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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810803942.1 (22)申请日 2018.07.20 (71)申请人 扬生 （南召） 生物科技有限公司 地址 474650 河南省南阳市南召台湾华扬 龙生科技产业园 (72)发明人 李恒 李中洋 李雨 王春阳 (74)专利代理机构 郑州明德知识产权代理事务 所(普通合伙) 41152 代理人 李艳玲 郭丽娜 (51)Int.Cl. A23L 33/00(2016.01) (54)发明名称 一种无花果益生菌酵素及其制备方法 (57)摘要 本发明属于酵素生产技术领域， 。
2、具体涉及一 种无花果益生菌酵素及其制备方法。 本发明以红 无花果和黑无花果为主要原料， 经过四次发酵而 成。 本发明原料的营养成分在科学合理的搭配上 更加丰富， 在益生菌的发酵作用下， 同时严格控 制益生菌的种类、 用量以及发酵时长， 保证原料 的发酵更加充分、 深度， 最终使得原料中的营养 物质、 活性物质、 抗氧化物质能够完全释放分解 出来， 最终得到一种口感良好、 可降血脂的无花 果益生菌酵素。 权利要求书1页 说明书5页 CN 108991507 A 2018.12.14 CN 108991507 A 1.一种无花果益生菌酵素的制备方法， 其特征在于， 包括以下步骤： S1将无花果50。
3、0-700KG、 木瓜100-150KG、 冬瓜50-100KG、 佛手瓜50-100KG和赤砂糖50- 100 KG加入发酵设备中； S2向发酵设备中继续加入酵母菌10-15g和发酵乳杆菌5-10g进行初发酵， 发酵时间为 5-7个月； 初发酵结束后加入植物乳杆菌5-10g、 鼠李糖乳杆菌1-5g进行第二次发酵， 发酵时 间7-9个月； 第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌5-10g、 罗伊氏乳杆菌1-5g继续第三次发酵 5-7个月； 第三次发酵结束后加入醋酸菌5-10g继续第四次发酵3-5个月， S3四阶段发酵结束后， 检测pH稳定在2.8-3.7之间， 酒精度0.5%时， 发酵完成； S4将发。
4、酵完成的发酵液进行过滤； S5静置纯化： 将过滤后的发酵液静置纯化， 当酒精度0.5%、 乳酸菌总数1106CFU/ ml时纯化完成， 得到无花果益生菌酵素原液。 2.根据权利要求1所述无花果益生菌酵素的制备方法， 其特征在于： 所述S2中初发酵 时， 发酵过程中定期搅拌、 进行有氧发酵、 第二次发酵和第三次发酵时， 隔绝空气进行厌氧 发酵。 3.根据权利要求1所述的无花果益生菌酵素的制备方法， 其特征在于： 发酵设备为发酵 桶。 4.根据权利要求1所述的无花果益生菌酵素的制备方法， 其特征在于： S1中原料加入发 酵设备之前， 先经过清洗、 吹干、 消毒、 粉碎。 5.采用权利要求1-4任一。
5、项制备方法制得的无花果益生菌酵素。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 108991507 A 2 一种无花果益生菌酵素及其制备方法 技术领域 0001 本发明属于酵素生产技术领域， 具体涉及一种无花果益生菌酵素及其制备方法。 背景技术 0002 酵素指通过微生物对水果蔬菜发酵， 提取的一种含生物活性成分的液体。 上述生 物活性成分包括酶但是不限于酶， 包括活性抗氧化成分、 生物质化素等， 来自发酵参与菌和 用于发酵的食材。 0003 合理制作的酵素， 所萃取的植物活性物质都是来自于食材， 且发酵参与菌更是人 体微生态系统的组成部分。 因此， 酵素的副作用几乎为零， 强大的功效， 极小的。
6、副作用， 近年 来一直呈爆炸性增长趋势。 0004 无花果果实找那个含有多种营养成分， 例如氨基酸、 维生素、 果糖、 葡萄糖等， 同时 也是富硒水果， 但是由于无花果果体成熟期比较集中， 且难以保存， 常见的是将无花果制作 成无花果干。 无花果现有的进一步开发有无花果酒(CN106929267A)、 无花果饮品 (CN102948846A)、 无花果酵素(CN103103103A)， 但这些产品对原料中营养物质成分的提取 不够充分。 发明内容 0005 有鉴于此， 本发明的目的在于提供一种无花果益生菌酵素及其制备方法， 解决了 传统无花果应用途径窄的问题。 0006 本发明所采用的技术方案为。
7、： 0007 一种无花果益生菌酵素的制备方法， 包括以下步骤： 0008 S1将无花果500-700KG、 木瓜100-150KG、 冬瓜(去皮)50-100KG、 佛手瓜50-100KG和 赤砂糖50-100KG加入发酵设备中； 0009 S2向发酵设备中继续加入酵母菌10-15g和发酵乳杆菌5-10g进行初发酵， 发酵时 间为5-7个月； 初发酵结束后加入植物乳杆菌5-10g、 鼠李糖乳杆菌1-5g进行第二次发酵， 发 酵时间7-9个月； 第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌5-10g、 罗伊氏乳杆菌1-5g继续第三次 发酵5-7个月； 第三次发酵结束后加入醋酸菌5-10g继续第四次发酵3-5个。
8、月， 0010 S3四阶段发酵结束后， 检测pH稳定在2.8-3.7之间， 酒精度0.5时， 发酵完成； 0011 S4将发酵完成的发酵液进行过滤； 0012 S5静置纯化： 将过滤后的发酵液静置纯化， 当酒精度0.5、 乳酸菌总数1 106CFU/ml时纯化完成， 得到无花果益生菌酵素原液。 0013 所述S2中初发酵时， 发酵过程中定期搅拌、 进行有氧发酵、 第二次发酵和第三次发 酵时， 隔绝空气进行厌氧发酵。 0014 发酵设备为发酵桶。 0015 S1中原料加入发酵设备之前， 先经过清洗、 吹干、 消毒、 粉碎。 0016 采用以上制备方法制得的无花果益生菌酵素。 说 明 书 1/5 。
9、页 3 CN 108991507 A 3 0017 无花果益生菌酵素原液进行灌装得到终产品。 0018 灌装条件： 控制室内洁净度达到10万级规定要求， 车间工人进入车间前必须洗手、 更衣、 消毒， 严格按灌装机及旋盖机的操作规程进行操作， 在灌装进行中随时检查灌装量， 封口质量等环节， 确保产品符合标准技术要求。 在灌装前后将设备及管道进行彻底清洗和 消毒； 灌装为瓶装， 瓶及瓶盖清洗： 瓶子先用纯净水翻转冲洗， 再用洁净压缩空气吹干， 盖子 用消毒柜进行消毒处理， 保证达到无菌要求。 0019 优选以下技术方案： 在S2中， 专用发酵桶为850个， 每个发酵桶容量1200升(每次加 入原料。
10、总量1000kg左右)， 电子称2台， 每发酵桶装料量1吨， 发酵温度为常温， 车间密封， 保 持洁净， 常温发酵， 发酵时间为24个月。 0020 在S5中， 静置纯化罐为50个， 每个静置纯化罐容量为30吨， 使用材质为食品级塑料 材质。 0021 灌装时， 灌装机的型号为TD-8， 灌装机的数量为2套； 旋盖机的型号TD-SP1， 旋盖机 的数量为2套， 灌装速度为2000瓶/小时， 瓶器为30ml玻璃瓶。 0022 瓶及瓶盖清洗时， 理瓶器2台； 全自动翻转冲瓶机2台， 全自动翻转冲瓶机的型号为 CP-15； 消毒柜1台， 消毒柜的型号为ZTP-390。 0023 与现有技术相比， 本。
11、发明的有益技术效果是： 0024 本发明以红无花果和黑无花果为主要原料， 原料的营养成分在科学合理的搭配上 更加丰富， 制备过程中不添加水， 充分保障了酵素中的营养物质及活性物质含量、 浓度， 在 益生菌的发酵作用下， 同时严格控制益生菌的种类、 用量以及发酵时长， 保证原料的发酵更 加充分、 深度， 发酵过程分为四个阶段且根据不同阶段的特性分别加入不同的菌种， 使发酵 具有层次更加合理； 特别是二次发酵阶段， 自然发酵， 不再增加糖源， 最终使得原料中的营 养物质、 活性物质、 抗氧化物质能够完全释放分解出来， 改善了现有酵素采用原材料加水发 酵或果汁发酵的制作方式所导致的酵素发酵效率低， 。
12、活性物质、 营养成分含量低， 以及保健 效果不显著等技术问题。 最终得到一种口感良好、 可降血脂的无花果益生菌酵素， 增加了无 花果益生菌酵素营养价值。 0025 本发明制得的无花果益生菌酵素不含任何食品添加剂， 安全健康， 无毒副作用， 可 放心享用， 适宜于各类人群； 解决了传统无花果应用途径窄、 产品形态单一问题。 具体实施方式 0026 下面结合实施例来说明本发明的具体实施方式， 但以下实施例只是用来详细说明 本发明， 并不以任何方式限制本发明的范围。 0027 以下实施例中原料加入发酵桶之前经过清洗、 吹干、 紫外消毒、 粉碎。 0028 实施例1： 0029 一种无花果益生菌酵素的。
13、制备方法， 包括以下步骤： 0030 S1将无花果700KG、 木瓜150KG、 冬瓜(去皮)50KG、 佛手瓜50KG和赤砂糖50KG加入发 酵桶中； 0031 S2向发酵桶中继续加入酵母菌15g和发酵乳杆菌10g进行初发酵， 发酵过程中每天 搅拌、 进行有氧发酵， 发酵时间为6个月； 初发酵结束后加入植物乳杆菌10g、 鼠李糖乳杆菌 5g进行第二次发酵， 发酵时间8个月； 第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌10g、 罗伊氏乳杆菌 说 明 书 2/5 页 4 CN 108991507 A 4 5g继续第三次发酵6个月； 第三次发酵结束后加入醋酸菌10g继续第四次发酵4个月； 0032 第二次发酵。
14、、 第三次发酵和第四次发酵时， 隔绝空气进行厌氧发酵； 0033 S3四阶段发酵结束后， 检测pH稳定在2.8-3.7之间， 酒精度0.5时， 发酵完成； 0034 S4将发酵完成的发酵液进行过滤； 0035 S5静置纯化： 将过滤后的发酵液静置纯化， 当酒精度0.5、 乳酸菌总数1 106CFU/ml时纯化完成， 得到无花果益生菌酵素原液。 0036 实施例2： 0037 一种无花果益生菌酵素的制备方法， 包括以下步骤： 0038 S1将无花果500KG、 木瓜150KG、 冬瓜(去皮)100KG、 佛手瓜100KG和赤砂糖100KG加 入发酵桶中； 0039 S2向发酵桶中继续加入酵母菌1。
15、0g和发酵乳杆菌10g进行初发酵， 发酵过程中每天 搅拌、 进行有氧发酵， 发酵时间为5个月； 初发酵结束后加入植物乳杆菌5g、 鼠李糖乳杆菌5g 进行第二次发酵， 发酵时间9个月； 第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌5g、 罗伊氏乳杆菌5g 继续第三次发酵5个月； 第三次发酵结束后加入醋酸菌8g继续第四次发酵5个月； 0040 第二次发酵、 第三次发酵和第四次发酵时， 发酵桶覆膜密封， 隔绝空气进行厌氧发 酵； 0041 S3四阶段发酵结束后， 检测pH稳定在2.8-3.7之间， 酒精度0.5时， 发酵完成； 0042 S4将发酵完成的发酵液进行过滤； 0043 S5静置纯化： 将过滤后的发酵液。
16、静置纯化， 当酒精度0.5、 乳酸菌总数1 106CFU/ml时纯化完成， 得到无花果益生菌酵素原液。 0044 实施例3： 0045 一种无花果益生菌酵素的制备方法， 包括以下步骤： 0046 S1将无花果600KG、 木瓜130KG、 冬瓜(去皮)80KG、 佛手瓜80KG和赤砂糖80KG加入发 酵桶中； 0047 S2向发酵桶中继续加入酵母菌15g和发酵乳杆菌5g进行初发酵， 发酵过程中每天 搅拌、 进行有氧发酵， 发酵时间为7个月； 初发酵结束后加入植物乳杆菌10g、 鼠李糖乳杆菌 1g进行第二次发酵， 发酵时间7个月； 第二次发酵结束后加入嗜酸乳杆菌10g、 罗伊氏乳杆菌 1g继续第。
17、三次发酵7个月； 第三次发酵结束后加入醋酸菌5g继续第四次发酵3个月； 0048 第二次发酵、 第三次发酵和第四次发酵时， 隔绝空气进行厌氧发酵； 0049 S3四阶段发酵结束后， 检测pH稳定在2.8-3.7之间， 酒精度0.5时， 发酵完成； 0050 S4将发酵完成的发酵液进行过滤； 0051 S5静置纯化： 将过滤后的发酵液静置纯化， 当酒精度0.5、 乳酸菌总数1 106CFU/ml时纯化完成， 得到无花果益生菌酵素原液。 0052 实施例1-3得到无花果益生菌酵素原液后， 需按国标GB/T31121检测微生物指标、 重金属指标达标， 其他指标达到行业标准T/CBFIA08003-2。
18、016， 然后无花果益生菌酵素原液 经专用管道输送至灌装车间， 灌装得到无花果益生菌酵素成品。 0053 效果实验： 实施例1-3所制得的无花果益生菌酵素对大鼠降血脂作用验证 0054 实验对象SD雄性大鼠70只， 体重在180-220g 0055 试剂与仪器胆固醇试剂盒、 甘油三酯试剂盒、 低密度脂蛋白试剂盒、 高密度脂蛋白 说 明 书 3/5 页 5 CN 108991507 A 5 试剂盒， AU-2700自动升华分析仪 0056 试验方法 0057 分组及造模将70只实验大鼠随机分为2批， 10只常规饲养， 60只进行高血脂症大鼠 模型制备。 0058 方法： 给予自制高脂饲料(在基础。
19、饲料中添加20蔗糖、 15猪油、 1.2胆固醇、 0.2胆酸钠)2周。 模型评价方法： 2周后不禁食采血(目内眦)， 采血后分离血清， 测定血清 密度脂蛋白-胆固醇(LDL-TC)高脂血症(TG)总胆固醇(TC)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-TC)水 平。 结果表明高脂饲料饲养的血清TC、 LDL-C与对照组比较均显著升高(P0.05)， 血清HDL- C与对照组比较显著降低(P0.05)， 证明高血脂症大鼠模型制备成功。 造模成功后， 常规饲 养的10只大鼠为空白组， 造模的60只大鼠根据大鼠血脂水平随机分为模型组、 实验组1-3组 和阳性对照组(立普妥组)。 实验组1-3组分别给予7.5g/。
20、kg.d实施例1-3中所制得的无花果 益生菌酵素灌胃； 阳性对照组给予立普妥药液10mg/kg.d灌胃； 空白组给予生理盐水7.5g/ kg.d灌胃； 各组均给予灌胃30d， 同时高血脂模型大鼠各组继续给予高脂饲料喂养， 空白组 基础饲料喂养， 均正常自主饮水。 0059 指标采集与检测灌胃饲养30d后， 各组大鼠目内眦取血， 静置2h左右， 2000r/min离 心5min， 取上清液， 分装， 待测血脂各项指标。 0060 统计学方法采用SPSS13.0软件， 用单因素方差分析， P0.05为差异均有统计学意 义。 0061 实验结果 0062表1各组给样前血脂水平比较(mmol/L) 0。
21、063 0064 注： 与空白组比较aP0.05。 0065 各组给样前血脂各项指标与空白组比较， 差异有统计学意义， 见上表。 0066各组给药后血脂水平比较(mmol/L) 0067 组别n(只)TCTGHDL-TCLDL-TC 空白组10159.117.392.038.174.69.389.16.1 模型组10909.6253.1a159.267.1a47.613.8a266.176.2a 实验组110673.7236.5b176.051.248.413.5177.050.2b 实验组210751.6218.0164.289.148.616.2174.842.5b 实验组310846.9。
22、264.3141.456.644.110.3236.561.6 阳性对照组10622.7231.3b179.279.145.610.1182.859.7c 说 明 书 4/5 页 6 CN 108991507 A 6 0068 注： 与空白组比较， aP0.01； 与模型组比较，bP0.01，cP0.05 0069 模型组各项指标均高于空白组， 差异有统计学意义； 与模型组比较， 实验组1和阳 性对照组TC水平均有显著降低， 实验组1-2组和阳性对照组LDL-TC水平显著降低， 差异有统 计学意义。 0070 本实验通过建立高脂饮食诱导高血脂症大鼠的模型， 分别选用实施例1-3中制得 的无花果。
23、益生菌酵素与立普妥对比降血脂作用， 实验结果表明实施例1-3所制得的无花果 益生菌酵素对应的实验组1-3组血清总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇较模型组降低， 其中 实施例1制得的无花果益生菌酵素对应的实验组1效果最为显著。 同时实验组1-3血清三酰 甘油未显著高于模型对照组， 血清高密度脂蛋白胆固醇未显著低于模型对照组， 故判断实 验组1-3对应的实施例1-3的无花果益生菌酵素辅助降低血脂、 胆固醇动物实验结果阳性， 且降血脂效果与阳性对照药物立普妥相当， 且以实施例1所制得的无花果益生菌酵素最为 显著。 0071 最后说明的是， 以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制， 本领域普通 技术人员对本发明的技术方案所做的其他修改或者等同替换， 只要不脱离本发明技术方案 的精神和范围， 均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。 说 明 书 5/5 页 7 CN 108991507 A 7 。