-3小时， 过滤； 向滤渣中加入其体积3-10倍的60水超声提取1-3小 时， 然后过滤； 将滤液混合均匀， 缩至子实体粉碎后体积的6-20倍； 加入牛磺酸混合均匀。 该 金针菇益智口服液具有提高机体免疫和改善记忆、 益智的功效， 但该方法使金针菇的利用 率低， 且口感不佳。 发明内容 0005 本发明的目的在于提供一种具有较强的抗氧化活性、 蛋白肽得率高、 口感佳、 营养 丰富、 易于吸收的金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法。 0006 本发明针对上述技术中提到的问题， 采取的技术方案为： 一种金针菇蛋白抗氧化 肽。
11、口服液的加工方法， 包括金针菇蛋白的提取、 金针菇蛋白抗氧化肽的制备、 口服液制备， 具体操作步骤为： 金针菇蛋白的提取： 将金针菇洗净切碎， 以固液比为34:1加入浓度为36%的醋酸， 粉 粹至糊状， 放入冰浴中， 超声波细胞破碎80100min， 搅拌80100min， 在35离心15 25min， 取上清液， 称取8595%饱和溶液所需(NH4)2SO4的量， 2535min内分次缓慢加入， 然后 说 明 书 1/4 页 3 CN 108497503 A 3 在35下离心1525min， 收集沉淀物， 放入透析袋中， 于90110倍体积蒸馏水中透析， 换水 46次， 冻干， 即得金针菇蛋。
12、白提取物， 该步骤中利用弱酸浸提蛋白质， 超声波能使细胞急剧 震荡破裂， 促使蛋白融出， 金针菇蛋白中含有18种氨基酸， 其中人体所必须得氨基酸种， 占 氨基酸总量的， 高于一般菇类， 在必须氨基酸中赖氨酸和精氨酸含量丰富， 具有很好的食药 价值； 金针菇蛋白抗氧化肽的制备： 金针菇蛋白提取物中以固液比为1:1525加水混匀， 调节 pH为68， 加入13wt%蛋白溶液的复合蛋白酶， 复合蛋白酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶， 其 质量比为35:1， 在4555下酶解57h， 100120下灭酶1015min， 酶解液进行离心过滤， 滤液中加入重量分数为13%的活性炭， 调节pH为24， 5565下。
13、脱色1.52.5h后离心， 用 0.40.5 m微滤膜进行微滤， 滤液即为金针菇蛋白抗氧化肽， 抗氧化肽的氨基酸序列有 HSASYSRYYSVCGYYVSHRGRCYCRCLRCRVLHPGKLCVCVNCSR， 该金针菇肽具有较好的抗氧化特性， 安全无毒且具有一定的保健功能， 能够抑制由金属离子、 血红蛋白、 脂酶和单线态氧、 O2-、 OH、 ROO 催化的脂质过氧化反应， 具有螯合金属离子的能力， 可有效地抑制非金属离子催 化脂质过氧化反应， 激活机体本身内在的抗氧化防御系统， 达到保健的效果； 口服液制备： 口服液的配方成分及其重量份为： 金针菇蛋白抗氧化肽2535份、 白砂糖7 13。
14、份、 浓缩果汁26份、 柠檬酸0.020.05份、 瓜尔豆胶0.050.13份、 水3545份， 按配方称 取配料， 混合均匀即得金针菇蛋白抗氧化肽口服液， 该口服液含有大量的抗氧化肽， 具有较 强的抗氧化活性， 营养全面丰富， 易于吸收， 口感佳、 酸甜适中、 风味独特， 易被消费者接 受， 且产品稳定性好， 具有较大的市场潜力。 0007 与现有技术相比， 本发明的优点在于： 1） 本发明金针菇蛋白抗氧化肽口服液含有 大量的抗氧化肽， 具有较好的抗氧化特性， 安全无毒且具有一定的保健功能， 能够抑制脂质 过氧化反应， 具有螯合金属离子的能力， 可有效地抑制非金属离子催化脂质过氧化反应； 2。
15、） 营养全面丰富， 易于吸收， 口感佳、 酸甜适中、 风味独特， 易被消费者接受； 3） 该加工方法通 过酶解提取的金针菇蛋白制备蛋白抗氧化肽， 蛋白肽得率高， 纯度高， 且口服液产品批次稳 定性好， 易于扩大生产， 具有较大的市场潜力。 具体实施方式 0008 下面通过实施例对本发明方案作进一步说明： 实施例1： 一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 包括金针菇蛋白的提取、 金针菇蛋白抗 氧化肽的制备、 口服液制备， 具体操作步骤为： 1） 金针菇蛋白的提取： 将金针菇洗净切碎， 以固液比为3:1加入浓度为5%的醋酸， 粉粹 至糊状， 放入冰浴中， 超声波细胞破碎90min， 搅拌90m。
16、in， 在4离心20min， 取上清液， 称取 90%饱和溶液所需(NH4)2SO4的量， 28min内分次缓慢加入， 然后在4下离心20min， 收集沉淀 物， 放入透析袋中， 于100倍体积蒸馏水中透析， 换水5次， 冻干， 即得金针菇蛋白提取物， 该 步骤中利用弱酸浸提蛋白质， 超声波能使细胞急剧震荡破裂， 促使蛋白融出， 金针菇蛋白中 含有18种氨基酸， 其中人体所必须得氨基酸种， 占氨基酸总量的， 高于一般菇类， 在必须氨 基酸中赖氨酸和精氨酸含量丰富， 具有很好的食药价值； 2） 金针菇蛋白抗氧化肽的制备： 金针菇蛋白提取物中以固液比为1:1525加水混匀， 调 说 明 书 2/4。
17、 页 4 CN 108497503 A 4 节pH为7， 加入2wt%蛋白溶液的复合蛋白酶， 复合蛋白酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶， 其质 量比为5:1， 在50下酶解6h， 120下灭酶14min， 酶解液进行离心过滤， 滤液中加入重量 分数为2%的活性炭， 调节pH为3， 60下脱色2h后离心， 用0.42 m微滤膜进行微滤， 滤液即为 金针菇蛋白抗氧化肽， 抗氧化肽的氨基酸序列有 HSASYSRYYSVCGYYVSHRGRCYCRCLRCRVLHPGKLCVCVNCSR， 该金针菇肽具有较好的抗氧化特性， 安全无毒且具有一定的保健功能， 能够抑制由金属离子、 血红蛋白、 脂酶和单线态氧、 。
18、O2-、 OH、 ROO 催化的脂质过氧化反应， 具有螯合金属离子的能力， 可有效地抑制非金属离子催 化脂质过氧化反应， 激活机体本身内在的抗氧化防御系统， 达到保健的效果； 3） 口服液制备： 口服液的配方成分及其重量份为： 金针菇蛋白抗氧化肽30份、 白砂糖12 份、 浓缩果汁4份、 份柠檬酸0.020.05份、 瓜尔豆胶0.050.13份、 水3545份， 按配方称取配 料， 混合均匀即得金针菇蛋白抗氧化肽口服液， 该口服液含有大量的抗氧化肽， 具有较强的 抗氧化活性， 营养全面丰富， 易于吸收， 口感佳、 酸甜适中、 风味独特， 易被消费者接受， 且产 品稳定性好， 具有较大的市场潜力。
19、。 0009 实施例2： 一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法， 包括金针菇蛋白的提取、 金针菇蛋白抗 氧化肽的制备、 口服液制备， 具体操作步骤为： 1） 金针菇蛋白的提取： 将金针菇洗净切碎， 以固液比为4:1加入浓度为5%的醋酸， 粉粹 至糊状， 放入冰浴中， 超声波细胞破碎100min， 搅拌90min， 在5离心20min， 取上清液， 称取 90%饱和溶液所需(NH4)2SO4的量， 30min内分次缓慢加入， 然后在4下离心20min， 收集沉淀 物， 放入透析袋中， 于110倍体积蒸馏水中透析， 换水6次， 冻干， 即得金针菇蛋白提取物， 该 步骤中利用弱酸浸提蛋白质， 超声。
20、波能使细胞急剧震荡破裂， 促使蛋白融出， 金针菇蛋白中 含有18种氨基酸， 其中人体所必须得氨基酸种， 占氨基酸总量的， 高于一般菇类， 在必须氨 基酸中赖氨酸和精氨酸含量丰富， 具有很好的食药价值； 2） 金针菇蛋白抗氧化肽的制备： 金针菇蛋白提取物中以固液比为1:18加水混匀， 调节 pH为7， 加入2wt%蛋白溶液的复合蛋白酶， 复合蛋白酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶， 其质量 比为5:1， 在50下酶解6h， 120下灭酶10min， 酶解液进行离心过滤， 滤液中加入重量分 数为3%的活性炭， 调节pH为3， 60下脱色2h后离心， 用0.45 m微滤膜进行微滤， 滤液即为金 针菇蛋白抗氧。
21、化肽， 抗氧化肽的氨基酸序列有 HSASYSRYYSVCGYYVSHRGRCYCRCLRCRVLHPGKLCVCVNCSR， 该金针菇肽具有较好的抗氧化特性， 安全无毒且具有一定的保健功能， 能够抑制由金属离子、 血红蛋白、 脂酶和单线态氧、 O2-、 OH、 ROO 催化的脂质过氧化反应， 具有螯合金属离子的能力， 可有效地抑制非金属离子催 化脂质过氧化反应， 激活机体本身内在的抗氧化防御系统， 达到保健的效果； 3） 口服液制备： 口服液的配方成分及其重量份为： 金针菇蛋白抗氧化肽30份、 白砂糖10 份、 浓缩果汁4份、 柠檬酸0.03份、 瓜尔豆胶0.1份、 水40份， 按配方称取配料。
22、， 混合均匀即得 金针菇蛋白抗氧化肽口服液， 该口服液含有大量的抗氧化肽， 具有较强的抗氧化活性， 营养 全面丰富， 易于吸收， 口感佳、 酸甜适中、 风味独特， 易被消费者接受， 且产品稳定性好， 具有 较大的市场潜力。 0010 本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知， 在此不进行赘述。 0011 以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明， 应理解的是以上所述仅 说 明 书 3/4 页 5 CN 108497503 A 5 为本发明的具体实施例， 并不用于限制本发明， 凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、 补充或类似方式替代等， 均应包含在本发明的保护范围之内。 说 。
23、明 书 4/4 页 6 CN 108497503 A 6 SEQUENCE LISTING 西南大学 一种金针菇蛋白抗氧化肽口服液的加工方法 1 1 PatentIn version 3.5 1 45 PRT 人工合成 1 His Ser Ala Ser Tyr Ser Arg Tyr Tyr Ser Val Cys Gly Tyr Tyr Val 1 5 10 15 Ser His Arg Gly Arg Cys Tyr Cys Arg Cys Leu Arg Cys Arg Val Leu 20 25 30 His Pro Gly Lys Leu Cys Val Cys Val Asn Cys Ser Arg 35 40 45 序 列 表 1/1 页 7 CN 108497503 A 7 。