技术领域
本发明属于兽医用药领域，具体涉及一种防治仔猪腹泻的中药涂 膜剂及其制备方法。
背景技术
腹泻是仔猪阶段最为常见的疾病，2014年以来美国暴发仔猪流 行性腹泻疾病，死亡仔猪近600万头，其后多地也出现腹泻疫情。近 日，流行性腹泻又洗劫日本养殖场，已造成近7万头猪死亡。面对席 卷全球的疫情，各国正加紧研发针对仔猪腹泻的药物。
仔猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的猪的一种急性肠 道传染病，以水泻、呕吐和脱水为特征，其病原属于冠状病毒科冠状 毒病属。对乙醚，氯仿等敏感，对外界环境和消毒药抵抗力不强。哺 乳仔猪、断奶仔猪和育肥猪感染发病率100％，哺乳仔猪受害最严重， 病死率平均50％，常在4～5周内传遍整个猪场，而且仔猪腹泻会导 致仔猪成活率下降，生长发育缓慢，甚至停滞，给养猪业带来巨大的 经济损失，因此如何防治仔猪腹泻已成为一个引人注目的世界性问 题。
仔猪腹泻的原因可以分为病原性和非病原性两种，病原性主要由 于多种细菌、病毒和寄生虫等引起，非病原性主要由于营养和饲养环 境的应激。针对病原性引起的仔猪细菌性腹泻，需要有针对性的药物 进行治疗，即该药物需具有对细菌及其毒性产物的直接抑杀和解毒作 用。对于非病原性引起腹泻的主要原因是由于仔猪免疫机能不全造成 的，由于仔猪的免疫系统发育不完善，因此当猪舍存在病原菌或外界 环境发生剧烈变化，仔猪便会因为抵抗力差而患病，引起腹泻或其他 疾病，针对这种腹泻的药物要通过调动机体免疫防御功能而发挥抑 菌、杀菌作用。
目前，防治仔猪腹泻多采用抗菌素类的西药，但是，随着耐药菌 株的不断出现和仔猪本身的抵抗力差，有些猪场利用现有的药物控制 效果不佳，而且还造成了畜产品药物残留高，毒性大。
申请号为201310680752.2专利申请中提供了一种有效防治仔猪 腹泻的中草药饲料添加剂，该发明将中草药混合物添加入饲料中，但 是该中草药饲料添加剂的适口性差，仔猪对于药物气味十分敏感，饲 料添加剂的中草药味道过大，仔猪会产生厌食反应，不适合仔猪口服， 进而会大大影响药效。
目前市面上还没有针对仔猪腹泻的中药涂膜剂相关产品的介绍。
发明内容
针对现有治疗仔猪腹泻的口服中药适口性不好及药效不佳的问 题，本发明提供了一种防治仔猪腹泻的中药涂膜剂及其制备方法，中 药涂膜剂可直接涂抹在仔猪肚脐部位便可吸收药物成分，见效快，无 药物残留，成本低。
本发明的技术方案如下：一种防治仔猪腹泻的中药涂膜剂的制备 方法，包括如下步骤：取白术、车前子、木香、藿香、甘草、土茯苓、 黄岑、黄芪作为原料，将其粉碎后经煮制、过滤、提取后浓缩成流浸 膏，将流浸膏与成膜溶液和透皮促进剂均匀混合后制成中药涂膜剂。
进一步的，所述的防治仔猪腹泻的中药涂膜剂的制备方法，包括 如下步骤：
(1)称取白术18～30份、车前子25～35份、木香10～25份、藿香 8～15份、甘草7～15份、土茯苓15～22份、黄岑13～18份、黄芪25～33 份，将原料分别粉碎至80～120目，放入各原料质量的15～20倍水中 分别大火煮制2～4小时，煮制后再于各原料质量的5～10倍浓度为 60～80vt％乙醇中加热回流分别提取1～3次，提取温度为60～65℃，将 各提取液用滤纸过滤，配制成1:1的各中药流浸膏，即每1g原料得 到1ml流浸膏；
(2)将步骤(1)制得的各中药流浸膏混合，于1500～2000r/min 离心20～30min后收集上清液，将上清液浓缩成2:1的混合流浸膏， 即每2g原料得到1ml流浸膏，待用；
(3)将聚乙烯醇、壳聚糖和海藻酸钠分别溶于2vt％的醋酸水溶 液中，配制成浓度为2vt％的聚乙烯醇溶液、5vt％的壳聚糖溶液以及 2vt％的海藻酸钠溶液，将其按照1～3：1～2：0.5～1的质量比均匀混合， 搅拌1小时，得到成膜溶液；
(4)向每100ml成膜溶液中加入10～30g步骤(2)中所得产物， 搅拌并溶解，边搅拌边加入1～2g甘油，静置12～24小时，最后加入 20～30g透皮促进剂，搅拌均匀即得中药涂膜剂；
(5)将制得的成品分装于小瓶中密封，每瓶10～30g。
优选的，所述原料为白术20份、车前子30份、木香15份、藿 香10份、甘草10份、土茯苓20份、黄岑15份、黄芪30份。
优选的，所述的成膜溶液即浓度为2vt％的聚乙烯醇溶液、5vt％ 的壳聚糖溶液以及2vt％的海藻酸钠溶液按照2：1：0.5的质量比均匀 混合，搅拌1小时而得。
优选的，所述的透皮促进剂为氮酮或丙二醇。
本发明还请求保护按照上述方法制备而得的防治仔猪腹泻的中 药涂膜剂。
白术(拉丁学名Atractylodes macrocephala)补脾，益胃，燥湿， 和中，安胎。主治：治脾胃气弱，不思饮食，倦怠少气，虚胀，泄泻， 痰饮，水肿，黄疸，湿痹，小便不利，头晕，自汗，胎气不安。
车前子(拉丁学名Plantago asiatica L)又名车轮菜子、猪耳朵 棵子、车前草、五更草、田灌草，车前子为车前科植物车前草的成熟 种子。主治：主小便不利；淋浊带下；水肿胀满；暑湿泻痢；目赤障 翳；痰热咳喘。
木香(拉丁学名Rosa cymosa Tratt)：为菊科植物木香的干燥根。 味辛、苦，性温；归脾、胃、大肠、三焦、胆经；行气止痛，健脾消 食。
藿香(拉丁学名Agastache rugosa)：芳香化湿中药，功能主治：芳 香化湿；和胃止呕；祛暑解表。主湿阻中焦之脘腹痞闵；食欲不振； 呕吐；泄泻；外感暑湿之寒热头痛；湿温初起的发热身困；胸闵恶心； 鼻渊；手足癣。
甘草(拉丁学名Glycyrrhiza uralensis)：甘，平。归心、脾、肺、 胃经。具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药的 功效。主治：脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，脘腹、四 肢挛急疼痛，痈肿疮毒，缓解药物毒性、烈性。
土茯苓(拉丁学名Rhizoma Smilacis Glabrae)：甘淡，平。功 能：解毒，除湿，利关节。主治：淋浊，筋骨挛痛，脚气，疗疔疮， 痈肿，瘰疬，筋骨疼痛，止泄泻，治拘挛骨痛，恶疮痈肿，解汞粉、 银朱毒。
黄芩(拉丁学名Scutellaria baicalensis)：苦，寒。归肺，心， 肝，胆，大肠经。主治：清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎，降血压。 用于湿温、暑温胸闷呕恶，湿热痞满，泻痢，黄疸，肺热咳嗽，高热 烦渴，血热吐衄，痈肿疮毒，胎动不安。
黄芪(拉丁学名Leguminosae)：甘，气微温，气薄而味浓，可 升可降，阳中之阳也，无毒，专补气。入手太阴、足太阴、手少阴之 经。具有补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌的功效。用于气虚乏 力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，痈疽难 溃，久溃不敛，血虚萎黄，内热消渴。
本发明的中药原料中省去了价格昂贵的何首乌、杜仲等药材，选 择了白术、车前子、木香、藿香、甘草、土茯苓、黄岑、黄芪作为原 料进行组合，以上八味药具有清热解毒，健脾养胃、暖脾散寒、补中 益气的功效，在治疗腹泻等病症中起主要治疗作用，兼具杀菌解毒、 提高免疫力的双重功效，各味药物之间产生协同作用，不但抵消了部 分组分的毒副作用，而且增强了大补脾肾之力，可针对病原性和非病 原性引起的仔猪腹泻的治疗，疗程短，治愈率高；通过聚乙烯醇和壳 聚糖按一定配比混合而得成膜溶液，使中药成膜效果好，更易涂抹在 仔猪皮肤上；加入透皮促进剂，可以使药物更快的直接通过表皮渗入 仔猪体内。本发明以涂抹的方式入药，一方面克服了口服药物需先从 肝脏代谢分解之后进入肠道上部吸收入血液，再随血液循环进入仔猪 体内各个器官进而见效慢的缺陷，另一方面解决了在饲料中加入中药 添加剂或口服中药导致药味大，仔猪适口性差的缺陷。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：(1)本发明产品可直 接涂抹于仔猪的肚脐上，药物吸收快，克服了口服药物适口性差而且 吸收慢的缺陷；(2)本发明的中药涂膜剂可以有效提高药物吸收效 果，见效快，仔猪腹泻治愈率最佳可达90.0％，达到了良好的治疗效 果，对皮肤无刺激性，具有抗菌、消炎、无残留等优点；(3)制备 工艺简单易行、成本低，适合工业化生产。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明进行详细描述，但不限制本发明的保护 范围。
实施例1
(1)称取白术18份、车前子25份、木香10份、藿香8份、甘 草7份、土茯苓15份、黄岑13份、黄芪25份，将原料分别粉碎至 120目，放入各原料质量的15倍的水中大火煮制2小时，煮制后再 于各原料质量的5倍的浓度为60vt％乙醇中加热回流提取3次，提取 温度为60℃，将各提取液用滤纸过滤，配制成1:1的各中药流浸膏， 即每1g原料得到1ml流浸膏；
(2)将步骤(1)制得的各中药流浸膏混合，于1800r/min离心 30min后收集上清液，将上清液浓缩成2:1的混合流浸膏，待用；
(3)将聚乙烯醇、壳聚糖和海藻酸钠并分别溶于2vt％的醋酸水 溶液中，配制成浓度为2vt％的聚乙烯醇溶液、5vt％的壳聚糖溶液以 及2vt％的海藻酸钠溶液，将其按照3：2：1的质量比均匀混合，搅 拌1小时，得到成膜溶液；
(4)向每100ml成膜溶液中加入10g步骤(2)中所得产物，搅 拌并溶解，边搅拌边加入2g甘油，静置12小时，最后加入20g氮酮， 搅拌均匀即得中药涂膜剂；
(5)将制得的成品分装于小瓶中密封，每瓶10～30g。
实施例2
(1)称取白术20份、车前子30份、木香15份、藿香10份、 甘草10份、土茯苓20份、黄岑15份、黄芪30份，将原料分别粉碎 至120目，放入各原料质量的15倍的水中大火煮制3小时，煮制后 再于各原料质量6倍的浓度为75vt％乙醇中加热回流提取3次，提取 温度为65℃，将各提取液用滤纸过滤，配制成1:1的各中药流浸膏， 即每1g原料得到1ml流浸膏；
(2)将步骤(1)制得的各中药流浸膏混合，于2000r/min离心 20min后收集上清液，将上清液浓缩成2:1的混合流浸膏，待用；
(3)将聚乙烯醇、壳聚糖和海藻酸钠并分别溶于2vt％的醋酸水 溶液中，配制成浓度为2vt％的聚乙烯醇溶液、5vt％的壳聚糖溶液以 及2vt％的海藻酸钠溶液，将其按照2：1：0.5的质量比均匀混合，搅 拌1小时，得到成膜溶液；
(4)向每100ml成膜溶液中加入10g步骤(2)中所得产物，搅 拌并溶解，边搅拌边加入2g甘油，静置24小时，最后加入20g丙二 醇，搅拌均匀即得中药涂膜剂；
(5)将制得的成品分装于小瓶中密封，每瓶10～30g。
实施例3
(1)称取白术30份、车前子35份、木香25份、藿香15份、甘 草15份、土茯苓22份、黄岑18份、黄芪33份，将原料分别粉碎至 120目，放入各原料质量的20倍的水中大火煮制4小时，煮制后再 于各原料质量5倍的浓度为65vt％乙醇中加热回流提取3次，提取温 度为63℃，将各提取液用滤纸过滤，配制成1:1的各中药流浸膏，即 每1g原料得到1ml流浸膏；
(2)将步骤(1)制得的各中药流浸膏混合，于2000r/min离心 20min后收集上清液，将上清液浓缩成2:1的混合流浸膏，待用；
(3)将聚乙烯醇、壳聚糖和海藻酸钠并分别溶于2vt％的醋酸水 溶液中，配制成浓度为2vt％的聚乙烯醇溶液、5vt％的壳聚糖溶液以 及2vt％的海藻酸钠溶液，将其按照1：1：0.5的质量比均匀混合，搅 拌1小时，得到成膜溶液；
(4)向每100ml成膜溶液中加入30g步骤(2)中所得产物，搅 拌并溶解，边搅拌边加入2g甘油，静置24小时，最后加入30g氮酮， 搅拌均匀即得中药涂膜剂；
(5)将制得的成品分装于小瓶中密封，每瓶10～30g。
实施例4
(1)称取白术25份、车前子32份、木香19份、藿香12份、 甘草14份、土茯苓16份、黄岑17份、黄芪28份，将原料分别粉碎 至80目，放入各原料质量的20倍的水中大火煮制4小时，煮制后再 于各原料质量10倍的浓度为80vt％乙醇中加热回流提取2次，提取 温度为64℃，将各提取液用滤纸过滤，配制成1:1的各中药流浸膏， 即每1g原料得到1ml流浸膏；
(2)将步骤(1)制得的各中药流浸膏混合，于1500r/min离心 30min后收集上清液，将上清液浓缩成2:1的混合流浸膏，待用；
(3)将聚乙烯醇、壳聚糖和海藻酸钠并分别溶于2vt％的醋酸水 溶液中，配制成浓度为2vt％的聚乙烯醇溶液、5vt％的壳聚糖溶液以 及2vt％的海藻酸钠溶液，将其按照2：1：1的质量比均匀混合，搅 拌1小时，得到成膜溶液；
(4)向每100ml成膜溶液中加入20g步骤(2)中所得产物，搅 拌并溶解，边搅拌边加入1g甘油，静置16小时，最后加入25g氮酮， 搅拌均匀即得中药涂膜剂；
(5)将制得的成品分装于小瓶中密封，每瓶10～30g。
药效实验
选取大连某养猪场初生仔猪～5日龄仔猪发生腹泻且临床症状明 显的仔猪300头，将腹泻的仔猪随机分为五组，其中一组为空白对照 组，另外四组为实验组，分别使用实施例1～4所制备的中药涂膜剂， 每组60头仔猪，观察实验总计25天。
用温水清洗实验组仔猪肚脐，用干毛巾擦干后用药，每个仔猪的 肚脐以画圈的方式涂抹实施例1～4中方法制备的中药涂膜剂30ml， 一天三次，5天一个疗程，实验组和对照组均按照常规的方法喂食。 涂抹药剂后，每天早、晚定时观察仔猪粪便情况，粪便分为正常、稀 软、粘稠、水样和血便5个等级，除第一种情况以外其他四种等级均 为腹泻症状，腹泻频率(％)＝(各组腹泻头数×腹泻天数)/(各组 总头数×实验天数)；腹泻率(％)＝各组腹泻头数/各组总头数；治 愈率(％)＝各组持续2周不腹泻头数/各组总头数。
表1采用本发明中药涂膜剂对仔猪腹泻的影响效果
实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 对照组 腹泻率 8.33％ 5.0％ 11.7％ 11.7％ 95.0％ 腹泻频率 1.4％ 1.1％ 1.5％ 2.1％ 91.2％ 死亡数(头) 1 0 2 2 48 治愈率 88.0％ 90.0％ 86.7％ 85％ 3.3％ 样本量(头) 60 60 60 60 60
从表1中的数据可知，本发明的中药涂膜剂对仔猪腹泻具有明显 的治疗效果，其中实施例2中中药涂膜剂的治疗效果最好，使用该中 药涂膜剂后，仔猪的腹泻率降低至5.0％，腹泻频率也大幅下降到 1.1％，治愈率高达到90.0％，由此可知，该涂膜剂各中药成分之间起 到预想不到的协同作用，有效改善仔猪腹泻症状，而且其治疗效果明 显好于市售的中药，同时，本发明属于绿色产品，不存在药物残留及 耐药性等风险。
本发明实施例1～4的中药涂膜剂的刺激性试验
(1)实验动物处理：
取已在实验室饲养5天的清洁级体重相近的小鼠16只，雌雄各 半，随机分成8组，实验前24小时，给小鼠腹部剃毛。实验组1～4 小鼠皮肤消毒后，用灭菌6号针头成“井”字形划破两侧皮肤，使皮肤 出现渗血为度，破损区面积3cm×3cm，作为破损皮肤实验组，实验 组5～8小鼠皮肤完整无破损。
(2)给药：
实验组1～4为破损皮肤实验组，实验组5～8为完整皮肤组，均为 每天涂抹1次，连续涂抹7天。每组左侧涂抹药剂，右侧为空白对照， 每次给药容量为1g/kg，分别涂抹实施例1～4的方法制备的中药涂膜 剂，各组均于最后一次涂抹24小时后除去受试物，用温水洗净，去 除受试物后于24小时、48小时和72小时观察涂抹部位皮肤有无红 斑及水肿等变化。
(3)实验结果：
实验组1～4的小鼠皮肤未出现过红斑和红肿，实验组5～8的小鼠 未出现红肿，充血现象于24小时消失。
由以上实验结果可知，本发明的中药涂膜剂局部1次或多次用药 后，对正常和破损的皮肤均无刺激性，因此本发明可直接涂抹于仔猪 的肚脐上，药物吸收快，克服了口服药物适口性差而且吸收慢的缺陷。 本发明产品具有可有效提高药物吸收效果，见效快，仔猪腹泻治愈率 达90.0％，达到了良好的治疗效果，具有抗菌、消炎、无残留等优点。 产品的制备工艺简单易行、成本低，适合工业化生产。