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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201510575061.5 (22)申请日 2015.09.10 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 105210671 A (43)申请公布日 2016.01.06 (73)专利权人 即墨市第一职业中等专业学校 地址 266200 山东省青岛市即墨市文化路 68号 (72)发明人 刘建军 王雅礼 张崇振 赵勇 万军 张永利 赵煮 綦主昌 (74)专利代理机构 青岛高晓专利事务所(普通 合伙) 37104 代理人 张世功 (51)Int.Cl. A01G 1/04(。
2、2006.01) 审查员 徐龙龙 (54)发明名称 一种段木灵芝培育方法 (57)摘要 本发明属于灵芝培育技术领域， 涉及一种段 木灵芝培育方法； 先将小麦粒浸泡蒸煮并加入麸 皮和生石灰搅拌， 再将小麦粒填满段木上的接种 孔并用塑料袋包裹并结扎封口后对段木袋进行 高压灭菌得段木菌棒， 然后选取马铃薯或大豆 粉、 磷酸二氢钾、 硫酸镁和蒸馏水蒸煮或熬制得 液体母种营养液， 后将灵芝母种接种到灭菌的液 体母种营养液中进行恒温培养得灵芝菌种， 最后 将段木菌棒冷却后接种灵芝菌种并培养， 待菌棒 出现豆粒状灵芝原基时将菌棒埋土出芝， 制得灵 芝； 其工艺步骤简单， 工艺条件易控， 培育周期 短， 食用。
3、菌设施利用率高， 培育效益好， 节能节 源， 原料易得， 培育灵芝品质好。 权利要求书1页 说明书3页 CN 105210671 B 2017.09.29 CN 105210671 B 1.一种段木灵芝培育方法， 其特征在于包括麦粒处理、 母种营养液制备、 液体培养基制 备、 菌种培养、 段木制备、 段木装袋、 接种与发菌管理和出芝管理八个步骤； (1)麦粒处理： 先选取无虫蛀、 无霉变、 无杂质的饱满的小麦粒， 将小麦粒用纯净水浸泡 1020小时， 然后控制温度在95100蒸煮小麦粒3050分钟后， 捞出沥干水分， 再按浸 泡后麦粒的重量加入10的麸皮和0.5的生石灰， 充分搅拌均匀后得处理。
4、后的麦粒； (2)母种营养液制备： 采用两种制备过程， 先选取马铃薯100g， 葡萄糖20g， 麸皮40g， 蛋白胨2g， 磷酸二氢钾2g， 硫酸镁1g， 蒸馏水10001500ml， 先将马铃薯去皮， 切成薄片， 与 麸皮一起放入锅内， 控制温度95100， 蒸煮2030分钟后， 用滤网过滤取滤液， 用量筒定 容至1000ml， 得液体母种营养液； 或选取大豆粉10g， 小麦面粉30g， 白糖20g， 磷酸二氢钾 2g， 硫酸镁1g， 蒸馏水1000ml， 将上述物质在不锈钢锅内， 控制温度95100熬制1530分 钟后， 用量筒定容至10001500ml得液体母种营养液； (3)液体培养基。
5、制备： 将步骤(2)的液体母种营养液进行分装， 用玻璃三角瓶每瓶装200 250ml， 然后用塑料膜进行封口后置于高压锅内， 控制温度120125， 灭菌3040分钟， 即得液体培养基； (4)菌种培养： 将步骤(3)所得的液体培养基置于无菌接种箱内， 按照常规的无菌操作 流程将灵芝母种接种到三角瓶内， 实现无菌接种后， 再将三角瓶移入2527的恒温培养 箱内进行无菌振荡培养， 振荡频率为120转/分， 培养时间为57天， 得液体菌种； (5)段木制备： 选择直径为818cm的树木， 在休眠期进行砍伐， 树木砍伐后1012天进 行截段， 截段长度为1015cm， 截面平整， 然后用粗2cm的钻。
6、头对段木的侧面进行打制接种 孔， 孔深为810cm， 接种孔在段木中均匀分布； (6)段木装袋： 选用耐高温的聚丙烯塑料袋， 先在塑料袋的底部铺一层步骤(1)制备的 麦粒， 再将段木上的接种孔用麦粒填满放在塑料袋中， 然后在段木上表面再铺一层麦粒， 将 塑料袋结扎式封口后， 放入高压灭菌锅中控制温度120127灭菌23小时即可； (7)接种与发菌管理： 将装袋灭菌后的段木冷却至30以下并进行无菌接种， 先将段木 上的接种孔灌满步骤(4)的液体菌种， 然后用步骤(4)的液体菌种封住段木截面， 并将液体 菌种接入段木底部， 每个菌袋用液体菌种3050ml； 再将接种后的段木菌袋立即上架单层 培养，。
7、 控制温度为2430， 段木菌袋接种后23天开始萌发， 一周内菌丝连成片， 菌丝生 长的中后期， 袋内有大量水珠产生时进行通风， 降低空气湿度， 减少袋内积水， 增加袋内氧 气， 促进菌丝向木质部深层生长， 灵芝菌丝经历1520天即布满段木表面， 2040天菌丝达 到生理成熟， 此时菌棒段木的木质呈浅米黄色， 表皮指压有弹性， 截面表面有红褐色菌膜出 现， 菌棒出现豆粒状灵芝原基时， 将有灵芝原基出现的段木面朝上， 并埋土出芝， 菌棒行距6 8cm， 段距46cm， 排列整齐， 上盖23cm细土， 最后喷水保湿， 完成接种与菌期管理； (8)出芝管理： 出芝管理包括控制温度、 湿度、 通风和光。
8、线， 完成步骤(7)的菌棒入土后， 在控温1834条件下， 经过1520天形成芝蕾， 并使芝蕾向上生长形成菌柄， 温度在22 以上时菌盖正常展开， 灵芝原基在2528， 经历1520天后子实体成熟， 形成灵芝； 从灵 芝原基形成到菌盖分化成熟前， 保持8595的空气湿度， 为保证灵芝正常生长， 将灵芝棚 内的CO2浓度通过通风控制在0.1以内， 灵芝生长环境为散射光并避免日光直射， 灵芝光 线管理原则是前期低光照， 后期提高光照， 有利于菌盖的增厚和干物质的积累， 实现段木灵 芝的快速培育。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 105210671 B 2 一种段木灵芝培育方法 技术领域：。
9、 0001 本发明属于灵芝培育技术领域， 涉及一种采用液体灵芝母种， 打入段木接种孔并 添加麦粒提高营养， 实现段木灵芝的快速培育的方法， 特别是一种段木灵芝培育方法。 背景技术： 0002 灵芝的应用已有二千多年的历史， 因其食用和药用价值极高在 本草纲目 中列为 上品， 灵芝是由菌丝体和子实体两大部分组成， 灵芝以死亡倒木为生的木腐性真菌， 对木质 素、 纤维素、 半纤维素等复杂的有机物质具有较强的分解和吸收能力， 灵芝本身含有纤维素 酶、 糖酶和氧化酶等多种酶类， 能把复杂的有机物质分解为自身可以吸收利用的简单营养 物质， 针对传统的段木灵芝栽培制种工艺， 从母种到灵芝栽培一般需要709。
10、0天， 发菌需 23个月， 出灵芝需要23个月， 整个传统灵芝栽培的一个周期至少需要68个月的时间 才能完成， 发菌周期漫长， 出灵芝的质量很难保证， 现阶段的灵芝栽培技术也在不断提高， 如中国专利200910041707.6公开了一种灵芝栽培法； 中国专利申请号为201310623416.4也 公开了一种灵芝的栽培方法等等； 目前根据现阶段的灵芝栽培现状， 尚未发现有采用液体 母种取代传统的固体菌种， 并采用段木打接种孔， 同时增加麦粒提高营养的技术措施， 达到 发菌迅速并出芝健壮的灵芝栽培技术被公开报道或应用。 发明内容： 0003 本发明的目的在于克服现有技术存在的缺点， 寻求设计一种采。
11、用段木快速栽培灵 芝的技术方法， 通过液体母种制作和添加麦粒营养成分， 实现灵芝发菌迅速和出芝健壮的 栽培目的。 0004 为了实现上述目的， 本发明涉及的段木灵芝培育方法包括麦粒处理、 母种营养液 制备、 液体培养基制备、 菌种培养、 段木制备、 段木装袋、 接种与发菌管理和出芝管理八个步 骤； 0005 (1)麦粒处理： 首先选取无虫蛀、 无霉变、 无杂质的饱满的小麦粒， 将小麦粒用纯净 水浸泡1020小时， 然后控制温度在95100蒸煮小麦粒3050分钟后， 捞出沥干水分， 再按浸泡后麦粒的重量加入10的麸皮和0.5的生石灰， 充分搅拌均匀后得处理后的麦 粒； 0006 (2)母种营养液。
12、制备： 采用两种制备过程， 先选取马铃薯100g， 葡萄糖20g， 麸皮 40g， 蛋白胨2g， 磷酸二氢钾2g， 硫酸镁1g， 蒸馏水10001500ml， 先将马铃薯去皮， 切成薄 片， 与麸皮一起放入锅内， 控制温度95100， 蒸煮2030分钟后， 用滤网过滤取滤液， 用 量筒定容至1000ml， 得液体母种营养液； 或选取大豆粉10g， 小麦面粉30g， 白糖20g， 磷酸 二氢钾2g， 硫酸镁1g， 蒸馏水1000ml， 将上述物质在不锈钢锅内， 控制温度95100熬制15 30分钟后， 用量筒定容至10001500ml得液体母种营养液； 0007 (3)液体培养基制备： 将步骤(。
13、2)的液体母种营养液进行分装， 用玻璃三角瓶每瓶 装200250ml， 然后用塑料膜进行封口后置于高压锅内， 控制温度120125， 灭菌3040 说 明 书 1/3 页 3 CN 105210671 B 3 分钟， 即得液体培养基； 0008 (4)菌种培养： 将步骤(3)所得的液体培养基置于无菌接种箱内， 按照常规的无菌 操作流程将灵芝母种接种到三角瓶内， 实现无菌接种后， 再将三角瓶移入2527的恒温 培养箱内进行无菌振荡培养， 振荡频率为120转/分， 培养时间为57天， 得灵芝菌种； 0009 (5)段木制备： 选择直径为818cm的树木， 在休眠期进行砍伐， 树木砍伐后1012 天。
14、进行截段， 截段长度为1015cm， 截面平整， 然后用粗2cm的钻头对段木的侧面进行打制 接种孔， 孔深为810cm， 接种孔在段木中均匀分布； 0010 (6)段木装袋： 选用耐高温的聚丙烯塑料袋， 先在塑料袋的底部铺一层步骤(1)制 备的麦粒， 再将段木上的接种孔用麦粒填满放在塑料袋中， 然后在段木上表面再铺一层麦 粒， 将塑料袋结扎式封口后， 放入高压灭菌锅中控制温度120127灭菌23小时即可； 0011 (7)接种与发菌管理： 将装袋灭菌后的段木菌棒冷却至30以下并进行无菌接种， 先将段木上的接种孔灌满步骤(4)的液体菌种， 然后用步骤(4)的液体菌种封住段木截面， 并将菌种接入段。
15、木底部， 每个菌袋用液体菌种3050ml； 再将接种后的段木菌袋立即上架 单层培养， 控制温度为2430， 菌袋接种后23天开始萌发， 一周内菌丝连成片， 菌丝生 长的中后期， 袋内有大量水珠产生时进行通风， 降低空气湿度， 减少袋内积水， 增加袋内氧 气， 促进菌丝向木质部深层生长， 灵芝菌丝经历1520天即布满段木表面， 2040天菌丝达 到生理成熟， 此时菌棒段木的木质呈浅米黄色， 表皮指压有弹性， 截面表面有红褐色菌膜出 现， 菌棒出现豆粒状灵芝原基时， 将有灵芝原基出现的段木面朝上， 并埋土出芝， 菌棒行距6 8cm， 段距46cm， 排列整齐， 上盖23cm细土， 最后喷水保湿， 。
16、完成接种与菌期管理； 0012 (8)出芝管理： 出芝管理包括控制温度、 湿度、 通风和光线， 完成步骤(7)的菌棒入 土后， 在控温1834条件下， 经过1520天形成芝蕾， 并使芝蕾向上生长形成菌柄， 温度 在22以上时菌盖正常展开， 灵芝原基在2528， 经历1520天后子实体成熟， 形成灵 芝； 从灵芝原基形成到菌盖分化成熟前， 保持8595的空气湿度， 为保证灵芝正常生长， 将灵芝棚内的CO2浓度通过通风控制在0.1以内， 灵芝生长环境为散射光并避免日光直 射， 灵芝光线管理原则是前期低光照， 后期提高光照， 有利于菌盖的增厚和干物质的积累， 实现段木灵芝的快速培育。 0013 本发。
17、明与现有技术相比， 将灵芝的液体母种、 原种及发菌出芝溶于同一段木内， 实 现灵芝制种简短、 发菌迅速、 出芝健壮的栽培目的； 其工艺步骤简单， 工艺条件易控， 培育周 期短， 食用菌设施利用率高， 培育效益好， 节能节源， 原料易得， 培育灵芝品质好。 具体实施方式： 0014 下面通过具体实施例对本发明作进一步详细说明。 0015 实施例1： 0016 本发明涉及的段木灵芝培育方法包括麦粒处理、 母种营养液制备、 液体培养基制 备、 菌种培养、 段木制备、 段木装袋、 接种与发菌管理和出芝管理八个步骤； 0017 (1)麦粒处理： 首先选取无虫蛀、 无霉变、 无杂质的饱满的小麦粒， 将小麦。
18、粒用纯净 水浸泡1020小时， 然后控制温度在95100蒸煮小麦粒3050分钟后， 捞出沥干水分， 再按浸泡后麦粒的重量加入10的麸皮和0.5的生石灰， 充分搅拌均匀后得处理后的麦 粒； 说 明 书 2/3 页 4 CN 105210671 B 4 0018 (2)母种营养液制备： 采用两种制备过程， 先选取马铃薯100g， 葡萄糖20g， 麸皮 40g， 蛋白胨2g， 磷酸二氢钾2g， 硫酸镁1g， 蒸馏水10001500ml， 先将马铃薯去皮， 切成薄 片， 与麸皮一起放入锅内， 控制温度95100， 蒸煮2030分钟后， 用滤网过滤取滤液， 用 量筒定容至1000ml， 得液体母种营养液。
19、； 或选取大豆粉10g， 小麦面粉30g， 白糖20g， 磷酸 二氢钾2g， 硫酸镁1g， 蒸馏水1000ml， 将上述物质在不锈钢锅内， 控制温度95100熬制15 30分钟后， 用量筒定容至10001500ml得液体母种营养液； 0019 (3)液体培养基制备： 将步骤(2)的液体母种营养液进行分装， 用玻璃三角瓶每瓶 装200250ml， 然后用塑料膜进行封口后置于高压锅内， 控制温度120125， 灭菌3040 分钟， 即得液体培养基； 0020 (4)菌种培养： 将步骤(3)所得的液体培养基置于无菌接种箱内， 按照常规的无菌 操作流程将灵芝母种接种到三角瓶内， 实现无菌接种后， 再将。
20、三角瓶移入2527的恒温 培养箱内进行无菌振荡培养， 振荡频率为120转/分， 培养时间为57天， 得灵芝菌种； 0021 (5)段木制备： 选择直径为818cm的树木， 在休眠期进行砍伐， 树木砍伐后1012 天进行截段， 截段长度为1015cm， 截面平整， 然后用粗2cm的钻头对段木的侧面进行打制 接种孔， 孔深为810cm， 接种孔在段木中均匀分布； 0022 (6)段木装袋： 选用耐高温的聚丙烯塑料袋， 先在塑料袋的底部铺一层步骤(1)制 备的麦粒， 再将段木上的接种孔用麦粒填满放在塑料袋中， 然后在段木上表面再铺一层麦 粒， 将塑料袋结扎式封口后， 放入高压灭菌锅中控制温度1201。
21、27灭菌23小时即可； 0023 (7)接种与发菌管理： 将装袋灭菌后的段木菌棒冷却至30以下并进行无菌接种， 先将段木上的接种孔灌满步骤(4)的液体菌种， 然后用步骤(4)的液体菌种封住段木截面， 并将菌种接入段木底部， 每个菌袋用液体菌种3050ml； 再将接种后的段木菌袋立即上架 单层培养， 控制温度为2430， 菌袋接种后23天开始萌发， 一周内菌丝连成片， 菌丝生 长的中后期， 袋内有大量水珠产生时进行通风， 降低空气湿度， 减少袋内积水， 增加袋内氧 气， 促进菌丝向木质部深层生长， 灵芝菌丝经历1520天即布满段木表面， 2040天菌丝达 到生理成熟， 此时菌棒段木的木质呈浅米黄。
22、色， 表皮指压有弹性， 截面表面有红褐色菌膜出 现， 菌棒出现豆粒状灵芝原基时， 将有灵芝原基出现的段木面朝上， 并埋土出芝， 菌棒行距6 8cm， 段距46cm， 排列整齐， 上盖23cm细土， 最后喷水保湿， 完成接种与菌期管理； 0024 (8)出芝管理： 出芝管理包括控制温度、 湿度、 通风和光线， 完成步骤(7)的菌棒入 土后， 在控温1834条件下， 经过1520天形成芝蕾， 并使芝蕾向上生长形成菌柄， 温度 在22以上时菌盖正常展开， 灵芝原基在2528， 经历1520天后子实体成熟， 形成灵 芝； 从灵芝原基形成到菌盖分化成熟前， 保持8595的空气湿度， 为保证灵芝正常生长， 将灵芝棚内的CO2浓度通过通风控制在0.1以内， 灵芝生长环境为散射光并避免日光直 射， 灵芝光线管理原则是前期低光照， 后期提高光照， 有利于菌盖的增厚和干物质的积累， 实现段木灵芝的快速培育。 说 明 书 3/3 页 5 CN 105210671 B 5 。