技术领域
本发明涉及一种可溶性鹿鞭提取物的制备方法，属于特种经济动物鹿产品的深加工技术领域。
背景技术
中药鹿鞭系鹿科动物梅花鹿或马鹿带睾丸的阴茎，是我国传统的补益类中药，具有补肾阳、益精血的功能，用于治疗阳痿、肾虚耳鸣、妇人子宫寒冷、久不受孕、慢性睾丸炎等疾病。目前，鹿鞭最常用于配制鹿鞭酒。但是由于鹿鞭属于动物组织，在酒中溶解度极低，仅能达到4％，因此，绝大多数鹿鞭并不能通过饮酒吸收，大大影响了鹿鞭的利用率和药用效果。
发明内容
为提高鹿鞭的利用率和药用效果，本发明提供了一种可溶性鹿鞭提取物制备方法，采用的技术方案如下：
本发明的目的在于一种可溶性鹿鞭提取物的制备方法，该方法包括如下步骤：
1)将鹿鞭切片，然后烘干至恒重，获得干鹿鞭，将获得的干鹿鞭粉碎后与蒸馏水混合成悬液；
2)将步骤1)获得的悬液先后用胃蛋白酶和胰蛋白酶进行消化；其中：胃蛋白酶按照质量比为干鹿鞭：胃蛋白酶＝(70-80)：1，胰蛋白酶按照质量比为干鹿鞭：胰蛋白酶＝(180-220)：1；
3)将经过步骤2)消化后的液体进行干燥处理，获可溶性鹿鞭提取物。
优选地，步骤1)所述鹿鞭为新鲜鹿鞭或传统干制鹿鞭。
优选地，步骤1)是将粉碎后得到的粉末与蒸馏水按照质量比为1:10混合。
优选地，步骤1)所述烘干至恒重是在65℃下烘干至恒重。
优选地，步骤2)中胃蛋白酶按照质量比为干鹿鞭：胃蛋白酶＝75：1，胰蛋白酶按照质量比为干鹿鞭：胰蛋白酶＝200：1。
优选地，步骤2)中胃蛋白酶消化完成后进行灭酶处理，在胰蛋白酶消化完成后进行灭酶处理；所述灭酶处理是指：将消化后的液体升温至95℃以上，维持至少15min。
优选地，步骤2)所述胃蛋白酶的消化条件为37℃、pH值1.0-2.0、恒温消化4-6h。
优选地，步骤2)所述胰蛋白酶的消化条件为37℃、pH值7.8-8.4、恒温消化1-2h。
优选地，步骤3)中，在干燥处理前，先将消化后的液体进行沉降处理成滤液和滤渣，然后对滤液进行喷雾干燥。
进一步地，所述沉降处理的方式为离心或膜过滤。
本发明还提供了上述任一方法制备的鹿鞭提取物用于制备保健品。
例如：
1)将按照本发明方法制备的可溶性鹿鞭提取物溶于酒基中，形成高鹿鞭含量鹿鞭酒；与其它保健药材制备的酒混合，即可形成某种特殊功效的保健酒。
2)将按照本发明方法制备的可溶性鹿鞭提取物溶于制备口服液的基液中，按照口服液制备所需的流程，制备成高鹿鞭含量口服液。
3)将按照本发明方法制备的可溶性鹿鞭提取物，分别按照压片工艺制备成片剂，即可制备成用速溶鹿鹿鞭片，咀嚼服用，开水冲服，或者加入白酒中，将普通白酒瞬时制成鹿鞭酒。
4)将按照本发明方法制备的可溶性鹿鞭提取物作为制备含鹿鞭成分的保健品、中成药的鹿鞭提取物原材料。
5)将按照本发明方法制备的可溶性鹿鞭提取物制备老汤，直接或加入其它药膳材料后，制备药膳食品。该方法与传统方法相比的好处是，更多的鹿鞭成分溶于老汤中，大幅度提高药膳食品的效果。
本发明有益效果：
1、鹿鞭最常用于配制鹿鞭酒，然而整支鹿鞭中，能够溶于酒中的成分微乎其微，仅有4.0％左右。按照本发明中的方法粉碎后，在40％的以乙醇中的溶解度能达到21.0％。经过本发明方法进行双酶酶解后，鹿鞭粉在水中的溶解度为93.2％。也就是说，可溶性鹿鞭提取物的的得率为93.2％。采用本发明的方法取得了预料不到的技术效果：本发明经过酶解后可溶性鹿鞭提取物的得率达到93.2％，且该提取物能够完全溶于40％的乙醇，相比于传统提取工艺，本发明方法的提取率提高了23倍。
2、在现有报道的鹿鞭酶解提取方法中，采用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶等非消化酶。本发明分别采用胃蛋白酶和胰蛋白酶进行酶解，该种方法能够有效避免营养成分和活性成分的流失，并充分保留营养成分：首先，本方法将不可溶的大分子降解成可溶性的小分子，不仅能够使得酶解后制备的鹿鞭提取物具有高溶解度。其次，该方法没有引入非哺乳动物消化酶，保证了鹿鞭中的活性成分不受非正常消化降解的破坏，减少了营养成分和活性成分的损失，最大限度的保存了活性成分和营养成分，进而最大限度的保存了鹿鞭的保健效果。
3、本发明所述的方法克服了现有鹿鞭提取率低的难题，为鹿鞭深加工产品的开发提供了新的方法，并且该新的方法与现有方法相比较，更多的保留了鹿鞭中的活性成分和营养成分。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受实施例的限制。
以下实施例中提取率的计算公式如下:
δ＝(A-B/A)×100％
δ:提取率；A：提取前干鹿鞭的重量(65℃烘干至恒重)；B：提取后渣子的重量(65℃烘干至恒重)。
实施例1：
本实施例提供了一种利用新鲜鹿鞭制备可溶性鹿鞭提取物的方法，该方法是通过下述步骤实现的：
1)粉碎：将新鲜鹿鞭冷冻后切片，65℃下烘干至恒重，获得干鹿鞭，将获得的干鹿鞭粉碎至絮状，然后将粉碎后的絮状粉末与蒸馏水按照质量比为1:10混合成悬液；
2)消化：将步骤1)获得的悬液用10M的浓HCl调节PH至2.0，通过水浴加热至37℃，并维持恒温；按干鹿鞭：胃蛋白酶＝75:1(质量比)的比例加入胃蛋白酶，搅拌均匀，37℃恒温消化6小时；升温至95℃以上，至少15分钟，使酶灭活；然后将温度降至37℃后，用20M的浓NaOH调节PH至8.4，按干鹿鞭：胰蛋白酶＝200:1(质量比)的比例加入胰蛋白酶，搅拌均匀，37℃恒温消化2小时；升温至95℃以上，至少15分钟，使酶灭活。
3)沉降和喷雾干燥：将消化后的液体进行离心(少量可以离心，大量生产可以用膜过滤)，获得滤液和滤渣，除去不溶性物质，将滤液通过喷雾干燥，制备成粉剂，获得可溶性鹿鞭提取物。
本实施例中可溶性鹿鞭提取物的得率高达93.2％，且将该提取物溶于40％的乙醇发现，该提取物能够完全溶于40％的乙醇。
实施例2
本实施例提供了一种利用传统干制鹿鞭制备可溶性鹿鞭提取物的方法，该方法是通过下述步骤实现的：
1)粉碎：将传统干制鹿鞭切片，65℃下烘干至恒重，获得干鹿鞭，将获得的干鹿鞭粉碎至絮状，然后将粉碎后的絮状粉末与蒸馏水按照质量比为1:10混合成悬液；
2)消化：将步骤1)获得的悬液用10M的浓HCl调节PH至2.0，通过水浴加热至37℃，并维持恒温；按干鹿鞭：胃蛋白酶＝75:1(质量比)的比例加入胃蛋白酶，搅拌均匀，37℃恒温消化6小时；升温至95℃以上，至少15分钟，使酶灭活；然后将温度降至37℃后，用20M的浓NaOH调节PH至8.4，按干鹿鞭：胰蛋白酶＝200:1(质量比)的比例加入胰蛋白酶，搅拌均匀，37℃恒温消化2小时；升温至95℃以上，至少15分钟，使酶灭活。
3)沉降和喷雾干燥：将消化后的液体进行离心(少量可以离心，大量生产可以用膜过滤)，获得滤液和滤渣，除去不溶性物质，将滤液通过喷雾干燥，制备成粉剂，获得可溶性鹿鞭提取物。
本实施例中可溶性鹿鞭提取物的得率高达91.8％，且将该提取物溶于40％的乙醇发现，该提取物能够完全溶于40％的乙醇。
实施例3
本实施例提供了一种利用传统干制鹿鞭制备可溶性鹿鞭提取物的方法，该方法是通过下述步骤实现的：
1)粉碎：将传统干制鹿鞭切片，将传统干制鹿鞭切片，65℃下烘干至恒重，获得干鹿鞭，将获得的干鹿鞭粉碎至絮状，然后将粉碎后的絮状粉末与蒸馏水按照质量比为1:10混合成悬液；
2)消化：将步骤1)获得的悬液用10M的浓HCl调节PH至2.0，通过水浴加热至37℃，并维持恒温；按干鹿鞭：胃蛋白酶＝70:1(质量比)的比例加入胃蛋白酶，搅拌均匀，37℃恒温消化4小时；升温至95℃以上，至少15分钟，使酶灭活；然后将温度降至37℃后，用20M的浓NaOH调节PH至8.4，按干鹿鞭：胰蛋白酶＝180:1(质量比)的比例加入胰蛋白酶，搅拌均匀，37℃恒温消化1小时；升温至95℃以上，至少15分钟，使酶灭活。
3)沉降和喷雾干燥：将消化后的液体进行离心(少量可以离心，大量生产可以用膜过滤)，获得滤液和滤渣，除去不溶性物质，将滤液通过喷雾干燥，制备成粉剂，获得可溶性鹿鞭提取物。
本实施例中可溶性鹿鞭提取物的得率高达90.1％，且将该提取物溶于40％的乙醇发现，该提取物能够完全溶于40％的乙醇。
实施例4
本实施例提供了一种利用传统干制鹿鞭制备可溶性鹿鞭提取物的方法，该方法是通过下述步骤实现的：
1)粉碎：将传统干制鹿鞭切片，将传统干制鹿鞭切片，65℃下烘干至恒重，获得干鹿鞭，将获得的干鹿鞭粉碎至絮状，然后将粉碎后的絮状粉末与蒸馏水按照质量比为1:10混合成悬液；
2)消化：将步骤1)获得的悬液用10M的浓HCl调节PH至2.0，通过水浴加热至37℃，并维持恒温；按干鹿鞭：胃蛋白酶＝80:1(质量比)的比例加入胃蛋白酶，搅拌均匀，37℃恒温消化6小时；升温至95℃以上，至少15分钟，使酶灭活；然后将温度降至37℃后，用20M的浓NaOH调节PH至8.4，按干鹿鞭：胰蛋白酶＝220:1(质量比)的比例加入胰蛋白酶，搅拌均匀，37℃恒温消化2小时；升温至95℃以上，至少15分钟，使酶灭活。
3)沉降和喷雾干燥：将消化后的液体进行离心(少量可以离心，大量生产可以用膜过滤)，获得滤液和滤渣，除去不溶性物质，将滤液通过喷雾干燥，制备成粉剂，获得可溶性鹿鞭提取物。
本实施例中可溶性鹿鞭提取物的得率高达89.8％，且将该提取物溶于40％的乙醇发现，该提取物能够完全溶于40％的乙醇。
通过以下实验证明本发明所能取得的有益效果：
对照实验1：本实验提供了一种传统鹿鞭酒的制备方法，该方法是通过下述步骤实现的：
1)称重：将传统干制鹿鞭放置在65℃烘箱中，烘干至恒重，称重。
2)浸酒：将上述鹿鞭泡到2000ml 40度白酒中，浸泡3个月。
3)干燥：将鹿鞭取出，65℃烘干至恒重，计算提取率为4.0％。
对照实验2：本实验提供了一种鹿鞭粉的常规的提取方法(非酶解水提法)，该方法是通过下述步骤实现的：
1)粉碎：传统干制鹿鞭切片，65℃烘干至恒重，粉碎机粉碎至絮状，称重。
2)提取：将上述粉碎的鹿鞭粉按照1:3的料液比加入蒸馏水，加热至沸腾，并保持37℃恒温提取6小时；按相同程序提取5次，合并滤液。
3)干燥：喷雾干燥，获得鹿鞭提取物；将滤渣烘干，计算提取率为21.3％。
对照实验3：本实验提供了一种鹿鞭粉的常规的提取方法(非酶解醇提法)，该方法是通过下述步骤实现的：
1)粉碎：传统干制鹿鞭切片，65℃烘干至恒重，粉碎机粉碎至絮状，称重。
2)提取：将上述粉碎的鹿鞭粉按照1:3的料液比加入40％的乙醇，保持37℃恒温提取6小时；按相同程序提取5次，合并滤液。
3)干燥：喷雾干燥，获得鹿鞭提取物；将滤渣烘干，计算提取率为21.5％。
表1实施例1-4与对照实验1-3效果比较
通过对比表1中对照实验1和实施例1-4可知，利用传统方法提取鹿鞭，如对照试验1，鹿鞭在40％乙醇中的提取率仅为4.0％，而利用本发明的双酶解法制备鹿鞭提取物的提取率高达89.8％-93.2％，由此可知本发明方法相比于传统方法能够显著提高提取率，本发明方法的提取率约为传统方法提取率的23倍。
通过对比对照实验2、对照实验3和实施例1-4可知，本发明采用双酶酶解超过非酶解法提取，可以显著提高鹿鹿鞭的提取率，也就是说可以显著提高可溶性鹿鞭提取物的得率。本发明方法的提取率约为传统的水提法及醇提法的4.2-4.4倍。
将本发明获得的鹿鞭提取物溶于40％的乙醇发现，本发明方法制备的鹿鞭提取物能够完全溶于40％的乙醇。
并且通过比较实施例1-4的溶解度可知实施例1中的鹿鞭提取率最高，即在胃蛋白酶按照质量比为干鹿鞭：胃蛋白酶＝75：1，胰蛋白酶按照质量比为干鹿鞭：胰蛋白酶＝200：1的条件下的提取率最高。
虽然本发明已以较佳的实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可以做各种改动和修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。