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1、(10)授权公告号 CN 101341869 B (45)授权公告日 2011.04.20 CN 101341869 B *CN101341869B* (21)申请号 200810117982.7 (22)申请日 2008.08.19 A01N 3/02(2006.01) (73)专利权人 中国农业大学 地址 100083 北京市海淀区清华东路 17 号 中国农业大学 40 信箱 (72)发明人 李里特 刘海杰 夏丹萍 (74)专利代理机构 北京众合诚成知识产权代理 有限公司 11246 代理人 胡长远 JP 2002104908 A,2002.04.10, 全文 . JP 200500854。
2、2 A,2005.01.13, 摘要及说明 书第 20-30 段 . 李里特 . 电生功能水在农业上的应用研究及 展望 .中国农业信息 .2006,( 第 1 期 ), 全文 . (54) 发明名称 电生功能水在鲜切花保鲜上的应用 (57) 摘要 本发明公开了电生功能水在鲜花保鲜上的 应用。其中所述的电生功能水包括酸性电生功 能水或者碱性电生功能水， 所述的酸性电生功 能水为 pH2 5， 氧化还原电位 ORP 为 1000 1200mV， 有效氯浓度为 10 50mg/L ； 所述的碱性 电生功能水是为 pH 值为 9 13， 氧化还原电位 为 -870 -580mV。本发明还公开了利用电生。
3、功 能水保鲜鲜切花的方法和电声功能水的制备方 法。本发明鲜花保鲜效果显著， 比用蒸馏水、 保鲜 剂、 切花营养液等保鲜效果好 ； 其次， 本发明生产 方法简单、 生产成本低 ； 此外， 本发明所用电生功 能水安全、 无害。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 田瑞增 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书 1 页 说明书 8 页 附图 4 页 CN 101341869 B1/1 页 2 1. 电生功能水在鲜切花保鲜上的应用，所述的电生功能水是指酸性电生功能水或者 碱性电生功能水，其特征在于所述的酸性电生功能水的 pH 值为 2.5、氧化还原电位 ORP。
4、 为 1125mV、有效氯浓度为 10 50mg/L ；所述的碱性电生功能水的 pH 值为 13、氧化还 原电位为 -874mV。 2.利用权利要求1所述的电生功能水保鲜鲜切花的方法，其特征在于将鲜切花插入电 生功能水中，每隔 48 小时换一次电生功能水。 权 利 要 求 书 CN 101341869 B1/8 页 3 电生功能水在鲜切花保鲜上的应用 技术领域 0001 本发明属于电生功能水的用途，具体涉及电生功能水在鲜切花保鲜上的用途。 背景技术 0002 “电生功能水 (Electrolyzed Functional Water， EFW)”，亦称电解离子水，是 以特殊电解装置对电解质稀溶。
5、液进行处理，最终得到的酸性离子水和碱性离子水的总 称。 其中，酸性离子水具有较低的 pH 值，较高的氧化还原电位 (Oxidation-Reduction Potential，ORP)和一定的有效氯含量(AvailableChlorine Concentration，ACC) ；碱性离子 水具有较高的 pH 值和较低的氧化还原电位。 其中，强酸性离子水的 pH 值在 2.0 3.5 之间，氧化还原电位 ORP 值达到 1100 1200mV，有效氯浓度 20 100mg/L ；强碱性 离子水的 pH 值在 11.0 12.2 之间，ORP 值可达 -850 -1000mV。 通常情况下用于杀 。
6、菌洗涤和农业用途的电生功能水多指强酸性离子水，酸性电生功能水可以有效延长果蔬 类农产品的采后货架期 ；可以替代农药防治病虫害的发生等等。 0003 鲜切花是花卉市场的主导产品，但鲜切花采后的自然寿命一般较短，因此在流 通中会造成比较严重的损失，大多数损耗在 20左右，有的甚至高达 50。 目前针对鲜 切花的保鲜方法主要有 ：(1) 物理保鲜方法，如冷藏处理、气调处理和辐射处理 ；(2) 生 物工程保鲜技术 ；(3) 化学保鲜方法，如加入有机酸、杀菌剂、乙烯抑制 / 拮抗剂、生长 调节剂、无机盐、表面活性剂等化学药剂。 但上述鲜切花保鲜方法具有一定局限性，如 物理方法普遍投资较大，生产规模较小，。
7、难以应用 ；而化学保鲜方法会造成一定残留， 并且具有品种特异性，保鲜效果不够稳定，也难以推广。 发明内容 0004 本发明第一目的是提供电生功能水在鲜花保鲜上的应用。 0005 本发明第二目的是提供利用电生功能水进行鲜花保鲜的方法。 0006 为实现上述目的，本发明的技术方案为 ： 0007 电生功能水在鲜切花保鲜上的应用。 0008 所述的电生功能水是指酸性电生功能水或者碱性电生功能水。 0009 上述电生功能水中所述的酸性电生功能水是指pH值为25，优选为pH45， 最优选 pH 为 5，氧化还原电位 ORP 为 1000 1200mV，有效氯浓度为 10 50mg/L。 0010 上述电。
8、生功能水中所述的碱性电生功能水是指其pH值为913，优选为13，氧 化还原电位为 -870 -580mV。 0011 所述的鲜切花是指月季、玫瑰或牡丹等。 0012 上述鲜切花是指月季品种贝拉米。 0013 利用电生功能水保鲜鲜切花的方法，就是将鲜切花插入电生功能水中，每隔 48 小时换一次电生功能水。 0014 上述电生功能水的制备方法，包括如下步骤 ： 说 明 书 CN 101341869 B2/8 页 4 0015 (1) 按照重量百分比为 0.05 0.2的比例将电解质溶解于蒸馏水中，充分搅拌 均匀，然后分别置于电功能水发生器的两个电解槽中 ； 0016 (2) 在电压为 12 36V。
9、、电流为 0.2 3A、电极距为 4 50mm、极板面积为 108cm2的条件下进行电解反应 10 30min ；即在阳极电解槽得到酸性电生功能水，在阴 极电解槽得到碱性电生功能水。 0017 上述制备方法中所述的电解质是指氯化钠、氯化钾、氯化钙或氯化镁等。 0018 上述制备方法中所述的电功能水发生器可参见实用新型专利 一种制备强酸化 水的装置 ( 专利号为 ：ZL96244992.x) 0019 与现有技术相比，本发明具有的优点和有益效果为 ：(1) 本发明鲜花保鲜效果 显著，比用蒸馏水、保鲜剂、切花营养液等保鲜效果好 ；(2) 本发明生产方法简单、生 产成本低，本发明只需要承担水费和电费。
10、，因而成本很低 ；(3) 本发明所用电生功能水 安全、无害，在使用后可以还原为普通水，对环境不会造成危害，同样对使用者来说安 全，没有伤害性和残留性。 附图说明 0020 图 1 不同品种月季切花的瓶插总天数对比柱形图 0021 其中 1- 阳光、2- 芽变、3- 二级贝拉米、4- 一级贝拉米、5- 金徽章、6- 坦尼克 0022 图 2 不同电生功能水处理下切花贝拉米的瓶插寿命的柱形图 0023 1-EOW 原，2-EOW2，3-EOW4，4-EOWpH 4，5-EOWpH 5，6-ERW 原， 7-ERW2，8-ERW4，9-ERWpH 11，10-ERWpH 11，11- 蒸馏水。 00。
11、24 图 3 不同处理下鲜切花寿命柱形图 0025 图 4 不同处理下鲜切花的鲜重随瓶插天数变化曲线图 0026 图 5 不同处理下鲜切花的鲜重变化曲线图 0027 图 6 不同处理下鲜切花的吸水量随瓶插天数变化曲线图 0028 图 7 不同处理下鲜切花的失水量随瓶插天数变化曲线图 0029 图 8 不同处理下鲜切花的水分平衡状况曲线图 0030 图 9 不同处理下鲜花瓣的含水量随瓶插天数的变化的曲线图 0031 图 10 不同处理下鲜切花的乙烯生成量的曲线图 0032 图 11 不同处理下鲜切花花瓣的质膜氧化性随瓶插天数变化的曲线图 具体实施方式 0033 实施例 1 电生功能水的制备 00。
12、34 (1) 按照重量百分比为 0.075的比例将氯化钠溶解于蒸馏水中，充分搅拌均 匀，然后分别置于电功能水发生器的两个电解槽中 ； 0035 (2)在电压为24V、电流为1.6A、电极距为24mm、极板面积为108cm2进行电解 反应 20min ；即在阳极电解槽得到酸性电生功能水 ( 以下简称 EOW)，在阴极电解槽得到 碱性电生功能水 ( 以下简称 ERW) ；经检测所得酸性电生功能水为 pH 2.50.3， ORP 112510mV，有效氯的含量为 1.420.5mg/L 的酸性电生功能水 ；所得碱性电生功能 水为 pH 130.5，0RP -8745mV。 说 明 书 CN 1013。
13、41869 B3/8 页 5 0036 实施例 2 电生功能水对月季鲜切花的保鲜试验 0037 (1) 试验材料 ：5 个月季花品种 ：阳光、金徽章 (Gold Emblem， HT)、坦尼克 (Tineke，HT)、芽变和贝拉米 (Belami，HT)。 每个品种 30 支。 0038 (2) 试验材料的前处理 ：将运回的鲜花迅速进行前处理，用专业修花剪在蒸馏 水下修剪花茎，保留长度大约在30cm，切口处为45斜面，修剪叶片最终只保留2、3对 复叶。 插入盛有蒸馏水的容器中并置于黑暗环境静置 2h，进行复水，弥补鲜花在采收和 运输过程中发生的部分失水。 0039 (3) 试验的处理实施例 1。
14、 制备的 EOW 和 ERW 0040 EOW ：pH 2.50.3， ORP 112510mV，有效氯的含量为 1.420.5mg/ L ； 0041 ERW ：pH 130.5，0RP -8745mV ； 0042 蒸馏水 ( 对照 )pH 6.440.4，ORP 40050mV。 0043 (4) 试验方法将每个品种的 30 支鲜切花品种随机分成三组， 0044 将 (1) 中每个品种的 30 支鲜切花随机分成三组，利用 (2) 中三种瓶插液进行三 种瓶插处理，瓶插容器是容积为 1500ml 的圆柱形塑料容器，平均一只容器中插入切花 10 支，瓶插液的使用量为 500ml，重复 2 次。。
15、 并每隔 48 小时更换新鲜的瓶插液，于使用前 制备，换水操作时迅速将原有瓶插液倒出，而后将已经量取好的新鲜瓶插液倒入。 0045 (5) 结果切花的瓶插寿命计算 0046 从瓶插之日起，当花瓣出现失水萎蔫或者发生 “弯头” 和 “蓝变” 或者 “掉 瓣” 现象，作为瓶插寿命结束的标志。 0047 结果 ( 见图 1) 坦尼克的保鲜效果不显著，间隔 24h 的测定未能发现各处理组间 有着明显的区别。 其他种类切花在EOW处理下的寿命比起蒸馏水处理平均延长17.5， 其中贝拉米的效果最明显，能够延长切花寿命 25.6。 ERW 处理的瓶插寿命比蒸馏水处 理平均可以延长10.1。 说明电生功能水尤。
16、其是EOW延长了盛花期的时间，即延长了瓶 插的持续天数，从而在整体上延长了月季切花的瓶插总寿命。 0048 实施例 3 电生功能水对于月季鲜切花的保鲜试验 0049 (1) 实验材料 ：月季品种 ：贝拉米。 0050 (2) 材料的前处理 ( 见实施例 2)。 0051 (3) 瓶插液的制备 0052 a、稀释水的制备 ：将实施例 1 制备的 EOW 和 ERW 分别用蒸馏水稀释 2 倍或 4 倍，分别得 EOW2 倍稀释水 ( 下文简称 EOW2) 和 EOW4 倍稀释水 ( 下文简称 EOW4)， 及 ERW2 倍稀释水 ( 下文简称 ERW2) 和 ERW4 倍稀释水 ( 下文简称 ER。
17、W4) ； 0053 b、用 1mol/LNaOH 调节实施例 1 制备的 EOW 的 pH 值，最终分别得到 pH 值为 4、5 的弱酸性 EOW ；即 pH 4 的 EOW( 下文简称 EOWpH 4) 和 pH 5 的 EOW( 下文 简称 EOWpH 5) ； 0054 c、用 1mol/LHCl 调节实施例 1 制备的 ERW 的 pH 值，最终分别得到 pH 值为 11、9 的弱碱性 ERW，即 pH 11 的 ERW( 下文简称 ERWpH 11) 和 pH 9 的 ERW( 下 文简称 ERWpH 9) ； 0055 d、实施例 1 制备的 EOW 原水 ( 下文简称 EOW 。
18、原 ) 和 ERW 原水 ( 下文简称 说 明 书 CN 101341869 B4/8 页 6 ERW 原 ) ； 0056 e、蒸馏水 (ck) 0057 上述瓶插液的指标见表 1 0058 (3) 试验方法将总数为 300 的鲜切花贝拉米随机分组，每组 10 支、2 次重复，进 行表 1 所示的瓶插液的处理，每隔 48h 更换瓶插液，使用前现用现制。 以完成第一次瓶 插的时间记为初始时间。 0059 表 1 瓶插液类型和指标表 0060 pH 值ORP 值 (mV) 有效氯含量 (mg/L) EOW 原2.62115433.27 EOW22.86111516.49 EOW43.101060。
19、7.98 ERW 原13.37-804/ ERW212.67-56/ ERW412.2946/ EOWpH 43.97107533.39 EOWpH 55.01100033.56 ERWpH 1111.06-710/ ERWpH 98.95-580/ 蒸馏水(CK) 5.44350/ 0061 (4) 试验结果 ( 见图 2) 与对照蒸馏水相比，EOW 平均可以延长贝拉米鲜切花的 瓶插寿命 27.3；ERW 平均可以延长贝拉米鲜切花的瓶插寿命 7.0。 EOW 的保鲜效果 好于 ERW，平均延长了贝拉米鲜切花寿命 18.7，其中经调节至 pH 5 和 pH 4 的弱 酸性 EOW 在所选的众多。
20、保鲜液中瓶插寿命最佳，平均可以延长瓶插寿命 35 ；未经处 理的 pH 13 的 ERW 原液保鲜在所有 ERW 中的保鲜效果最好，平均可以延长切花寿命 14.3。 这些试验结果说明电生功能水能显著提高鲜切花的瓶插寿命。 0062 实施例 4 电生功能水对鲜切花吸水性试验 0063 (1) 实验材料 ：贝拉米 0064 (2) 实验材料前处理 ：同实施例 2。 0065 (3) 瓶插液的制备 0066 处理 1 ：用浓度为 1mol/L 的 NaOH 调节实施例 1 制备的 EOW 为 pH 4.5， 0067 处理 2 ：实施例 1 制备的 ERW 原水调整为 pH 13 0068 对照 ：。
21、蒸馏水 0069 (4)实验方法 ：将300支鲜花随机分组，每组50支，2个重复，进行三种处理， 即分别用 (2) 所述的 EOW、ERW、蒸馏水进行瓶插，每隔 48h 重新制备并更换瓶插液， 用前现用现制。 以完成第一次瓶插的时间记为初始时间，此后每隔 24h 测定以下指标 ： 0070 a水分测定 ：测定花枝重量、切花吸水、切花失水、花瓣含水量，具体的测定方 法如下 ： 0071 b 切花的鲜重 ：称量法，先称出 ( 杯 + 保鲜液 + 切花 ) 的总重 W1，然后将切花 取出，称出 ( 杯 + 保鲜液 ) 的重量 W2，切花鲜重 W1-W2。 后面一天的鲜重减去前面 说 明 书 CN 1。
22、01341869 B5/8 页 7 第一天的鲜重为每天的鲜重变化量。 0072 c. 切花吸水量 ：以 ( 杯 + 保鲜液 ) 连续 2 次的称量之差为这段时间的吸水量。 0073 d. 切花失水量 ：以 ( 杯 + 保鲜液 + 切花 ) 连续 2 次的称量之差为这段时间的失水 量。 0074 e. 水分平衡 ：切花吸水量和失水量之差为水分平衡。 0075 f.花瓣含水量 ：摘取23片花瓣，称其鲜重W3(取1g左右)，放入烘箱在85 烘 15min，再以 105烘 30min 至完全干燥恒重时称重 W4，含水量变化 W3-W4。 0076 (5) 试验结果 0077 a. 切花的瓶插寿命 ：结。
23、果 ( 见图 3)EOW、ERW 作为瓶插液的实验组的切花寿命 显著比对照蒸馏水处理组 (p0.05)，分别延长了切花寿命 73.5和 55.1，说明 EOW、 ERW 都明显延长了鲜切花的瓶插寿命。 0078 b. 切花鲜重 ：结果 ( 见图 4) 在瓶插期间，三种瓶插液处理的切花鲜重均呈现出 小幅增长而后下降的趋势，EOW 和 ERW 处理的切花鲜重在瓶插第 5d 之后开始下降，而 蒸馏水处理组在第 4d 便出现下降的趋势 ；其次，在瓶插过程中，EOW 和 ERW 处理组切 花鲜重始终远远高于对照蒸馏水处理组， EOW 和 ERW 处理组的切花鲜重变化趋势比较 一致，但 EOW 在瓶插中后。
24、期的鲜重下降较 ERW 缓慢。 瓶插第 5 9d，EOW 处理组切 花的鲜重与蒸馏水相比分别高出 18.4、25.3、32.1、33.9和 30.6，ERW 处理组 切花的鲜重与蒸馏水相比分别高出 13.5、15.3、22.6、33.7和 30.9。 说明电生 功能水能够缓解切花鲜重的下降。 0079 c. 切花的鲜重变化 ：结果 ( 见图 5)EOW 处理组在瓶插的前 5d 切花鲜重一直在 不断增长，之后直线下降，而ERW和蒸馏水处理组切花的鲜重从瓶插第4d起便开始不断 下降，但ERW的下降比蒸馏水处理组缓慢，EOW在瓶插第7d到8d间鲜重下降最快，这 与切花鲜重变化的结果相符合，此时的鲜切。
25、花逐渐丧失了观赏价值。 说明电生功能水能 够有效降低切花鲜重的下降速度。 0080 d. 切花吸水量 ：结果 ( 见图 6) 在瓶插期间，对照蒸馏水组切花吸水量比较平 均，没有明显的变化，平均吸水量在 1.46g/24h。 而对于 EOW 和 ERW 来说，在瓶插过 程中，吸水量变化趋势为先增后减，在瓶插第 6d， EOW 的吸水量到达峰值，日吸水量 为2.025g，与对照蒸馏水相比高出33.0，之后缓慢下降 ；ERW在第7d吸水量最大，为 1.888g/24h，比对照蒸馏水高出 26.2。 EOW 和 ERW 处理组的切花吸水整体水平均高 于对照蒸馏水处理组。 说明电生功能水能够有效促进切花。
26、的吸水。 0081 e. 切花失水量 ：结果 ( 见图 7) 切花失水量表现为切花内部由于蒸腾导致的水分 含量下降以及瓶插液蒸发失水的两个部分。 三种处理切花的失水量在瓶插前期间除第 5d 以外的瓶插前 7d 整体变化趋势比较相似，但后期 EOW 和 ERW 的失水量明显增加，而蒸 馏水失水减少。 说明电生功能水能够有效抑制切花的失水。 0082 f.切花水分平衡 ：结果(如图8)在瓶插第5d ERW处理组的切花水分平衡下降至 0 以下的负值，而 EOW 和蒸馏水处理组的切花在瓶插第 6d 水分平衡才降至负值。 说明 ERW 处理组切花在瓶插初期的失水较为严重，使得水分平衡难于保持，此后第 6。
27、 9d 该 处理组切花的水分平衡基本保持不变，说明其基本维持了一定的吸水和失水平衡， EOW 处理组和蒸馏水处理组自瓶插第 5d 开始水分平衡持续下降，蒸馏水组的下降幅度更为明 说 明 书 CN 101341869 B6/8 页 8 显，在瓶插第 8d，尽管 3 处理组的水分平衡均处于负值，但 ERW 处理组的水分平衡与对 照相比高出 32.2，EOW 处理组与对照相比高出 20.4。 在瓶插第 9d，3 处理组的水分 平衡又处于相同的水平，由切花鲜重的结论，蒸馏水处理组的切花在瓶插第 6d 即开始了 失水萎蔫，而 EOW 和 ERW 处理组在瓶插第 8d 才开始萎蔫，因此在瓶插第 9d 时，。
28、3 个处 理组的切花达到了相近的萎蔫状态，失水和吸水量比较接近，故而水分平衡值达到了相 同的水平。 说明电生功能水能够较好的维持鲜切花体内的水分平衡状态。 0083 g.切花花瓣含水量 ：结果(见图9)三种处理组有显著的差异，EOW含水量始终 最高， ERW 其次，而对照蒸馏水最差，这与实验现象观察到用蒸馏水处理的花瓣很早便 出现失水萎蔫皱缩的情况是相符合的。 EOW处理组的花瓣整体含水量与对照蒸馏水相比 高出 2.6，ERW 处理组的花瓣整体含水量与对照蒸馏水相比高出 1.1。 说明电生功能 水能够促进花枝吸水，保持花瓣较高的含水量。 0084 实施例 5 电生功能水对鲜切花乙烯释放量，缓解。
29、乙烯峰高并推迟峰的到来的试 验。 0085 (1) 试验材料 ：月季切花 ：贝拉米 0086 (2) 各项前处理和处理液的制备同实施例 4 0087 (3) 试验方法 ：EOW、 ERW 和蒸馏水作为瓶插液的 3 种处理，每隔 24h 各取 5 枝贝拉米月季切花，剪去茎干只保留花朵，在称量花头的重量后迅速装入容积为 100ml 的玻璃瓶内并用胶塞密封，密封 45min 后用一次性针管反复抽气和推气使瓶子内的气体 均匀混合，之后抽取其中的气体 8ml，于饱和食盐水下通过排气法将气体保存在容积是 10ml 的小玻璃瓶中，用橡胶塞封住瓶口，之后用 parafi lm 再次密封瓶口防止漏气，并将 小玻。
30、璃瓶倒置于 0的冰箱中保存。 0088 用气相色谱法测定乙烯的生成量。 气相色谱的型号为岛津 GC-17A，测定条件 柱温 50，载气 N2 流速 50ml/min，空气流速 500ml/min， H2 流速 70ml/min。 根据乙 烯标准曲线计算花头释放出的乙烯含量，以 nl kg-1 h-1 表示，重复 3 次。 0089 0090 (4) 试验结果 ：结果 ( 见图 10) 在整个瓶插期间， EOW 处理的乙烯生成量变化 不大，并且总量比较低，平均在 0.009nl/kgh，没有出现一般意义上的呼吸高峰 ；ERW 的乙烯生成量较高，瓶插中期达到了平均 0.019nl/kg h 左右，。
31、在整个瓶插的第 4 7d 增长并在第 7 天达到了小呼吸高峰，乙烯生成量在 0.022nl/kg h ；对照蒸馏水虽然在初 期乙烯生成量不高，与 ERW 没有显著差异但高于 EOW，但自瓶插第 4d 后，乙烯释放量 突然急剧增加并在第 7d 到达了峰值 0.048nl/kg h，远远高于 EOW 和 ERW 处理组的乙 烯释放量，根据切花鲜重的实验结论，蒸馏水处理组切花自瓶插第 6d 开始进入萎蔫，分 析此后的切花产生乙烯最为严重，而乙烯的产生同样加速了切花的呼吸作用，使得切花 失水萎蔫的速度加快。 0091 EOW 处理组有效降低了乙烯的释放量，在整个瓶插期间没有明显的呼吸高峰 出现。 EO。
32、W 和 ERW 处理组在瓶插第 7d 与对照蒸馏水组相比分别降低了乙烯的释放量 说 明 书 CN 101341869 B7/8 页 9 0.039nl/kg h 和 0.027nl/kg h。 该实验证明 EOW 和 ERW 作为瓶插液处理可以降低 切花瓶插过程中的乙烯释放量，有效缓解乙烯峰高并推迟峰的到来，从而缓解乙烯对切 花的促衰老作用，延长了切花瓶插寿命。 0092 实施例 6 电生功能水抑制鲜切花花瓣质膜氧化性试验 0093 (1) 试验材料 ：月季切花 ：贝拉米 0094 (2) 各项前处理和处理液的制备同实施例 4 0095 (3) 试验方法 ：实验期间每隔 24h 取样，三个处理。
33、各取 5 枝切花，从每枝花上称 取新鲜的花瓣 1g，用铝箔纸包裹，放入液氮中速冻，在 -20的冰箱内保存，待后续实 验。 0096 将在超低温冰箱中保存的 1g 花瓣样品在液氮中研磨，期间加入 5 (0.05g) 的 PVP-K30 用于脱色，将花瓣充分研磨至粉末细腻均匀后转入在液氮中预冷的 10ml 离心管 中，加入 5ml 在冰浴预冷的 PBS-EDTA 缓冲液，摇匀，冰浴下提取 30min，然后在 4、 12000rpm 下离心 15min，提取出的上清液即为花瓣粗酶液。 0097 10ml 玻璃具刻度试管中反应体系如下，依次加入，稍混匀。 0098 表 3 实验反应体系列表 0099 。
34、对照 (ml)样品 (ml) 重蒸水1.50.5 TBAD-TCA 溶液2.52.5 粗酶液0.01.0 反应总体积4.04.0 0100 盖紧试管，在沸水中煮 15min，再于凉水中迅速冷却，将样品管液体倒入 10ml 离心管中，5000rpm 离心 10min，并取上清夜，以对照管为空白，分别在 450nm、 532nm、600nm 下测定样品管的吸光值。 依据公式计算 MDA 含量 ： 0101 0102 0103 其中 OD450、 OD532、 OD600分别表示提取的上清液在紫外分光光度计 450nm、 532nm、600nm 的吸光度值。 0104 MDA 是细胞质膜氧化的产物，。
35、质膜过氧化程度越高，预示着切花的衰败和萎蔫 程度越深。 结果 ( 见图 11) 三种瓶插处理下切花花瓣的整体质膜氧化性变化趋势会在瓶 插第3d出现一个峰值，而后下降，之后又逐渐上升。EOW的质膜氧化性在瓶插期间一直 低于对照蒸馏水处理，但对于 ERW 来说，变化趋势一直比较平缓，在瓶插第 3d 其 MDA 低于 EOW 处理，之后高于 EOW 处理组，但 ERW 处理组一直低于对照蒸馏水。 在瓶插 第 8d，EOW 和 ERW 处理组的切花 MDA 含量与对照蒸馏水处理组相比分别低 38.01和 32.06。 说明 ERW 能够在生物体胞内及胞外消除衰老的根源物质超氧自由基，即平衡 超氧自由基。
36、的不成对电子，防止它们对于细胞、蛋白质的破坏作用，从而保证了细胞正 常分裂，延缓衰老。 同理推断ERW具备-850mV的负电位赋予其较强的还原性，这有利 说 明 书 CN 101341869 B8/8 页 10 于缓解切花内部由于氧化造成的衰老变化，从而达到保鲜功效。 说 明 书 CN 101341869 B1/4 页 11 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 101341869 B2/4 页 12 图 3 图 4 图 5 说 明 书 附 图 CN 101341869 B3/4 页 13 图 6 图 7 图 8 说 明 书 附 图 CN 101341869 B4/4 页 14 图 9 图 10 图 11 说 明 书 附 图 。