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1、(10)授权公告号 CN 101209058 B (45)授权公告日 2011.09.07 CN 101209058 B *CN101209058B* (21)申请号 200610160001.8 (22)申请日 2006.12.29 A01N 63/02(2006.01) A01N 25/04(2006.01) A01P 7/04(2006.01) (73)专利权人 河南农业大学 地址 450002 河南省郑州市文化路 95 号 (72)发明人 梁振普 张小霞 (74)专利代理机构 郑州中原专利事务所有限公 司 41109 代理人 赵磊 袁哲明等.重组增效蛋白对Bt和氯氰菊酯防 治棉铃虫的增。
2、效作用 . 中国生物防治 .2006, 第 22 卷 ( 第 3 期 ),194-197. (54) 发明名称 一种复合生物杀虫剂 (57) 摘要 本发明公开了一种复合生物杀虫剂， 包括以 下体积份的原料 ： 灭幼脲1020， 色氨酸0.01 0.1， 分散剂 1 2， 甘油 2 5， 无菌水 72.9 86.99， 还包括杨扇舟蛾颗粒体病毒、 苏云金芽孢 杆菌芽孢和 ENHANCIN 增强蛋白制备而成， 杨扇舟 蛾颗粒体病毒的含量为每毫升 5 20 亿 PIB， 苏 云金芽孢杆菌芽孢的含量为每毫升 20 60 亿， ENHANCIN 增强蛋白的含量为每毫升 20 50 国际 单位。这种复合生。
3、物杀虫剂配伍合理、 制作方便、 杀虫谱广、 杀虫效果好。 它克服了可湿性粉剂和乳 油剂的缺陷， 助剂易于分散， 田间施用更方便， 没 有残留和环境污染， 这在实际应用中具有明显的 优势， 适于在林业上大量施用。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 索翌 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书 1 页 说明书 3 页 CN 101209058 B1/1 页 2 1. 一种复合生物杀虫剂， 其特征在于 ： 包括以下体积份的原料 ： 灭幼脲 10 20， 色氨 酸 0.01 0.1， 分散剂 1 2， 甘油 2 5， 无菌水 72.9 86.99， 还包括杨。
4、扇舟蛾颗粒体病 毒、 苏云金芽孢杆菌芽孢和 ENHANCIN 增强蛋白制备而成， 杨扇舟蛾颗粒体病毒的含量为每 毫升 5 20 亿 PIB， 苏云金芽孢杆菌芽孢的含量为每毫升 20 60 亿， ENHANCIN 增强蛋白 的含量为每毫升 20 50 国际单位。 2. 如权利要求 1 所述的复合生物杀虫剂， 其特征在于 ： 所述的分散剂为 L602、 LH656 或 L656。 3. 如权利要求 1 或 2 所述的复合生物杀虫剂的制备方法， 其特征在于 ： 首先将杨扇舟 蛾颗粒体病毒、 苏云金芽孢杆菌、 灭幼脲、 ENHANCIN 增强蛋白混合， 然后依次向其中加入甘 油、 色氨酸、 分散剂、 。
5、无菌水， 搅拌均匀， 得到悬浮剂即可。 权 利 要 求 书 CN 101209058 B1/3 页 3 一种复合生物杀虫剂 技术领域 0001 本发明属于含有病毒的杀生剂， 尤其涉及一种针对杨树鳞翅目害虫的复合生物杀 虫剂。 背景技术 0002 近年来， 杨树食叶害虫给我国林业生产造成了巨大的经济损失， 它们主要是以杨 扇舟蛾、 杨小舟蛾、 分月扇舟蛾、 杨尺蠖、 舞毒蛾和杨毒蛾为代表的鳞翅目害虫。 这些害虫在 我国分布广泛， 世代重叠， 混代繁殖， 食叶量大， 随着全球气候变暖和其他因素的影响， 杨树 鳞翅目害虫的发生和危害有逐年加重的趋势。 2005年杨扇舟蛾和杨小舟蛾在河南、 湖北、 湖。
6、 南等省多处爆发， 使大片杨树林危害及其严重， 大大限制了我国的杨树种植业的发展。 0003 目前的杨树害虫防治主要靠化学农药， 但是害虫繁殖速度快， 每年发生多代， 化学 农药也需频繁使用， 这就使杨扇舟蛾对多种化学农药产生了严重抗性。 另外， 由于灾情发生 严重的林木多为行道树和防护林， 也是人、 畜活动频繁的地区， 大量使用化学农药势必造成 对环境的污染， 对人体健康和畜禽的危害。因此， 减少和限制化学杀虫剂的使用势在必行。 0004 生物杀虫剂具有对宿主害虫杀虫效果好、 宿主专一性高、 对人畜无害、 不伤害天 敌、 不污染环境等优点， 其开发和应用前景相当广阔。但是值得注意的是， 其优。
7、势同时也成 为了限制它进一步发展的枷锁。比如， 它的高宿主专一性使得人们施一次药只能杀灭一种 或极少数几种害虫 ； 其生物性决定它必须在害虫体内后复制才能使害虫表现出症状， 这样 就大大降低了农药的杀虫速度。为了克服这些缺陷， 科学家们正在积极寻找各种途径。通 常可以从三个方面来解决这些问题 ： 第一， 利用基因工程手段改造微生物及其产物， 获得高 效、 广谱、 高毒的农药 ； 其二， 在杀虫剂中添加增效剂比如荧光增白剂、 几丁质等， 来提高农 药的杀虫速率 ； 其三， 研制复合生物杀虫剂来扩大农药的杀虫谱和杀虫速度。目前， 有关专 家对前两种途径的研究较多， 而复合生物杀虫剂因研究对象多、 。
8、试验复杂、 要与实际生产相 结合等原因而相对滞后。 0005 对于生物杀虫剂来说， 病毒杀虫剂和苏云金杆菌是其两大龙头， 在生物防治 领域研究最深入、 应用最广泛。杨扇舟蛾颗粒体病毒属杆状病毒科， 在电镜下观察， 病 毒颗粒体形态为卵圆形， 其平均大小为 337nm170nm， 病毒粒子呈杆状， 两端钝圆， 大 小为 250nm46nm， 病毒粒子为单核衣壳包埋型。杨扇舟蛾颗粒体病毒对 3 龄以上目 标幼虫致病力很高， 当杨扇舟蛾连续大面积发生、 虫口密度大时， 自然感染率可高达 40 60， 是控制扬扇舟蛾大发生的重要因素， 具有很好的应用价值。苏云金杆菌 (Bacillusthuringi。
9、ensis 简称 Bt) 是发展时间最早、 应用最广泛的一类鳞翅目害虫生物杀 虫剂。其作用机理是， Bt 是一种杆状、 格兰氏阳性、 形成芽孢的细菌， 成熟的芽孢内含有没 有活性的晶体状毒性蛋白质。当昆虫食入后， 毒蛋白被碱性肠液激活， 并被肠蛋白酶降解， 形成较小的 D2 内毒素分子， 破坏昆虫的肠上皮细胞， 渗进血腔引起败血症， 导致昆虫死亡。 最初人们一直认为害虫不会对 Bt 产生抗性。研究证实， 如果每年使用 Bt 制剂 10 次， 连续 5 年后， 害虫的半致死剂量将提高一倍。虽然该制剂对防治杨扇舟蛾这类鳞翅目害虫有特殊 说 明 书 CN 101209058 B2/3 页 4 的效果。
10、， 因而得到广泛的应用， 但是它的抗性将会随着应用的深入越来越明显的表现出来。 0006 灭幼脲是一种昆虫生长调节剂， 属特异性杀虫剂。 害虫取食或接触药剂后， 抑制表 皮几丁质的合成， 使幼虫不能正常蜕皮而死亡。主要是胃毒作用， 也有一定的触杀作用， 但 无内吸性。对鳞翅目幼虫有特效， 不杀成虫， 但能使成虫不育， 卵不能正常孵化。毒性低， 对 人、 畜和植物安全， 对天敌杀伤小， 药效较慢， 2 3 天后才能显示杀虫作用。 发明内容 0007 本发明的目的在于提供一种配伍合理、 制作方便、 杀虫谱广、 杀虫效果好的针对杨 树鳞翅目害虫的复合生物杀虫剂。 0008 为了达到上述目的， 本发明。
11、采用如下技术方案 ： 一种复合生物杀虫剂， 包括以下体 积份的原料 ： 灭幼脲1020， 色氨酸0.010.1， 分散剂12， 甘油25， 无菌水72.9 86.99， 还包括杨扇舟蛾颗粒体病毒、 苏云金芽孢杆菌芽孢和 ENHANCIN 增强蛋白制备而成， 杨扇舟蛾颗粒体病毒的含量为每毫升 5 20 亿 PIB， 苏云金芽孢杆菌芽孢的含量为每毫升 20 60 亿， ENHANCIN 增强蛋白的含量为每毫升 20 50 国际单位。 0009 所述的分散剂为 L602、 LH656 或 L656。 0010 所述的复合生物杀虫剂的制备方法是 ： 首先将杨扇舟蛾颗粒体病毒、 苏云金芽孢 杆菌、 灭幼。
12、脲、 ENHANCIN 增强蛋白混合， 然后依次向其中加入甘油、 色氨酸、 分散剂、 无菌水， 搅拌均匀， 得到悬浮剂即可。 0011 增强蛋白 (ENHANCIN) 是一种主要在杆状病毒科的颗粒体病毒属中发现的金属蛋 白酶性质的蛋白质。这种蛋白能够有效地提高昆虫病毒和其他病原物的感染性， 纯化的粉 纹夜蛾颗粒体病毒 (TnGV) 增效蛋白与杨扇舟蛾颗粒体病毒一同饲喂杨扇舟蛾幼虫时， 能 使杨扇舟蛾颗粒体病毒的感染力提高12倍 ； 与Bt混合使用， 能使Bt的毒力提高2-7倍。 因 此， 增强蛋白在提高杆状病毒杀虫效率和拓宽害虫综合防治等方面具有广阔的应用前景。 0012 本发明与现有技术相比。
13、， 具有以下优点和效果 ： 杨扇舟蛾颗粒体病毒可以长期在 害虫种群中形成流行病， 保证了该杀虫剂的后效应 ； 苏云金芽孢杆菌和灭幼脲可以杀灭多 数杨树鳞翅目害虫， 具备了较宽的杀虫谱 ； ENHANCIN 增强蛋白为生物增效剂， 可以促进病 毒和细菌对害虫中肠的入侵， 保证了较高的杀虫速度 ； 四种主要成分组合在一起可以优势 互补， 相互促进， 不但可以在 2-4 天内快速杀灭鳞翅目害虫， 而且保持了生物杀虫剂作用时 间长久、 对环境无污染的优势。该杀虫剂为悬浮剂， 它克服了可湿性粉剂和乳油剂的缺陷， 助剂易于分散， 田间施用更方便， 没有残留和环境污染。这在实际应用中具有明显的优势， 适于在。
14、林业上大量施用。 具体实施方式 0013 实施例 1 ： 选用灭幼脲 10 毫升， 色氨酸 0.1 毫升， L602 分散剂 2 毫升， 甘油 5 毫 升， 无菌水 82.9 毫升， 杨扇舟蛾颗粒体病毒 1000 亿 PIB， 苏云金芽孢杆菌芽孢 4000 亿个和 ENHANCIN 增强蛋白 3500 国际单位。分散剂选用 L602。首先将杨扇舟蛾颗粒体病毒、 苏云 金芽孢杆菌、 灭幼脲、 ENHANCIN 增强蛋白混合， 然后依次加入甘油、 色氨酸、 分散剂、 无菌水， 搅拌均匀， 得到悬浮剂即可。 0014 实施例 2 ： 选用灭幼脲 200 毫升， 色氨酸 0.5 毫升， LH656 分。
15、散剂 10 毫升， 甘油 20 说 明 书 CN 101209058 B3/3 页 5 毫升， 杨扇舟蛾颗粒体病毒 5000 亿 PIB， 苏云金芽孢杆菌芽孢 60000 亿， ENHANCIN 增强蛋白 20000 国际单位。首先将杨扇舟蛾颗粒体病毒、 苏云金芽孢杆菌、 灭幼脲、 ENHANCIN 增强蛋 白混合， 然后依次加入甘油、 色氨酸、 分散剂， 最后加入无菌水定容到 1 升， 搅拌均匀， 得到 悬浮剂即可。 0015 实施例 3 ： 在本实施例中， 选用灭幼脲 150 毫升， 色氨酸 0.1 毫升， 分散剂 15 毫升， 甘油 40 毫升， 无菌水 794.9 毫升， 杨扇舟蛾颗粒。
16、体病毒 15000 亿 PIB， 苏云金芽孢杆菌芽孢 50000 亿和 ENHANCIN 增强蛋白 20000 国际单位。分散剂选用 L656。其它与实施例 1 相同。 0016 实施例 4 ： 选用灭幼脲 10 毫升， 色氨酸 0.01 毫升， 分散剂 1 毫升， 分散剂为 L602， 甘油2毫升， 无菌水86.99毫升， 杨扇舟蛾颗粒体病毒500亿PIB， 苏云金芽孢杆菌芽孢3000 亿和 ENHANCIN 增强蛋白 4500 国际单位。其它与实施例 1 相同。 0017 实施例 5 ： 选用灭幼脲 20 毫升， 色氨酸 0.1 毫升， 分散剂 2 毫升， 分散剂为 L656， 甘 油 5。
17、 毫升， 无菌水 72.9 毫升， 杨扇舟蛾颗粒体病毒 2000 亿 PIB， 苏云金芽孢杆菌芽孢 3500 亿和 ENHANCIN 增强蛋白 5000 国际单位。其它与实施例 1 相同。 0018 实施例6 ： 选用灭幼脲18毫升， 色氨酸0.07毫升， 分散剂1.5毫升， 分散剂为L656， 甘油 2.5 毫升， 杨扇舟蛾颗粒体病毒 1800 亿 PIB， 苏云金芽孢杆菌芽孢 5500 亿， ENHANCIN 增强蛋白 2000 国际单位。首先将杨扇舟蛾颗粒体病毒、 苏云金芽孢杆菌、 灭幼脲、 ENHANCIN 增强蛋白混合， 然后依次加入甘油、 色氨酸、 分散剂， 最后加入无菌水定容到 100 毫升， 搅拌 均匀， 得到悬浮剂即可。 0019 实施例7 ： 选用灭幼脲12毫升， 色氨酸0.08毫升， 分散剂1.3毫升， 分散剂为L656， 甘油 4.5 毫升， 杨扇舟蛾颗粒体病毒 2000 亿 PIB， 苏云金芽孢杆菌芽孢 4000 亿， ENHANCIN 增强蛋白 5000 国际单位。首先将杨扇舟蛾颗粒体病毒、 苏云金芽孢杆菌、 灭幼脲、 ENHANCIN 增强蛋白混合， 然后依次加入甘油、 色氨酸、 分散剂， 最后加入无菌水定容到 100 毫升， 搅拌 均匀， 得到悬浮剂即可。 说 明 书 。