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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610248381.4 (22)申请日 2016.04.20 (71)申请人 运城学院 地址 044000 山西省运城市盐湖区复旦西 街1155号 (72)发明人 杜磊 (74)专利代理机构 北京酷爱智慧知识产权代理 有限公司 11514 代理人 赵永辉 (51)Int.Cl. A01G 1/00(2006.01) A01G 7/00(2006.01) (54)发明名称 一种筛选耐盐芸豆品种的方法 (57)摘要 本发明提供了一种筛选耐盐芸豆品种的方 法， 所述方法从不同品种。
2、的芸豆种子中挑选出饱 满、 整齐无损伤的种子分别用同样的种植基质进 行沙培种植， 播种一段时间之后选取长势一致的 幼苗移栽至盛有1/2Hoagland营养液的气雾栽培 周转箱中培育成芸豆植株， 待芸豆植株第一枚复 叶完全展开时， 选出长势一致的植株测量记录下 全株鲜重X1并分成盐处理组和空白对照组两组， 空白对照组仍采用1/2Hoagland营养液进行气雾 栽培， 盐处理组采用加入了100mmol/L的NaCl的 1/2Hoagland营养液进行气雾栽培。 过预定时间 之后， 分别对盐处理组和空白对照组的芸豆全株 鲜重进行测定， 通过全株鲜重数据的分析对比即 可筛选出更耐盐的芸豆品种。 该方法。
3、成本不高， 易于操作便于在各个地方推广实施。 权利要求书1页 说明书7页 附图1页 CN 105900636 A 2016.08.31 CN 105900636 A 1.一种筛选耐盐芸豆品种的方法， 其特征在于包括如下步骤： 步骤一： 将预定盐浓度的培养液灌注到容器中； 步骤二： 将不同品种的芸豆种子浸泡在培养液里； 步骤三： 播种预定时间后， 取预定数量芸豆植株进行耐盐性检测； 步骤四： 比较各芸豆植株的检测结果。 2.一种筛选耐盐芸豆品种的方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 步骤S1， 从不同品种的芸豆种子中挑选出饱满、 整齐无损伤的种子， 分别进行沙培种 植， 其中种植基质为细沙和过筛。
4、的农田土壤1:2混合； 步骤S2， 播种5天后， 选取长势一致的幼苗， 移栽至气雾栽培周转箱中， 每个气雾栽培周 转箱内倒入1/2Hoagland营养液， 所述1/2Hoagland营养液在使用前将PH值调整为6.0， 采用 定时开关控制气雾栽培周转箱中的超声波雾化器， 每工作515分钟， 休息35分钟， 每过 2024小时更换1/2Hoagland营养液； 步骤S3， 按步骤S2将芸豆幼苗培育至第一枚复叶完全展开时， 选出长势一致的芸豆植 株并记录下全株鲜重X1， 将选出的芸豆植株分成盐处理组和空白对照组两组， 空白对照组 仍采用步骤S2进行培育， 盐处理组移栽至另一气雾栽培周转箱中， 该盐。
5、处理组的气雾栽培 周装箱内倒入NaCl浓度为100mmol/L的1/2Hoagland营养液， 采用定时开关控制气雾栽培周 转箱中的超声波雾化器每工作1020分钟， 休息510分钟， 每过1015小时更换含有NaCl 的1/2Hoagland营养液； 步骤S4， 按照步骤S3的培育步骤再培育10天， 分别对盐处理组和空白对照组的芸豆全 株鲜重进行测定， 将盐处理组的芸豆全株鲜重记为X2， 空白对照组的芸豆全株鲜重记为X3； 步骤S5， 计算每一株芸豆全株鲜重变化幅度Y1， 其中Y1X2-X1， Y1值越大， 表明经过盐 处理后的芸豆全株鲜重增加的幅度越大， 对应品种的芸豆种子的耐盐性越好； 步。
6、骤S6， 若Y1数值相同， 则比较同一品种的芸豆盐处理组和空白对照组的全株鲜重增 量Y2， 其中Y2X3-X2， Y2值为正值时， 其他培养条件相同时， 数值越小， 则表明盐处理同空白对照相比， 该芸 豆品种的全株鲜重下降的幅度越小， 说明对应品种的耐盐性越好， Y2值为负值时， 其他培养条件相同时， 该负值的绝对值越大， 则表明盐处理同空白对照 相比， 该芸豆品种的全株鲜重增加的幅度越大， 说明对应品种的耐盐性越好， Y2值为负值时对应品种的耐盐性， 比Y2值为正值时对应品种耐盐性要好。 3.根据权利要求2所述的筛选耐盐芸豆品种的方法， 其特征在于， 所述气雾栽培周转箱 包括多孔泡沫板和箱体。
7、， 每孔插入1株幼苗或植株， 该多孔泡沫板置于周转箱的箱体中。 4.根据权利要求3所述的筛选耐盐芸豆品种的方法， 其特征在于， 所述多孔泡沫板为多 孔聚苯乙烯泡沫板。 5.根据权利要求2所述的筛选耐盐芸豆品种的方法， 其特征在于， 步骤S3中盐处理组和 空白对照组的芸豆植株每个品种都至少包括3株植株。 6.根据权利要求2所述的筛选耐盐芸豆品种的方法， 其特征在于， 步骤S3和S4中对芸豆 植株的全株鲜重测定， 需在擦拭干植株表面液体后再测量且不对植株造成伤害。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 105900636 A 2 一种筛选耐盐芸豆品种的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种筛。
8、选芸豆品种的方法， 尤其涉及一种筛选耐盐芸豆品种的方法。 背景技术 0002 芸豆是我国主要的食用豆类， 目前国内通常只把芸豆作为辅助食品， 消费量不大。 近年由于出口数量的增长， 带动芸豆种植面积增加， 但由于土壤盐渍化的制约， 芸豆的种植 受到严重影响。 不同芸豆品种间的耐盐性也存在较大差异， 经过耐盐选育之后可作为改良 利用盐碱土、 发展盐碱地区经济的先锋作物。 0003 长期以来， 对耐盐碱芸豆的筛选或鉴定， 均是采用田间盐碱地、 人工盐池进行试 验， 或室内测定一些生理生化的参数， 作为比较参考。 现有方法是根据芸豆材料在盐碱地或 者盐池中生长状况进行盐害调查进行判断是否对盐碱具有耐。
9、性。 虽然该方法是直接在田间 鉴定的， 鉴定结果相对较直接， 但每年芸豆只有特定的生长季节， 即每年只能进行特定批次 试验； 另外对鉴定场所要求较高， 如盐浓度要有一定的梯度， 盐池或盐碱地场所无法更换， 因为经过这类鉴定试验的盐碱地或盐池不可以用来种植其他植物， 以防对其他作物带来盐 害， 占地面积大， 鉴定效率低； 而且盐害症状是个定性的范围， 没有具体的数字量化， 不同的 检定人员观察的结果差异较大， 得出的结论具有差异和不稳定； 田间盐碱地是自然状态的， 且土壤的混匀程度及盐碱度不易统一， 盐池的盐分虽然是人工撒入的NaCl， 但进入土壤后， 土壤的成分、 PH值以及天气降雨等因素均会。
10、引起盐分水平的随时变化， 年度间及平行间试 验结果的可比性较差。 0004 现有技术还有一种水培耐盐筛选方法， 以人工创造的根系环境取代了土壤环境， 由于其在耐盐鉴定中有许多优势， 特别它提供了一个均一的根系生态环境， 因而可以准确 测定出植物对盐害的反应， 所以在植物耐盐鉴定中得到了广泛应用。 但是水培由于植物根 系进行无氧呼吸容易出现烂根的情况。 0005 因此缺少一种栽培环境易控制且植株不易烂根、 易操作的筛选耐盐芸豆品种的方 法。 发明内容 0006 为了解决上述问题， 本发明采用气雾栽培芸豆植株选育耐盐芸豆品种。 该方法的 栽培环境容易统一控制、 成本更低、 检测周期更短、 耐盐检测。
11、的准确度更高、 植株根系环境 好不易烂根并易于操作便于在各个地方推广实施。 0007 一种筛选耐盐芸豆品种的方法， 包括以下步骤： 0008 步骤一： 将预定盐浓度的培养液灌注到容器中； 0009 步骤二： 将不同品种的芸豆种子浸泡在培养液里； 0010 步骤三： 播种预定时间后， 取预定数量芸豆植株进行耐盐性检测； 0011 步骤四： 比较各芸豆植株的检测结果。 0012 一种筛选耐盐芸豆品种的方法， 包括以下步骤： 说 明 书 1/7 页 3 CN 105900636 A 3 0013 步骤S1， 从不同品种的芸豆种子中挑选出饱满、 整齐无损伤的种子， 分别进行沙培 种植， 其中种植基质为。
12、细沙和过筛的农田土壤1:2混合； 0014 步骤S2， 播种5天后， 选取长势一致的幼苗， 移栽至气雾栽培周转箱中， 每个气雾栽 培周转箱内倒入1/2Hoagland营养液， 所述1/2Hoagland营养液在使用前将PH值调整为6.0， 采用定时开关控制气雾栽培周转箱中的超声波雾化器， 每工作515分钟， 休息35分钟， 每过2024小时更换1/2Hoagland营养液； 0015 步骤S3， 按步骤S2将芸豆幼苗培育至第一枚复叶完全展开时， 选出长势一致的芸 豆植株并记录下全株鲜重X1， 将选出的芸豆植株分成盐处理组和空白对照组两组， 空白对 照组仍采用步骤S2进行培育， 盐处理组移栽至另。
13、一气雾栽培周转箱中， 该盐处理组的气雾 栽培周装箱内倒入NaCl浓度为100mmol/L的1/2Hoagland营养液， 采用定时开关控制气雾栽 培周转箱中的超声波雾化器每工作1020分钟， 休息510分钟， 每过1015小时更换含有 NaCl的1/2Hoagland营养液； 0016 步骤S4， 按照步骤S3的培育步骤再培育10天， 分别对盐处理组和空白对照组的芸 豆全株鲜重进行测定， 将盐处理组的芸豆全株鲜重记为X2， 空白对照组的芸豆全株鲜重记 为X3； 0017 步骤S5， 计算每一株芸豆全株鲜重变化幅度Y1， 其中Y1X2-X1， Y1值越大， 表明经 过盐处理后的芸豆全株鲜重增加的。
14、幅度越大， 对应品种的芸豆种子的耐盐性越好； 0018 步骤S6， 若Y1数值相同， 则比较同一品种的芸豆盐处理组和空白对照组的全株鲜 重增量Y2， 其中Y2X3-X2， 0019 Y2值为正值时， 其他培养条件相同时， 数值越小， 则表明盐处理同空白对照相比， 该芸豆品种的全株鲜重下降的幅度越小， 说明对应品种的耐盐性越好， 0020 Y2值为负值时， 其他培养条件相同时， 该负值的绝对值越大， 则表明盐处理同空白 对照相比， 该芸豆品种的全株鲜重增加的幅度越大， 说明对应品种的耐盐性越好， 0021 Y2值为负值时对应品种的耐盐性， 比Y2值为正值时对应品种耐盐性要好。 0022 进一步地。
15、， 所述气雾栽培周转箱包括多孔泡沫板和箱体， 每孔插入1株幼苗或植 株， 该多孔泡沫板置于周转箱的箱体中。 更进一步地， 所述多孔泡沫板为多孔聚苯乙烯泡沫 板。 0023 进一步地， 步骤S3中盐处理组和空白对照组的芸豆植株每个品种都至少包括3株 植株。 0024 进一步地， 6.根据权利要求2所述的筛选耐盐芸豆品种的方法， 其特征在于， 步骤 S3和S4中对芸豆植株的全株鲜重测定， 需在擦拭干植株表面液体后再测量且不对植株造成 伤害。 0025 本发明的筛选耐盐芸豆品种的方法， 从不同品种的芸豆种子中挑选出饱满、 整齐 无损伤的种子分别用同样的种植基质进行沙培种植， 保证了芸豆种子的发芽率和。
16、排除了品 种之外的其他因素的影响。 播种5天之后选取长势一致的幼苗移栽至盛有1/2Hoagland营养 液的气雾栽培周转箱中， 每过2024小时更换1/2Hoagland营养液直至幼苗培育成芸豆植 株， 待第一枚复叶完全展开时选出长势一致的芸豆植株并记录下全株鲜重X1， 并将选出的 各品种芸豆植株都分成盐处理组和空白对照组两组， 空白对照组仍采用1/2Hoagland营养 液进行气雾栽培， 盐处理组采用加入了100mmol/L的NaCl的1/2Hoagland营养液进行气雾栽 说 明 书 2/7 页 4 CN 105900636 A 4 培。 过10天之后， 分别对盐处理组和空白对照组的芸豆全。
17、株鲜重进行测定， 将盐处理组的芸 豆全株鲜重记为X2， 空白对照组的芸豆全株鲜重记为X3， 最后计算每一株芸豆全株鲜重变 化幅度Y1和同一品种的芸豆盐处理组和空白对照组的全株鲜重增量Y2， 分析Y1和Y2的数据 进行对比即可筛选出更耐盐的芸豆品种。 该方法相比于现有技术而言， 栽培环境容易统一 控制、 成本更低、 检测周期更短、 耐盐检测的准确度更高、 植株根系环境好不易烂根并易于 操作便于在各个地方推广实施。 附图说明 0026 图1为本发明筛选耐盐芸豆品种的方法流程图。 具体实施方式 0027 下面将结合本发明实施例中的附图， 对本发明实施例中的技术方案进行清楚、 完 整地描述。 基于本发。
18、明中的实施例， 本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所 获得的所有其他实施例， 都属于本发明保护的范围。 0028 一种筛选耐盐芸豆品种的方法， 具体包括以下步骤： 0029 种子的选育： 从不同品种的芸豆种子中挑选出饱满、 整齐无损伤的种子分别进行 沙培种植， 其中种植基质为细沙和过筛的农田土壤1:2混合。 从不同品种的芸豆种子中挑选 出饱满、 整齐无损伤的种子分别用同样的种植基质进行沙培种植， 保证了芸豆种子的发芽 率和排除了品种之外的其他因素的影响。 种植基质的选用也经过了大量的实验， 由于各地 的土壤环境的复杂性和多样性， 发明人发现采用细沙和过筛的农田土壤1： 2混合形成的种。
19、 植基质能够更好好地模拟自然种植条件下的土壤环境。 直接采用未过筛的农田土壤受到取 样地的土壤环境的局限性很大， 过筛之后直接采用也会受到取样地的土壤环境的局限， 优 选采用细沙和过筛之后的农田土壤混合形成的种植基质， 不同比例的细沙和过筛农田土壤 对种植基质的肥力和透气性也有很大的影响。 表1是发明人试验的不同种植基质间土壤肥 力、 透气性和与不同地区土壤环境的契合度的试验统计结果。 0030 表1 说 明 书 3/7 页 5 CN 105900636 A 5 0031 0032 幼苗的培育： 播种5天后(一般培育37天芸豆幼苗就可以进行移栽了， 优选5天)， 选取长势一致的幼苗， 移栽至气。
20、雾栽培周转箱中， 该气雾栽培周转箱包括盛有营养液的周 转箱和置于周转箱中的多孔泡沫板， 优选采用40孔的聚苯乙烯泡沫板， 每孔插入1株芸豆幼 苗， 每个容积为25L的气雾栽培周转箱中倒入10L的1/2Hoagland营养液， 该1/2Hoagland营 养液在使用前将PH值调整为6.0。 在此需要特别指出， 土壤酸碱性划分为9等级。 PH值小于 4.5为极强酸性， 4.5-5.5为强酸性， 5.5-6.0为酸性， 6.0-6.5为弱酸性， 6.5-7.0为中性， 7.0-7.5为弱碱性， 7.5-8.5为碱性， 8.5-9.5为强碱性， 大于9.5为极强碱性。 虽然芸豆对土 壤要求不严格,在P。
21、H值位于5.5-7之间的各类土壤上均能生长， 有较强的耐酸碱能力， 但是 发明人在大量实验的基础上， 发现若将1/2Hoagland营养液的PH值调整为6.0-7.0等中性或 弱酸性范围， 试验芸豆成活率会大大提高且烂根率都会大大降低， 具体效果对比参见下表： 0033 表2 0034 0035 0036 本发明优选的1/2Hoagland营养液在使用前将PH值调整为6.0。 同时采用定时开关 控制气雾栽培周转箱中的雾化器间歇式工作， 产生营养液气雾供植株根系吸收， 优选采用 超声波雾化器， 超声波雾化器使用时方便快捷， 且无噪音、 震动等因素影响， 超声波雾化器 说 明 书 4/7 页 6 。
22、CN 105900636 A 6 工作515分钟然后休息35分钟交替进行， 经过实验验证工作10分钟然后休息4分钟为最 佳的间歇工作频率， 也是本发明的超声波雾化器的优选工作频率， 不同工作频率下的超声 波雾化器对实验结果的影响如表3所示。 0037 表3 0038 0039 综合来看， 营养液消耗越慢、 对雾化器的损耗越小、 幼苗生长状态和幼苗对营养液 的吸收率越好的方案越符合本发明的要求， 其中工作10分钟休息4分钟的方案效果最好。 0040 每过2024小时更换周转箱中的营养液， 防止营养液挥发或者被吸收导致的浓度 差异过大， 从而保持营养液新鲜足量以及浓度足够芸豆生长。 周转箱的容积和。
23、营养液的体 积可以自行选定， 本发明部对此做限定， 本发明优选用25L的周转箱中加入10L的营养液只 是一个示例。 0041 植株的分组处理： 将芸豆幼苗培育至第一枚复叶完全展开时， 选出长势一致的芸 豆植株并记录下全株鲜重X1， 并将选出的各品种芸豆植株都分成盐处理组和空白对照组两 组， 其中盐处理组和空白对照组的芸豆植株每个品种都至少包括3株植株， 更好地保证了不 同植株个体对实验结果的影响。 复叶是由多数小叶组成， 分为掌状复叶、 三出复叶、 羽状复 叶等。 芸豆幼苗的复叶为三处复叶， 有3片小叶着生在总叶柄的顶端。 空白对照组仍采用上 述 “幼苗的培育” 步骤进行培育， 盐处理组移栽至。
24、另一气雾栽培周转箱中， 该盐处理组的气 雾栽培周装箱内倒入NaCl浓度为100mmol/L的1/2Hoagland营养液， 采用定时开关控制气雾 栽培周转箱中的雾化器间歇式工作， 优选采用超声波雾化器， 超声波雾化器使用时方便快 捷， 且无噪音、 震动等因素影响， 由于植株的分组处理步骤中的芸豆植株比幼苗培育步骤中 的植株的株龄大， 因此芸豆植株对营养液的吸收效率和吸收量更大， 相应地超声波雾化器 产生的营养液气雾要更充足， 此时的雾化器每工作1020分钟， 休息510分钟交替进行， 且每过1015小时(优选12小时更换一次营养液便于时间控制， 可每天早晚各更换一次)更 说 明 书 5/7 页。
25、 7 CN 105900636 A 7 换周转箱中的营养液， 保持营养液新鲜足量以及浓度足够芸豆生长。 发明人经过大量的试 验之后优选每工作15分钟， 休息7分钟。 不同工作频率下超声波雾化器对处于生长期的芸豆 植株的影响如表4所示。 0042 表4 0043 0044 0045 由于芸豆植株比幼苗期对营养液的吸收效率和吸收量更大， 不同的工作频率对植 株的影响也不尽相同， 相应地超声波雾化器产生的营养液气雾就需要更充足， 而长时间工 作或者频繁开关机也对雾化器的损耗较大。 综合来看， 营养液消耗越慢、 对雾化器的损耗越 小、 植株生长状态和植株对营养液的吸收率越好的方案越符合本发明的要求， 。
26、其中工作15 分钟休息7分钟的方案效果最好。 0046 其中， 选出长势一致的第一枚复叶完全展开的芸豆植株是为了控制初始条件一 致， 不至于干扰试验结果。 对于NaCl的浓度的选用， 发明人通过对常见的盐碱化土壤进行研 究发现NaCl浓度为100mmol/L的1/2Hoagland营养液更为契合常见的盐碱地环境。 过高则超 过了盐碱化土壤对芸豆的生长的影响， 一般芸豆在过高的盐碱化土壤中不能成活或者不结 实。 过低则没有很好的筛选作用， 盐处理组和空白对照组之间的差异不明显。 表5是发明人 试验的不同浓度的含NaCl的1/2Hoagland营养液对芸豆的影响。 其中， NaCl浓度过低则起不 。
27、到应有的盐处理效果， 过高则大大超出了现有耐盐植物的耐盐承受力而没有参考性。 0047 表5 说 明 书 6/7 页 8 CN 105900636 A 8 0048 0049 全株鲜重测定： 处理后再培育10天(一般为515天， 优选10天， 培育时间太短没有 明显差距， 太长芸豆植株生长受其他因素影响产生误差)， 分别对盐处理组和空白对照组的 芸豆全株鲜重进行测定， 将盐处理组的芸豆全株鲜重记为X2， 空白对照组的芸豆全株鲜重 记为X3； 对芸豆全株鲜重X1、 X2和X3的测定需在擦拭干植株表面液体后再测量且不对植株 造成伤害， 保证不同芸豆植株长势不受到影响。 0050 耐盐性初步对比： 。
28、计算每一株芸豆全株鲜重变化幅度Y1， 其中Y1X2-X1， Y1值越 大， 表明经过盐处理后的芸豆全株鲜重增加的幅度越大， 对应品种的芸豆种子的耐盐性越 好； 0051 耐盐性进一步对比： 若Y1数值相同， 则比较同一品种的芸豆盐处理组和空白对照 组的全株鲜重增量Y2， 其中Y2X3-X2， Y2值为正值时， 其他培养条件相同时， 数值越小， 则 表明盐处理同空白对照相比， 该芸豆品种的全株鲜重下降的幅度越小， 说明对应品种的耐 盐性越好， Y2值为负值时， 其他培养条件相同时， 该负值的绝对值越大， 则表明盐处理同空 白对照相比， 该芸豆品种的全株鲜重增加的幅度越大， 说明对应品种的耐盐性越好， Y2值为 负值时对应品种的耐盐性， 比Y2值为正值时对应品种耐盐性要好。 0052 此外， 由于芸豆、 花生等豆科作物生长特性相似， 因此采用上述相同或相似的参数 进行检测， 会得到同样良好的耐盐性检测效果。 0053 以上所述， 仅为本发明较佳的具体实施方式， 但本发明的保护范围并不局限于此， 任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内， 根据本发明的技术方案及其 发明构思加以等同替换或改变， 都应涵盖在本发明的保护范围之内。 说 明 书 7/7 页 9 CN 105900636 A 9 图1 说 明 书 附 图 1/1 页 10 CN 105900636 A 10 。