《一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法.pdf（5页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、10申请公布号CN104072469A43申请公布日20141001CN104072469A21申请号201410266473622申请日20140616C07D311/6420060171申请人南京泽朗医药科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号05幢6楼72发明人刘东锋杨成东54发明名称一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法57摘要本发明公开了一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法，包括以下步骤（1）以紫色瓣蕊豆根为原料，进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取紫色瓣蕊豆根中的油脂类物质；（2）残渣加丙酮溶液进行超声循环提取；（3）提取液浓缩后上大孔树脂柱，先用水和4060乙。
2、醇溶液洗脱，再用8595乙醇溶液洗脱，收集8595乙醇洗脱液；（4）洗脱液浓缩，上硅胶短粗柱，以乙酸乙酯丙酮混合溶液为洗脱剂，收集洗脱液，浓缩，放置结晶；（5）分出结晶，丙酮正己烷混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得紫色瓣蕊豆酚。本发明方法操作简单，可实现规模化生产。51INTCL权利要求书1页说明书3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页10申请公布号CN104072469ACN104072469A1/1页21一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法，其特征在于按如下工艺步骤进行（1）以紫色瓣蕊豆根为原料，进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取紫色瓣蕊豆根中的。
3、油脂类物质；（2）残渣加510倍（V/W）7590丙酮溶液进行超声循环提取23次，每次12H，合并提取液；（3）提取液浓缩后上大孔树脂柱，先用水和4060乙醇溶液洗脱，再用8595乙醇溶液洗脱，收集8595乙醇洗脱液；（4）洗脱液浓缩，上硅胶短粗柱，柱径高比为145，以乙酸乙酯丙酮混合溶液为洗脱剂，收集洗脱液，浓缩，放置结晶；（5）分出结晶，丙酮正己烷混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得紫色瓣蕊豆酚。2如权利要求1所述的一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法，其特征在于，所述步骤（1）中超临界二氧化碳萃取温度为3550，压力为2032MPG，萃取时间为051H。3如权利要求1所述的一种提取纯化紫色瓣。
4、蕊豆酚的方法，其特征在于，所述步骤（3）中大孔树脂可选HPD100、ADS17、D101或HZ801型。4如权利要求1所述的一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法，其特征在于，所述步骤（4）中乙酸乙酯丙酮混合溶液体积比为1515。5如权利要求1所述的一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法，其特征在于，所述步骤（5）中丙酮正己烷混合溶剂体积比为1151。权利要求书CN104072469A1/3页3一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法技术领域0001本发明属于天然药物领域，具体而言，本发明涉及一种提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法。背景技术0002紫色瓣蕊豆酚（PETALOPURPURENOL），主要存在于豆科LEGUMINO。
5、SAE紫色瓣蕊豆PETALOSTEMONPURPUREUSRYDB根中，是一种黄酮醇类化合物，MP9295，分子式C25H24O7，分子量43646，结构式现代药理研究表明，紫色瓣蕊豆酚具有细胞毒活性，对BC1、HT、LU1、MEL2、KB、KBVVLB、KBVVLB、A431、LNCAP、ZR751、U373细胞株的ED50G/ML依次为99、73、148、171、189、10、67、119、148、41和133。0003经文献检索，尚无适用于高纯度紫色瓣蕊豆酚的提取纯化方法报道。发明内容0004本发明要解决的技术问题是提供一种适用于规模化生产、产品纯度高的提取纯化紫色瓣蕊豆酚的方法。000。
6、5为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下（1）以紫色瓣蕊豆根为原料，进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取紫色瓣蕊豆根中的油脂类物质；（2）残渣加510倍（V/W）7590丙酮溶液进行超声循环提取23次，每次12H，合并提取液；（3）提取液浓缩后上大孔树脂柱，先用水和4060乙醇溶液洗脱，再用8595乙醇溶液洗脱，收集8595乙醇洗脱液；（4）洗脱液浓缩，上硅胶短粗柱，柱径高比为145，以乙酸乙酯丙酮混合溶液为洗脱剂，收集洗脱液，浓缩，放置结晶；（5）分出结晶，丙酮正己烷混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得紫色瓣蕊豆酚。0006所述步骤（1）中超临界二氧化碳萃取温度为3550，压力。
7、为2032MPG，萃取时间为051H。说明书CN104072469A2/3页40007所述步骤（3）中大孔树脂可选HPD100、ADS17、D101或HZ801型。0008所述步骤（4）中乙酸乙酯丙酮混合溶液体积比为1515。0009所述步骤（5）中丙酮正己烷混合溶剂体积比为1151。0010综上所述，本发明存在以下优点（1）采用超临界二氧化碳萃取技术脱除油脂类物质，快速、高效。0011（2）采用超声循环提取的方法，提取效率高。0012（3）采用大孔树脂和硅胶短粗柱层析后进行结晶，从而获得含量98以上的紫色瓣蕊豆酚，成本低，分离效果好。0013（4）本发明所用试剂乙酸乙酯、丙酮等，可替代通常柱。
8、层析采用的氯仿、甲醇，降低毒性和污染。0014下面将结合具体实施方式对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。具体实施方式0015实施例1取紫色瓣蕊豆根粗粉500G，采用超临界二氧化碳技术萃取紫色瓣蕊豆根中的油脂类物质，萃取温度为35，压力为20MPG，萃取时间为1H，残渣加10倍（V/W）90丙酮溶液进行超声循环提取2次，每次1H，合并提取液，浓缩后上HPD100型大孔树脂柱，先用水和40乙醇溶液洗脱，再用85乙醇溶液洗脱，收集85乙醇洗脱液，浓缩，与200目的硅胶按重量比11拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为15，以乙酸乙酯丙酮混合溶液为洗脱剂，依次按15、110。
9、、115体积比进行洗脱，收集含紫色瓣蕊豆酚的洗脱液，回收试剂，将所得紫色瓣蕊豆酚浓缩液置于结晶罐中静置20小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮正己烷（151）混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得紫色瓣蕊豆酚032G，纯度为974。0016实施例2取紫色瓣蕊豆根粗粉500G，采用超临界二氧化碳技术萃取紫色瓣蕊豆根中的油脂类物质，萃取温度为40，压力为25MPG，萃取时间为05H，残渣加7倍（V/W）80丙酮溶液进行超声循环提取2次，每次1H，合并提取液，浓缩后上HZ801型大孔树脂柱，先用水和45乙醇溶液洗脱，再用90乙醇溶液洗脱，收集90乙醇洗脱液，浓缩，与200目的硅胶按重量比11拌匀、。
10、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为14，以乙酸乙酯丙酮混合溶液为洗脱剂，依次按15、19、113体积比进行洗脱，收集含紫色瓣蕊豆酚的洗脱液，回收试剂，将所得紫色瓣蕊豆酚浓缩液置于结晶罐中静置24小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮正己烷（11）混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得紫色瓣蕊豆酚044G，纯度为982。0017实施例3取紫色瓣蕊豆根粗粉500G，采用超临界二氧化碳技术萃取紫色瓣蕊豆根中的油脂类物质，萃取温度为45，压力为28MPG，萃取时间为05H，残渣加10倍（V/W）90丙酮溶液进行超声循环提取1次，每次2H，合并提取液，浓缩后上D101型大孔树脂柱，先用水和60乙醇溶液洗脱，。
11、再用85乙醇溶液洗脱，收集85乙醇洗脱液，浓缩，与200目的硅胶按重量比11拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为15，以乙酸乙酯丙酮混合溶液为洗脱剂，依次按15、110、115体积比进行洗脱，收集含紫色瓣蕊豆酚的洗脱液，回收试剂，将所得紫色说明书CN104072469A3/3页5瓣蕊豆酚浓缩液置于结晶罐中静置12小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮正己烷（151）混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得紫色瓣蕊豆酚045G，纯度为986。0018实施例4取紫色瓣蕊豆根粗粉1KG，采用超临界二氧化碳技术萃取紫色瓣蕊豆根中的油脂类物质，萃取温度为50，压力为32MPG，萃取时间为05H，残渣加6倍。
12、（V/W）70丙酮溶液进行超声循环提取3次，每次1H，合并提取液，浓缩后上ADS17型大孔树脂柱，先用水和55乙醇溶液洗脱，再用95乙醇溶液洗脱，收集95乙醇洗脱液，浓缩，与100目的硅胶按重量比11拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为13，以乙酸乙酯丙酮混合溶液为洗脱剂，依次按16、111、114体积比进行洗脱，收集含紫色瓣蕊豆酚的洗脱液，回收试剂，将所得紫色瓣蕊豆酚浓缩液置于结晶罐中静置18小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮正己烷（11）混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得紫色瓣蕊豆酚096G，纯度为989。0019实施例5取紫色瓣蕊豆根粗粉5KG，采用超临界二氧化碳技术萃取紫色瓣蕊。
13、豆根中的油脂类物质，萃取温度为38，压力为30MPG，萃取时间为05H，残渣加10倍（V/W）80丙酮溶液进行超声循环提取3次，每次2H，合并提取液，浓缩后上HPD100型大孔树脂柱，先用水和50乙醇溶液洗脱，再用90乙醇溶液洗脱，收集90乙醇洗脱液，浓缩，与200目的硅胶按重量比11拌匀、阴干，上硅胶短粗柱，柱径高比为15，以乙酸乙酯丙酮混合溶液为洗脱剂，依次按15、111、115体积比进行洗脱，收集含紫色瓣蕊豆酚的洗脱液，回收试剂，将所得紫色瓣蕊豆酚浓缩液置于结晶罐中静置12小时使其结晶，过滤，分出结晶，采用丙酮正己烷（11）混合溶剂重结晶，滤出结晶，冷冻干燥即得紫色瓣蕊豆酚235G，纯度为991。说明书CN104072469A。