利伐沙班在制药中的应用及药物制剂.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810233705.6 (22)申请日 2018.03.20 (71)申请人 武汉轻工大学 地址 430023 湖北省武汉市东西湖区常青 花园学府南路68号 (72)发明人 赵玲 杨博 薛稳来 陈新 刘梁 (74)专利代理机构 深圳市世纪恒程知识产权代 理事务所 44287 代理人 胡海国 (51)Int.Cl. A61K 31/5377(2006.01) A61P 19/06(2006.01) (54)发明名称 利伐沙班在制药中的应用及药物制剂 (57)摘要 本发明公开利。

2、伐沙班在制药中的应用及药 物制剂。 本发明旨在提供一种成本低、 药效好的 预防和/或治疗高尿酸血症药物、 以及由高尿酸 血症导致的痛风药物。 权利要求书1页 说明书6页 CN 108186648 A 2018.06.22 CN 108186648 A 1.利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物在制备预防和/或治疗高尿酸血症药物 中的应用。 2.如权利要求1所述的利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物在制备预防和/或治 疗高尿酸血症药物中的应用， 其特征在于， 所述预防和/或治疗高尿酸血症药物包括一种或 多种药学上可接受的载体。 3.如权利要求1所述的利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物。

3、在制备预防和/或治 疗高尿酸血症药物中的应用， 其特征在于， 所述利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物 在制备用于抑制黄嘌呤氧化酶活性的药物中的应用。 4.利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物在制备预防和/或治疗由高尿酸血症导 致的痛风药物中的应用。 5.一种药物制剂， 其特征在于， 包括利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 108186648 A 2 利伐沙班在制药中的应用及药物制剂 技术领域 0001 本发明涉及生物技术领域， 特别涉及利伐沙班在制药中的应用及药物制剂。 背景技术 0002 随着人们生活水平的提高和饮食习惯的改变， 近。

4、年来， 我国高尿酸血症和痛风的 发病率呈逐年攀升趋势。 高尿酸血症是由于嘌呤代谢紊乱和/或尿酸排泄障碍而导致血尿 酸超过正常值的一种疾病， 是指正常嘌呤饮食状态下， 非同日2次空腹血尿酸水平： 男性 420 mol/L， 女性360 mol/L， 临床上不表现任何症状。 而当人体长期处于高尿酸血症的情 况下， 尿酸即以钠盐的形式沉淀在关节、 软组织、 软骨和肾脏中， 引起人体器官和组织病变， 导致痛风， 引发严重的并发症， 包括痛风性关节炎、 痛风性肾脏病变、 痛风性肾结石、 痛风性 心脏病、 痛风性高血压病等， 病人出现关节痛、 肾绞痛或血尿等症状。 0003 目前临床治疗高尿酸血症的药物主。

5、要是西药为主， 疗效显著， 但不良反应众多， 如 胃肠道症状、 皮疹、 肝功能损害、 骨髓抑制等， 在治疗的过程中同时损害了人体健康， 例如别 嘌醇， 别嘌醇是一种广泛应用于降尿酸的药物， 通过抑制尿酸合成产生降尿酸作用， 但是它 带来了不良反应包括胃肠道症状、 皮疹、 肝功能损害、 骨髓抑制等， 应给予监测。 大约5患 者不能耐受。 偶有发生严重的别嘌呤醇超敏反应综合征(allopurinol hypersen sitivitysyndrome， AHS)。 在肾功能不全患者及采用噻嗪类利尿剂时该风险增加。 相关文献 证实， AHS与白细胞抗原HLA-B5801基因阳性密切相关。 中国汉族人。

6、HLA-B58阳性率达6 8， 而白人仅为2。 虽然AHS的发生率仅0.1， 但病死率高达20。 0004 故， 开发一种安全有效并且毒副作用较低的降尿酸的药物， 具有极为广阔的市场 前景， 并能创造良好的社会和经济效益。 发明内容 0005 本发明的主要目的是提出利伐沙班在制药中的应用及药物制剂， 旨在提供一种成 本低、 药效好的预防和/或治疗高尿酸血症药物。 0006 为实现上述目的， 本发明提出利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物在制备 预防和/或治疗高尿酸血症药物中的应用。 0007 优选地， 所述预防和/或治疗高尿酸血症药物包括一种或多种药学上可接受的载 体。 0008 优选地，。

7、 所述利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物在制备用于抑制黄嘌呤 氧化酶活性的药物中的应用。 0009 为实现上述目的， 本发明还提出利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物在制 备预防和/或治疗由高尿酸血症导致的痛风药物中的应用。 0010 为实现上述目的， 本发明还提出一种药物制剂， 包括利伐沙班或其药学上可接受 的盐、 溶剂合物。 0011 本发明利用利伐沙班作为预防和/或治疗高尿酸血症药物， 可以大大降低临床前 说 明 书 1/6 页 3 CN 108186648 A 3 研究成本， 节约资源， 缩短研发周期， 而且具有良好的药效。 具体实施方式 0012 为使本发明实施例的目的、 。

8、技术方案和优点更加清楚， 下面将对本发明实施例中 的技术方案进行清楚、 完整地描述。 实施例中未注明具体条件者， 按照常规条件或制造商建 议的条件进行。 所用试剂或仪器未注明生产厂商者， 均为可以通过市售购买获得的常规产 品。 0013 本发明提出利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物在制备预防和/或治疗高 尿酸血症药物中的应用。 0014 利伐沙班(Rivaroxaban)， 分子式为C19H18ClN3O5S， 分子量为435.8813， 0015 中文名： 0016 5-氯-N-(5S)-2-氧代-3-(4-(3-氧代吗啉-4-基)苯基)-1,3-恶唑啉-5-基)甲 基)噻吩-2-甲酰。

9、胺 0017 英文别名为： 0018 5-Chloro-N-(5S)-2-oxo-3-(4-(3-oxomorpholin-4-yl)phenyl)-1,3- oxazolidin-5-yl)methyl)thiophene-2-carboxamide。 0019 本发明利用利伐沙班作为预防和/或治疗高尿酸血症药物， 可以大大降低临床前 研究成本， 节约资源， 缩短研发周期， 而且具有良好的药效。 0020 优选地， 该药物可以通过注射、 喷射、 滴鼻、 滴眼、 渗透、 吸收、 物理或化学介导的方 法导入机体如肌肉、 皮下、 皮内、 静脉、 粘膜组织； 或是被其他物质混合或包裹后导入机体。 0。

10、021 优选地， 也可以是用利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物为活性成分制备 高尿酸血症药物可以制成注射剂、 片剂、 丸剂、 粉剂、 颗粒剂、 胶囊、 口服液等多种形式。 上述 各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备， 也可以采用其他剂型， 在此不做具 体限制。 0022 优选地， 所述预防和/或治疗高尿酸血症药物包括一种或多种药学上可接受的载 体。 0023 需要的时候， 在上述药物加入一种或多种药学上可接受的载体， 所述载体包括药 学领域常规的稀释剂、 赋形剂、 填充剂、 粘合剂、 润湿剂、 崩解剂、 吸收促进剂、 表面活性剂、 吸附载体、 润滑剂等。 0024 优选地， 所。

11、述利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物在制备用于抑制黄嘌呤 氧化酶活性的药物中的应用。 0025 本发明还提出利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物在制备预防和/或治疗 由高尿酸血症导致的痛风药物中的应用。 0026 本发明提出一种药物制剂， 包括利伐沙班或其药学上可接受的盐、 溶剂合物。 0027 本发明利用已经作为抗凝血药物而上市的利伐沙班， 作为预防和/或治疗高尿酸 血症药物， 可以大大降低临床前研究成本， 节约资源， 缩短研发周期， 而且具有良好的药效。 0028 另外， 本发明提供的该药物制剂可用于预防和/治疗由高尿酸血症导致的急性痛 风、 慢性痛风、 痛风关节炎、 痛风发作、。

12、 尿酸性肾石病和痛风性肾病。 0029 以下结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步详细说明， 应当理解， 以下实 说 明 书 2/6 页 4 CN 108186648 A 4 施例仅用以解释本发明， 并不用于限定本发明。 0030 实施例一验证利伐沙班抑制黄嘌呤氧化酶活性的效果 0031 黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase,XO,EC 1.17.3.2)是一种专一性高， 既能催化 次黄嘌呤生成黄嘌呤， 进而生成尿酸， 又能直接催化黄嘌呤生成尿酸的酶。 本发明证明利伐 沙班能够抑制黄嘌呤氧化酶的活性， 以预防和/或治疗高尿酸血症。 0032 别嘌醇是目前应用广范的降尿酸药物， 是一。

13、种竞争性黄嘌呤氧化酶抑制剂， 通过 抑制尿酸合成产生降尿酸作用。 别嘌醇的不良反应主要包括胃肠道症状、 皮疹、 肝功能损 害、 骨髓抑制等， 大约5患者不能耐受， 偶有发生严重的别嘌呤醇超敏反应综合征 (allopurinol hypersen sitivitysyndrome， AHS)。 在肾功能不全患者及采用噻嗪类利尿 剂时该风险增加。 Khanna等研究证实， AHS与白细胞抗原HLA-B5801基因阳性密切相关。 中国 汉族人HLA-B58阳性率达68， 而白人仅为2。 虽然AHS的发生率仅0.1， 但病死率高 达20。 本实施例以别嘌醇作为对照， 来验证利伐沙班抑制黄嘌呤氧化酶的效。

14、果。 0033 (1)磷酸缓冲液(PBS)的配制 0034 配制pH7.4的磷酸缓冲液(Phosphate Buffered Saline， PBS， 是常用于生物学 研究的一种缓冲溶液)50mM， 按 中华人民共和国药典 2015年版附录配制， 具体配制方法如 下： 0035 精确称取在1155干燥23h的无水磷酸氢二钠3.55g和磷酸二氢钾3.40g， 加水使其溶解并稀释至1000mL， 再用0.1mol/L的NaOH调节pH值至7.4。 0036 当然， 也可以不按 中华人民共和国药典 中进行配制， 在此不做具体限制， 此处还 提供另一种如下的配制方法： 0037 精确称取KH2PO4 。

15、0.9560g、 K2HPO43H2O 6.9460g、 及乙二胺四乙酸(EDTA) 18.62mg， 加入超纯水约480mL超声促溶， 取出， 定容至500mL， 即得pH7.4的PBS溶液。 0038 (2)试验样品配制 0039 称取10.46mg利伐沙班样品， 溶于1mL二甲基亚砜(DMSO)溶液， 制成浓度为24mmol/ L的利伐沙班溶液。 取24mmol/L的利伐沙班溶液， 用DMSO依次稀释至12mmol/L、 6mmol/L的利 伐沙班溶液待用。 0040 二甲基亚砜(DMSO)是一种含硫有机化合物， 常温下为无色无臭的透明液体， 是一 种吸湿性的可燃液体。 具有高极性、 高。

16、沸点、 热稳定性好、 非质子、 与水混溶的特性， 能溶于 乙醇、 丙醇、 苯和氯仿等大多数有机物， 被誉为 “万能溶剂” 。 在酸存在时加热会产生少量甲 基硫醇、 甲醛、 二甲基硫、 甲磺酸等化合物。 在高温下有分解现象,遇氯能发生剧烈反应， 在 空气中燃烧发出淡蓝色火焰。 可作有机溶剂、 反应介质和有机合成中间体。 也可用作合成纤 维的染色溶剂、 去染剂、 染色载体， 以及回收乙炔、 二氧化硫的吸收剂。 0041 试验样品1： 从24mmol/L的利伐沙班-DMSO溶液中吸取1 L， 加入PBS溶液稀释100 倍， 配制240 mol/L的溶液。 0042 试验样品2： 从12mmol/L利。

17、伐沙班-DMSO溶液中吸取1 L， 加入PBS溶液稀释100倍， 配制120 mol/L的溶液。 0043 试验样品3： 从6mmol/L利伐沙班-DMSO溶液中吸取1 L， 加入PBS溶液稀释100倍， 配 制60 mol/L的溶液。 0044 (3)阳性药(别嘌醇)溶液配制 说 明 书 3/6 页 5 CN 108186648 A 5 0045 取别嘌醇药片1片， 研磨成粉末， 加0.613 L的DMSO和61.3mL的PBS溶解后， 配制成 10 g/mL的溶液。 0046 别嘌醇(Allopurinol)， 可抑制黄嘌呤氧化酶， 使次黄嘌呤及黄嘌呤不能转化为尿 酸， 即尿酸合成减少， 。

18、进而降低血中尿酸浓度， 减少尿酸盐在骨、 关节及肾脏的沉着， 能抑制 尿酸合成的药物。 0047 (4)黄嘌呤溶液配制 0048 黄嘌呤配制的方法如下： 0049 取4.5mg黄嘌呤溶于0.5mL浓度为1mol/L的NaOH中， 再加79.5mL的PBS， 配成 0.005625mg/mL的溶液。 0050 黄嘌呤是一组通常用作温和的兴奋剂和支气管扩张剂， 特别用于治疗哮喘症状。 黄嘌呤的衍生物包括咖啡因， 茶碱， 可可碱(主要在巧克力中发现)， 和马黛因。 主要的化合 物， 黄嘌呤， 是嘌呤降解途径的产物， 并会在黄嘌呤氧化酶的作用下转换为尿酸。 0051 (5)黄嘌呤氧化酶溶液配制 005。

19、2 取黄嘌呤氧化酶化冻， 用PBS稀释20倍， 配制成0.025U的酶溶液； 涡旋震荡， 离心三 次后， 将100 L酶溶液用移液枪转移到提前准备好的体积为1.5mlL的EP管(离心管)中， 放入 冰盒备用。 0053 黄嘌呤氧化酶是一种底物非专一性的羟化酶， 主要功能是催化次黄嘌呤氧化为黄 嘌呤， 再进一步氧化为尿酸。 0054 (6)紫外吸收率测定 0055 将试验分为处理组1、 处理组2、 处理组3以及对照组， 其中， 0056 处理组1： 将黄嘌呤氧化酶(100 L)、 PBS缓冲液(100 L)、 试验样品1(100 L)于37 孵育5min后， 加入300 L黄嘌呤(5.625 g。

20、/mL)， 涡旋震荡10s后测定紫外吸收速率。 处理组1 由于含利伐沙班剂量最高， 也称为利伐沙班高剂量组(40.0 mol/L或104.62 g/mL)。 0057 处理组2： 将黄嘌呤氧化酶(100 L)、 PBS缓冲液(100 L)、 试验样品1(100 L)于37 孵育5min后， 加入300 L黄嘌呤(5.625 g/mL)， 涡旋震荡10s后测定紫外吸收速率。 处理组2 由于含利伐沙班剂量其次， 也称为利伐沙班中剂量组(20.0 mol/L或52.31 g/mL)。 0058 处理组3： 将黄嘌呤氧化酶(100 L)、 PBS缓冲液(100 L)、 试验样品3(100 L)于37 。

21、孵育5min后， 加入300 L黄嘌呤(5.625 g/ml)， 涡旋震荡10s后测定紫外吸收速率。 处理组3 由于含利伐沙班剂量最少， 也称为利伐沙班低剂量组(10.0 mol/L或26.16 g/ml)。 0059 对照组： 将黄嘌呤氧化酶(100 L)， PBS缓冲液(100 L)、 别嘌醇(100 L)孵育5min 后， 加入300 L黄嘌呤(5.625 g/ml)， 涡旋震荡10s后测定紫外吸收速率。 对照组也称为别嘌 醇组。 0060 空白组： 300 L PBS孵育5min后， 加入300 L黄嘌呤， 涡旋震荡10s后测定紫外吸收 速率。 0061 (7)抑制率计算 0062 紫。

22、外检测下读取吸光度数据， 按照下述公式计算斜率K： K(A1-A2)/T， 其中， A1、 A2为两端吸光度， T为测定时间。 0063 抑制率的计算公式为： 抑制率1-(K(处理组或对照组)/K(空白组)。 0064 抑制率的计算结果如表1所示。 说 明 书 4/6 页 6 CN 108186648 A 6 0065 表1实施例1中的试验结果 0066 0067 由表1的计算结果可以看出， 处理组1(利伐沙班高剂量组)可以明显的抑制黄嘌呤 氧化酶的活性， 与对照组(别嘌醇组)相近， 甚至优于对照组， 表明利伐沙班对黄嘌呤氧化酶 具有良好的抑制效果。 0068 实施例二利伐沙班降尿酸活性效果的。

23、验证 0069 别嘌醇是目前应用最广的降尿酸药物， 是一种竞争性黄嘌呤氧化酶抑制剂， 通过 抑制尿酸合成产生降尿酸作用。 别嘌醇的不良反应主要包括胃肠道症状、 皮疹、 肝功能损 害、 骨髓抑制等， 大约5患者不能耐受， 偶有发生严重的别嘌呤醇超敏反应综合征 (allopurinol hypersen sitivitysyndrome， AHS)。 在肾功能不全患者及采用噻嗪类利尿 剂时该风险增加。 Khanna等研究证实， AHS与白细胞抗原HLA-B5801基因阳性密切相关。 中国 汉族人HLA-B58阳性率达68， 而白人仅为2。 虽然AHS的发生率仅0.1， 但病死率高 达20。 本实施。

24、例以别嘌醇作为模型对照， 来验证利伐沙班降尿酸活性的效果。 0070 (1)称取适量氧嗪酸钾， 以0.5CMC-Na溶液混悬， 配制成12.5mg/mL的造模液(其 中， CMC-Na为羧甲基纤维素钠， 是天然纤维素经化学改性后得到的纤维素衍生物， 是一种纤 维素的羧甲基醚化物)。 0071 (2)取60只试验小鼠(昆明种、 雄性小鼠)， 按体重随机分为6组， 每组10只， 分别设 为空白对照组、 模型对照组、 别嘌醇组、 利伐沙班高剂量组、 利伐沙班中剂量组以及利伐沙 班低剂量组； 将上述6组试验小鼠分笼饲养于室内， 室温(2022)， 相对湿度3550， 自由饮食、 饮水， 适应性饲养5天。

25、； 0072 第6至11天， 每日对空白对照组、 模型对照组灌胃给予0.5CMC-Na； 0073 每日对别嘌醇组灌胃给予别嘌醇， 给药剂量为0.2mL/10g； 0074 利伐沙班高剂量组灌胃给予利伐沙班， 给药剂量为0.2mL/10g； 其中利伐沙班高剂 量组中利伐沙班的剂量为10mg/kg； 0075 利伐沙班中剂量组灌胃给予利伐沙班， 给药剂量为0.2mL/10g； 其中利伐沙班高剂 量组中利伐沙班的剂量为20mg/kg； 0076 利伐沙班低剂量组灌胃给予利伐沙班， 给药剂量为0.2mL/10g； 其中利伐沙班高剂 量组中利伐沙班的剂量为30mg/kg； 0077 第12天， 对空白。

26、对照组腹腔注射0.2mL/10g的0.5CMC-Na； 0078 对模型对照组、 别嘌醇组、 利伐沙班高剂量组、 利伐沙班中剂量组以及利伐沙班低 剂量组的腹腔分别注射上述配制得到的造模液0.2mL/10g； 0079 对空白对照组、 模型对照组、 别嘌醇组、 利伐沙班高剂量组、 利伐沙班中剂量组以 及利伐沙班低剂量组注射药物1小时后， 摘眼球取血， 上述样品分别按尿酸测定试剂盒、 加 反应试剂， 进行测定。 试验数据用SPSS11.5软件统计分析， 分析结果以表示。 试验结 果如下表2所示。 0080 表2实施例2中的试验结果 说 明 书 5/6 页 7 CN 108186648 A 7 00。

27、81 组别剂量(mg/kg)动物(只)血尿酸( mol/L) 空白对照组 10179.342.37 模型对照组 10399.8210.98 别嘌醇组1010279.507.20 利伐沙班低剂量组1010342.2314.82 利伐沙班中剂量组2010320.9813.01 利伐沙班高剂量组3010295.1910.89 0082 由表2的试验结果可以看出， 利伐沙班高剂量组降血尿酸活性的效果较别嘌醇组 的效果相当， 也表明本发明利用利伐沙班降血尿酸活性的效果较好， 可以将利伐沙班应用 于降血尿酸活性。 0083 以上仅为本发明的优选实施例， 并非因此限制本发明的专利范围， 凡是利用本发 明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换， 或直接或间接运用在其他相关的技术领 域， 均同理包括在本发明的专利保护范围内。 说 明 书 6/6 页 8 CN 108186648 A 8 。