技术领域
本发明涉及饲料技术领域，具体地说，是南美白对虾孵化专用营养液体制剂的制备方法。
背景技术
南美白对虾(Litopenaeus Vannamei Boone，1931)，又称白肢虾、白对虾、万氏白虾、凡纳对虾等，其外形形态与中国对虾和墨吉对虾相似，最大体长可达23cm，甲壳较薄，正常体色为青蓝色，全身不具斑纹；步足呈白垩色，故称白脚虾或白肢虾。该虾原产于中、南美太平洋沿岸水域，以厄瓜多尔(Ecuador)沿海的分布最为集中。上世纪七十年代初厄瓜多尔率先试养，一举成功。其后许多养虾国家或地区相继引进，南美白对虾养殖业发展迅速。南美白虾以其适温、适盐性强、抗病力强、离水耐受性强以及杂食习性、生长迅速等显著优点，成为当今世界养殖产量最高的三大优良大型虾类养殖种类之一。
经过几十年的发展，南美白对虾的养殖已经成为我国水产养殖业的支柱产业之一，我国对南美白对虾养殖的研究也取得了诸多的进步。现在人们逐渐认识到，南美白对虾虾苗培育对于发展南美白对虾养殖业越来越重要。在对虾人工育苗生产中，对虾受精卵的孵化是关系到生产成败的关键步骤。
中国专利文献CN101904311A公开了一种对虾类幼体孵化的方法，包括以下步骤：一、对虾孵化装置的设计，二、孵化水体的准备，三、虾卵受精和孵化，四、幼体收集和洗涤；实现以上所述的对虾类幼体孵化的方法所采用的孵化装置，包括孵化桶、孵化桶盖、照明装置、收集洗涤装置，孵化桶和孵化桶盖组成一体，孵化桶盖上设有透光孔和连有微孔塞的充气管，照明装置放置在透光孔的上方，利用对虾的趋光性选出活力强的虾类幼体并除去活力弱的虾类幼体以及死卵。中国专利文献CN103931955A公开了一种南美白对虾幼苗饲料，按以下重量份数的原料组成：虾片55-75份、破壁酵母2-3份、海洋红酵母2-3份、虾青素0.1-0.5份、维生素D30.3-0.8份、可溶性钙盐2-4份、粘合剂3-5份、崩解剂8-10份及吸湿剂3-5份。但是关于本发明的南美白对虾孵化专用保护液体制剂的制备方法目前还未见报道。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种南美白对虾孵化专用营养液体制剂。
本发明的再一的目的是，提供一种南美白对虾孵化专用营养液体制剂。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种南美白对虾孵化专用营养液体制剂，所述的液体制剂包含保藏编号为CCTCC M 2013240的短小芽孢杆菌，镁，锌，铜，钴，维生素A，维生素D，维生素E，维生素B1，维生素B2，维生素C，胃蛋白酶和类胰蛋白酶。
所述的液体制剂包含保藏编号为CCTCC M 2013240的短小芽孢杆菌，氯化镁，硫酸锌，蛋氨酸铜，蛋氨酸钴，维生素A，维生素D，维生素E，维生素B1，维生素B2，维生素C，胃蛋白酶和类胰蛋白酶。
为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：一种南美白对虾孵化专用营养液体制剂的制备方法，所述的制备方法包括以下步骤：将所述的短小芽孢杆菌进行液体发酵得到浓缩液，然后将矿物质元素、维生素和酶加入到所述的浓缩液中。
所述的制备方法包括以下步骤：将短小芽抱杆菌菌株按斜面、液体种子、液体发酵的顺序培养，斜面和种子培养基为营养琼脂培养基或肉汤培养基；发酵培养基配方：豆饼粉3％，淀粉1.5％，玉米浆1％，葡萄糖0.5％，(NH4)2SO40.1％，NH4Cl0.1％，KH2PO40.05％，NaH2PO40.5％，MgSO40.05％，MnSO40.05％，发酵培养条件为28-37℃，通风培养36-48h，活菌数≥2×109cfu/ml；每1000ml短小芽孢杆菌浓缩液中的添加：MgCl2·6H2O101g，硫酸锌27g，蛋氨酸铜19g，蛋氨酸钴36g，50万IU/g的饲料级维生素A1.2g，50万IU/g的饲料级维生素D36g，维生素E17.5g，维生素B16.5g，维生素B25g，维生素C30g，胃蛋白酶65g，类胰蛋白酶85g。
本发明优点在于：
1、本发明的南美白对虾孵化专用营养液体制剂营养全面、均衡。可以提高南美白对虾的存活率、生长速度并减少疾病的发生。
2、本发明的南美白对虾孵化专用营养液体制剂的制备方法工艺简单，制备短小芽孢杆菌浓缩液的发酵培养基同时也可以作为南美白对虾的营养成分，提高的原料的利用率、节约成本。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。
本发明的南美白对虾孵化专用营养液体制剂是通过将保藏编号为CCTCC M 2013240的短小芽孢杆菌和矿物质元素、维生素、酶等组合使用来完成。保藏编号为CCTCC M 2013240的短小芽孢杆菌的分类命名：短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)，保藏单位：中国典型培养物中心，地址：中国湖北省武汉市武汉大学，保藏日期：2013年06月02日，保藏编号为CCTCC NO:M2013240。本发明的南美白对虾孵化专用营养液体制剂的制备方法可以将短小芽孢杆菌进行液体发酵培养，然后将矿物质元素、维生素、酶等添加到短小芽孢杆菌的发酵液中。
实施例1
将短小芽抱杆菌菌株按斜面、液体种子、液体发酵的顺序培养，斜面和种子培养基为常规的营养琼脂培养基或肉汤培养基；发酵培养基配方(W/V):豆饼粉3％，淀粉1.5％，玉米浆1％，葡萄糖0.5％，(NH4)2SO40.1％，NH4Cl0.1％，KH2PO40.05％，NaH2PO40.5％，MgSO40.05％，MnSO40.05％，发酵培养条件为28-37℃，通风培养36-48h，活菌数≥2×109cfu/ml。
向短小芽孢杆菌浓缩液中添加矿物质元素、维生素和酶等，每1000ml短小芽孢杆菌浓缩液中的添加量为：MgCl2·6H2O101g，硫酸锌27g，蛋氨酸铜19g，蛋氨酸钴36g，50万IU/g的饲料级维生素A1.2g，50万IU/g的饲料级维生素D36g，维生素E17.5g，维生素B16.5g，维生素B25g，维生素C30g，胃蛋白酶65g，类胰蛋白酶85g。
实施例2
常规方法进行南美白对虾亲虾的培育，行单侧眼柄切除手术，待雌虾发育成熟后，精心挑选肢全体健的雄虾与雌虾进行交配。具体方法是将成熟雌虾转移到0.60m×0.60m×0.60m的水族箱中，每只箱中放两只雌虾和两只雄虾，一旦发现雌虾发生交配，将其移入单独的产卵箱。没有发生交配的雌虾放回原来的水族箱。待产卵结束后，将雌虾移出产卵箱，以免造成卵的损失。产卵箱分为对照组和实验组，对照组的产卵箱为常规的产卵箱，实验组的产卵箱添加了实施例1的南美白对虾孵化专用营养液体制剂，添加量为孵化专用保护液体制剂：水体的体积比为1:100。受精卵和无节幼体的计数采用50ml烧杯，每次计3杯，取平均数，再根据总水体换算出实际产卵量或无节幼体的数量。
将对照组和实验组的无节幼体分别在水族箱中培育，密度为100个/L。在幼体培育过程中，用测定产卵量的方法来测定幼体各个阶段的成活率。从无节幼体到蚤状幼体投喂单胞藻，从蚤状幼体开始投喂卤虫无节幼体。对照组和实验组的幼体培育条件相同。
具体实验结果如表1所示：
表1孵化实验结果
其中，幼体存活率A为无节幼体期至蚤状幼体期的幼体存活率，幼体存活率B为蚤状幼体期至糠虾幼体期的幼体存活率。
从表1，我们可以看出，在孵化过程中添加了本发明的南美白对虾孵化专用营养液体制剂后，提高了受精卵的孵化率，并且孵化出来的幼体的存活率也更高。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。