本发明涉及一种蝎毒素的提取方法,该蝎毒素可用于制造蝎毒注射液。
目前的蝎毒素提取尚没有一个较统一的、规范的方法,整个过程通常都是 在常温下进行,其不足之处是所提取的蝎毒素杂质多、毒蛋白质易被破坏、毒 力低,质量不稳定。特别是在提取的蝎毒素中含有一些对人体有害的物质,制 成蝎毒注射液后,用于人体会出现局部红肿、痒痛、心跳过速、或全身性荨麻 疹过敏性反应,且注射局部的肌肉神经疼痛难忍,而且疗效不确切、不稳定。 采用这种方法提取的蝎毒素不能用于制造蝎毒注射液。
本发明的目的就是克服上述已有技术的不足,提供一种专门用于制造蝎毒 注射液的蝎毒素的提取方法。用该方法提取的蝎毒素质量稳定可靠。
本发明方法是:(一)提毒前饲养:将待提毒蝎子放入黑暗、无噪音、温 度为35-40℃、湿度为40-50%的饲养室中,供给足量的营养丰富的饲料饲养40 -50小时;使蝎子处于活动高峰状态,以备提毒。(二)检选、灭菌:将待提毒 蝎子进行检选,去除受伤或染病的蝎子、选取健康蝎子待用,将选好的蝎子去 杂除尘,并采用紫外线灭菌器照射8-10分钟灭菌;(三)提毒:在无菌环境下, 采用脉冲发生器对蝎子进行电脉冲刺激,使蝎子将体内毒液排出,落入玻璃收 毒器皿内,收毒器皿温度为-3℃-0℃;(四)检验:通过灯检来选出不含有粪 便及脏物等杂质的蝎毒液为合格品待用;而其中含有杂质的蝎毒液为不合格品。 (五)沉淀过滤:将蝎毒液在-3℃-1℃无菌环境静置2.5-3小时自然沉淀,然 后采用0.2-0.3μm微孔滤膜除菌过滤器过滤,以去除其中的纤维沉淀物;(六) 干燥研磨,采用冷冻干燥机进行干燥处理,然后采用带盖玻璃研磨器皿研磨成 粉,装瓶封口密闭备用。
本发明采用的脉冲发生器频率为每秒50-100次、空度比为50-80%、输出 电压为30-50伏。既能有效的刺激蝎子排毒,又能减少蝎子的死伤。提毒后的 蝎子饲养1个月后可再次提毒。
本发明所用蝎子主要是东亚钳蝎。提毒时提取室的温度应在15-20℃,以 使蝎子处于活跃状态。
检选待提毒蝎子时,可以用目测的方法,也可采用检选器进行检选。
检选器包括有箱体、底板和隔板。两块隔板将箱体分为前、中、后三部 分,二块隔板底部各开有一个孔,两个孔位置不在一条直线上。底板采用孔径 为0.2-0.3mm的钢丝网。其检选方法是将待选蝎子放入前箱体内,静待10-15 分钟,从隔板底部两个孔穿过进入后箱体内的蝎子即为选出的健康蝎子。
附图为检选器的结构示意图;
图中:两个隔板(2)、(3)将箱体(1)分隔成前、中、后三个部分,两个 隔板(2)、(3)的间距以1.2-1.5米为宜,两个隔板底部的孔(5)、(4)以 孔径10-15厘米为宜。底板(6)采用钢丝网有助于去除蝎子身上的泥土或杂物。
本发明与已有的提毒方法相比,提取的蝎毒素质量稳定可靠,毒蛋白质不 被破坏,纯度高,主要用作生产蝎毒注射液的原料,该注射液属生物制剂,是 一种用途广泛、无毒付作用和药物依赖性的止痛药。经大量动物试验和临床应 用,已取得国家新药证书并投入批量生产。