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1、(10)授权公告号 CN 101036448 B (45)授权公告日 2011.06.08 CN 101036448 B *CN101036448B* (21)申请号 200710011132.4 (22)申请日 2007.04.28 A01K 61/00(2006.01) A61L 2/18(2006.01) (73)专利权人 大连水产学院 地址 116023 辽宁省大连市沙河口区黑石礁 街 52 号大连水产学院 (72)发明人 赵文 霍元子 (74)专利代理机构 大连非凡专利事务所 21220 代理人 闪红霞 霍元子 . 海水中大量培养西藏拟溞及作为红 鳍东方鲀鱼苗活饵料的研究 . 大连水。
2、产学院学报 第 21 卷 第 4 期 .2006,21(4), 第 325-330 页 . 赵文 . 温度、 盐度和体长对西藏拟溞耗氧率 的影响.生态学报第25卷 第7期.2005,25(7), 第 1549-1553 页 . 赵文 . 西藏拟溞生物学的初步研究 . 大连水 产学院学报第 17 卷 第 3 期 .2002,17(3), 第 209-214 页 . (54) 发明名称 西藏拟溞的海水驯化培养方法 (57) 摘要 本发明公开一种西藏拟溞的海水驯化培养 方法， 有如下步骤 ： 对培养容器消毒灭菌， 培养容 器四周为不透明状 ； 调配培养用水 ： 取消毒过滤 海水， 调整海水 pH 为。
3、 7 8， 温度 10 15， 盐 度为 10 15 ； 选取种溞 ： 将采集的西藏拟溞置 于 a 步骤所述培养容器中， 用 b 步骤所述培养用 水进行培养， 光照强度为 1000 2000Lx， 光照周 期为 14D 10L， 用牟氏角毛藻等饵料投喂， 投喂 量为 30105cell/ml， 选已产过 1 2 窝幼溞之 后、 体长在23mm、 游动活泼的健康雌溞为种溞 ； 用牟勒氏角毛藻、 盐生杜氏藻、 球等鞭金藻、 小球 藻中的一种或两种配成藻液并喂食， 喂食密度是 3105cell/ml， 接种西藏拟溞的密度为 100ind/ l， 培养期间注意观察西藏拟溞的生长及培养水体 状况， 以部。
4、分或全部替代卤虫， 提高鱼苗成活率、 降低海产鱼育苗成本。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 喻江霞 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书 2 页 说明书 4 页 CN 101036448 B1/2 页 2 1. 一种西藏拟溞的海水驯化培养方法， 其特征在于如下步骤 ： a. 对培养容器消毒灭菌， 培养容器四周为不透明状 ； b.调配培养用水 ： 取消毒过滤海水， 调整海水pH为78， 温度1015， 盐度为10 15 ； c. 选取种溞 ： 将采集的西藏拟溞置于 a 步骤所述培养容器中， 用 b 步骤所述培养用水 进行培养， 光照强度为 1000。
5、 2000Lx， 光照周期为 14D ： 10L， 用牟氏角毛藻投喂， 投喂量为 30105cell/ml， 选已产过 1 2 窝幼溞之后、 体长在 2 3mm、 游动活泼的健康雌溞为种 溞 ； d. 培养 ： 用 a 步骤所述培养容器， 注入培养容器体积 1/5 1/4 的藻液， 所述藻液是在 b 步骤所 述培养用水中加入牟氏角毛藻、 盐生杜氏藻、 球等鞭金藻、 小球藻中的一种或两种而成， 密 度是 3105cell/ml， 接种种溞的密度为 100ind/l ； 光照强度为 1000 2000Lx， 光照周期为 14D ： 10L， 用牟氏角毛藻、 盐生杜氏藻、 球等鞭 金藻、 小球藻中的。
6、一种或两种替换投喂， 投喂量为 3105cell/ml， 每日投喂两次 ； 接种初期每隔 3 4 天换水一次， 当密度达到 500ind/l 之后， 1 2 天换水一次， 每次 换水量为原水量的 2/3 ； 接种的种溞产 1 2 窝幼溞后， 除掉种溞， 待新生幼溞成龄后 15 18 天， 除去新生母 溞， 保证新生幼溞的培养密度在 450 550ind/l， 成龄溞的培养密度在 100 200ind/l ； e. 采收 ： 当培养溞密度达到 2000 2500 个 / 升， 进行采收。 2. 根据权利要求 1 所述的西藏拟溞的海水驯化培养方法， 其特征在于所述 a 步骤中培 养容器为玻璃缸或塑。
7、料水槽， 用浓度为10HCl溶液浸泡至少6个小时， 然后用淡水冲洗干 净， 玻璃缸或塑料水槽的四周用不透明的布或纸遮挡。 3. 根据权利要求 1 或 2 所述的西藏拟溞的海水驯化培养方法， 其特征在于所述 b 步骤 的盐度是将近岸海水经沙滤、 沉淀和 20m 筛绢过滤与经曝气后的自来水调配所得， 调配 后充气 3 5h。 4. 根据权利要求 1 或 2 所述的西藏拟溞的海水驯化培养方法， 其特征在于所述 b 步骤 是使用NaHCO3和HCl将盐度为10-15的稀释海水的pH调到78， 碱度调节到712mmol/ l。 5. 根据权利要求 4 所述的西藏拟溞的海水驯化培养方法， 其特征在于所述 。
8、b 步骤是将 每升水加入 0.6 1.0g 的 NaHCO3， 再用 HCl 将 pH 调节到 7 8。 6. 根据权利要求 5 所述的的西藏拟溞的海水驯化培养方法， 其特征在于每 100 升稀释 海水中加入如下种类及重量的无机盐 ： CuSO4 0.05mg、 ZnSO4 0.15mg、 LiCl 0.03 0.06g、 H3BO3 0.515g、 CaCl2 0.02 0.028g、 KCl 0.688g、 MgSO4 2.13 2.38g、 NaCl 6 8g、 SrCl2 0.18mg、 KI 1.96mg、 Na2SO4 1.48 4.43g。 7. 根据权利要求 1 或 2 所述的。
9、西藏拟溞的海水驯化培养方法， 其特征在于所述藻液中 含有盐生杜氏藻 3.0105cell/ml ； 或者含有牟氏角毛藻 2.5105cell/ml 与球等鞭金藻 0.5105cell/ml ； 或者含有牟氏角毛藻 2.5105cell/ml 与小球藻 0.5105cell/ml ； 或者含有牟氏角毛藻 3.0105cell/ml ； 权 利 要 求 书 CN 101036448 B2/2 页 3 或者含有盐生杜氏藻 2.5105cell/ml 与球等鞭金藻 0.5105cell/ml ； 或者含有盐生杜氏藻 2.5105cell/ml 与小球藻 0.5105cell/ml。 8. 根据权利要求。
10、 1 或 2 所述的西藏拟溞的海水驯化培养方法， 其特征在于 d 步骤投喂 的饵料及用量如下 ： 盐生杜氏藻 3.0105cell/ml ； 或者牟氏角毛藻 2.5105cell/ml 与球等鞭金藻 0.5105cell/ml ； 或者牟氏角毛藻 2.5105cell/ml 与小球藻 0.5105cell/ml ； 或者牟氏角毛藻 3.0105cell/ml ； 或者盐生杜氏藻 2.5105cell/ml 与球等鞭金藻 0.5105cell/ml ； 或者盐生杜氏藻 2.5105cell/ml 与小球藻 0.5105cell/ml。 9. 根据权利要求 1 或 2 所述的西藏拟溞的海水驯化培养。
11、方法， 其特征在于 ： 所述 d 步 骤中每月更换 a 步骤所述培养容器一次。 10. 根据权利要求 1 或 2 所述的西藏拟溞的海水驯化培养方法， 其特征在于 ： 所述的培 养水温度以 13为基准， 每日升或降 2变换温度。 权 利 要 求 书 CN 101036448 B1/4 页 4 西藏拟溞的海水驯化培养方法 技术领域 ： 0001 本发明涉及一种西藏拟溞的海水驯化培养方法。 背景技术 ： 0002 西藏拟溞 (Daphniapsis tibetana Sars， 1903) 隶属溞科 (Daphniidae) 拟溞 属 Daphniapsis， 主要分布于我国西藏、 青海、 新疆等地。
12、， 国外分布于前苏联、 印度、 帕米尔 (syn.Daphniapamiresis Rylov)、 伊朗 (syn.Daphnia fusca Gurney) 和南极地带 (syn. Daphnia studerri Rhe)， 是一种冷水性盐水枝角类， 其分布的自然水温为-218， 盐度 9 35， pH9 10.4。由于西藏拟溞喜低温且耐较高盐度， 适合高海拔、 高寒、 贫营养水体生 活， 可成为北方海水鱼、 虾和蟹培养中新的活饵料， 尤其当前海产鱼类育苗生产中继用轮虫 作为开口饵料之后需要大量的卤虫无节幼体， 卤虫卵资源有限， 且价格昂贵 ( 每吨 50 60 万元 )， 因此用西藏拟溞。
13、部分或全部替代卤虫， 就可提高育苗成活率， 降低海水鱼育苗成本， 具有很大的社会和经济意义。但是迄今为止， 还没有在北方海水鱼繁殖季节 (4 6 月 ) 用 海水 ( 盐度 30 35) 对西藏拟溞进行大量的人工培养、 利用。 发明内容 ： 0003 本发明是为了解决现有技术所存在的上述问题， 提供一种可在北方海水鱼繁殖季 节(46月)， 用海水人工大量培养西藏拟溞， 以部分或全部替代卤虫， 提高鱼苗成活率、 降 低海产鱼育苗成本的西藏拟溞的海水驯化培养方法。 0004 本发明的技术解决方案是 ： 一种西藏拟溞的海水驯化培养方法， 其特征在于有如 下步骤 ： 0005 a. 对培养容器消毒灭菌。
14、， 培养容器四周为不透明状 ； 0006 b. 调配培养用水 ： 取消毒过滤海水， 调整海水 pH 为 7 8， 温度 10 15， 盐度 为 10 15 ； 0007 c. 选取种溞 ： 将采集的西藏拟溞置于 a 步骤所述培养容器中， 用 b 步骤所述培养 用水进行培养， 光照强度为 1000 2000Lx， 光照周期为 14D:10L， 用牟氏角毛藻等饵料投 喂， 投喂量为 30105cell/ml， 选已产过 1 2 窝幼溞之后、 体长在 2 3mm、 游动活泼的健 康雌溞为种溞 ； 0008 d. 培养 ： 0009 用 a 步骤所述培养容器， 注入培养容器体积 1/5 1/4 的藻液。
15、， 所述藻液是在 b 步骤所述培养用水中加入牟氏角毛藻、 盐生杜氏藻、 球等鞭金藻、 小球藻中的一种或两种而 成， 密度是 3105cell/ml， 接种西藏拟溞的密度为 100ind/l ； 0010 光照强度为 1000 2000Lx， 光照周期为 14D ： 10L， 用牟勒氏角毛藻、 盐生杜氏藻、 球等鞭金藻、 小球藻中的一种或两种替换投喂， 投喂量为 3105cell/ml， 每日投喂两次 ； 0011 接种初期每隔 3 4 天换水一次， 当密度达到 500ind/l 之后， 1 2 天换水一次， 每次换水量为原水量的 2/3 ； 说 明 书 CN 101036448 B2/4 页 。
16、5 0012 接种的种溞产 1 2 窝幼溞后， 除掉种溞， 待新生幼溞成龄后 15 18 天， 除去新 生母溞， 保证新生幼溞的培养密度在 450 550ind/l， 成龄溞的培养密度为 100 200ind/ l ； 0013 e. 采收 ： 当培养溞密度达到 2000 2500 个 / 升， 进行采收。 0014 所述 a 步骤中培养容器为玻璃缸或塑料水槽， 用浓度为 10 HCl 溶液浸泡至少 6 个小时， 然后用淡水冲洗干净， 玻璃缸或塑料水槽的四周用不透明的布或纸遮挡。 0015 所述 b 步骤的盐度是将近岸海水经沙滤、 沉淀和 20m 筛绢过滤与经曝气后的自 来水调配所得， 调配后。
17、充气 3 5h。 0016 所述 b 步骤是使用 NaHCO3和 HCl 将盐度为 10-15 的稀释海水的 pH 调到 7 8， 碱 度调节到 7 12mmol/l。 0017 所述 b 步骤是将每升水加入 0.6 1.0g 的 NaHCO3， 再用 HCl 将 pH 调节到 7 8。 0018 最好在每 100 升稀释海水中加入如下种类及重量的无机盐 ： CuSO4 0.05mg、 ZnSO4 0.15mg、 LiCl 0.03 0.06g、 H3BO3 0.515g、 CaCl2 0.02 0.028g、 KCl0.688g、 MgSO4 2.13 2.38g、 NaC16 8g、 Sr。
18、Cl2 0.18mg、 KI1.96mg、 Na2SO4 1.48 4.43g。 0019 所 述 藻 液 中 含 有 盐 生 杜 氏 藻 3.0105cell/ml ； 或 者 含 有 牟 氏 角 毛 藻 2.5105cell/ml 与 球 等 鞭 金 藻 或 小 球 藻 0.5105cell/ml ； 或 者 含 有 牟 氏 角 毛 藻 3.0105cell/ml、 或 者 含 有 盐 生 杜 氏 藻 2.5105cell/ml 与 球 等 鞭 金 藻 或 小 球 藻 0.5105cell/ml。 0020 所述饵料及用量如下 ： 盐生杜氏藻 3.0105cell/ml ； 或者牟氏角毛藻。
19、 2.5 105cell/ml 与球等鞭金藻或小球藻 0.5105cell/ml ； 或者牟氏角毛藻 3.0105cell/ ml ； 或者盐生杜氏藻 2.5105cell/ml 与球等鞭金藻或小球藻 0.5105cell/ml。 0021 所述 d 步骤中每月更换 a 步骤所述培养容器一次。 0022 所述的培养水温度以 13为基准， 每日升或降 2变换温度。 0023 本发明是用稀释海水 ( 盐度 10 15) 驯化及培养西藏拟溞， 使其适应并正常生长 繁殖， 可在北方海水鱼繁殖季节 (4 6 月 ) 用稀释海水大量人工培养， 其密度可达 2000 2500 个 / 升， 以部分或全部替代。
20、卤虫， 提高鱼苗成活率、 降低海产鱼育苗成本。 0024 具体实施方式 ： 0025 实施例 1 ： 0026 a. 对用常规方法培养容器进行消毒灭菌， 培养容器四周为不透明状 ； 0027 b.调配培养用水 ： 取消毒过滤海水， 并用酸碱调整海水pH为78， 用电加热或光 照使温度为 10 15， 用淡水调整盐度为 10 15 ； 0028 c. 选取种溞 ： 将采集的西藏拟溞置于 a 步骤所述培养容器中， 用 b 步骤所述培养 用水进行培养， 培养期间光照强度为10002000Lx， 光照周期为14D ： 10L， 用用牟氏角毛藻 等饵料投喂， 投喂量为 3105cell/ml， 待已产过。
21、 1 2 窝幼溞之后， 选体长在 2 3mm、 游 动活泼的健康雌溞为种溞 ； 0029 d. 进行培养 ： 0030 用 a 步骤所述培养容器， 注入培养容器体积 1/5 1/4 的藻液， 所述藻液是在 b 步骤所述培养用水中加入牟氏角毛藻、 盐生杜氏藻、 球等鞭金藻、 小球藻中的一种或两种而 成， 密度是 3105cell/ml， 接种西藏拟溞的密度为 100ind/l ； 说 明 书 CN 101036448 B3/4 页 6 0031 培养期间光照强度为10002000Lx， 光照周期为14D ： 10L， 用牟氏角毛藻、 盐生杜 氏藻、 球等鞭金藻、 小球藻中的一种或两种替换投喂， 。
22、投喂量为 3105cell/ml， 每日投喂两 次 ； 0032 接种初期每隔 3 4 天换水一次， 当密度达到 500ind/l 之后， 1 2 天换水一次， 每次换水量为原水量的 2/3 ； 所换用水要经曝气， 温度与原培养用水一致， 同时要吸底以去 除残佴， 并及时除去蜕皮产下的黑褐色的壳瓣及西藏拟溞的死体 ； 0033 接种的种溞产12窝幼溞后， 要将种溞用较大些的筛绢滤除掉， 以防止产过多的 雄溞， 待新生幼溞成龄后1518天， 用同样方法除去新生母溞， 保证新 生幼溞的培养密度 在 450 550ind/l， 成龄溞的培养密度在 100 200ind/l ； 0034 在培养的过程。
23、中， 应经常观察水质变化 ( 如温度， 盐度， DO， pH 值等 ) 和西藏拟溞 的生长和产卵情况， 培养盐度应保持在 10 15， 温度 10 15， DO 保持在 2mg/l 以上， 同 时还要镜检投喂前后饵料浓度的变化， 判断是否要加减饵料的投喂量。西藏拟溞生长情况 的观察包括虫体是否健康？游动是否活跃？是否吃饱 ( 有无粪便 ) ？特别是西藏拟溞有 无拖便的现象？拖便主要时由饵料浮游植物过渡老化 ( 质量下降 ) 或饵料种类不适造成， 应采取投喂处于指数生长期的饵料或改变饵料种类来加以解决， 另外也可能是母溞接近死 亡， 这种情况下， 就要将母溞及时吸出。培养的过程中， 要经常用解剖。
24、镜检查雄溞出现的比 例， 如果比例较高， 如比例 5 7， 就应该提前换水、 改投新饵或将母溞提前吸出。 0035 e.采收 ： 当培养溞密度达到20002500个/升， 最好是2320个/升， 进行采收。 0036 实施例 2 ： 0037 基本培养方法同实施例1， 所述a步骤的培养容器为20-251玻璃缸或塑料水槽， 用 浓度为10HCl溶液浸泡至少6个小时， 然后用淡水冲洗干净， 玻璃缸或塑料水槽的四周用 不透明的布或纸遮挡。 0038 实施例 3 ： 0039 基本培养方法同实施例 1 或实施例 2， 所述 b 步骤的盐度是将近岸海水经沙滤、 沉 淀和20m筛绢过滤与经曝气后的自来水调。
25、配所得， 调配后充气35h。 pH可以使用NaHCO3 和 HCl 将盐度为 10-15 的稀释海水的 pH 调到 7 8， 碱度调节到 7 12mmol/l， 最好是将 每升水加入 0.6 1.0g 的 NaHCO3， 再用 HCl 将 pH 调节到 7 8。 0040 实施例 4 ： 0041 基本培养方法同实施例 1 或实施例 2 或实施例 3， 可以用普通的稀释海水， 最好 在每 100 升稀释海水中加入如下种类及重量的无机盐 ： CuSO40.05mg、 ZnSO40.15mg、 LiCl 0.03 0.06g、 H3BO30.515g、 CaCl20.02 0.028g、 KCl0。
26、.688g、 MgSO42.13 2.38g、 NaCl6 8g、 SrCl20.18mg、 KI1.96mg、 Na2SO41.48 4.43g， 以改善培养用水的微量元素和离子数， 更 便于西藏拟溞的生长及繁育。 0042 实施例 5 ： 0043 基本培养方法同实施例 1 或实施例 2 或实施例 3 或实施例 4。只是所述的 藻液中 可以含有盐生杜氏藻 3.0105cell/ml， 也可以含有牟氏角毛藻 2.5105cell/ml 与球等鞭 金藻或普通小球藻 0.5105cell/ml ； 或者是含有牟氏角毛藻 3.0105cell/ml、 或者是含 有盐生杜氏藻 2.5105cell/。
27、ml 与球等鞭金藻或普通小球藻 0.5105cell/ml。 0044 实施例 6 ： 说 明 书 CN 101036448 B4/4 页 7 0045 基本培养方法同实施例 1 或实施例 2 或实施例 3 或实施例 4 或实施例 5。所述饵 料的品种和用量如下 ： 盐生杜氏藻 3.0105cell/ml ； 或者牟氏角毛藻 2.5105cell/ml 与 球等鞭金藻或普通小球藻 0.5105cell/ml 混合喂养 ； 或者牟氏角毛藻 3.0105cell/ml ； 或者盐生杜氏藻2.5105cell/ml与球等鞭金藻或普通小球藻0.5105cell/ml混合喂养， 最好是隔天替换喂养。 0046 实施例 7 ： 0047 基本培养方法同实施例 1 或实施例 2 或实施例 3 或实施例 4 或实施例 5 或实施例 6， 最好在培养过程中， 每月更换培养容器一次， 培养容器应按 a 步骤所述， 经过消毒并四周 遮光。培养用水温度以 13为基准， 最好是每日升 2或者降 2变换温度进行培养。 说 明 书 。