技术领域
本发明属于医药制药领域，具体涉及一种精氨酸谷氨酸药物制剂的制备方 法及其应用。
背景技术
肝脏是人体最大的器官，具有将各种营养素给予合成、贮存、代谢、解毒 等功能。人体肝功能严重损害可导致体内氨代谢紊乱，造成体内高血氨状态， 对人体重要器官产生损害，如引发肝损伤和肝性脑病等。肝损伤包括化学性肝 损伤、机械性肝损伤和肝炎等。临床对肝损伤导致肝性脑病的治疗一般采用调 节饮食、调整氨基酸谱、维持酸碱电解质平衡等综合治疗方案。目前国内可供 临床选择的降血氨药非常少，主要有谷氨酸钾、谷氨酸钠、盐酸精氨酸三种药 物。但由于产品本身的特性，三种药一般需要联合使用才能取得较好的降血氨 效果，其临床应用有诸多限制，且用药期间须做血气分析及测定钾、钠含量。 如此烦琐的用药操作对于急救治疗非常不利；又因用药时带入了大量的钾离子、 钠离子和氯离子，极易造成患者体内电解质失衡，且钾离子对血管有明显的刺 激作用，用药时病人往往疼痛难忍。因病人的高血氨状态是最为凶险的症状， 直接影响病人生存及预后恢复，因此肝性脑病治疗中，降血氨药的选择及应用 是十分关键的。
精氨酸和谷氨酸溶于水，5℃下加入无水甲醇，进行反复重结晶得精氨酸谷 氨酸盐，然后60℃真空干燥制备精氨酸谷氨酸盐成品(参见美国专利： US2851482)。
精氨酸和谷氨酸两者作用结合，可迅速有效地解除高氨血状态，治疗高血 氨症，避免产生严重器官损害。精氨酸谷氨酸药物经静脉输入体内可分解成精 氨酸和谷氨酸，其中精氨酸在人体内参与鸟氨酸循环，促进尿素的形成，使人 体内产生的氨，经鸟氨酸循环转变成无毒的尿素，由尿中排出；谷氨酸能与血 中过多的氨结合成无毒的谷氨酰胺，后者在肾脏经谷胺酰胺酶作用将氨解离， 由尿排出。
精氨酸和谷氨酸虽是人体非必需氨基酸，但均具有极其重要的生理功能。 精氨酸可用作营养支持剂。谷氨酸在体内代谢容易失去氨基，与酮酸发生转移 反应，能合成其它氨基酸。谷氨酸在体内被吸收，可作为营养增补剂。
另外，精氨酸能促进伤口的愈合作用，可促进胶原组织的合成，修复伤口。 精氨酸还能降低肿瘤的转移率，提高动物的活存时间与存活率。谷氨酸具有兴 奋性递质作用，可对皮层神经元产生兴奋性影响是改进和维持脑功能必不可少 氨基酸。
精氨酸和谷氨酸均为对人体有益的氨基酸，具有保肝护肝的作用，可恢复 受损的肝功能，增强人体免疫能力。
发明内容
本发明研究人员经过长期试验研究，研制出一种精氨酸谷氨酸药物制剂， 该制剂将精氨酸谷氨酸盐作为原料药，与适宜的药用辅料结合制成制剂。本发 明药物制剂操作工艺简单，环境污染小，适合大工业生产，生物利用度高，动 物试验结果表明精氨酸谷氨酸药物制剂具有明显的降血氨的药理作用。
本发明的目的在于提供一种操作工艺简单，环境污染小，适合大工业生产， 生物利用度高的注射用精氨酸谷氨酸药物制剂。
本发明的目的在于提供的一种具有明显降血氨的精氨酸谷氨酸药物制剂。
本发明的目的还在于提供一种精氨酸谷氨酸药物制剂的制备方法。
本发明是通过以下方案实现的：
一、制备工艺
1.本发明处方重量份配比为：
精氨酸∶谷氨酸＝1∶0.2-5；
2.工艺制法：
取处方量精氨酸溶于1-5倍量的水，室温下搅拌加入谷氨酸，溶解，过滤， 滤液减压浓缩，得到精氨酸谷氨酸组合物；
A.精氨酸谷氨酸冻干粉针制剂
①将精氨酸谷氨酸组合物加入到1-5重量份冻干药用赋形剂，搅拌均匀，再 溶于1-10倍量注射用水中，使溶解，用pH调节剂调节溶液pH值6.0-8.0，加 0.1-2％(W/V)活性炭，室温下，搅拌脱色10-60min，过滤，滤液再经微孔滤 膜过滤除菌，分装，冷冻、真空干燥、压塞、压盖，得冻干粉针制剂成品；
②将精氨酸谷氨酸组合物加到1-10倍量注射用水，搅拌使溶解，制得溶液 A；将1-5重量份冻干药用赋形剂加1-3倍量注射用水，搅拌使溶解，制得溶液 B；将A、B两溶液混合，用pH调节剂调节溶液pH值6.0-8.0，加0.1-2％(W/V) 活性炭，室温下搅拌、脱色10-60min，加入无菌注射用水，过滤，滤液再经微 孔滤膜过滤除菌，分装，冷冻、真空干燥、压塞、压盖，得冻干粉针制剂成品；
③将精氨酸谷氨酸组合物加到1-10倍量注射用水，搅拌使溶解，用pH调 节剂调节溶液pH值6.0-8.0，加0.1-2％(W/V)活性炭，室温下搅拌、脱色 10-60min，过滤，滤液再经微孔滤膜过滤除菌，分装，冷冻、真空干燥、压塞、 压盖，得冻干粉针制剂成品；
B.精氨酸谷氨酸无菌粉针制剂
①在无菌条件下，将精氨酸谷氨酸组合物加到1-10倍量注射用水，室温下 搅拌溶解，用pH调节剂调节溶液pH值6.0-8.0，过滤，滤液在无菌条件下喷雾 干燥，精制得到无菌药物粉末，然后将所制备的无菌粉末在无菌条件下，定量， 无菌分装，得无菌粉针制剂成品；
②在无菌条件下，将精氨酸谷氨酸组合物加到1-5倍量注射用水，60-90℃ 温度下搅拌溶解，用pH调节剂调节溶液pH值6.0-8.0，过滤，滤液静置12-48 小时，室温冷却、析出结晶，收集结晶，真空干燥，粉碎，分装，压塞，压盖， 得无菌粉针制剂成品；
C.精氨酸谷氨酸颗粒剂
将精氨酸谷氨酸组合物与1-5重量份的药用辅料混合均匀，制粒，干燥，整 粒，制成颗粒剂成品；
D.精氨酸谷氨酸散剂
将精氨酸谷氨酸组合物粉碎、过筛、混合均匀，分剂量，制成散剂成品。
本发明所述的冻干粉针制剂的药用赋形剂为甘露醇、葡萄糖、右旋糖酐、 蔗糖、乳糖、聚乙烯吡咯烷酮、山梨醇中的一种。
本发明所述的冻干粉针制剂、无菌粉针剂的pH调节剂为酸性调节剂、碱性 调节剂。
本发明所述的冻干粉针制剂、无菌粉针剂的酸性pH调节剂为枸橼酸、柠檬 酸、乙酸中的一种。
本发明所述的冻干粉针制剂、无菌粉针剂的碱性pH调节剂为氢氧化钠、磷 酸二氢钠、磷酸氢二钠、乙酸钠、枸橼酸钠、碳酸氢钠、碳酸钠中的一种。
本发明所述的冻干粉针制剂、无菌粉针剂的针用活性炭为767型针剂用活 性炭、732型针剂用活性炭、ZC-1型针剂用活性炭中的一种。
本发明所述的注射用精氨酸谷氨酸制剂还可用于静脉注射和肌肉注射。
本发明所述颗粒剂的药用辅料为淀粉、乳糖、糖粉、糊精、微晶纤维素中 的任意一种。
二、药理试验
试药：本发明精氨酸谷氨酸药物制剂(按本发明制备工艺制备，由北京和 为康医药科技有限公司实验室提供)；谷氨酸钠(西南药业股份有限公司)、谷 氨酸钾(北京紫竹药业有限公司)、注射用门冬氨酸鸟氨酸(武汉启瑞药业有限 公司)(阳性对照药物，市售品)。
1.精氨酸谷氨酸降血氨作用
试验用动物：成年雄性小鼠50只，体重为270～320g，分为空白对照组、模 型组、精氨酸谷氨酸冻干粉针组、精氨酸谷氨酸水针组、门冬氨酸鸟氨酸组五 组。分别给小白鼠腹腔注射80g/L NH4Cl 0.01L/kg，制成肝性脑病氨中毒模型， 其中空白对照组注射生理盐水。30分钟后由静脉分别注射生理盐水、生理盐水、 精氨酸谷氨酸冻干粉的生理盐水溶液(剂量为10mmol/kg)、精氨酸谷氨酸水针 注射液(剂量为10mmol/kg)、门冬氨酸鸟氨酸的生理盐水溶液(剂量为 10mmol/kg)，1小时后抽取血液样本，立即封存于-5℃的冰盐水中，并在-5℃下 离心，取清夜，用酶法进行分析，其结果如下(括号内为试验动物数)：
表1静脉注射精氨酸谷氨酸降血氨的试验结果
组别 空白对 照组 模型组 精谷氨酸 粉针组 精谷氨酸水 针组 门冬氨酸鸟 氨酸组 血氨浓度(umol/L) 45±9(5) 135±12(10) 65±4(10) 75±4(10) 98±8(10)
2.精氨酸谷氨酸预防高血氨作用
试验动物为成年雄性小鼠40只，体重为240～285g，分为四组，分别为：空 白对照组、醋酸胺(模型)组、精氨酸谷氨酸无菌粉针组、谷氨酸钠组。除空 白组外，均喂食剂量为40mmol/kg/d的醋酸胺，造成氨中毒模型，其中精氨酸谷 氨酸无菌粉针组和谷氨酸钠组还分别肌肉注射剂量为40mmol/kg/d的精氨酸谷 氨酸、谷氨酸钠，连续喂食3天后再分别抽取血液样本，立即封存于-5℃的冰盐 水中，并在-5℃下离心，取清夜，用酶法进行分析，其结果如下(括号内为试验 动物数)：
表2精氨酸谷氨酸无菌粉针降血氨的试验结果
组别 空白对 照组 模型组 精谷氨酸无 菌粉针组 谷氨酸钠组 血氨浓度(umol/L) 55±8(5) 125±10(10) 67±9(10) 110±8(10)
上述试验证明，精氨酸谷氨酸与氨作用，从而达到清除血液中氨，预防和抑 制高血氨症的目的。
3.精氨酸谷氨酸对CCl4诱导的高血氨症的作用
Wistar雄性大白鼠40只，体重200～250g，分成四组，分别是空白对照组、 模型组、精氨酸谷氨酸冻干粉针组以及门冬氨酸鸟氨酸组。实验开始每日一次 给大鼠灌胃20％CCl4石蜡溶液5ml/kg，连续2天，大鼠禁食12 h后，切除2/3 肝脏，建立大鼠HE动物模型。空白对照组相应地同时灌胃同等体积的生理盐水， 并行假手术(剖腹但不切肝)。术后空白对照组、模型组注射生理盐水，另外两组 分别注射精氨酸谷氨酸的生理盐水溶液(剂量为10mmol/kg)、门冬氨酸鸟氨酸 的生理盐水溶液(剂量为10mmol/kg)。于实验第8天在乙醚麻醉下对大鼠心脏 采血，取肝组织标本。取1ml置于无热原肝素管中迅速用全自动血氨分析仪测 血氨(BA)；取2ml全血，分离血浆后以全自动生化分析丙氨酸转氨酶(ALT)、总 胆红素(TBil)、尿素氮(BUN)。试验结果见表3。
表3注射精氨酸谷氨酸对CCl4诱导的高血氨症的影响
组别 n ALT(IU/L) TBil(IU/L) BUN(mmol/L) BA(mg/L) 空白对照组 10 59±14.4 9.8±4.7 5.2±1.3 1.0±0.4 模型组 10 1339.4±302.4 73.4±19.2 8.2±7.3 5.3±2.5 精氨酸谷氨酸组 10 60.1±23.2 10.2±5.3 5.8±5.4 1.2±2.9 门冬氨酸鸟氨酸 10 79.4±22.6 15.6±4.7 7.0±2.3 2.7±8.2
三、制备实施例
实施例1
将17.4g的精氨酸与14.7g的谷氨酸加入32.1g乳糖，溶于300ml注射用水 中，搅拌均匀，枸橼酸钠调节溶液pH值为7.0，加0.1％(W/V)732型针剂用 活性炭，室温下搅拌脱色10-60min，过滤，滤液再经微孔滤膜过滤除菌，分装， 冷冻、真空干燥、压塞、压盖，得冻干粉针制剂成品。
实施例2
将8.7g的精氨酸与14.7g的谷氨酸溶于120ml注射用水中，搅拌均匀，制 得溶液A；将46.8g乳糖溶于100ml注射用水中，搅拌使溶解，制得溶液B；将 A、B两溶液混合，碳酸钠调节溶液的pH值为7.0，加0.1％(W/V)732型针 剂用活性炭，室温下搅拌脱色10-60min，过滤，滤液再经微孔滤膜过滤除菌， 分装，冷冻、真空干燥、压塞、压盖，得冻干粉针制剂成品。
实施例3
将17.4g的精氨酸与7.3g谷氨酸加到90ml注射用水，搅拌使溶解，制得溶 液A，将49.0g甘露醇加150ml注射用水，搅拌混合均匀，枸橼酸调节溶液的 pH值为7.0，加0.2％(W/V)732型针剂用活性炭，室温下搅拌脱色10-60min， 过滤，滤液再经微孔滤膜过滤除菌，分装，冷冻、真空干燥、压塞、压盖，得 冻干粉针制剂成品。
实施例4
将34.7g精氨酸和29.4g谷氨酸加到65ml注射用水，搅拌使溶解，枸橼酸 钠调节溶液的pH值为7.0，0.1％(W/V)767型针剂活性炭，室温下搅拌、脱色 10-60min，加入无菌注射用水，过滤，滤液再经微孔滤膜过滤除菌，分装，冷冻、 真空干燥、压塞、压盖，得冻干粉针制剂成品。
实施例5
将17.4g精氨酸和73.5g谷氨酸加到455ml注射用水，搅拌使溶解，制得溶 液A；将90.9g冻干药用赋形剂加91ml注射用水，搅拌使溶解，制得溶液B； 将A、B两溶液混合，磷酸氢二钠调节溶液pH值6.0，加0.2％(W/V)767型针 剂用活性炭，室温下搅拌、脱色10-60min，加入无菌注射用水，过滤，滤液再 经微孔滤膜过滤除菌，分装，冷冻、真空干燥、压塞、压盖，得冻干粉针制剂 成品。
实施例6
将17.4g精氨酸和14.7g谷氨酸加入32.1g右旋糖酐，搅拌均匀，再加160ml 注射用水，搅拌使溶解，乙酸钠调节溶液的pH值为7.0，加0.2％(W/V)ZC-1 型针剂用活性炭，室温下搅拌、脱色10-60min，加入无菌注射用水，过滤，滤 液再经微孔滤膜过滤除菌，分装，冷冻、真空干燥、压塞、压盖，得冻干粉针 制剂成品。
实施例7
将87g精氨酸和14.7g谷氨酸加入102g甘露醇，搅拌均匀，再加205ml注 射用水，搅拌使溶解，柠檬酸调节溶液的pH值为8.0，加0.1％(W/V)ZC-1型 针剂用活性炭，室温下搅拌、脱色10-60min，加入无菌注射用水，过滤，滤液 再经微孔滤膜过滤除菌，分装，冷冻、真空干燥、压塞、压盖，得冻干粉针制 剂成品。
实施例8
将17.4g精氨酸和29.4g谷氨酸加到375ml注射用水，搅拌使溶解，碳酸氢 钠调节溶液的pH值为6.0，0.2％(W/V)767型针剂活性炭，室温下搅拌、脱色 10-60min，加入无菌注射用水，过滤，滤液再经微孔滤膜过滤除菌，分装，冷冻、 真空干燥、压塞、压盖，得冻干粉针制剂成品。
实施例9
在无菌条件下，将17.4g精氨酸、14.7g谷氨酸加到100ml注射用水，室温 下搅拌使溶解，碳酸氢钠调节溶液的pH值为7.0，过滤，滤液在无菌条件下喷 雾干燥，精制得到无菌药物粉末，然后将所制备的无菌粉末在无菌条件下，定 量，无菌分装，得无菌粉针制剂成品。
实施例10
在无菌条件下，将17.4g精氨酸、29.4g谷氨酸加到188ml注射用水，60-90℃ 温度下加热搅拌使溶解，磷酸二氢钠调节溶液的pH值为7.0，过滤，滤液在无 菌条件下喷雾干燥，精制得到无菌药物粉末，然后将所制备的无菌粉末在无菌 条件下，定量，无菌分装，得无菌粉针制剂成品。
实施例11
在无菌条件下，将17.4g精氨酸、73.5g谷氨酸加到727ml注射用水，60-90℃ 温度下加热搅拌使溶解，氢氧化钠调节溶液的pH值为7.0，过滤，滤液在无菌 条件下喷雾干燥，精制得到无菌药物粉末，然后将所制备的无菌粉末在无菌条 件下，定量，无菌分装，得无菌粉针制剂成品。
实施例12
在无菌条件下，将17.4g精氨酸、14.7g谷氨酸加到32.1ml注射用水，60-90℃ 温度下搅拌溶解，枸橼酸钠调节溶液的pH值为7.0，过滤，滤液静置12-48小 时，室温冷却、析出结晶，收集结晶，真空干燥，粉碎，分装，压塞，压盖， 得无菌粉针制剂成品。
实施例13
在无菌条件下，将34.8g精氨酸、14.7g谷氨酸加到50ml注射用水，60-90℃ 温度下搅拌溶解，乙酸调节溶液的pH值为8.0，过滤，滤液静置12-48小时， 室温冷却、析出结晶，收集结晶，真空干燥，粉碎，分装，压塞，压盖，得无 菌粉针制剂成品。
实施例14
在无菌条件下，将87g精氨酸、14.7g谷氨酸加到203ml注射用水，60-90℃ 温度下搅拌溶解，柠檬酸调节溶液的pH值为8.0，过滤，滤液静置12-48小时， 室温冷却、析出结晶，收集结晶，真空干燥，粉碎，分装，压塞，压盖，得无 菌粉针制剂成品。
实施例15
在无菌条件下，将17.4g精氨酸、73.5g谷氨酸加到542ml注射用水，60-90℃ 温度下搅拌溶解，磷酸氢二钠调节溶液的pH值为6.0，过滤，滤液静置12-48 小时，室温冷却、析出结晶，收集结晶，真空干燥，粉碎，分装，压塞，压盖， 得无菌粉针制剂成品。
实施例16
将17.4g精氨酸、14.7g谷氨酸与64.2g淀粉混合均匀，制粒，干燥，整粒， 制成颗粒剂成品。
实施例17
将34.8g精氨酸、14.7g谷氨酸与49.5g微晶纤维素混合均匀，制粒，干燥， 整粒，制成颗粒剂成品。
实施例18
将17.4g精氨酸、29.4g谷氨酸与234g乳糖混合均匀，制粒，干燥，整粒， 制成颗粒剂成品。
实施例19
将17.4g精氨酸、14.7g谷氨酸粉碎成细粉，过筛混合均匀即制成精氨酸谷 氨酸散剂成品。