技术领域
本发明涉及一种食品加工中的杀菌保鲜剂，它可用于鲜肉、果蔬 等的保鲜。
背景技术
人们日常食用的新鲜食品，特别是新鲜畜肉和新鲜水果蔬菜不易 保存，而且又因为新鲜水果蔬菜生产季节性强，新鲜畜肉货架期短， 往往造成大量新鲜畜肉、果蔬因为长途运输而腐烂变质浪费，这些变 质的食品不仅丧失了原有的色香味，而且由于微生物的大量滋生对人 类的健康造成了严重的威胁。
目前随着人们生活水平的提高，人们对肉品的质量和数量的需求 都有了很大的提高，色香味俱全的鲜肉变成了人们的首选。鲜肉的食 用性高于冷冻肉，鲜肉的需求量高于冻肉。鲜肉的保鲜一直是生肉生 产企业与消费者所追求的。鲜肉保鲜处理正是解决长货架期储藏的方 法。为了解决鲜肉的保存保鲜问题，国内外通常采取冷冻，添加防腐 剂等方法。冷冻等方法有的会对鲜肉的品质及营养价值造成损失，使 鲜肉失去了应有的鲜味。对于果蔬的保存保鲜问题，国内外通常采取 冷冻、干燥、钴60照射等方法，这些方法具有投资大，设备多，工 艺复杂，能源消耗多等缺点。也有采用制备为罐头的方式进行保存， 如市场上出售的蔬菜罐头例如蘑菇罐头均是采用高盐、高糖以及低 pH溶液浸制而成的，有些还需要经过高温杀菌，真空密封等工艺， 但是在经过这些工艺后，这些果蔬的营养成分都会受到一定程度的破 坏。此外，目前的鲜肉和果蔬保鲜技术中，也有采用化学药剂进行保 鲜，保鲜效果也不错，但所使用的化学药剂多为化学合成，有的还有 一定的毒性，从食用卫生观点都是尽量禁忌的。
随着人们生活的不断改善，对鲜肉和果蔬的品质要求越来越高， 不但要求鲜肉和果蔬种类多样、而且还要求数量丰富、品质优良，因 此鲜肉和果蔬贮藏保鲜，保持原有风味，合乎卫生安全，成为一个亟 待解决的问题。
发明内容
本发明的目的是要提供一种高效、低毒的杀菌保鲜剂及其用途。
本发明所提供的杀菌保鲜剂，每100ml含有如下组分：
葡萄柚种子提取物 0.005～3ml；
尼生素(Nisin) 0.005～3g；
加无菌水到100ml。
为了进一步增强杀菌保鲜剂的保鲜效果，所述每100ml杀菌保鲜 剂还含有一种或几种如下组分：
茶多酚提取物 0.005～2g；
水溶性壳聚糖 0.005～2g；
抗坏血酸(Vc) 0.005～2g；
本发明杀菌保鲜剂的优选用量为：
葡萄柚种子提取物 0.05～1.0ml；
尼生素(Nisin) 0.05～1.0g；
茶多酚提取物 0.05～1.0g；
水溶性壳聚糖 0.05～0.5g；
抗坏血酸(Vc) 0.05～1.0g。
上述的杀菌保鲜剂可用于鲜肉的保鲜。
上述的杀菌保鲜剂可用于果蔬的保鲜。
本发明的杀菌保鲜剂使用方法比较简单，如可以采用如下方法：
将鲜羊肉切成100克左右(或者根据需要来确定肉块的克数)的 块状，直接浸在保鲜液中，30秒中后取出，4℃沥干，真空包装后置 于4℃或者常温保鲜，使用时，从袋中取出羊肉等固形物，经清水洗 涤，基本脱去保鲜剂，使之恢复新鲜口味。该方法可以延长保鲜期2 -4倍。
将果蔬去掉不可使用部分，洗净，根据品种和使用需要加工成块 等各种形状的固形物。将蔬菜等固形物浸没于保鲜剂中十分钟到半小 时，从保鲜剂中取出蔬菜固形物，沥干后装入复合层塑料袋中。经真 空封口后，置于常温下保鲜。使用时，从袋中取出蔬菜等固形物，经 清水洗涤，基本脱去保鲜剂，使之恢复新鲜蔬菜口味。
在本发明杀菌保鲜剂中，葡萄柚种子提取物、尼生素(Nisin)、 茶多酚提取物、水溶性壳聚糖、抗坏血酸(Vc)等均是从植物或者动物 中提取的天然产物，使用安全、无任何毒副作用且具生物降解性，合 乎卫生要求。以本发明保鲜剂对鲜肉和新鲜果蔬进行保鲜保存，在保 鲜期内，鲜肉和新鲜果蔬的口味、色泽、营养成分等均基本不变，保 持鲜肉和新鲜果蔬原来的新鲜特点。经过保鲜处理的鲜肉和新鲜果 蔬，可以按品种和实用需要进行加工，并且可以使用真空包装，运输、 销售以及食用均比较方便。本发明杀菌保鲜剂配制简单，不仅可以应 用于屠宰场，鲜肉和新鲜果蔬批发市场，超市，且可应用于一般家庭， 它不仅可用于鲜肉的保鲜，还可用于果蔬的保鲜，应用范围广泛。
具体实施方式
原料来源：
葡萄柚种子提取物：购于美国拜尔康生物化学研究所；
尼生素(Nisin)：购于洛阳市华健生物工程有限公司；
茶多酚提取物：购于北京绿色金可生物技术股份有限公司；
水溶性壳聚糖(食品级)：购于济南海得贝海洋生物工程有限公 司；
抗坏血酸(Vc)：购于海南钟晨生物工程有限公司；
无菌水：蒸馏水经高压锅灭菌后制得。
实施例1、杀菌保鲜剂的配制
以1000ml杀菌保鲜剂量计：将葡萄柚种子提取物0.05ml，尼生 素(Nisin)0.05g和茶多酚提取物0.05g、水溶性壳聚糖0.05g、抗 坏血酸(Vc)0.05g混合，加无菌水到1L，在均质机内均质，然后脱气， 配制成杀菌保鲜剂1。
实施例2、杀菌保鲜剂的配制
以1000ml杀菌保鲜剂量计：将葡萄柚种子提取物1ml，尼生素 (Nisin)1g和茶多酚提取物1g、水溶性壳聚糖0.5g、抗坏血酸(Vc)1g 混合，加无菌水到1L，在均质机内均质，然后脱气，即得到杀菌保 鲜剂2。
实施例3、杀菌保鲜剂的配制
以1000ml杀菌保鲜剂量计：将葡萄柚种子提取物30ml，尼生素 (Nisin)30g和茶多酚提取物20g、水溶性壳聚糖20g、抗坏血酸 (Vc)20g混合，加入无菌水到1L，在均质机内均质，然后脱气，即得 到杀菌保鲜剂3。
实施例4、杀菌保鲜剂的配制
以1000ml杀菌保鲜剂量计：将葡萄柚种子提取物8ml，尼生素 (Nisin)8g和茶多酚提取物4g、水溶性壳聚糖2g、抗坏血酸(Vc)4g 混合，加入无菌水到1L，在均质机内均质，然后脱气，即得到杀菌保 鲜剂4。
实施例5、杀菌保鲜剂的配制
以1000ml杀菌保鲜剂量计：将葡萄柚种子提取物10ml，尼生素 (Nisin)10g和茶多酚提取物10g、水溶性壳聚糖5g、抗坏血酸(Vc)10g 混合，加入无菌水到1L，在均质机内均质，然后脱气，即得到杀菌保 鲜剂5。
实施例6、杀菌保鲜剂的配制
以1000ml杀菌保鲜剂量计：将葡萄柚种子提取物2ml和尼生素 (Nisin)2g，加无菌水到1L，在均质机内均质，然后脱气，配制成 杀菌保鲜剂6。
实施例7、杀菌保鲜剂的抑菌试验
以实施例1-6配制的杀菌保鲜剂进行抑菌试验。
实验菌株：单增李斯特菌(L.monocytogenes CMCC54004)购 自中国医学细菌保藏中心。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus subsp.Aureus CGMCC 1.0089)、大肠埃希氏菌(Escherichia coli CGMCC 1.0090)、沙门氏菌(Salmonella sp.CGMCC 1.1552)、黄瓜灰 霉病(灰葡萄孢，Botrytis cinerea Pers.CGMCC编号3.4583)、 柑桔青霉病(白孢意大利青霉菌Penicillium italicum Weh CGMCC 编号3.2631)、油桃软腐病(葡枝根霉Rhizopus stolonifer CGMCC 编号3.1362)、梨青霉病(扩展青霉Pen.expansum CGMCC编号 3.5425)、苹果霉心病(链格孢菌Alternaria alternata CGMCC编号 3.1015)等菌株购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中 心。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus subsp.Aureus C18849)、沙门氏菌(Salmonella sp.C79-533)购自中国兽药监察所。
1.对于细菌，利用滤纸片法测定保鲜剂对病原菌生长的抑制效 果：用加样器在MHA平板培养基上滴加50μl、浓度为1×105-106ml-1活化后的病菌悬浮液，用玻璃刮子涂匀，然后将直径为10mm的 滤纸片(在实施例1-6杀菌保鲜剂中浸泡1h)置于MHA平板培养 基中央。以无菌水处理作为CK，0.80mg/ml“扑海因”处理为CK。 25℃恒温箱中培养24h，测量各处理的抑菌圈直径，结果如表1。
病菌悬浮液用含有0.1％蛋白无菌水制成，细菌计数采用血球计 数板法。
2.对于真菌，将以上各种真菌实验菌株接种到Mueller-Hinton 琼脂培养基(MHA)上，在24℃黑暗条件下培养约四星期，直到真菌 产生孢子。用灭菌的蒸馏水冲洗真菌培养基收获孢子，并将孢子浓度 调节到1×105-106孢子/ml。
利用滤纸片法测定保鲜剂对病原菌生长的抑制效果：用加样器在 PDA平板培养基上滴加50μl、浓度为1×105-106孢子ml-1病菌孢 子悬浮液，用玻璃刮子涂匀，然后将直径为10mm的滤纸片(在实 施例1-6杀菌保鲜剂中浸泡1h)置于PDA平板培养基中央。以无 菌水处理作为CK，0.80mg/ml“扑海因”处理为CK。25℃恒温箱中 培养72h，测量各处理的抑菌圈直径，结果如表1。
病菌孢子悬浮液用含有0.05％Tween 80的无菌水制成，孢子计 数采用血球计数板法。
本试验每处理试验3次，每次每个处理设4个重复。
表1抑菌实验结果 杀菌剂1 杀菌剂2 杀菌剂3 杀菌剂4 杀菌剂5 杀菌剂6 单增李斯特菌CMCC54004 16.3mm 16.2mm 21.7mm 15.6mm 17.7mm 15.4mm 金黄色葡萄球菌CGMCC 1.0089 16.3mm 17.4mm 22.2mm 16.7mm 18.3mm 16.3mm 金黄色葡萄球菌C18849 16.7mm 17.3mm 21.8mm 16.5mm 18.7mm 15.2mm 沙门氏菌C79-533 15.8mm 17.1mm 22.0mm 16.4mm 18.4mm 15.5mm
沙门氏菌CGMCC 1.1552 15.5mm 16.8mm 21.7mm 16.7mm 18.7mm 15.9mm 大肠埃希氏菌CGMCC 1.0090 16.3mm 17.6mm 22.5mm 16.8mm 19.18mm 16.2mm 黄瓜灰霉病 14.6mm 15.3mm 18.3mm 13.4mm 15.3mm 13.4mm 柑桔青霉病 15.4mm 16.6mm 19.1mm 14.5mm 17.3mm 12.8mm 油桃软腐病 13.7mm 15.2mm 17.7mm 14.1mm 16.1mm 13.1mm 杏褐腐病 14.2mm 16.1mm 19.3mm 14.3mm 15.1mm 13.4mm 梨青霉病 13.3mm 15.4mm 17.9mm 14.6mm 16.5mm 12.9mm 苹果霉心病 14.2mm 15.6mm 18.4mm 14.9mm 16.3mm 14.2mm
注：抑菌圈直径β≥1.5cm为高度敏感，1.0cm≤β≤1.5cm为中度敏 感，β＜1.0cm为低度敏感，无抑菌圈为不敏感。
结果表明，本发明实施例1-6配制的杀菌保鲜剂均能够完全抑制 这些病原菌的生长。
以下是本发明的杀菌保鲜剂的应用实例：
实施例8、杀菌保鲜剂的保鲜试验
将新鲜的猪肉浸没于杀菌保鲜剂1中30秒后取出，4℃沥干，真 空包装后置于4℃下或者常温下保鲜。4℃下可保鲜11天，常温下可 保鲜4天，经检测，肉中没有有害残留物。此方法同样适用于新鲜羊 肉，牛肉等新鲜肉品的保鲜。
实施例9、杀菌保鲜剂的保鲜试验
将新鲜的羊肉浸没于杀菌保鲜剂2中30秒后取出，4℃沥干，真 空包装后置于4℃或者常温下保鲜。4℃下可保鲜12天，常温下可保 鲜4天，经检测，肉中没有有害残留物。此方法同样适用于新鲜猪肉， 牛肉等新鲜肉品的保鲜。
实施例10、杀菌保鲜剂的保鲜试验
将新鲜的牛肉浸没于杀菌保鲜剂3中30秒后取出，4℃沥干，真 空包装后置于4℃下或者常温下保鲜。4℃下可保鲜13天，常温下可 保鲜5天，经检测，肉中没有有害残留物。此方法同样适用于新鲜猪 肉，羊肉等新鲜肉品的保鲜。
实施例11、杀菌保鲜剂的保鲜试验
将新鲜的猪肉浸没于杀菌保鲜剂4中30秒后取出，4℃沥干，真 空包装后置于4℃下或者常温下保鲜。4℃下可保鲜14天，常温下可 保鲜5天，经检测，肉中没有有害残留物。此方法同样适用于新鲜羊 肉，牛肉等新鲜肉品的保鲜。
实施例12、杀菌保鲜剂的保鲜试验
将新鲜的羊肉浸没于杀菌保鲜剂5中30秒后取出，4℃沥干，真 空包装后置于4℃下或者常温下保鲜。4℃下可保鲜12天，常温下可 保鲜4天，经检测，肉中没有有害残留物。此方法同样适用于新鲜猪 肉，牛肉等新鲜肉品的保鲜。
实施例13、杀菌保鲜剂的保鲜试验
将新鲜的牛肉浸没于杀菌保鲜剂6中30秒后取出，4℃沥干，真 空包装后置于4℃下或者常温下保鲜。4℃下可保鲜10天，常温下可 保鲜4天，经检测，肉中没有有害残留物。此方法同样适用于新鲜猪 肉，羊肉等新鲜肉品的保鲜。
实施例14、杀菌保鲜剂的保鲜试验
将豆角浸没于杀菌保鲜剂2中二十分钟，取出、沥干后装入复合 层塑料袋中。经真空封口后，置于常温(8～18℃)下保鲜三个月， 好果率97％以上。经检测，果实中没有有害残留物。此方法同样适用 于苹果，甜橙，柑橘，青椒等新鲜果疏的保鲜。
实施例15、杀菌保鲜剂的保鲜试验
将豆角浸没于杀菌保鲜剂4中二十分钟，取出、沥干后装入复合 层塑料袋中。经真空封口后，置于常温(8～18℃)下保鲜三个月， 好果率93％以上。经检测，果实中没有有害残留物。此方法同样适用 于苹果，甜橙，柑橘，青椒等新鲜果疏的保鲜。
实施例16、杀菌保鲜剂的保鲜试验
将酥梨浸没于杀菌保鲜剂6中二十分钟，取出、沥干后装入复合 层塑料袋中。经真空封口后，置于常温(8～18℃)下保鲜三个月， 好果率92％以上。经检测，果实中没有有害残留物。此方法同样适用 于苹果，甜橙，柑橘，青椒等新鲜果疏的保鲜。
最后所应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而 非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普 通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替 换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的 权利要求范围当中。