技术领域：本发明属于药用高分子材料学领域的一种卡托普利复合几丁 聚糖缓释微球的制备方法。
背景技术：卡托普利(captopril，Cap)是最早发现的一种水溶性的血 管紧张素转换酶抑制剂，是治疗高血压及难治性充血性心衰的首选药物之一， 但由于其普通制剂生物半衰期较短(1.9h)，单剂量口服后仅能维持6-8小时， 每天需服药3-4次(Cap治疗浓度50ng/ml，po 50mg，Cmax 600ng/ml)，临 床为了提高Cap疗效通过增加剂量以延长其体内作用时间导致“波峰波谷”现 象，而引起眩晕、头痛等不良反应。此外，由于卡托普利在肠内不稳定，吸收 易受食物的影响等而减弱其治疗效果，另，国外已有尝试采用多种方法，如薄 膜包衣，微型包囊和水凝胶脉冲释放技术以微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、乙 基纤维素和羟丙基甲基纤维素等制备Cap缓释剂，因出现突释现象等，其临床 应用效果尚有争议，国内已有采用粉末直接压片法制备Cap缓释剂，但由于不 能维持足够的胃肠道滞留时间和肠内稳定性，至今尚无Cap的缓释品种在临床 应用，因此，研制Cap缓释剂具有重要的价值。
几丁聚糖(chitosan，Chi)是从昆虫、甲壳类动物骨骼和真菌细胞壁及 一些绿藻中提取的甲壳质脱乙酰基衍生物，化学结构为氨基葡萄糖聚合物，由 于其来源丰富、对人体无毒、优良的生物相溶性和成膜性等优点，以及具有很 强的亲水性，可在酸性介质中膨胀形成凝胶，阻止药物扩散及溶出等特性，而用 作缓释制剂的辅料，尤其近年来在缓释、控释制剂制备中的应用成为研究热点。
发明内容：该发明的目的是提供一种以几丁聚糖和胶原衍生物为载体辅 料制备卡托普利复合几丁聚糖缓释微球的方法，以弥补已有技术的不足。
本发明采用几丁聚糖衍生物和胶原衍生物为辅料，先分别溶解得到几丁聚 糖衍生物的溶液和胶原衍生物的溶液，在搅拌条件下将胶原衍生物溶液和几丁 聚糖衍生物溶液混合，并向该混合溶液中加入卡托普利粉，搅拌分散均匀，得 到包材与药物的混合溶液，再倾入到含有乳化剂的分散相溶剂中，搅拌乳化， 调节溶液的酸碱度pH2-8，且其温度保持在1-50℃，并向其中加入交联剂，进 行固化反应，分离并干燥，即得到本发明的产品。其中的几丁聚糖衍生物的脱 乙酰度范围是80％-100％，几丁聚糖衍生物溶液的浓度是1％-10％；胶原衍生物的 浓度是1-10％，胶原衍生物的添加量是几丁聚糖衍生物的0.5-3倍；而其中的 卡托普利粉的添加量是几丁聚糖的0.1-2倍。
上述几丁聚糖衍生物可以是部分脱乙酰基几丁质、全部脱乙酰基几丁质、 羧甲基几丁聚糖、羟乙基几丁聚糖、羟丙基几丁聚糖、几丁聚糖季氨盐、聚乙 烯醇接枝几丁聚糖等。
本发明采用新方法研究制备的卡托普利复合几丁聚糖缓释微球，能够改善 Cap的治疗效果、降低其不良反应，成为理想的水溶性药物缓释体系，具有巨 大的社会效益及经济效益。本发明具有操作简便，制备技术工艺稳定，制造成 本低廉等优点。本发明对原材料有广泛的适用性，所有具有游离氨基的几丁聚 糖衍生物均可以适用。本发明对胶原衍生物也有广泛的适用性，适用于具有可 以发生盐析作用的一切胶原衍生物。因此，本发明的原料来源十分广泛。本 发明的重要意义还在于微球制备中采用了两种交联剂复合交联的方法，结果使 微球更加致密、性能更加稳定。本发明采用的材料安全无毒副作用、具有良好 的生物相容性、生物可降解性、成膜性能好等特点，有望成为水溶性药物的理 想缓释系统，具有良好的研究和开发应用前景。
具体实施方式：本发明采用几丁聚糖(chitin)衍生物和胶原衍生物为 辅料，先分别溶解两者得到几丁聚糖衍生物的溶液和胶原衍生物的溶液，在搅 拌条件下将胶原衍生物溶液和几丁聚糖衍生物溶液混合，并向该混合溶液中加 入卡托普利粉，搅拌分散均匀，得到包材与药物的混合溶液，再倾入到含有乳 化剂的分散相溶剂中，搅拌乳化，控制pH值和温度，并向其中加入交联剂，进 行固化反应，得到微球产物和反应物的混合液，最后将其这些混合液分离，干 燥得到固体产品卡托普利复合几丁聚糖缓释微球。
其中的几丁聚糖衍生物的脱乙酰度范围是80％-100％，几丁聚糖衍生物溶液 的浓度是1％-10％；胶原衍生物的浓度是1-10％，胶原衍生物的添加量是几丁聚 糖衍生物的0.5-3倍；而其中的卡托普利粉的添加量是几丁聚糖的0.1-2倍。
本发明中几丁聚糖衍生物可以包括部分脱乙酰基几丁质、全部脱乙酰基几 丁质(即几丁聚糖)、羧甲基几丁聚糖、羟乙基几丁聚糖、羟丙基几丁聚糖、几 丁聚糖季氨盐、聚乙烯醇接枝几丁聚糖。
本发明中所指的胶原衍生物包括牛骨、牛皮、猪皮胶原衍生物，如A型明胶、 B型明胶。
本发明中使用的交联剂是三聚磷酸钠和硫酸钠，其中三聚磷酸钠和硫酸钠 的重量比是1∶1-5，添加量是几丁聚糖衍生物的0.5-3倍，本发明中使 用的交联剂还可以是甲醛、戊二醛、三聚磷酸钠、硫酸钠、谷氨酸钠中的任何 二者的共混物。
本发明中所使用的分散相可以是甲苯，其用量是包材与药物的混合溶液的 5-50倍，本发明中的分散相还可以是石蜡油、精制豆油、蓖麻油等有机溶剂。 其中所使用的乳化剂是司盘80，其用量是分散相的0.01-1％，本发明中的 乳化剂还可以是吐温、十二烷基硫酸钠。
本发明中包材与药物的混合溶液倾入到含有乳化剂的分散相溶剂中的搅拌 速度可以是1000-4000rpm，为了降低微球粒径搅拌速度可以是5000-10000 rpm。
本发明中乳化混合溶液的酸碱度可以是pH 2-8，所使用的调节pH值的试 剂可以是氢氧化钠，溶液的浓度是0.1M，本发明中调节pH值的试剂还可以是 碳酸氢铵、氨水、氢氧化钾，盐酸，醋酸。
通常固化的温度可以是20-50℃，为了加快微球固化速度，缩短固化时间， 其温度可以降低到1-10℃。微球的固化时间可以是1-10小时。
实施例1
将Cap粉(100mg)加入到羧甲基几丁聚糖(10ml，4％)与牛皮胶原衍 生物溶液(3ml，16％)的混合物中混合均匀，在搅拌条件下滴入到含有吐温 (0.2ml)的40℃甲苯(200ml)中，以4000r/min高速搅拌10min，用 0.1M的氢氧化钠调节到pH 6.8，温度降至5℃，倾入乙醚中并立即加硫酸钠 (191mg)与三聚磷酸钠(191mg)组成的复合交联剂，固化反应2小时，分离， 干燥，即得浅黄色卡托普利复合几丁聚糖缓释微球。
实施例2
将Cap粉(200mg)加入到羧甲基几丁聚糖(12ml，4％)与猪皮胶原衍 生物溶液(5ml，15％)的混合物中混合均匀，在搅拌条件下滴入到含有司盘 80(0.3ml)的50℃蓖麻油(300ml)中，以1000r/min高速搅拌20min，用 0.1M的氢氧化钾调节到pH 6.05，温度降至2℃，倾入乙醚中并立即加戊二醛(105 mg)与柠檬酸钠(105mg)组成的复合交联剂，固化反应10小时，分离，干 燥，即得浅黄色卡托普利复合几丁聚糖缓释微球。
实施例3
将Cap粉(400mg)加入到羧甲基几丁聚糖(15ml，4％)与牛骨胶原衍 生物溶液(10ml，10％)的混合物中混合均匀，在搅拌条件下滴入到含有十二烷 基硫酸钠(200mg)的30℃精制豆油(250ml)中，以2000r/min高速搅拌30min， 用0.1M的氨水调节到pH5.1，温度降至10℃，倾入乙醚中并立即加戊二醛(20mg) 与谷氨酸钠(20mg)组成的复合交联剂，固化反应5小时，分离，干燥，即得 浅黄色卡托普利复合几丁聚糖缓释微球。
实施例4
将Cap粉(300mg)加入到羧甲基几丁聚糖(13ml，4％)与牛骨胶原衍 生物溶液(8ml，10％)的混合物中混合均匀，在搅拌条件下滴入到含有十二烷 基硫酸钠(200mg)的30℃石蜡(250ml)中，以2500r/min高速搅拌25min， 用0.1M的碳酸氢铵调节到pH5.5，温度降至7℃，倾入乙醚中并立即加三聚磷酸 钠(20mg)与谷氨酸钠(20mg)组成的复合交联剂，固化反应6小时，分离， 干燥，即得浅黄色卡托普利复合几丁聚糖缓释微球。