《驱虫剂.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《驱虫剂.pdf（10页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、(10)授权公告号 CN 101107002 B (45)授权公告日 2011.07.20 CN 101107002 B *CN101107002B* (21)申请号 200680002644.8 (22)申请日 2006.01.19 0501220.8 2005.01.21 GB A61K 31/635(2006.01) A61K 31/366(2006.01) A61K 35/74(2006.01) A61K 9/12(2006.01) A61P 33/10(2006.01) (73)专利权人 诺布鲁克有限公司 地址 英国邓恩郡 (72)发明人 威廉布莱克利 莉莲克罗密 (74)专利代理机。
2、构 深圳市顺天达专利商标代理 有限公司 44217 代理人 郭伟刚 李琴 US 20030180350 A1,2003.09.25, 说明书第 4 页实施例 4, 实施例 5, 说明书第 2 页第 27 段 , 说明书第 4 页第 63 段 . (54) 发明名称 驱虫剂 (57) 摘要 本发明涉及一种体表用驱虫剂， 包含作为活 性成分的至少一种从阿佛曼菌提取得到的有效驱 虫药剂， 即大环内酯如阿维菌素或由其化学改性 或合成的衍生物， 例如伊维菌素， 以及另一种磺胺 类驱虫药剂如氯舒隆， 包含于便于体表给药和所 述活性成分的透皮给药的载体内。例如， 用于此 目的的载体包括醇类溶剂如乙醇和异丙醇。
3、， 还可 选择性的加有赋形剂和辅助剂， 其包括聚合物如 PVP 或泊洛沙姆。 (30)优先权数据 (85)PCT申请进入国家阶段日 2007.07.19 (86)PCT申请的申请数据 PCT/GB2006/000211 2006.01.19 (87)PCT申请的公布数据 WO2006/077429 EN 2006.07.27 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 樊江波 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书 1 页 说明书 8 页 CN 101107002 B1/1 页 2 1. 一种体表用驱虫剂， 包括作为活性成分的至少一种从阿佛曼菌提取得到的具有有。
4、效 治疗剂量的驱虫药剂， 和至少另外一种具有有效治疗剂量的磺胺类驱虫药剂， 包含于便于 体表给药和所述活性成分透皮给药的基于醇类溶剂的载体中， 其中所述基于醇类溶剂的载 体包括至少30(v/v)的乙醇和异丙醇加至100， 并可选择性的加有赋形剂和辅助剂， 其 中所述从阿佛曼菌提取得到的具有有效治疗剂量的驱虫药剂是伊维菌素， 且所述磺胺类驱 虫药剂是氯舒隆。 2. 根据权利要求书 1 所述的体表用驱虫剂， 其中所述驱虫药是喷洒型药剂。 3. 根据权利要求书 1 所述的体表用驱虫剂， 其中所述驱虫药包含有阿维菌素。 4. 根据权利要求 1 所述的体表用驱虫剂， 其特征在于， 所述驱虫药用在感染了肝。
5、片吸 虫的动物的皮肤上时， 至少 90的成年肝片吸虫被杀灭。 5. 根据权利要求 4 所述的体表用驱虫剂， 其中用于牛的氯舒隆的有效治疗剂量是至少 5 (w/v)。 6. 根据权利要求 1-5 中任一项权利要求所述的体表用驱虫药剂， 其中所述载体包括聚 合物。 7. 根据权利要求 1 所述的体表用驱虫剂， 所述驱虫药在使用中至少在血浆中每毫升有 2g 的苯磺酰胺。 8. 一种用于牛的根据权利要求 1 所述的体表用驱虫剂， 其剂量率控制在每千克体重提 供 500g 伊维菌素和 5mg 氯舒隆。 9. 一种用于牛的体表用驱虫剂， 采用喷洒型药剂， 包含如下成分 ： 伊维菌素 0.5 (w/v) 氯。
6、舒隆 5.0 (w/v) 乙醇 30 v/v PEG20010 v/v 辛酸鲸蜡硬脂酯和肉豆寇酸异丙酯 20 v/v 异丙醇加至 100 v/v 亮蓝染料 0.01 (w/v) 苯甲地那铵 0.001 (w/v) 。 权 利 要 求 书 CN 101107002 B1/8 页 3 驱虫剂 技术领域 0001 本 发 明 涉 及 一 种 对 易 感 反 刍 动 物 ( 尤 其 是 牛 ) 身 上 的 肝 片 吸 虫 (Fasciolahepatica)、奥 氏 奥 斯 特 线 虫 (Ostertagia ostertagi)、肿 孔 古 柏 线 虫 (Cooperiaoncophora) 感染有。
7、疗效的合成物。 背景技术 0002 肝片吸虫、 奥氏奥斯特线虫、 肿孔古柏线虫在牲畜身上的感染是一个未解决的问 题， 尤其是春季放牧的牛在被污染的牧场很容易被感染。包含伊维菌素 (ivermectin) 和氯 舒隆 (Clorsulon) 的注射剂是目前已知的用于治疗肉牛和非哺乳期牛的方法。 0003 氯舒隆是属于苯磺酰胺族 (benzenesulfonamide) 的化合物， 被推荐用于控制牛 身上的成年肝吸虫(liver fluke)， 使用时采用悬液口服或皮下注射的形式。 口服的剂量是 7mg/kg 体重 (bw)， 皮下注射是 2mg/kg 体重。目前， 体表用药剂还未研究出来， 很可。
8、能是因 为氯舒隆不能很好地渗透入皮肤。 0004 本发明的一个目的是提供一种能够有效治疗前述感染的体表用药剂， 优选提供 一种喷洒型药剂。本发明的另一个目的是提供一种合成物， 包括至少一种从阿佛曼菌 (streptomyces avermitilis) 提取得到的有效药剂， 即大环内酯 (macrocyclic lactone) 或由其化学改性或合成的衍生物， 以及另外一种磺胺类驱虫药。本发明的另一个目的是提 供一种适于治疗未成熟的肝吸虫病的合成物。 0005 考虑到这些目的， 对生产包含有本领域已经认可的采用其它给药方式 ( 如针剂 ) 对牛身上的肝片吸虫 ( 成年的 )、 奥氏奥斯特线虫 。
9、( 成年的 ) 和肿孔古柏线虫 ( 成年的 ) 提 供有效治疗的已知药剂成分的体表用药剂进行了可行性研究。 0006 考虑到本研究的目的， 新的药剂包括至少一种二磺酰胺类驱虫剂， 如作为苯磺酰 胺族成员的氯舒隆 (CAS 号 ： 60200-06-84 ； 4- 氨基 -6- 三氯乙基 -1， 3- 苯硫酰 )， 以及适 合于治疗未成熟的肝吸虫的阿维菌素， 例如伊维菌素， 半合成大环内酯的混合物 (CAS 号 ： 70288-86-7 ； 22， 23- 二氢 -C076B， 其为 80的伊维菌素成分 B1a(5-O- 去甲基 -22， 23-二氢阿维菌素A1a)和20的伊维菌素成分B1b(5。
10、-O-去甲基1-35-去(1-甲基丙基)-22， 23- 二氢 -35-(1- 甲基乙基 ) 阿维菌素 A1a)。 0007 本研究使用Norbrook Laboratories公司研发部被认可的动物设施对健康的欧洲 牛进行了实验， 与现行工业实践中的权威协议相符合。 0008 在研究中， 每只牛用 500 个肝吸虫后囊蚴、 10000 个奥氏奥斯特线虫的幼虫、 10000 个肿孔古柏线虫的幼虫来感染。在感染肝吸虫后的第 79 天和感染奥氏奥斯特线虫及肿孔 古柏线虫后的第32天， 用Norbrook Laboratories公司研发的包含伊维菌素和氯舒隆的喷 洒剂对这些动物进行治疗。治疗大约 。
11、3 周后， 所有的动物都被宰杀， 并且肝、 皱胃、 小肠被摘 除。这些器官经处理， 以便于对每个器官中的寄生虫的数量进行计数。 0009 在本研究中用到的牛在选择时和在整个研究周期中都是健康的。 牛对测试用的喷 洒产品有很好的耐受性， 并且在研究的过程中没有产生治疗副作用。 说 明 书 CN 101107002 B2/8 页 4 0010 屠宰后实验动物携带的肝片吸虫、 奥氏奥斯特线虫、 肿孔古柏线虫的数量与未经 治疗的组进行对比， 确证对每种寄生虫都有 90的效果， 因此可以得出结论， 测试的喷洒 产品对牛身上的成年肝片吸虫、 成年奥氏奥斯特线虫、 成年肿孔古柏线虫感染有很好的疗 效。 00。
12、11 测试的喷洒产品 ( 包含伊维菌素和氯舒隆 ) 在治疗牛的成年肝片吸虫、 成年奥氏 奥斯特线虫和成年肿孔古柏线虫感染时用喷洒给药的方法时， 每千克体重 500g 的伊维 菌素和 5mg 氯舒隆的标定剂量的疗效最被认可。 发明内容 0012 因此， 本发明提供一种至今尚未出现的体表用药剂， 包括作为活性成分的至少一 种从阿佛曼菌(streptomyces avermitilis)提取得到的有效药剂， 即大环 内酯， 例如阿维 菌素或由其化学改性或合成的衍生物如伊维菌素， 以及另外一种磺胺类驱虫药， 例如氯舒 隆， 包含在便于体表给药和活性成分透皮给药的载体中。所述载体包括醇类溶剂并可选择 性。
13、的加有赋形剂和辅助剂， 可包括聚合物如 PVP 或泊洛沙姆 (poloxamer)。优选地， 提供了 一种包含伊维菌素和氯舒隆的喷洒药剂。 所述基于醇类溶剂的载体包括至少30(v/v)的 乙醇和异丙醇加至 100， 其中所述从阿佛曼菌提取得到的具有有效治疗剂量的驱虫药剂 是伊维菌素， 且所述磺胺类驱虫药剂是氯舒隆。 0013 在所述的体表用驱虫药剂中， 用于牛的氯舒隆的有效治疗剂量是至少5(w/v)。 0014 在所述的体表用驱虫药剂中， 所述驱虫药在使用中至少在血浆中每毫升有 2g 的苯磺酰胺。 0015 本发明的所提出的药剂的一个实施例是 ： 0016 伊维菌素 0.5 (w/v) 氯舒隆。
14、 5.0 (w/v) 0017 乙醇 30 v/v PEG200 10 v/v 0018 辛酸鲸蜡硬脂酯和肉豆寇酸异丙酯 (Crodamol Cap)20 v/v 0019 异丙醇加至 100v/v 0020 亮蓝染料 0.01 (w/v) 苯甲地那铵 0.001 (w/v) 0021 其标定剂量比是每千克体重使用 500g 的伊维菌素和 5mg 的氯舒隆。 0022 使用这样的药剂， 记数未成熟肝片吸虫感染的方法得以实现。 具体实施方式 0023 实验过程 0024 本研究使用一组 4 只雄性小牛， 在感染肝片吸虫时约 3 至 4 个月大。粪便中的虫 卵使用单独的设备进行记数， 以保证动物在。
15、感染肝片吸虫囊蚴之前是不带寄生虫的。动物 在感染肝吸虫之前先驯养了 19 天。 0025 在治疗之前 ( 在开始治疗之前 79 天 )， 所有的小牛先用 500 个肝片吸虫囊蚴经 口腔感染， 之后， ( 在开始治疗之前 32 天 )， 所有小牛用 10000 个奥氏奥斯特线虫的幼虫、 10000个肿孔古柏线虫的幼虫经口腔感染。 小牛在使用本发明的喷洒药剂之前3天被称重， 便于计算每只动物需要的剂量。小牛在治疗之后的第 18 天被屠宰， 将肝、 皱胃、 小肠取出并 进行处理， 便于计算其内寄生虫的个数。 说 明 书 CN 101107002 B3/8 页 5 0026 本发明的喷洒药剂的标定剂量。
16、包含 0.5 w/v 的伊维菌素和 5.0 w/v 的氯舒隆， 经化验其含有 0.498 w/v 的伊维菌素和 4.94 w/v 的氯舒隆。这提供了 每千克体重使 用 500g 伊维菌素和 5mg 氯舒隆的标定剂量浓度。 0027 该喷洒产品用体表给药的方式在每只动物背部中间的肩隆部和尾根部之间 24 英 寸长的窄条区域内给药。这便是本发明喷洒药剂的建议给药方式。针对每只动物使用的所 有剂量都是使用精度为 0.5ml 的 20ml 注射器一次给药的。每只动物的剂量详见表 1。 0028 肝吸虫记数 ： 肝吸虫是通过将有标记的容器的内容物倒空到平底玻璃皿的方式来 记数的。玻璃皿底部的黑色表面有助。
17、于识别小的或未成熟的肝吸虫。总数被记录下来。记 数是由单独的外部服务提供者进行的， 并且是在不做组内参考的情况下进行的。 0029 线虫类记数 ： 每个带标记的广口瓶内的内容物分开进行检查。少量的被倒入皮氏 培养皿中， 在该培养皿底部有相互间距离为 1cm 的平行线。然后用手术显微镜对蠕虫进行 记数。由于在样本处理过程中加入了碘酒对线虫染色， 如果必要的话可用硫代硫酸钠对背 景进行褪色。每个广口瓶的记数数量被单独记录下来， 并且被乘以 100( 原始稀释系数 )。2 次记数取平均来得到最终值。线虫通过如下方法识别 ： 挑选出线虫的雄性虫体到含有乳酸 酚的胎盘 (embryodish) 上， 并。
18、将其转移到载玻片上， 加入 1 滴乳酸酚， 置一盖玻片于其上。 用标准的寄生虫学教科书上的方法便可以识别出虫体。记数是用单独的设备进行的， 并且 是在不做组内参考的情况下进行的。 0030 分析 0031 在屠宰后， 从每个动物身上得到的肝片吸虫、 奥氏奥斯特线虫、 肿孔古柏线虫的数 量用求平均、 几何平均、 最小值、 最大值和样本量进行总结。 由于本研究不包括控制组， 控制 组结果就从使用相同程度的感染并在相同感染阶段屠宰(成年肝吸虫和成年线虫)的平行 研究来获得。使用该控制组结果计算效果如下 ( 参见表 3a-5b 的所有结果 ) ： 0032 0033 组内几何平均值用双样本 t- 检验。
19、算法在进行对数变换将数据进行标准化之后进 行比较。如果数据不符合正态分布， 则用非参数检验 ( 即针对不匹配对 的 Mann-Whitney 检验 ) 来比较各组。在数据分析中没有用到协变 (covariant)。 0034 结果 ： 0035 粪便中的虫卵数量 0036 所有在治疗之前的粪便样本没有寄生虫卵。在奥氏奥斯特线虫、 肿孔古柏线虫感 染 29 天后的 4 个粪便样本中的 3 个， 被发现其中有圆线虫类卵 ( 见表 2)。 0037 屠宰后肝片吸虫的数量 ： 0038 肝片吸虫数量汇总 0039 治疗组 控制组 平均 7.75 198.63 最大值 19 264 最小值 1 84 几。
20、何平均 5.16 189.38 说 明 书 CN 101107002 B4/8 页 6 样本数量 4 8 0040 未治疗的控制组的肝吸虫病的平均感染率是 39.7， 这略高于针对接种的囊蚴数 量(每只500个)和牛的年龄所预期的值(基于同类研究， 大约为3035)。 感染的程度 比足以视为感染所需的每只动物20个肝吸虫的平均值高的多(参见VICH GL 12 Efficacy of Anthelmintics ： Specific Recommendations forBovines)。 0041 在治疗时， 感染的肝吸虫在 8 10 周的范围内 ( 参见 VICH GL12 Efficac。
21、yof Anthelmintics ： Specific Recommendations for Bovines)， 需要将其归类为成年的肝吸虫。 0042 杀肝吸虫的治疗效果是97.3(参见表6 ： 效果计算汇总)。 由于正态性的假设不 满足， 故用非参数检验方法Mann-Whitney(Wilcoxon Rank-Sum)检验经对数处理后的数据， 发现经治疗的动物和控制组动物的肝吸虫数量之间的统计差异性是显著的 (p 0.0117)。 表 3 是各自的肝吸虫记数。 0043 屠宰后奥氏奥斯特线虫的数量 0044 奥氏奥斯特线虫数量汇总 0045 治疗组 控制组 平均 0 1937.50 最。
22、大值 0 2950 最小值 0 550 几何平均 0 1646.48 样本数量 4 8 0046 未治疗的控制组的奥氏奥斯特线虫的平均感染率是 19.4， 从接种的幼虫数量 ( 每只 10000 个 ) 和牛的年龄来看， 这是在预期的范围内的 ( 基于相似研究的结果 )。达到 的感染程度比足以视为感染所需的每只动物 100 个线虫的平均值高的多 ( 参见 VICH GL12 Efficacy of Anthelmintics ： SpecificRecommendations for Bovines)。 0047 在感染奥氏奥斯特线虫幼虫后 32 天开始对所有测试动物进行治疗。所以， 在治疗时。
23、， 奥氏奥斯特线虫是在 28 32 天的范围内 ( 参见 VICH GL12 Efficacyof Anthelmintics ： Specific Recommendations for Bovines)， 需要将其归类为成年的奥氏 奥斯特线虫。 0048 治疗的效果是 100.0 ( 参见表 6 ： 效果计算汇总 )。由于正态性的假设不满足， 故用非参数检验方法 Mann-Whitney(Wilcoxon Rank-Sum) 检验经对数处理后的数据， 发现 经治疗的动物和控制组动物的线虫数量的统计差异性是显著的(p0.0107)。 表4是各自 的奥氏奥斯特线虫记数。 0049 屠宰后肿孔古。
24、柏线虫的数量 0050 肿孔古柏线虫数量汇总 0051 治疗组 控制组 平均 100.00 5662.50 最大值 350 7950 0052 最小值 0 3750 几何平均 10.57 5485.59 样本数量 4 8 说 明 书 CN 101107002 B5/8 页 7 0053 未治疗的控制组的肿孔古柏线虫的平均感染率是 56.6， 从接种的幼虫数量 ( 每 只 10000 个 ) 和牛的年龄来看， 这是在预期的范围内的 ( 基于相似研究的结果 )。达到的 感染程度比足以视为感染所需的每只动物 100 个线虫的平均值高的多 ( 参见 VICH GL12 Efficacy of Anth。
25、elmintics ： Specific Recommendationsfor Bovines)。 0054 在治疗时， 肿孔古柏线虫是在 28 32 天的范围内 ( 参见 VICH GL12Efficacy of Anthelmintics ： Specific Recommendations for Bovines)， 需要将其归类为成年的肿孔 古柏线虫。 0055 治疗的效果是 99.8 ( 参见表 6 ： 效果计算汇总 )。由于正态性的假设满足， 故用 参数 t 检验方法对经对数处理后数据进行检验， 发现经治疗的动物和控制组动物的线虫数 量的统计差异性是显著的 (p 0.0244)。表。
26、 5 是各自的肿孔古柏线虫记数。 0056 从显示的结果看， 使用本发明的喷洒药剂， 抗感染 11 周龄的肝片吸虫的效果是 97.3， 因此满足 VICH GL 12(Efficacy of Anthelmintics ： SpecificRecommendations for Bovines( 驱虫剂的功效 ： 牛的特殊参考 ) 中 90的效果要求。数据分析显示， 在 治疗肝吸虫携带时， 治疗效果具有很高的统计差异性。 研究也显示， 本发明的伊维菌素和氯 舒隆喷洒药剂对成年奥氏奥斯特线虫有 100的效果， 对成年肿孔古柏线虫有 99.8的效 果， 再次满足 VICH GL 12 中 90的效。
27、果要求。数据分析显示， 治疗的效果对于线虫携带 具有很高的统计差异性。 0057 本发明的喷洒产品在应用时于牛时有很好的耐受性， 并且在任何治疗阶段都没有 局部性的或者系统性的副作用。 0058 可以得出结论， 本发明所述的伊维菌素 / 氯舒隆喷洒药剂， 以每千克体重 500g 伊维菌素和 5mg 氯舒隆的剂量进行体表给药， 对治疗牛的成年肝片吸 虫、 成年奥氏奥斯特 线虫、 成年肿孔古柏线虫有临床效果。对每种寄生虫， 效果都在 90以上， 并且治疗组和控 制组的数量之间具有显著的统计差异性 (P 0.05)。用这种特殊药剂时， 氯舒隆在治疗的 动物体内的血浆浓度水平在每毫升 1.20g 到 。
28、2.4g 之间， Tmax 值是 54+/-22.9。 0059 表 1 ： 动物和详细剂量 0060 动物标识 品种 性别 年龄 1( 月 ) 体重 2 (Kg) 使用剂量 (ml) DY 1109-2 DY 1819-7 DY 1820-1 DY 2474-2 Fr Fr Ayr Fr M M M M 4.0 3.5 4.0 4.0 201.0 154.0 141.0 187.5 20.0 15.5 14.0 19.0 0061 1- 选择时是大致年龄。 0062 2- 动物在使用喷洒药剂前 3 天称的体重。 0063 Ayr 艾尔夏牛 0064 Fr 弗里斯兰奶牛 0065 M 雄性 说。
29、 明 书 CN 101107002 B6/8 页 8 0066 表 2 ： 粪便中的虫卵记数 ( 在治疗前 3 天 ) 0067 动物标识 圆形线虫数目 (epg) DY 1109-2 DY 1819-7 DY 1820-1 DY 2474-2 0 900 700 800 0068 epg 每克的虫卵数 0069 表 3a ： 肝吸虫记数 ( 治疗组 ) 0070 动物标识 肝吸虫数量 DY 1109-2 8 DY 1819-7 1 0071 DY 1820-1 3 DY 2474-2 9 平均 7.75 几何平均 5.16 最小值 1 最大值 19 样本数量 4 0072 表 3b ： 肝吸。
30、虫记数 ( 控制组 ) 0073 动物标识 肝吸虫数量 DY 351-1 214 DY 1097-3 165 DY 1167-7 84 DY 1184-3 257 DY 1498-7 196 DY 1499-1 264 DY 1500-2 203 DY 1577-7 206 平均 198.63 几何平均 189.38 最小值 84 最大值 264 样本数量 8 说 明 书 CN 101107002 B7/8 页 9 0074 表 4a ： 奥氏奥斯特线虫记数 ( 治疗组 ) 0075 动物标识 奥氏奥斯特线虫数量 DY 1109-2 0 DY 1819-7 0 DY 1820-1 0 0076。
31、 DY 2474-2 0 平均 0 几何平均 0 最小值 0 最大值 0 样本数量 4 0077 表 4b ： 奥氏奥斯特线虫记数 ( 控制组 ) 0078 动物标识 奥氏奥斯特线虫数量 DY 351-1 2950 DY 1097-3 550 DY 1167-7 2650 DY 1184-3 2550 DY 1498-7 1800 DY 1499-1 650 DY 1500-2 2900 DY 1577-7 1450 平均 1937.50 几何平均 1646.48 最小值 550 最大值 2950 样本数量 8 0079 表 5 ： 肿孔古柏线虫记数 ( 治疗组 ) 0080 动物标识 肿孔古。
32、柏线虫数量 DY 1109-2 0 DY 1819-7 350 DY 1820-1 50 DY 2474-2 0 0081 平均 100.00 几何平均 10.57 最小值 0 最大值 350 样本数量 4 说 明 书 CN 101107002 B8/8 页 10 0082 表 5 ： 肿孔古柏线虫记数 ( 控制组 ) 0083 动物标识 肿孔古柏线虫数量 DY 351-1 4800 DY 1097-3 7950 DY 1167-7 7900 DY 1184-3 5550 DY 1498-7 6050 DY 1499-1 4800 DY 1500-2 3750 DY 1577-7 4500 平均 5662.50 几何平均 5485.59 最小值 3750 最大值 7950 样本数量 8 0084 表 6 ： 效果计算汇总 0085 寄生虫 治疗组的几何平均值 控制组的几何平均值 效果百分比 肝片吸虫 5.16 189.38 97.3 奥氏奥斯特线虫 0 1646.48 100.0 肿孔古柏线虫 10.57 5485.59 99.8 说 明 书 。