技术领域:本发明涉及骨肽,具体为一种骨肽氯化钠注射液及其制备工艺。
背景技术:骨肽溶液的主要成分为小分子多肽类物质,是由胶原蛋白分解而来的小分子 肽类混合物,具有调节骨代谢,刺激成骨细胞增殖,促进新骨形成,以及调节钙、磷代谢, 增加骨钙沉积,防止骨质疏松作用,临床上主要用于促进骨折愈合。然而小分子肽类物质在 长时间保存的过程中受环境因素的影响,易发生聚合反应,产生高分子物质,而高分子物质 是临床上产生过敏反应的主要因素。另外,市场上的骨肽注射剂以注射液和冻干粉针为主, 在为患者静脉滴注时需用0.9%氯化钠溶液溶解,易造成二次污染,为安全用药带来隐患。同 时,骨肽溶液的现有提取工艺比较简单,对热原的去除还不够彻底,从而增加过敏反应的发 生率。况且现在由于疯牛病的流行,哺乳动物的骨只局限于胎牛骨,可能会影响产品的质量。
发明内容:本发明的目的在于提供一种资源更为丰富、降低了临床过程中过敏反应发生 几率的骨肽氯化钠注射液及其制备工艺。本发明的目的是这样实现的:骨肽氯化钠注射液, 每百毫升含多肽为0.05~0.1g、氯化钠为0.8~1g。
a、骨肽溶液的制备方法
(1)取健康新鲜冷冻的哺乳动物的四肢骨称重,用纯化水清洗三遍后,置液压机上压 碎,将压碎的四肢骨,置夹层锅中;
(2)按原料重量1∶1~5加入5%NaOH溶液,加热30~55℃水解12~48小时后取上 清液;
(3)上清液置夹层锅中用HCl调PH值3.0~6.0,加热至70~100℃15~40min,冷却 降温至30~55℃,静置12~48小时后用滤布过滤。取过滤液置夹层锅中用NaOH调PH值 8.0~10.5,加热至70~100℃15~40min,冷却降温至30~55℃,静置12~48小时后用滤 布过滤,得粗滤液,称取重量,计算收率;
(4)粗滤液置夹层锅中用HCl调PH值4.0~6.0,按药液量加入0.01~1%药用活性炭 加热至80~100℃搅拌吸附15~30min后,冷却降温至30~50℃,过滤除炭,再用0.22μm 微孔滤膜过滤得精滤液,称取重量;
(5)精滤液用NaOH调PH值6.0~8.0,药液温度15~25℃,用3000~10000道尔顿 的超滤器超滤,压力0.05~0.1Mpa,收集超滤液;
b、骨肽氯化钠注射液生产工艺
(1)取处方量氯化钠,加入注射用水中溶解后,加入溶液量0.01~1%针用活性炭混匀, 煮沸10~30分钟,趁热过滤至澄清,备用;
(2)取处方量骨肽溶液,与上述溶液混合,调pH6.0~8.0,补注射用水至全量,微孔 滤膜过滤,测定含量;
(3)合格后,灌装于100ml玻璃瓶中,加隔离膜,加胶塞,扎盖。100~115℃灭菌30min。 所述的哺乳动物四肢骨可以为牛骨、猪骨。本发明的优点是:(1)本品中多肽浓度小于 5mg/ml,即小于骨肽注射液中多肽的浓度,从而避免了骨肽注射液在长时间保存过程中小 分子多肽易发生聚合的现象,使产品质量稳定,疗效可靠。见表1。数据表明,本品三批 样品按市售包装,置于40℃±2℃、相对湿度为75%±5%的强烈条件下,放置6个月, 各样品的高分子物质含量均为0,与0月相比无明显变化。
(2)本品为骨肽氯化钠输液,避免了临床使用过程中现用现配伍的步骤,不但提高 了医护人员的工作效率,而且减少了配伍时发生二次污染,为患者提供了安全的保障。
(3)本发明与申请号为03111084.3的专利相比,在制备骨肽溶液的工艺中增加了除 热原的步骤,降低了临床过程中过敏反应发生的几率。
(4)本发明与申请号为03111084.3的专利相比,在用胎牛骨提取制得骨肽溶液的基 础上,增加了猪骨,为生产工艺增加了选择性。同时,从某种程度上也可以避免疯牛病对 本产品品质的影响。
具体实施方式:骨肽氯化钠注射液,每百毫升含多肽为0.05~0.1g、氯化钠为0.8~1g,
a、骨肽溶液的制备方法
(1)取健康新鲜冷冻的哺乳动物的四肢骨称重,用纯化水清洗三遍后,置液压机上 压碎,将压碎的四肢骨,置夹层锅中;
(2)按原料重量1∶1~5加入5%NaOH溶液,加热30~55℃水解12~48小时后取 上清液;
(3)上清液置夹层锅中用HCl调PH值3.0~6.0,加热至70~100℃15~40min,冷 却降温至30~55℃,静置12~48小时后用滤布过滤。取过滤液置夹层锅中用NaOH调 PH值8.0~10.5,加热至70~100℃15~40min,冷却降温至30~55℃,静置12~48小时 后用滤布过滤,得粗滤液,称取重量,计算收率;
(4)粗滤液置夹层锅中用HCl调PH值4.0~6.0,按药液量加入0.01~1%药用活性 炭加热至80~100℃搅拌吸附15~30min后,冷却降温至30~50℃,过滤除炭,再用0.22μm 微孔滤膜过滤得精滤液,称取重量;
(5)精滤液用NaOH调PH值6.0~8.0,药液温度15~25℃,用3000~10000道尔 顿的超滤器超滤,压力0.05~0.1Mpa,收集超滤液;
b、骨肽氯化钠注射液生产工艺
(1)取处方量氯化钠,加入注射用水中溶解后,加入溶液量0.01~1%针用活性炭混 匀,煮沸10~30分钟,趁热过滤至澄清,备用;
(2)取处方量骨肽溶液,与上述溶液混合,调pH6.0~8.0,补注射用水至全量,微孔 滤膜过滤,测定含量;
(3)合格后,灌装于100ml玻璃瓶中,加隔离膜,加胶塞,扎盖。100~115℃灭菌 30min。所述的哺乳动物四肢骨可以为牛骨、猪骨。
实施例1
1、骨肽溶液生产工艺
取健康新鲜冷冻的猪四肢骨115kg,用纯化水清洗三遍后,置液压机上压碎。将压碎的四 肢骨,置夹层锅中,按原料重量1∶1加入5%NaOH溶液,加热30℃水解48小时后取上 清液。上清液置夹层锅中用6mol/LHCl调PH值3.0,加热至70℃40min,冷却降温至30 ℃,静置12小时后用滤布过滤。取过滤液置夹层锅中用5mol/LNaOH调PH值8.0,加热 至70℃40min,冷却降温至30℃,静置12小时后用滤布过滤,得粗滤液,称取重量,计 算收率。粗滤液置夹层锅中用6mol/L HCl调PH值4.0,按药液量加入0.01%药用活性炭 加热至80℃搅拌吸附30min后,冷却降温至30℃,0.45μm微孔滤膜过滤除炭,再用0.22μm 微孔滤膜过滤得精滤液,称取重量。精滤液用5mol/L NaOH调PH值6.0,药液温度15 ℃,用3000道尔顿的超滤器超滤,压力0.05-0.1Mpa,收集超滤液。
2、骨肽氯化钠注射液生产工艺
取氯化钠0.8kg,加入10000ml注射用水中溶解后,加入溶液量0.01%针用活性炭混匀, 煮沸10分钟,趁热过滤至澄清,备用。取骨肽溶液(100mg/ml)1003.8ml,与上述溶液 混合,调pH6.0,补注射用水至100000ml,0.22μm微孔滤膜过滤,测定含量。合格后, 灌装于100ml玻璃瓶中,加隔离膜,加胶塞,扎盖。100℃灭菌30min。
实施例2
1、骨肽溶液生产工艺
同实施例1。
2、骨肽氯化钠注射液生产工艺
取氯化钠1kg,加入10000ml注射用水中溶解后,加入溶液量1%针用活性炭混匀,煮沸 30分钟,趁热过滤至澄清,备用。取骨肽溶液(100mg/ml)502.4ml,与上述溶液混合, 调pH8.0,补注射用水至100000ml,0.22μm微孔滤膜过滤,测定含量。合格后,灌装于 100ml玻璃瓶中,加隔离膜,加胶塞,扎盖。115℃灭菌30min。
实施例3
1、骨肽溶液生产工艺
同实施例1。
2、骨肽氯化钠注射液生产工艺
取氯化钠0.9kg,加入10000ml注射用水中溶解后,加入溶液量0.1%针用活性炭混匀,煮 沸20分钟,趁热过滤至澄清,备用。取骨肽溶液(100mg/ml)1003.8ml,与上述溶液混 合,调pH7.0,补注射用水至100000ml,0.22μm微孔滤膜过滤,测定含量。合格后,灌 装于100ml玻璃瓶中,加隔离膜,加胶塞,扎盖。115℃灭菌30min。
实施例4
本发明所述的哺乳动物四肢骨为胎牛、猪四肢骨。
实施例5
取健康新鲜冷冻的胎牛四肢骨73kg,用纯化水清洗三遍后,置液压机上压碎。将压碎的四 肢骨,置夹层锅中,按原料重量1∶5加入5%NaOH溶液,加热55℃水解12小时后取 上清液。上清液置夹层锅中用6mol/LHCl调PH值6.0,加热至100℃15min,冷却降温至 55℃,静置48小时后用滤布过滤。取过滤液置夹层锅中用5mol/LNaOH调PH值10.5, 加热至100℃15min,冷却降温至55℃,静置48小时后用滤布过滤,得粗滤液,称取重量, 计算收率。粗滤液置夹层锅中用6mol/L HCl调PH值6.0,按药液量加入1%药用活性炭 加热至100℃搅拌吸附15min后,冷却降温至50℃,0.45μm微孔滤膜过滤除炭,再用0.22μm 微孔滤膜过滤得精滤液,称取重量。精滤液用5mol/L NaOH调PH值8.0,药液温度25 ℃,用10000道尔顿的超滤器超滤,压力0.05-0.1Mpa,收集超滤液。
表1 批次 1 2 3 时间(月) 高分子含量(%) 0 0 1 0 2 0 3 0 6 0 0 0 1 0 2 0 3 0 6 0 0 0 1 0 2 0 3 0 6 0