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1、(10)申请公布号 CN 104186970 A (43)申请公布日 2014.12.10 CN 104186970 A (21)申请号 201410368849.4 (22)申请日 2014.07.30 A23K 1/16(2006.01) A23K 1/18(2006.01) A61K 38/36(2006.01) A61K 36/8994(2006.01) A61P 31/14(2006.01) A61K 31/165(2006.01) A61K 35/56(2006.01) (71)申请人 严中明 地址 266011 山东省青岛市市北区市场二路 振业大厦 1044 (72)发明人 严中。
2、明 (54) 发明名称 防治草鱼出血病的鱼饲料 (57) 摘要 本发明提供了一种防治草鱼出血病的鱼饲 料， 其中， 按照重量单位配置如下各组分 ： 白头 翁、 木贼、 刺五加各 100-150g， 连翘、 牛蒡子、 白 芍、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升麻、 玄参各 60-80g， 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮各 40-60g， 甘 草、 薏米各 20-30g， 氟苯尼考琥珀酸钠 5-20g、 植 物血球凝聚素 5-20mg。本发明配比简单， 使用方 便， 专门针对草鱼出血病， 治疗效果好。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 6 页 (19)中华人民共和国国家。
3、知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书6页 (10)申请公布号 CN 104186970 A CN 104186970 A 1/1 页 2 1. 一种防治草鱼出血病的鱼饲料， 其特征在于， 按照重量单位配置如下各组分 ： 白头翁、 木贼、 刺五加各 100-150g， 连翘、 牛蒡子、 白芍、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升 麻、 玄参各 60-80g， 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮各 40-60g， 甘草、 薏米各 20-30g， 氟苯尼考琥珀 酸钠5-20g、 植物血球凝聚素5-20mg ； 豆粕100g， 鱼粉50g， 小麦粉300g， 玉米粉500g， 。
4、盐5g， 维生素 2g。 2. 根据权利要求 1 所述防治草鱼出血病的鱼饲料， 其特征在于， 按照重量单位配置如 下各组分 ： 白头翁、 木贼、 刺五加各 100-120g， 连翘、 牛蒡子、 白芍、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升 麻、 玄参各 60-70g， 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮各 40-50g， 甘草、 薏米各 20-25g， 氟苯尼考琥珀 酸钠5-10g、 植物血球凝聚素5-10mg， 豆粕100g， 鱼粉50g， 小麦粉300g， 玉米粉500g， 盐5g， 维生素 2g。 3. 根据权利要求 1 所述防治草鱼出血病的鱼饲料， 其特征在于， 按照重量单位配置如 。
5、下各组分 ： 白头翁、 木贼、 刺五加各 120-150g， 连翘、 牛蒡子、 白芍、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升 麻、 玄参各 70-80g， 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮各 50-60g， 甘草、 薏米各 25-30g， 氟苯尼考琥珀 酸钠 10-20g、 植物血球凝聚素 10-20mg， 豆粕 100g， 鱼粉 50g， 小麦粉 300g， 玉米粉 500g， 盐 5g， 维生素 2g。 权 利 要 求 书 CN 104186970 A 2 1/6 页 3 防治草鱼出血病的鱼饲料 0001 技术领域 ： 本发明涉及药物技术领域， 尤其涉及一种防治草鱼出血病的鱼饲料。 0。
6、002 背景技术 ： 草鱼出血病是鱼种培育阶段一种流行地区广泛、 流行季节长、 发病率高、 死亡率高、 危 害性大的病毒性鱼病。主要危害体长 2.5-15cm 的草鱼鱼种及 1 足龄的青鱼， 有时 2 足龄以 上的大草鱼也患病。流行水温在 20-33， 最适流行水温 27-30 ； 但当水质恶化， 水中溶 氧低， 透明度低， 水中总氮、 有机氮、 亚硝酸态氮和有机物耗氧量高， 水温变化大， 鱼体抵抗 力低下， 病毒的数量多及毒力强时， 在水温 12及 34.5时也有发病。此病在湖北、 湖南、 广东、 广西、 江西、 福建、 江苏、 浙江、 安徽、 上海、 四川、 重庆等主要淡水鱼类养殖省、 市。
7、、 自治 区都流行。该病可通过被污染的水、 食物等进行水平传播， 也可通过卵进行垂直传播。目前 国标鱼药中用于预防鱼类出血病等病毒性疾病的药物有清热散等。该病病原为草鱼肠弧 病毒 GCRV， 或者草鱼出血病病毒 GCHV， 病毒个体极小， 呈颗粒状， 须在电子显微镜下才能看 清。症状 - 红肌肉型， 撕开病鱼的皮肤或对准阳光或灯光透视鱼体， 可见皮肤下肌肉充血 ； 肠炎型， 病鱼肠道充血， 常伴随松鳞、 肌肉充血。 0003 现有技术中， 中国专利申请 201210471907.7 公开了一种用于防治草鱼出血病的 药物， 包含表没食子酸表没食子儿茶素没食子酸酯。表没食子酸表没食子儿茶素没食子酸。
8、 酯为粉末状。使用时表没食子酸表没食子儿茶素没食子酸酯的浓度范围为 5 至 50g/mL。 再如中国专利申请 2013106306891， 用于防治草鱼出血病的饲料， 包括黄芪、 淫羊藿、 枸杞 子、 苦参、 穿心莲、 侧柏叶、 黄连、 刺五加、 五倍子、 车前草、 海金沙、 川芎、 山楂、 薄荷、 茵陈、 白 头翁、 马齿苋、 石斛、 阿魏、 白术、 白酒草、 节节花和甘草。中药或其提取物用于抗病毒， 有一 定的优越性， 如药物残留物低， 所以， 研究中药抗病毒药物用于治疗草鱼出血病是必要的。 0004 发明内容 ： 本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺点， 提供一种配比简单， 使用方便，。
9、 专门针 对草鱼出血病， 治疗效果好的一种防治草鱼出血病的鱼饲料。 0005 为了实现上述目的， 本发明提供了一种防治草鱼出血病的鱼饲料， 其中， 按照重量 单位配置如下各组分 ： 白头翁、 木贼、 刺五加各 100-150g， 连翘、 牛蒡子、 白芍、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升 麻、 玄参各 60-80g， 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮各 40-60g， 甘草、 薏米各 20-30g， 氟苯尼考琥珀 酸钠 5-20g、 植物血球凝聚素 5-20mg。豆粕 100g， 鱼粉 50g， 小麦粉 300g， 玉米粉 500g， 盐 5g， 维生素 2g。 0006 或者， 按照。
10、重量单位配置如下各组分 ： 白头翁、 木贼、 刺五加各 100-120g， 连翘、 牛蒡子、 白芍、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升 麻、 玄参各 60-70g， 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮各 40-50g， 甘草、 薏米各 20-25g， 氟苯尼考琥珀 酸钠 5-10g、 植物血球凝聚素 5-10mg。豆粕 100g， 鱼粉 50g， 小麦粉 300g， 玉米粉 500g， 盐 5g， 维生素 2g。 0007 或者， 按照重量单位配置如下各组分 ： 说 明 书 CN 104186970 A 3 2/6 页 4 白头翁、 木贼、 刺五加各 120-150g， 连翘、 牛蒡子、。
11、 白芍、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升 麻、 玄参各 70-80g， 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮各 50-60g， 甘草、 薏米各 25-30g， 氟苯尼考琥珀 酸钠 10-20g、 植物血球凝聚素 10-20mg。豆粕 100g， 鱼粉 50g， 小麦粉 300g， 玉米粉 500g， 盐 5g， 维生素 2g。 0008 防治草鱼出血病的鱼饲料的制备方法如下 ： 将上述中药组合物中的各原料药组分 （白头翁、 木贼、 刺五加、 连翘、 牛蒡子、 白芍、 牡 蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升麻、 玄参、 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮、 甘草、 薏米） 分别研磨成细 。
12、粉， 混合， 获得混合物， 将混合物加入到 68 倍量的水中进行煎煮， 每次煎煮 24 小时， 煎 煮 3 次， 每次煎煮完后过滤， 将滤液混合， 进行减压浓缩获得浸膏， 将浸膏加入到相对于混 合物质量 23 倍量的醇浓度为 90%95% 的乙醇溶液中， 搅拌完全溶解， 随后在 4温度以 下静置过夜， 随后过滤， 将滤液进行减压浓缩除去乙醇， 获得的膏体粉碎， 加入氟苯尼考琥 珀酸钠、 植物血球凝聚素后混合， 所得物与淀粉、 羟甲基纤维素按照质量比 1:2 ： 1 混匀， 用 14 目筛制粒， 烘烤 30 分钟， 获得颗粒状的药物， 大小 0.5-1mm。 0009 使用 ： 此药物可以掺入颗。
13、粒状鱼料内喂食， 按照 0.5 ： 1 的质量比配比。 0010 进一步的、 也可以在此颗粒药物 （称为药物芯） 的基础上， 即此药物的外表上包裹 饲料包衣， 制备成以此药物为芯的鱼料， 具体为 ： 将基础饲料 ：（将豆粕 100g， 鱼粉 50g， 小麦粉 300g， 玉米粉 500g， 盐 5g， 维生素 2g， ） 加 水搅拌为含水量 65%， 加羟甲基淀粉钠增稠至粘稠状， 将药物芯于粘稠液上反复滚过， 干燥 后复滚一会， 使基础饲料包裹在药物芯的外壁上， 厚度为 0.3-0.5mm。干燥后即得以鱼料。 0011 本发明的优点为， 配比简单， 使用方便， 专门针对草鱼出血病， 治疗效果好。
14、， 对草鱼 呼肠弧病毒 GCRV， 或者草鱼出血病病毒 GCHV 有灭活作用， 治疗效果好。 0012 具体实施方式 ： 原理 ： 本发明以直接灭活、 抑制病毒的白头翁、 木贼 ； 和促进免疫达到抗病毒作用的刺五加为 君药， 同时大量使用对药作为臣药、 佐药和使药。如， 清心解毒对药连翘、 牛蒡子 ； 清肝止血 的对药白芍、 牡蛎 ； 清热利尿的对药竹叶、 木通 ； 合营补血的对药麦冬、 生地 ； 清热解毒的对 药升麻、 玄参 ； 这些对药为臣药。疏肝行气对药川楝子、 青皮 ； 清肠活血的对药地榆、 赤芍为 佐药 ； 甘草、 薏米为使药。 同时在此基础上， 添加抗菌的氟苯尼考琥珀酸钠， 和止血。
15、的植物血 球凝聚素进一步增强效果。本发明中有效成分中蒽醌类对病毒具有直接的杀灭作用。黄酮 类 , 多糖及其衍生物、 三萜类化合物及其衍生物、 生物碱及苷类等 , 都是通过阻止病毒颗 粒对宿主细胞的吸附过程, 而发挥抑制病毒。 同时， 具有胞内抗病毒增殖作用， 抗表达(溢 出 ) 再感染作用。 0013 病鱼类型及病理数据 说 明 书 CN 104186970 A 4 3/6 页 5 治疗对比， 随机选用出血性疾病的草鱼， 分为 5 组， 每组 24 只 （三种发病类型， 每组 8 只） ， 喂食传统的大黄、 板蓝根、 黄芩、 黄柏混合的中药粉为组一、 投放生石灰、 漂白粉和含氯 消毒剂的为组二。
16、、 使用植物血球抗凝血素的为组三， 使用广谱抗菌药氟苯尼考琥珀酸钠为 组四， 使用本发明为组五， 同等条件下， 三天后观察。 0014 抗病毒实验数据 ： 对草鱼的体内抗病毒实验 取鱼， 按体重随机分 2 组 ： 病毒感染对照组和正常动物对照组， 除正常对照组外， 将草 鱼轻度麻醉， 以 15 个 LDSD 的草鱼肠弧病毒侵染， 每只 0.1ml， 从感染前一天开始给药， 病毒 感染对照组喂食本发明每天 2 次， 连续 5 天， 第六天， 称取体重后固定， 解剖， 取肝脏计算肝 指数值， 计算肝指数抑制率 肝指数 = 肝重 （g） / 体重 （g） 100 肝指数抑制率 =（病毒对照组肝指数均。
17、值 - 实验组肝指数均值） / 病毒对照组肝指数均 值 100% 肝指数越大， 表示肝病变程度严重，（因出血病导致各脏器出血， 选择一个脏器作为指 标， 也可以选择肺进行肺指数测定） 肝组织用 10% 甲醛固定， 乙醇系列脱水， 二甲苯透明， 石蜡包埋， 切片厚度 4-5 微米， HE 染色， 用普通光学显微镜观察肝组织形态变化， 选用广谱抗菌药 （氟苯尼考琥珀酸钠） 的抗 病毒组作为对比， 可以看出本发明效果明显优于广谱抗菌药。 0015 肝部验证 （病毒观察） 的影响 （n=10） 说 明 书 CN 104186970 A 5 4/6 页 6 可以发现， 本发明的对病毒抑制率明显高于直接使。
18、用广谱抗菌药。 0016 毒性对大鼠的实验 ： 急性经口 （LD50） 500mg/kg， 急性经皮 （LD 50） 2000mg/kg， 属于低毒。 0017 具体例子 1 赵家一养殖池塘， 面积2000平米， 水深约5米， 放养草鱼1.5万尾， 8月中开始发病陆续 死鱼， 每天死亡鱼的数量成倍增加， 最多日死草鱼达 500 多尾。检测病鱼， 发现有部分红鳍 红腮盖， 意思患草鱼出血病， 剖开后， 各脏器小血管受损， 弥漫性血管内凝血， 肠壁 ： 粘膜层 上皮细胞肿胀， 固有膜出血， 肠上皮破裂， 诊断为草鱼出血病， 使用本发明白头翁、 木贼、 刺 五加各 150g， 连翘、 牛蒡子、 白芍。
19、、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升麻、 玄参各 80g， 地榆、 赤 芍、 川楝子、 青皮各60g， 甘草、 薏米各30g， 氟苯尼考琥珀酸钠20g、 植物血球凝聚素20mg。 将 上述中药组合物中的各原料药组分 （白头翁、 木贼、 刺五加、 连翘、 牛蒡子、 白芍、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升麻、 玄参、 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮、 甘草、 薏米） 分别研磨成细粉， 混合， 获得混合物， 将混合物加入到 68 倍量的水中进行煎煮， 每次煎煮 24 小时， 煎煮 3 次， 每次煎煮完后过滤， 将滤液混合， 进行减压浓缩获得浸膏， 将浸膏加入到相对于混合物质量 。
20、23 倍量的醇浓度为 90%95% 的乙醇溶液中， 搅拌完全溶解， 随后在 4温度以下静置过 夜， 随后过滤， 将滤液进行减压浓缩除去乙醇， 获得的膏体粉碎， 加入氟苯尼考琥珀酸钠、 植 物血球凝聚素后混合， 所得物与淀粉、 羟甲基纤维素按照质量比 1:2 ： 1 混匀， 用 14 目筛制 粒， 烘烤 30 分钟， 获得颗粒状的药物， 大小 0.5-1mm。 0018 此颗粒药物 （称为药物芯） 的基础上， 即此药物的外表上包裹饲料包衣， 制备成以 此药物为芯的鱼料， 具体为 ： 将基础饲料 ：（将豆粕 100g， 鱼粉 50g， 小麦粉 300g， 玉米粉 500g， 盐 5g， 维生素 2。
21、g， ） 加 水搅拌为含水量 65%， 加羟甲基淀粉钠增稠至粘稠状， 将药物芯于粘稠液上反复滚过， 干燥 后复滚一会， 使基础饲料包裹在药物芯的外壁上， 厚度为 0.3-0.5mm。干燥后即得以鱼料。 0019 上述用量为 100 只鱼的用量， 根据鱼的数量乘以倍数去制备即可。 0020 1 餐 / 天， 连续 6 天， 在用药后的第 1 天草鱼死亡数量为 509 尾， 第 2 天草鱼死 亡数量 425 尾， 第 3 天死亡 320 尾， 第 4 天死亡 192， 第五天死亡 64， 之后再未发生草鱼出 血病， 总死亡率为 0.80%。 0021 例子 2 林家鱼塘 1300 平米， 放养 8。
22、000 尾， 夏秋季节发现鱼类陆续死亡， 最高日死亡 468 只， 解 说 明 书 CN 104186970 A 6 5/6 页 7 剖发现， 部分草鱼严重贫血， 白细胞数为健康草鱼的 40%， 肝细胞胞浆内有嗜酸性包涵体， 各 脏器小血管受损， 弥漫性血管内凝血。 此外， 发现部分草鱼草鱼肠道严重充血, 轻刮肠道内 壁无脱落现象， 肝脏颜色浅淡或颜色不均， 胆囊肿大， 轻度烂鳃。 诊断为草鱼出血病， 使用本 发明。 0022 白头翁、 木贼、 刺五加各 100g， 连翘、 牛蒡子、 白芍、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升 麻、 玄参各60g， 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮各40。
23、g， 甘草、 薏米各20g， 氟苯尼考琥珀酸钠5g、 植 物血球凝聚素 5mg。 0023 将上述中药组合物中的各原料药组分 （白头翁、 木贼、 刺五加、 连翘、 牛蒡子、 白芍、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升麻、 玄参、 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮、 甘草、 薏米） 分别研磨成 细粉， 混合， 获得混合物， 将混合物加入到 68 倍量的水中进行煎煮， 每次煎煮 24 小时， 煎煮 3 次， 每次煎煮完后过滤， 将滤液混合， 进行减压浓缩获得浸膏， 将浸膏加入到相对于 混合物质量 23 倍量的醇浓度为 90%95% 的乙醇溶液中， 搅拌完全溶解， 随后在 4温度 以下静置过夜。
24、， 随后过滤， 将滤液进行减压浓缩除去乙醇， 获得的膏体粉碎， 加入氟苯尼考 琥珀酸钠、 植物血球凝聚素后混合， 所得物与淀粉、 羟甲基纤维素按照质量比 1:2 ： 1 混匀， 用 14 目筛制粒， 烘烤 30 分钟， 获得颗粒状的药物， 大小 0.5-1mm。 0024 此颗粒药物 （称为药物芯） 的基础上， 即此药物的外表上包裹饲料包衣， 制备成以 此药物为芯的鱼料， 具体为 ： 将基础饲料 ：（将豆粕 100g， 鱼粉 50g， 小麦粉 300g， 玉米粉 500g， 盐 5g， 维生素 2g， ） 加 水搅拌为含水量 65%， 加羟甲基淀粉钠增稠至粘稠状， 将药物芯于粘稠液上反复滚过，。
25、 干燥 后复滚一会， 使基础饲料包裹在药物芯的外壁上， 厚度为 0.3-0.5mm。干燥后即得以鱼料。 0025 此例子为 100 只草鱼用， 根据鱼尾数乘以倍数去制备即可。 0026 1 餐 / 天， 连续 8 天， 在用药后的第 1 天草鱼死亡数量为 357 尾， 第 2 天草鱼死 亡数量 197 尾， 第 3 天死亡 115 尾， 第 4 天死亡 54 尾巴， 此后没有鱼发病死亡， 总死亡率为 0.90%。 0027 例子 3， 黄家鱼塘 1000 平米， 放养 7000 尾， 夏秋季节发现鱼类陆续死亡， 最高日死亡 392 只， 解 剖发现， 部分草鱼严重贫血， 白细胞数为健康草鱼的 。
26、40%， 肝细胞胞浆内有嗜酸性包涵体， 各 脏器小血管受损， 弥漫性血管内凝血。 此外， 发现部分草鱼草鱼肠道严重充血, 轻刮肠道内 壁无脱落现象， 肝脏颜色浅淡或颜色不均， 胆囊肿大， 轻度烂鳃。 诊断为草鱼出血病， 使用本 发明。 0028 白头翁、 木贼、 刺五加各 120g， 连翘、 牛蒡子、 白芍、 牡蛎、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升 麻、 玄参各70g， 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮各30g， 甘草、 薏米各25g， 氟苯尼考琥珀酸钠8g、 植 物血球凝聚素 8mg。 0029 将上述中药组合物中的各原料药组分 （白头翁、 木贼、 刺五加、 连翘、 牛蒡子、 白芍、 牡蛎。
27、、 竹叶、 木通、 麦冬、 生地、 升麻、 玄参、 地榆、 赤芍、 川楝子、 青皮、 甘草、 薏米） 分别研磨成 细粉， 混合， 获得混合物， 将混合物加入到 68 倍量的水中进行煎煮， 每次煎煮 24 小时， 煎煮 3 次， 每次煎煮完后过滤， 将滤液混合， 进行减压浓缩获得浸膏， 将浸膏加入到相对于 混合物质量 23 倍量的醇浓度为 90%95% 的乙醇溶液中， 搅拌完全溶解， 随后在 4温度 以下静置过夜， 随后过滤， 将滤液进行减压浓缩除去乙醇， 获得的膏体粉碎， 加入氟苯尼考 说 明 书 CN 104186970 A 7 6/6 页 8 琥珀酸钠、 植物血球凝聚素后混合， 所得物与淀。
28、粉、 羟甲基纤维素按照质量比 1:2 ： 1 混匀， 用 14 目筛制粒， 烘烤 30 分钟， 获得颗粒状的药物， 大小 0.5-1mm。 0030 此颗粒药物 （称为药物芯） 的基础上， 即此药物的外表上包裹饲料包衣， 制备成以 此药物为芯的鱼料， 具体为 ： 将基础饲料 ：（将豆粕 100g， 鱼粉 50g， 小麦粉 300g， 玉米粉 500g， 盐 5g， 维生素 2g， ） 加 水搅拌为含水量 65%， 加羟甲基淀粉钠增稠至粘稠状， 将药物芯于粘稠液上反复滚过， 干燥 后复滚一会， 使基础饲料包裹在药物芯的外壁上， 厚度为 0.3-0.5mm。干燥后即得以鱼料。 0031 此例子为 100 只草鱼用， 根据鱼尾数乘以倍数去制备即可。 0032 1 餐 / 天， 连续 8 天， 在用药后的第 1 天草鱼死亡数量为 322 尾， 第 2 天草鱼死 亡数量 186 尾， 第 3 天死亡 59 尾， 第 4 天死亡 27 尾巴， 此后没有鱼发病死亡， 总死亡率为 0.84% 综上， 本发明配比简单， 使用方便， 专门针对草鱼出血病， 治疗效果好， 对草鱼呼肠弧病 毒 GCRV， 或者草鱼出血病病毒 GCHV 有灭活作用， 治疗效果好。 说 明 书 CN 104186970 A 8 。