技术领域
本发明涉及Xylogranin B的新用途。具体地说是在制备抗肺纤维化药物中的应用，属于医药领域。
背景技术
JP 2012－184195已经公开了化合物Xylogranin B，其结构式为
式Ⅰ
已知该化合物是从木果楝(楝科)叶子中分离的，能明显降低β-连环蛋白细胞核蛋白质含量，抑制TCF /β-连环蛋白转录活动，由此对Wnt信号产生抑制，从而达到对抗结肠癌细胞株的作用。（Toume K. et al., 2013. Xylogranin B: a potent Wnt signal inhibitory limonoid from Xylocarpus granatum.Org Lett. 2013 Dec 6;15(23):6106-6109.）
发明内容
本发明的目的在于提供Xylogranin B的新用途，即在制药中的应用。 具体地，本发明涉及Xylogranin B在制备抗肺纤维化药物中的应用。
为了更好地理解本发明的实质，下面用Xylogranin B的药效学实验及其结果来进一步说明其在制药领域中的新用途。
参照文献Xylogranin B: a potent Wnt signal inhibitory limonoid from Xylocarpus granatum.（Toume K. et al., 2013. Org Lett. 2013 Dec 6;15(23):6106-6109.）制备Xylogranin B。取化合物Xylogranin B50克，加入1%的羧甲基纤维素钠分别配成0.05mol/L、0.1 mol/L 的混悬液，备用。
安全性毒理学评价：
1、急性毒性试验
在14天的观察期间内，选择清洁级标准SD雄性大鼠6只，180-200g，Xylogranin B 片100 mg/10g，每3日灌胃1次，2只雄性大鼠出现腹泻及体重下降现象，未出现任何中毒症状，无动物死亡。根据试验所设计的剂量，观察到的结果及大鼠急性毒性判定标准，可以认为Xylogranin B小鼠经口灌胃最大耐受量10g/kg，属实际低毒物质。
2、30天喂养试验
①一般状况观察
在14天的观察期间内，选择清洁级标准SD雄性大鼠6只，180-200g，随机分为Xylogranin B和对照组2组，Xylogranin B组按20 mg/10g每日喂养，对照组喂给等量饲料。在整个试验过程中，各组动物一般状况良好，行为正常，未见任何中毒表现，亦无动物死亡。
②Xylogranin B对大鼠体重增长、进食量、食物利用率的影响
Xylogranin B喂养的大鼠的体重增长情况良好，与对照组比较均无显著性差异。大鼠的增重、进食量及食物利用率与对照组比较差异均无显著性。表明Xylogranin B对大鼠体重增长、进食量及食物利用率均未见明显影响。对血常规、生化均未见明显影响。
药效学实验：
1、实验动物：标准SD雄性大鼠，清洁级，体重180±20g；
试剂及其他药品：博来霉素A5针剂（天津太河制药有限公司）、羟脯氨酸（HYP）检测试剂盒（南京建成生物工程研究所提供）、鼠转化生长因子β1（TGF-β1）单克隆抗体（美国R&D公司）、PV-6000二步法免疫组化试剂盒（北京中衫金桥生物公司）、羧甲基纤维素钠（天津科密欧试剂开发中心）、Xylogranin B。
2、实验方法：
取标准SD雄性大鼠96只，体重180~200 g。随机分为4组：空白组、博来霉素造模组（简称阳性对照组）、Xylogranin B高剂量组（0.1 mol/L，简称高剂量处理组）、Xylogranin B低剂量组（0.05 mol/L，简称低剂量处理组），每组24只。除空白组外的其余三组大鼠气管内一次性注入博莱霉素诱导肺纤维化，空白组不加药物直接给0.9%生理盐水气管镜内滴注。造模后第15 天起，Xylogranin B高剂量处理组和低剂量处理组分别给予0.1 mol/L Xylogranin B及0.05 mol/LXylogranin B 5ml每3日灌胃一次，博来霉素造模（阳性对照）组和空白组每3日给予1%羧甲基纤维素钠5ml（10 mL/kg）灌胃一次。各组动物分别于造模后第21，28，42及56 d随机处死6只，取肺组织行HE、Masson染色评价肺组织病理变化，消化法测定肺组织羟脯氨酸（HYP）含量，免疫组化法测定肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）的表达。
3、实验结果
统计结果表明阳性对照组及低剂量处理组、高剂量处理组的纤维化程度均较空白组显著（P均<0.05），但高剂量处理组肺纤维化程度于造模后第42和56 d显著低于阳性对照组 (博来霉素造模组)（P均<0.05）（表1），其肺组织HYP含量从42d起，高、低剂量处理组较阳性对照组均存在差异显著性，高剂量处理组在42d、56 d时较阳性对照组的HYP含量显著降低（P<0.01）（表2），同时高剂量处理组的大鼠肺组织TGF-β1蛋白表达于第28，42及56 d显著低于阳性对照组（P均<0.05），其中第56 d时与空白组TGF-β1蛋白含量比较无显著差异（P>0.05）（表3）。结果如下：
表1 各组肺纤维化评分
注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01；与阳性对照组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01
表2 各组大鼠HYP含量动态变化及比较（mg/g，±s）
注：与空白组比较，*P<0.01；与阳性对照组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01；与低剂量处理组比较，◆P<0.05
表3 不同时间点各组大鼠肺组织TGF-β1表达（IOD值，±s）
注：与空白组比较，*P<0.01；与阳性对照组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01；与低剂量处理组比较，◆P<0.05
从以上结果可以得出本发明的优点在于：
（1） 本发明发掘了已知化合物Xylogranin B的新医疗用途；
（2） 本发明的Xylogranin B安全低毒性，预示着很好的用药前景；
（3） 实验结果表明，含Xylogranin B的化合物抗肺纤维化的作用明显强于对照组。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明是作进一步详细说明。
实施例1
第一步 参照文献Xylogranin B: a potent Wnt signal inhibitory limonoid from Xylocarpus granatum.（Toume K. et al., 2013. Org Lett. 2013 Dec 6;15(23):6106-6109.）制备Xylogranin B。
第二步 取第一步所得化合物50克，加入1%的羧甲基纤维素钠配成0.05mol/L 的混悬液。
实施例2
第一步 参照文献Xylogranin B: a potent Wnt signal inhibitory limonoid from Xylocarpus granatum.（Toume K. et al., 2013. Org Lett. 2013 Dec 6;15(23):6106-6109.）制备Xylogranin B。
第二步 取第一步所得化合物50克，加入1%的羧甲基纤维素钠配成0.1mol/L的混悬液。
上面虽然结合实施例对本发明作了详细的说明，但是，所属领域技术人员能够理解，在不脱离本发明宗旨的前提下，在权利要求保护范围内，还可以对上述实施例进行变更或更改。