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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710009117.X (22)申请日 2017.01.05 (71)申请人 北京农业职业学院 地址 102442 北京市房山区长阳镇稻田南 里5号 (72)发明人 肖海峻 罗红霞 孟利前 陈兰芬 王伟青 郭彤 (74)专利代理机构 北京市京大律师事务所 11321 代理人 刘向辉 王凝 (51)Int.Cl. A01H 4/00(2006.01) (54)发明名称 蓝莓瓶内快速生根方法 (57)摘要 本发明提供一种蓝莓瓶内快速生根方法， 包 括以下步骤： 1)在培养瓶内铺。
2、一层滤纸， 将配制 好的液体培养基倒入瓶内， 之后将该培养瓶及装 有IBA的三角瓶在120-125的高温下灭菌15- 20min备用； 2)选择继代培养30-40天生长健壮的 蓝莓， 将其切成长度为3-4cm的茎段并将其基部 放入IBA溶液中速蘸10-15s， 然后将这些茎段竖 直放入铺有滤纸的培养瓶内； 3)先在暗光条件下 培养一周， 之后在光照强度为1500-2500Lx、 光照 时长为10-14h/d的条件下培养20-30天。 该方法 的生根速度快， 生根率高， 且操作简单， 适宜大规 模生产中使用。 权利要求书1页 说明书4页 CN 106804427 A 2017.06.09 CN 。
3、106804427 A 1.一种蓝莓瓶内快速生根方法， 其特征在于依次包括以下步骤： 1)在培养瓶内铺一层滤纸， 将配制好的液体培养基倒入瓶内， 之后将该培养瓶及装有 IBA的三角瓶在120-125的高温下灭菌15-20min备用； 2)选择继代培养30-40天生长健壮的蓝莓， 将其切成长度为3-4cm的茎段并将其基部放 入IBA溶液中速蘸10-15s， 然后将这些茎段竖直放入铺有滤纸的培养瓶内， 培养基没过蓝莓 茎段1-2cm； 3)先在暗光条件下培养一周， 之后在光照强度为1500-2500Lx、 光照时长为10-14h/d的 条件下培养20-30天。 2.根据权利要求1所述的蓝莓瓶内快速。
4、生根方法， 其特征在于步骤1)中所述液体培养 基配方为1/2WPM+20-30g/L蔗糖， pH为5.8-5.9。 3.根据权利要求2所述的蓝莓瓶内快速生根方法， 其特征在于步骤1)所述的液体培养 基中还可以加入活性炭， 重量百分比浓度为0.20.5。 4.根据权利要求1所述的蓝莓瓶内快速生根方法， 其特征在于步骤1)所述的液体培养 基中还可以加入维生素C， 加入量为0.001-0.002mmol/L。 5.根据权利要求1所述的蓝莓瓶内快速生根方法， 其特征在于步骤2)所述的IBA溶液浓 度为100mg/L200mg/L。 6.根据权利要求1所述的蓝莓瓶内快速生根方法， 其特征在于步骤3)所述。
5、的暗光条件 下是指可以将培养瓶放在暗室内， 也可以用黑布遮盖。 7.根据权利要求1所述的蓝莓瓶内快速生根方法， 其特征在于步骤3)中暗光下及光照 条件下的培养温度均为23-25。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 106804427 A 2 蓝莓瓶内快速生根方法 技术领域 0001 本发明涉及蓝莓组织培养技术领域， 特别是蓝莓瓶内快速生根方法。 背景技术 0002 蓝莓为杜鹃花科越橘属植物， 是具有较高经济价值和广阔开发前景的新兴果树树 种之一。 蓝莓果实营养丰富， 特别是抗氧化能力为所有果品蔬菜之首。 0003 当前， 利用植物组织培养方法可以在短期内快速繁殖多种植物， 不仅繁殖率高。
6、， 且 因为其是无性繁殖， 可以保持原繁殖母株的优良性状， 近年来在生产上应用越来越广。 此 外， 扦插作为苗木繁育的另外一种重要手段， 因其经济、 方便也得到广泛重视。 但蓝莓组培 苗植株纤弱、 生根率较低， 若直接进行扦插其成活率较低。 0004 中国专利CN201210048620.3公开了一种矮丛蓝莓组培苗的练苗及快速生根法。 该 方法包括如下步骤： 将矮丛蓝莓组培苗茎段接种在WPM基本培养基， 在生根培养基上进行生 根培养， 在移栽驯化阶段， 每隔7天喷施浓度为0.140.16的108生根宝一次。 与常规组 培育苗的炼苗和生根方法相比， 可以使矮丛蓝莓种苗生根率提高到90以上； 新苗。
7、成活率 由50上升到90以上， 同时新苗质量也有了显著提高。 但该专利更多的关注蓝莓在移栽 驯化阶段的生根管理措施， 即在生根培养基培养的基础上， 再次通过喷施生根宝进行生根， 从操作过程来看， 操作比较繁琐， 生根所需时间较长。 发明内容 0005 本发明的目的在于克服现有技术存在的上述不足， 提供一种蓝莓瓶内快速生根方 法， 该方法生根速度快， 生根率高， 且操作简单， 适宜大规模生产中使用。 0006 本发明蓝莓瓶内快速生根法依次包括以下步骤： 0007 1)在培养瓶内铺一层滤纸， 将配制好的液体培养基倒入瓶内， 之后将该培养瓶及 装有IBA的三角瓶在120-125的高温下灭菌15-20。
8、min备用； 0008 2)选择继代培养30-40天生长健壮的蓝莓， 将其切成长度为3-4cm的茎段并将其基 部放入IBA溶液中速蘸10-15s， 然后将这些茎段竖直放入铺有滤纸的培养瓶内， 培养基没过 蓝莓茎段1-2cm； 0009 3)先在暗光条件下培养一周， 之后在光照强度为1500-2500Lx、 光照时长为10- 14h/d的条件下培养20-30天。 0010 其中步骤1)中所述液体培养基配方为1/2WPM+20-30g/L蔗糖， pH为5.8-5.9。 0011 步骤1)所述的液体培养基中还可以加入活性炭， 加入量为重量百分比浓度0.2 0.5， 试验发现， 活性炭不仅可以创造一个。
9、暗环境， 而且还可以吸附一些有毒物质， 使根 不容易发生褐变， 有利于根的生长。 0012 步骤1)所述的液体培养基中还可以加入维生素C， 加入量为0.001-0.002mmol/L。 0013 其中步骤1)中所述IBA浓度为100-200mg/L， 根据不同的品种确定最佳浓度。 0014 步骤3)所述的暗光条件下是指可以将培养瓶放在暗室内， 也可以用黑布遮盖。 说 明 书 1/4 页 3 CN 106804427 A 3 0015 步骤3)所述暗光下及光照条件下的培养温度均为23-25。 0016 本发明的有益效果是： 0017 (1)本发明的适用范围较广。 0018 (2)本发明的生根速度。
10、快， 生根率高， 且操作简单， 适宜大规模生产中使用。 0019 蓝莓瓶内使用固体培养基培养， 一般生根时间需要60天左右， 而本发明缩短到20- 30天左右， 生根时间缩短， 成活率可达90以上。 具体实施方式 0020 下面将结合实例对本发明的实施方案进行详细描述， 但是本领域技术人员将会理 解， 下列实施例仅用于说明本发明， 而不应视为限定本发明的范围。 0021 实施例1： 试验品种为奥尼尔 0022 1)在培养瓶内铺一层滤纸， 然后将制备好的液体培养基(配方为1/2WPM+20g/L蔗 糖+0.3活性炭， pH为5.8)倒入培养瓶内， 之后将培养瓶及装有IBA的三角瓶(IBA浓度为 。
11、200mg/L)在121的高温下灭菌15min备用； 2)选择继代培养35天左右且生长健壮的蓝莓， 将其切成长度为3-4cm的茎段， 将其基部放入IBA溶液中速蘸10s， 然后将这些茎段竖着放入 培养瓶中； 3)先在暗光下培养一周， 之后在光照强度为2000Lx、 光照时长为14h/d下的培养 条件下进行培养。 光照下培养30天后生根率92， 平均根长2.7cm， 移栽后成活率可达到 93。 0023 实施例2： 试验品种为奥尼尔 0024 (1)在培养瓶内铺一层滤纸， 然后将制备好的液体培养基(配方为1/2WPM+20g/L蔗 糖， 还含有维生素C， 加入量为0.001mmol/L， pH为。
12、5.8)倒入培养瓶内， 之后将培养瓶及装有 IBA的三角瓶(IBA浓度为200mg/L)在121的高温下灭菌15min备用； 2)选择继代培养35天 生长健壮的蓝莓， 将其切成长度为3-4cm的茎段， 将其基部放入IBA溶液中速蘸10s， 然后将 这些茎段竖着放入培养瓶中； 3)先在暗光下培养一周， 之后在光照强度为2000Lx、 光照时长 为14h/d下的培养条件下进行培养。 光照下培养30天后生根率可达90， 平均根长为2.1cm， 移栽后成活率可达到92。 0025 实施例3： 试验品种为奥尼尔 0026 (1)在培养瓶内铺一层滤纸， 然后将制备好的液体培养基(配方为1/2WPM+20g。
13、/L蔗 糖， pH为5.8)倒入培养瓶内， 之后将培养瓶及装有IBA的三角瓶(IBA浓度为200mg/L)在121 的高温下灭菌15min备用； 2)选择继代培养35天生长健壮的蓝莓， 将其切成长度为3-4cm 的茎段， 将其基部放入IBA溶液中速蘸10s， 然后将这些茎段竖着放入培养瓶中； 3)先在暗光 下培养一周， 之后在光照强度为2000Lx、 光照时长为14h/d下的培养条件下进行培养。 光照 下培养30天后生根率87， 平均根长2.0cm， 移栽后成活率可达到88。 0027 实施例4： 试验品种为奥尼尔 0028 1)在培养瓶内铺一层滤纸， 然后将制备好的液体培养基(配方为1/2W。
14、PM+20g/L蔗 糖+0.3活性炭， pH为5.8， 还含有维生素C， 加入量为0.001mmol/L)倒入培养瓶内， 之后将 培养瓶及装有IBA的三角瓶(IBA浓度为200mg/L)在121的高温下灭菌15min备用； 2)选择 继代培养35天生长健壮的蓝莓， 将其切成长度为3-4cm的茎段， 将其基部放入IBA溶液中速 蘸10s， 然后将这些茎段竖着放入培养瓶中； 3)先在暗光下培养一周， 之后在光照强度为 说 明 书 2/4 页 4 CN 106804427 A 4 2000Lx、 光照时长为14h/d下的培养条件下进行培养。 光照下培养30天后生根率97， 平均 根长3.3cm， 移。
15、栽后成活率可达到97。 0029 实施例5： 试验品种为乔治 0030 1)在培养瓶内铺一层滤纸， 然后将制备好的液体培养基(配方为1/2WPM+20g/L蔗 糖+0.3活性炭， pH为5.8)倒入培养瓶内， 之后将培养瓶及装有IBA的三角瓶(IBA浓度 200mg/L)在121的高温下灭菌15min备用； 2)选择继代培养35天生长健壮的蓝莓， 将其切 成长度为3-4cm的茎段， 将其基部放入IBA溶液中速蘸10s， 然后将这些茎段放入培养瓶中； 3)在暗光下培养一周， 之后在光照强度为2000Lx、 光照时长为14h/d下的培养条件下进行培 养。 光照下培养25天后生根率95， 平均根长1。
16、.2cm， 移栽后成活率可达到90。 0031 实施例6： 试验品种为蓝丰 0032 1)在培养瓶内铺一层滤纸， 然后将制备好的液体培养基(配方为1/2WPM+20g/L蔗 糖， pH为5.8， 还含有活性炭， 重量百分比浓度为0.3)倒入培养瓶内， 之后将培养瓶及装有 IBA的三角瓶(IBA浓度100mg/L)在121的高温下灭菌15min备用； 2)选择继代培养35天生 长健壮的蓝莓， 将其切成长度为3-4cm的茎段， 将其基部放入IBA溶液中速蘸10s， 然后将这 些茎段放入培养瓶中； 3)首先在暗光下培养一周， 之后在光照强度为2000Lx、 光照时长为 14h/d下的培养条件下进行培。
17、养。 0033 光照下培养20天后生根率92， 根平均达到1.2cm， 移栽后蓝丰蓝莓苗的成活率可 达到91。 0034 实施例7： 试验品种为都克 0035 1)在培养瓶内铺一层滤纸， 然后将制备好的液体培养基(配方为1/2WPM+20g/L蔗 糖， pH为5.8， 还含有活性炭， 重量百分比浓度为0.3)倒入培养瓶内， 之后将培养瓶及装有 IBA的三角瓶(IBA浓度200mg/L)在121的高温下灭菌15min备用； 2)选择继代培养35天生 长健壮的蓝莓， 将其切成长度为3-4cm的茎段， 将其基部放入IBA溶液中速蘸10s， 然后将这 些茎段放入培养瓶中； 3)首先在暗光下培养一周， 。
18、之后在光照强度为2000Lx、 光照时长为 14h/d下的培养条件下进行培养。 0036 光照下培养20天后生根率100， 根平均达到3.33cm， 移栽后都克蓝莓苗的成活率 可达到92。 0037 实施例8： 试验品种为乔治 0038 1)在培养瓶内铺一层滤纸， 然后将制备好的液体培养基(配方为1/2WPM+20g/L蔗 糖， pH为5.8， 还含有活性炭， 重量百分比浓度为0.3)倒入培养瓶内， 之后将培养瓶及装有 IBA的三角瓶(IBA浓度200mg/L)在121的高温下灭菌15min备用； 2)选择继代培养35天生 长健壮的蓝莓， 将其切成长度为3-4cm的茎段， 将其基部放入IBA溶。
19、液中速蘸10s， 然后将这 些茎段放入培养瓶中； 3)首先在暗光下培养一周， 之后在光照强度为2000Lx、 光照时长为 14h/d下的培养条件下进行培养。 0039 光照下培养25天左右后生根率90， 根平均达到1.7cm， 移栽后乔治蓝莓苗的成活 率可达到90。 0040 实施例9： 试验品种为奥尼尔 0041 1)在培养瓶内铺一层滤纸， 然后将制备好的液体培养基(配方为1/2WPM+30g/L蔗 糖， pH为5.8， 还含有活性炭， 重量百分比浓度为0.4)倒入培养瓶内， 之后将培养瓶及装有 说 明 书 3/4 页 5 CN 106804427 A 5 IBA的三角瓶(IBA浓度为200。
20、mg/L)在121的高温下灭菌15min备用； 2)选择继代培养35天 生长健壮的蓝莓， 将其切成长度为3-4cm的茎段， 将其基部放入IBA溶液中速蘸10s， 然后将 这些茎段竖着放入培养瓶中； 3)首先在暗光下培养一周， 之后在光照强度为2000Lx、 光照时 长为14h/d下的培养条件下进行培养。 0042 光照下培养20天后生根率95， 根平均达到2.9cm， 移栽后奥尼尔蓝莓苗的成活率 可达到97。 0043 以上实施例暗光下及光照下的培养温度均为25。 0044 试验结论： 本发明繁殖方法适用范围广， 生根速度快， 操作简单， 且生根率高， 适宜 大规模生产中使用。 0045 实施。
21、例1-4均针对奥尼尔蓝莓做的试验， 培养基不同， 其中实施例4配方为1/2WPM+ 20g/L蔗糖+活性炭+维生素C， 实施例1配方为1/2WPM+20g/L蔗糖+活性炭， 实施例2配方为1/ 2WPM+20g/L蔗糖+维生素C， 实施例3配方为1/2WPM+20g/L蔗糖。 0046 从实施例1-4的试验结果可以看出， 同时含活性炭和维生素C的实施例4生根率、 根 长度及移栽后蓝莓苗的成活率均比其他实施例更好。 0047 对比例1： 0048 以圆蓝、 粉蓝和夏普蓝等为研究对象， 采用瓶内固体培养基生根的方法(配方为1/ 2WPM+0.3mg/LIBA)， 经过20d的培养， 上述三个品种的。
22、生根率分别是1.3， 0和0， 经过60d的 培养， 生根率分别达到82.7、 74.9和72。 0049 对比例2： 0050 以兔眼蓝莓为研究对象， 采用瓶内生根(配方为MS+0.2mg/LIBA)， 生根率仅为 57.5。 0051 对比例3： 0052 以美登为研究对象， 采用瓶内生根方法(配方为1/2WPM+0.6mg/LIBA)， 经过生根培 养45d后调研， 其生根率达到85。 0053 以上内容描述了本发明的基本原理和主要特征， 本发明不受上述实施例的限制， 在不脱离本发明精神和范围的前提下， 本发明还会有各种变化和改进， 这些变化和改进都 落入要求保护的本发明范围内。 说 明 书 4/4 页 6 CN 106804427 A 6 。