一种硼替佐米药物组合物及其应用.pdf

本发明公开了一种硼替佐米药物组合物及其应用，该组合物包含0.1‑200重量份的硼替佐米、0.1‑500重量份的释放速率调节用辅料，0‑10重量份的小分子调节剂，和0‑2000重量份的药用可注射溶剂。该组合物具有可控释药行为，保持化合物于体内的有效血药浓度和蛋白酶体抑制水平。本发明通过长效注射组合物手段，实现对硼替佐米体内血药浓度和药效水平发挥的控制，提高药物治疗效果，延长作用时间，同时降低药物毒副作用，提供一种高效持久、毒副作用小的蛋白酶体活性抑制药物组合物。还公开了硼替佐米药物组合物用于治疗具有难治/复发多发性骨髓瘤的用途。

1.硼替佐米药物组合物，包含0.1-200重量份的活性成分硼替佐米、0.1-500重量份的释放速率调节用辅料，0-10重量份的小分子调节剂，和0-2000重量份的药用可注射溶剂。 2.根据权利要求1所述的硼替佐米药物组合物，其中，所述释放速率调节用辅料为选自药用可生物降解的局部注射储库型控释材料、药用油脂、药用表面活性剂的一种或两种以上的组合；优选地，所述药用可生物降解的局部注射储库型控释材料为选自：醋酸异丁酸蔗糖酯(SAIB)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚乙二醇化的PLA/PLGA、聚原酸酯类、聚磷酸酯共聚物、脂肪酸甘油酯、三乙二醇聚(原酸酯)聚合物、壳聚糖、水溶性羧甲基壳聚糖、丝心蛋白、聚-β-羟基丁酸戊酸酯、聚丙交酯/丙交酯-聚乙二醇共聚物和/或其共混物、聚β-羟基丁酸酯与聚乙二醇共混物和聚乳酸/羟乙酸共混物中的一种或两种以上的组合，优选地，所述药用表面活性剂为选自：注射用磷脂、吐温20、吐温80、CremophorEL、SolutolHS15、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯脂肪酸酯、泊洛沙姆188、磷脂酰胆碱(如DEPC或DOPC或它们的组合物)、磷脂酰甘油(如DPPG)和其他可药用的表面活性剂中的一种或两种以上的组合，优选地，所述药用油脂为选自：甘油、胆固醇、丙二醇酯、乙二醇酯、角鲨烯、硬脂酸、橄榄油、大豆油、椰子油、蓖麻油、芝麻油、花生油、棉子油甘油三脂(如油酸甘油三酯或辛酸甘油三酯)和其他的药用油脂(甘油油酸或其与磷脂的混合物等)以及相应盐中的一种或两种以上的组合；和/或其中，所述小分子调节剂为选自：乙酸、无水枸橼酸、抗坏血酸、氯化钙、苯甲酚、依地酸钙二钠、依地酸钠、甘氨酸、组氨酸、盐酸、乳酸、单水乳糖、氯化镁、甘露醇、甲磺酸、蛋氨酸、苯酚、磷酸、无水磷酸氢二钾、醋酸钠、抗坏血酸钠、碳酸氢钠、亚硫酸氢钠、氯化钠、柠檬酸钠、氢氧化钠、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、葡甲胺、鱼精蛋白、对羟基苯甲酸丙酯、胆固醇、植物甾醇、精氨酸、三乙醇胺、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、酒石酸、氨丁三醇、醋酸锌、氯化锌、葡萄糖中的一种或两种以上的组合；和/或所述药用可注射溶剂为选自：水、苯甲醇、氯丁醇、二甲亚砜、甲基吡咯烷酮、丙二醇、聚乙二醇(单)甲醚、三乙酸甘油酯、苯甲酸苄酯、甘油糖醛、甘油缩甲醛、丙二醇、乙醇、乙二醇二乙醚和其他可药用的注射溶剂中的一种或两种以上的组合。 3.根据权利要求1或2所述的硼替佐米药物组合物，其中，所述硼替佐米药物组合物在给药后，在水性介质中，37℃条件下，6小时内释放量小于硼替佐米总量的20％，甚至可小于10％；24h释放量小于硼替佐米总量的40％，甚至可小于30％；90％药物释放时间>3天，甚至可大于7天，大于10天或大于15天。 4.根据权利要求1至3中任一项所述的硼替佐米药物组合物，其中，所述硼替佐米药物组合物在给药后，通过可控的释放行为可调节药物的吸收行为，维持在有效抑制蛋白酶体所需的血药浓度下几天，甚至十几天，例如该有效血药浓度可几天至十几天维持在1ng/mL以上，但浓度小于200ng/ml，甚至小于100ng/ml，甚至小于50ng/ml，即维持血药浓度几天至十几天地处于80％蛋白酶体抑制水平，进而维持在有效的蛋白酶体抑制水平数天，甚至十数天，增加药物抗肿瘤疗效。 5.根据权利要求1至4中任一项所述的硼替佐米药物组合物，其中，所述硼替佐米药物组合物选自供注射或埋植用的混悬剂，油针制剂，缓释微球，植入凝胶，多囊脂质体及其他可应用的缓控释局部注射递药系统(如SABERdeliverysystem和CamurusFluidCrystalinjection系统)。 6.根据权利要求1至4中任一项所述的硼替佐米药物组合物，其中，所述硼替佐米药物组合物为硼替佐米多囊脂质体，优选地，所述硼替佐米多囊脂质体包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，更优选1-50重量份的硼替佐米；0.1-300重量份、优选0.1-200重量份的脂质成分，和非必须的0-10重量份的其他可药用的pH/渗透压调节剂；优选地，所述硼替佐米多囊脂质体包括未被多囊脂质体包裹的游离硼替佐米，未被多囊脂质体装载的游离硼替佐米的量一般小于组合物中硼替佐米总量的20％，优选小于10％；优选地，所述脂质成分为至少一种两亲性脂质和/或至少一种中性脂质；优选地，所述两亲性脂质为磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、相应盐或以上两种以上成分的组合；优选地，磷脂酰甘油是DPPG，磷脂酰胆碱为DEPC或DOPC或它们的组合物；优选地，所述中性脂质为选自乙二醇酯、角鲨烯、甘油、甘油三脂和丙二醇酯的一种或两种以上的组合；优选地，甘油三脂为油酸甘油三酯或辛酸甘油三酯；优选地，所述硼替佐米多囊脂质体进一步包括脂质膜流动性调节剂、渗透压调节剂或pH调节剂；优选地，所述脂质膜流动性调节剂选自胆固醇和植物甾醇；所述pH调节剂为选自非有机酸、有机酸、非有机碱、有机碱中的一种或两种以上的组合，例如，pH调节剂为选自盐酸、磷酸、酒石酸、组氨酸、丁氨酸、氨丁三醇中的一种或两种以上的组合；优选地，所述多囊脂质体的外相水溶液pH范围可在4.0-9.0之间；所述硼替佐米多囊脂质体优选通过静脉、皮下或肌肉注射给药，更优选皮下注射给药；优选地，所述硼替佐米多囊脂质体于6小时内释放量小于制剂中硼替佐米总量的10％，甚至小于5％；24h释放量小于硼替佐米总量的30％，甚至小于20％；90％药物释放时间>3天。 7.根据权利要求1至4中任一项所述的硼替佐米药物组合物，其中，所述硼替佐米药物组合物为硼替佐米混悬剂，优选地，所述硼替佐米混悬剂包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，更优选1-50重量份，更优选1-20重量份的硼替佐米，0-300重量份的油性溶剂和/或注射用水，0.1-500重量份的释放速率调节用辅料，0-5重量份的等渗剂和/或缓冲剂；优选地，所述油性溶剂为选自椰子油、蓖麻油、芝麻油、大豆油、花生油、棉子油以及其他的药学上可应用的溶剂中的一种或两种以上组合；优选地，所述释放速率调节用辅料选自表面活性剂和聚合物，例如，所述表面活性剂为选自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20、聚氧乙烯蓖麻油50、聚氧乙烯蓖麻油60、泊洛沙姆和聚氧乙烯脂肪酸酯中的一种或两种以上的组合；所述聚合物为选自羧甲基纤维素钠、醋酸乙烯酯共聚物、泊洛沙姆、聚乙二醇、羟基乳酸聚合物、聚酯、聚多糖、聚维酮K12/K17、羧甲基纤维素钠和泊洛沙姆中的一种或两种以上的组合；优选地，所述缓冲剂为选自磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、葡甲胺、精氨酸、三乙醇胺和枸橼酸中的一种或两种以上的组合；优选地，所述等渗剂为选自氯化钠、葡糖糖和甘露醇中的一种或两种以上的组合；优选地，所述硼替佐米混悬剂是纳米混悬剂或微米混悬剂，纳米混悬剂粒径范围优选是50nm-800nm，微米混悬剂的粒径范围优选是1um-18um。 8.根据权利要求1至4中任一项所述的硼替佐米药物组合物，其中，所述硼替佐米药物组合物为硼替佐米原位凝胶系统，优选地，所述硼替佐米原位凝胶系统包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，更优选1-50重量份，甚至更优选1-20重量份的硼替佐米；50-2000重量份，优选100-1000重量份的溶剂；0.1-500重量份，优选0.5-250重量份，更优选1-100重量份，甚至更优选2-50重量份的释放速率调节用凝胶形成材料；优选地，所述溶剂为选自N-甲基吡咯烷酮、聚乙二醇(单)甲醚、三乙酸甘油酯、苯甲酸苄酯、甘油糖醛、甘油缩甲醛、丙二醇、乙醇、乙二醇二乙醚、苯甲醇、二甲亚砜及其他药学可应用的药用注射溶剂中的一种或两种以上的组合；优选地，所述释放速率调节用凝胶形成材料为选自：聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、醋酸异丁酸蔗糖酯、脂肪酸甘油酯、聚乙二醇化的PLA/PLGA、三乙二醇聚(原酸酯)聚合物以及其他药学可应用局部注射用缓控释材料中的一种或两种以上的组合；优选地，所述原位凝胶系统中的硼替佐米的单次给药量范围是0.1-200mg，优选0.5-100mg，更优选1-50mg，甚至更优选2-25mg；优选地，所述硼替佐米原位凝胶系统，于6小时内释放量小于制剂中硼替佐米总量的10％，甚至小于5％；24h释放量小于硼替佐米总量的40％，甚至小于30％；90％药物释放时间>3天；优选地，所述原位凝胶系统以溶液状态短期贮存，或以预分装药物和溶剂的注射器形式贮存；优选地，所述原位凝胶系统通过静脉、皮下或肌肉注射给药，优选皮下和肌肉注射给药。 9.根据权利要求1至4中任一项所述的硼替佐米药物组合物，其中，所述硼替佐米药物组合物为缓释微球，优选地，所述缓释微球包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，甚至更优选1-50重量份，甚至更优选1-20重量份的硼替佐米，和0.1-500重量份，优选0.2-250重量份，甚至更优选1-200重量份的释放速率调节用聚合物；优选地，所述缓释微球为干燥粉末，临用前，需用可注射用水或其他溶剂混悬均匀后注射；所述其他溶剂为选自0.1wt％-1wt％Tween80的水溶液、甘油、聚乙二醇、聚乙二醇甲醚以及其他药物学上可用的并不影响微球稳定性的注射用溶剂中的一种或两种以上组合；优选地，所述缓释微球粒径分布在0.5～20μm之间；优选地，所述释放速率调节用聚合物为选自聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚乙二醇化的PLA/PLGA、壳聚糖、水溶性羧甲基壳聚糖、丝心蛋白、聚-β-羟基丁酸戊酸酯、聚丙交酯/丙交酯-聚乙二醇共聚物共混物、聚β-羟基丁酸酯与聚乙二醇共混物、聚乳酸/羟乙酸共混物以及其他药学可应用的局部注射用缓控释材料中的一种或两种以上组合；优选地，所述缓释微球通过静脉、皮下或肌肉注射给药，优选皮下和肌肉注射给药。 10.根据权利要求1至9中任一项所述的硼替佐米药物组合物在制备用于治疗和/或预防多发性骨髓瘤的药物中的用途。

技术领域

本发明涉及药物制剂领域和生物学领域，具体涉及一种硼替佐米药物组合物及其用于治疗多发性骨髓瘤等癌症的用途，所述药物组合物具有可控的释放行为，能够维持稳定的体内血药浓度和长效的蛋白酶体抑制活性。

背景技术

硼替佐米的分子式为C19H25BN4O4，分子量为384.237，其化学名称为：[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧-3-苯基-2-[(吡嗪羧基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸，其具有下述化学结构：

细胞的核因子-KB(NF-KB)的功能是促进蛋白质家族启动或促进细胞核内的信号传导，但在正常的细胞内被特异性抑制物NF—KB抑制物(IKB)阻留在胞质而无活性。当IKB磷酸化后，引发了IKB的泛素化，进而26S蛋白酶体引起IKB的迅速降解，当IKB被蛋白酶体降解后，NF—KB转移到细胞核内发挥作用。26S蛋白酶体是细胞内主要的蛋白降解途径，存在于所有真核细胞的胞质和核内，它由1个20S核心颗粒和2个19S帽结构组成。20S核心颗粒呈筒状外形，由内层2个β环和外层2个α环组成，其中α亚基主要用于底物识别，β亚基主要参与底物降解。

蛋白酶体抑制剂—硼替佐米可直接与20S核心部分的活性位点结合，可逆性抑制26S蛋白酶体活性，引起IKB聚集，阻止释放NF-KB，逆转NF-KB的活化而抑制肿瘤。该蛋白降解途径被阻断后，细胞内很多重要蛋白的代谢，包括核转录因子NF—KB和其抑制单位IKB、肿瘤抑制基因p53、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白和多种促凋亡蛋白等出现紊乱，从而激活多条细胞凋亡通路，诱导MM细胞凋亡。阻断NF—KB可致骨髓瘤细胞黏附因子的表达下降，从而干扰由黏附因子介导的骨髓基质细胞产生白细胞介素-6的过程。硼替佐米同时可干扰与增生信号相关的丝裂原活化蛋白激酶p44/42途径，诱导细胞周期依赖性激酶抑制剂p21及p27的累积，当细胞周期依赖性激酶功能被抑制时，细胞不能从G1期进入S期，从而导致细胞死亡。研究证实，恶性细胞株对蛋白酶体抑制的敏感性比非恶性细胞株高100～1000倍。当蛋白酶体活性被抑制后，正常细胞处于G0期属于被保护状态，而肿瘤细胞仍处于细胞周期，因此硼替佐米对MM细胞具有选择性杀灭作用。

硼替佐米(商品名：Valcade/万珂)是于2003经FDA批准上市的一款用于多发性骨髓瘤的注射用药物，可静脉注射或皮下注射给药，本品的推荐剂量为单次注射1.3mg/m2，每周注射2次，连续注射2周(即在第1、4、8和11天注射)后停药10天(即从第12至第21天)。3周为1个疗程，两次给药至少间隔72小时。在临床研究中，被确认完全缓解的患者再接受另外2个周期的万珂治疗，建议缓解的患者接受8个周期的万珂治疗。

据临床药动数据结果可见，目前上市制剂为静脉注射剂，FDA在2012年批准其皮下注射剂。在癌症患者的临床研究中：EC50＝1.48ng/ml，对蛋白酶体有效抑制(70％-80％)的起效浓度为2ng/ml，其上市的静脉注射剂给药后2-5分钟可达到Cmax＝223ng/ml，皮下注射剂给药后5-60分钟可达到Cmax＝20.4ng/ml，其Cmax远超过其起效浓度，会产生较大的毒副作用。并且药动学曲线表明其药效持续时间约为72h(>2ng/ml)，因此临床3天给药一次(在第1、4、7和11天注射给药，随后停药10天使得蛋白活性恢复至正常)；将硼替佐米开发成缓释制剂，使其在11天内维持血药浓度大于起效浓度2ng/ml，随后停药10天恢复其蛋白活性。使得患者给药一次后可长时间达到治疗效果，降低Cmax引起的毒性，提高患者顺应性，降低用药成本。因此将硼替佐米开发成缓释制剂的可行性较大；

较大的化合物毒性和较高的血药浓度波动范围，导致硼替佐米注射制剂在临床运用的过程中，显示出较多的局限性：1)注射后虽可快速达蛋白酶体抑制所需的血药浓度水平，但药物吸收较快，血药浓度突高，导致硼替佐米的稳态血药浓度波动范围较大，稳态血药浓度峰值高于蛋白酶抑制所需浓度几十倍甚至上百倍，产生较严重的毒副作用；2)消除迅速，为维持体内蛋白酶体有效抑制所需血药浓度水平，需多次注射给药，患者顺应性差；3)注射后，药物吸收过快，毒性的产生，也限制了剂量的进一步推升，进而阻碍了药效的进一步提升。

为进一步改善硼替佐米的临床抗肿瘤疗效，并降低药物的毒副作用，提高患者顺应性，有必要提供一种可稳定维持蛋白酶体抑制所需血药浓度，并降低血药浓度波峰/波谷比值的优良组合物形式，本发明的目的就是开发一种硼替佐米药物组合物，通过控制其释放行为，精确调控硼替佐米于体内的吸收速率和吸收时间，进而控制体内血药浓度水平及其波动范围，维持体内血药浓度于有效蛋白酶体抑制水平的长期稳态，提高硼替佐米的抗肿瘤疗效，减少用药后的不良反应。

经专利检索，与硼替佐米有关的制剂专利包括：1)硼替佐米的注射用普通速释制剂，如：硼替佐米溶液制剂(WO2016001905)、注射用脂质体(CN200580045755.2，CN 101795671)、冻干粉制剂(CN 104586776 A，CN102784114A，CN 105496960)；2)控释制剂，如：与拓扑酶联合用药的控释制剂(CN101336893A)，经专利检索结果可见，目前尚无关于硼替佐米单一用药长效缓控释制剂的相关研究。

为进一步提高硼替佐米的临床疗效，本发明公开了一种可精确调控硼替佐米血药浓度水平和波动范围的控释组合物，该组合物可控地调节蛋白酶体抑制所需血药浓度水平的长期维持，同时降低血药浓度波动范围，进而在提高肿瘤细胞的蛋白酶体抑制率和抗肿瘤疗效的同时，减少了肿瘤患者用药后的不良反应，增加患者服药的顺应性。

发明内容

半衰期较短的硼替佐米，多次注射给药后，往往产生较高的稳态血药波峰/波谷比值(>100)，即较大的血药浓度波动，虽然该药物对蛋白酶体可逆性抑制，但仍然导致制剂存在众多安全性问题，而且存在多次注射的患者顺性差的问题，限制了其临床疗效的进一步提升和发挥。

本发明的首要目的是针对硼替佐米的生物学性质和临床治疗的药效及安全性需求，提供一种体内吸收行为、血药浓度和蛋白酶体抑制水平可控的硼替佐米药物组合物，以进一步提高硼替佐米的临床疗效，减少肿瘤患者用药后的不良反应，并增加患者服药的顺应性。本发明涉及具有改进硼替佐米药物载量和/或体内吸收和/或生物利用度和/或血药浓度控制和/或酶抑制水平控制的新型药物的组合和它们作为唯一制剂或与其他疗法联合治疗癌症的用途。

本发明所提供的硼替佐米药物组合物中的活性成分硼替佐米，可以是硼替佐米的游离碱形式，也可以是其药理学上可接受的盐形式的化合物。因此，在本发明药物组合物中的活性成分硼替佐米包括硼替佐米的游离碱和其药理学上可接受的盐。

本发明提供了一种硼替佐米药物组合物，所述组合物包含0.1-200重量份的活性成分硼替佐米，0.1-500重量份的释放速率调节用辅料，0-10重量份的小分子调节剂，0-2000重量份的药用可注射溶剂。

所述释放速率调节用辅料为选自药用可生物降解的局部注射药用储库型控释材料、药用油脂、药用表面活性剂等中一种或两种以上的组合；

优选地，所述药用可生物降解的局部注射储库型控释材料为选自：醋酸异丁酸蔗糖酯(SAIB)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚乙二醇化的PLA/PLGA、聚原酸酯类、聚磷酸酯共聚物、脂肪酸甘油酯、三乙二醇聚(原酸酯)聚合物、壳聚糖、水溶性羧甲基壳聚糖、丝心蛋白、聚-β-羟基丁酸戊酸酯、聚丙交酯/丙交酯-聚乙二醇共聚物和/或其共混物、聚β-羟基丁酸酯与聚乙二醇共混物和聚乳酸/羟乙酸共混物中的一种或两种以上的组合，

优选地，所述药用表面活性剂为选自：注射用磷脂、吐温20、吐温80、Cremophor EL、Solutol HS 15、聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯脂肪酸酯、泊洛沙姆188、磷脂酰胆碱(如DEPC或DOPC或它们的组合物)、磷脂酰甘油(如DPPG)和其他可药用的表面活性剂中的一种或两种以上的组合，

优选地，所述药用油脂为选自：甘油、胆固醇、丙二醇酯、乙二醇酯、角鲨烯、硬脂酸、橄榄油、大豆油、椰子油、蓖麻油、芝麻油、花生油、棉子油甘油三脂(如油酸甘油三酯或辛酸甘油三酯)和其他的药用油脂(甘油油酸或其与磷脂的混合物等)以及相应盐中的一种或两种以上的组合；和/或

其中，所述小分子调节剂为选自：乙酸、无水枸橼酸、抗坏血酸、氯化钙、苯甲酚、依地酸钙二钠、依地酸钠、甘氨酸、组氨酸、盐酸、乳酸、单水乳糖、氯化镁、甘露醇、甲磺酸、蛋氨酸、苯酚、磷酸、无水磷酸氢二钾、醋酸钠、抗坏血酸钠、碳酸氢钠、亚硫酸氢钠、氯化钠、柠檬酸钠、氢氧化钠、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、葡甲胺、鱼精蛋白、对羟基苯甲酸丙酯、胆固醇、植物甾醇、精氨酸、三乙醇胺、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、酒石酸、氨丁三醇、醋酸锌、氯化锌、葡萄糖中的一种或两种以上的组合；和/或

所述药用可注射溶剂为选自：水、苯甲醇、氯丁醇、二甲亚砜、甲基吡咯烷酮、丙二醇、聚乙二醇(单)甲醚、三乙酸甘油酯、苯甲酸苄酯、甘油糖醛、甘油缩甲醛、丙二醇、乙醇、乙二醇二乙醚和其他可药用的注射溶剂中的一种或两种以上的组合。

本发明提供的药物组合物的贮存形式可以是溶液、混悬液、冻干粉或预装药物粉末或溶液的注射器形式，可供皮下、皮内、肌肉以及其他部位的注射或埋植。

本发明提供的药物组合物可选自可供局部注射的或埋植用的混悬剂，油针制剂，缓释微球，植入凝胶，多囊脂质体及其他可应用的储库型缓控释局部注射用制剂(如SABER delivery system和Camurus FluidCrystal injection系统等)等。

本发明提供的药物组合物中注射前的单位制剂中药物活性成分的含量(单次注射制剂中含药量)约为0.1mg～200mg，优选制剂含药量为0.5-100mg，更优选1-50mg，甚至更优选2-20mg，人体上所需的单次局部注射或埋值的体积为0.5-2mL，优选每次注射或埋植的制剂量为小于1mL。

鉴于硼替佐米对蛋白酶体的高强度抑制活性，长期的高浓度抑制可能导致机体难以耐受的毒副作用，因此，不排除每一次或多次用药后，给予机体一定“药物假期”的给药形式，即用药后一段时间，待药物吸收并消除后，再给予机体一定的恢复周期，才能再次用药。

本发明提供的硼替佐米药物组合物具有可控的释药行为，注射或埋植给药后，在预定的时间段内，在符合漏槽条件的释放介质中，其释放行为和释放量可控，在水性介质中，37℃条件下，1小时内释放量小于硼替佐米总量的10％，甚至可小于5％；24h释放量小于硼替佐米总量的30％，甚至可小于20％；90％药物释放时间>3天，甚至可大于7天，大于14天或大于30天。

与目前的速效注射剂相比，本发明所提供的药物组合物注射给药后，可快速达到有效抗肿瘤蛋白酶体抑制所需的血药浓度水平，并可避免血药浓度波动，维持在有效的血药浓度下几天，甚至十几天。该有效血药浓度可几天至十几天天维持在1ng/mL-200ng/mL的范围内，甚至血药浓度维持在1.5ng/mL-100ng/mL，甚至血药浓度维持在2ng/mL-50ng/mL。血药浓度波动的降低以及长期高效的蛋白酶体抑制效果，有望提高抗肿瘤疗效，同时减少毒性的产生，实现对肿瘤患者更高效低毒的可调控化治疗和给药频次的调控。

本发明提供了所述硼替佐米药物组合物在制备用于治疗治疗多发性骨髓瘤等癌症的药物中的用途。

本发明提供的硼替佐米药物组合物可用于治疗多发性骨髓瘤等癌症的临床治疗。

与普通速释制剂相比，具有如下优点：

1)可实现药物的可控化释放和吸收，提供精确的体内血药浓度和长时间稳定的蛋白酶体抑制水平，药效持久；

2)可控的药物吸收速率，控制血药浓度水平和波动范围，避免患者用药后过多的不良反应；

3)单次注射或埋植后，可维持较长时间的有效蛋白酶体抑制，减少了普通制剂经常注射的繁琐过程，更加方便临床用药；

4)由于可控的血药浓度及其波动范围，安全窗口较大，临床治疗过程中，临床剂量和给药方案可灵活调节，有望进一步提高治疗剂量，增强抗肿瘤疗效。

为更好的阐述本发明提供的硼替佐米药物组合物性质，下文的叙述是对于本发明的详细说明，对本发明的范围不构成任何限制。

附图说明

图1显示对比实施例1的速释硼替佐米制剂和实施例1中的硼替佐米原位凝胶储库型注射液的犬体内药时曲线图。

图2显示实施例2中的缓释微球的释放曲线。

具体实施方式

1.多囊脂质体

本发明提供的多囊脂质体(Liposomes)主要是由胆固醇和磷脂等组成的类似于生物膜双分子层结构封闭的微小囊泡，是一种新型的药物载体。脂质体按结构可分为3类：单室脂质体(ULV)、多室脂质体(MLV)和多囊脂质体(MVL)，其中前两者为同心脂质体，而MVL则属于非同心脂质体，MVL是由非同心的类脂双分子囊泡紧密堆积而成的聚集体，是一种传递药物的新型脂质体。这种脂质体装载药物后，注射进入体内形成药物储库，产生良好的缓释作用，这样不仅可减少患者的用药次数，还能提高治疗的依从性，已成为众多学者研究的热点。

本发明的硼替佐米药物组合物可以为硼替佐米多囊脂质体形式，其中所述硼替佐米多囊脂质体组合物包含活性成分硼替佐米、脂质成分(包括油脂和表面活性剂)以及非必须的其他可药用的pH/渗透压调节剂中的一种或两种以上的组合；其中，所述硼替佐米多囊脂质体组合物包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，更优选1-50重量份的，甚至更优选1-20重量份的活性成分硼替佐米，0.1-300重量份、优选0.1-200重量份的脂质成分，和非必须的0-10重量份的其他可药用的pH/渗透压调节剂

所述硼替佐米是装载至多囊脂质体内部的唯一活性成分；该制剂组合物可以包括未被多囊脂质体包裹的游离硼替佐米，未被多囊脂质体装载的游离硼替佐米的量一般小于组合物中硼替佐米总量的20％，优选小于10％。

所述脂质成分为至少一种两亲性脂质和/或至少一种中性脂质；所述两亲性脂质为选自磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、相应盐中的一种或两种以上成分的组合；在某些实例中，磷脂酰甘油可以是DPPG，在某些实例中，磷脂酰胆碱可以为DEPC或DOPC或它们的组合物；所述中性脂质可为选自乙二醇酯、角鲨烯、甘油、甘油三酯和丙二醇酯等中的一种或两种以上的组合，在具体的实例中甘油三脂可以选自油酸甘油三酯和辛酸甘油三酯。

在某些实例中，组合物还可以包括脂质膜流动性调节剂、渗透压调节剂或pH调节剂；所述脂质膜流动性调节剂可以选自胆固醇、植物甾醇等；所述pH调节剂为选自非有机酸、有机酸、非有机碱、有机碱中的一种或两种以上的组合，具体地说pH调节剂选自盐酸、磷酸、酒石酸、组氨酸、丁氨酸、氨丁三醇中的一种或两种以上的组合；本发明的多囊脂质体的外相水溶液pH范围可在4.0-9.0之间。

多囊脂质体组合物制剂中的活性成分硼替佐米的单次注射给药量范围是0.1-200mg，在某些实例中，未包裹的游离硼替佐米量占组合物中硼替佐米总量的0％-10％。

本发明提供的多囊脂质体组合物，可静脉、皮下或肌肉注射给药，优选皮下注射给药。

本发明的多囊脂质体的制备方法采用本领域中的常规方法，例如采用复乳法，具体地说，需要包括以下5个步骤：(1)先将处方量的脂质成分溶解于易挥发的有机溶剂(通常为氯仿或氯仿与乙醚的混合液)形成油相，将处方量的硼替佐米溶于水中形成含药的水溶液(第一水相)，再以合适的油水体积比(体积比为1:10-12:10，v/v)将含药的水溶液(第一水相)与脂质的有机相(油相)混合，在室温下超声或机械剪切一定时间制备出均匀的油包水(W/O)型初乳；(2)吸取形成的W/O型初乳，按一定比例注入第二水相缓冲液(体积比为1:10-5:10，v/v)，在30℃条件下机械剪切再次乳化形成稳定的水包油包水(W/O/W)型复乳；(3)将复乳转移至锥形瓶中，以6L/min的速率用惰性气体(如氮气)除去复乳中的有机溶剂(乙醚、氯仿、二氯甲烷等)，可在表面通入氮气或将氮气导管伸入锥形瓶底部来除去有机溶剂；(4)必要时，可用适用于储存和生理上可接受的盐溶液(如0.9％氯化钠溶液)置换第二水相，浓缩；(5)调整药物含量、根据含量灌装。

所用脂质一般包括中性脂质(常用三酰甘油)、磷脂和胆固醇等，中性脂质是MVL制备过程中重要的部分，否则只能得到普通脂质体。制备初乳的方法有：超声、高速分散、乳匀机、喷嘴雾化等，实验室中也常采用涡旋混合器或高速分散器进行乳化。

处方中包封的介质及脂质的种类不同，都会使药物的释放速度不同，其中中性脂质甘油三酯不同的碳链长短可调节药物的释放速度。除此之外，制备MVL时搅拌的时间、温度、速度、外水相体积、氮气流速、分离游离药物的方法等对其粒径、包封率、包封容积和稳定性也会产生一定影响，调节以上工艺条件可获取不同释放速率的硼替佐米多囊脂质体。

本发明所提供的多囊脂质体，于6小时内释放量小于制剂中硼替佐米总量的10％，甚至小于5％；24h释放量小于硼替佐米总量的30％，甚至小于20％；90％药物释放时间>3天。本发明所提供的药物组合物注射给药后，可快速达到有效抗肿瘤蛋白酶体抑制所需的血药浓度水平，并可避免血药浓度波动，维持在有效的血药浓度下几天，甚至数十天。该有效血药浓度可几天至几十天维持在0.2ng/mL-50ng/mL的范围内，甚至血药浓度大于2ng/mL<C<25ng/mL维持7天以上。

2.混悬剂

本发明提供的硼替佐米药物组合物可以通过硼替佐米混悬剂的形式实施，以实现所述的释放行为。所述混悬剂可选自水性介质混悬剂或油性介质混悬剂。

硼替佐米混悬剂包含活性成分硼替佐米，油性溶剂和/或注射用水，和/或混悬剂稳定剂，和/或等渗剂、缓冲剂等；

其中，所述硼替佐米混悬剂包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，更优选1-50重量份的，甚至更优选1-20重量份的活性成分硼替佐米，0-300重量份的油性溶剂和/或注射用水，0.1-500重量份的释放速率调节用辅料，0-5重量份的等渗剂和/或缓冲剂。

在某些实施例中，所述油性溶剂可为选自椰子油、蓖麻油、芝麻油、大豆油、花生油、棉子油以及其他的药学上可应用的溶剂中的一种或两种以上的组合。

所述释放速率调节用辅料可选自表面活性剂和聚合物，表面活性剂可为选自聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20、聚氧乙烯蓖麻油50、聚氧乙烯蓖麻油60、泊洛沙姆和聚氧乙烯脂肪酸酯中的一种或两种以上组合，聚合物可为选自羧甲基纤维素钠、醋酸乙烯酯共聚物、泊洛沙姆、聚乙二醇、羟基乳酸聚合物、聚酯、聚多糖、聚维酮K12/K17、羧甲基纤维素钠和泊洛沙姆中的一种或两种以上的组合。

所述缓冲剂可选自磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸钠、碳酸氢钠、葡甲胺、精氨酸、三乙醇胺和枸橼酸中的一种或两种以上的组合。

所述等渗剂可选自氯化钠、葡糖糖和甘露醇中的一种或两种以上的组合。

本发明提供的混悬剂可以是纳米混悬剂或微米混悬剂，纳米混悬剂粒径范围是50nm-800nm，微米混悬剂的粒径范围是1um-18um。可通过本领域常见的均质破坏法等制备，如首先将混悬剂稳定剂溶于水中，将活性药物置于以上含有稳定剂的溶液，经过初步的剪切破碎后，在一定温度下，循环均质破碎，获取粒径均匀的混悬剂。

本发明提供的混悬剂中的活性成分硼替佐米的单次给药量范围是0.1-200mg，优选0.5-100mg；本发明提供的硼替佐米混悬剂可皮下或肌肉注射给药，优选皮下注射给药。

3.原位凝胶

原位凝胶制剂属于储库型局部注射用制剂的一种，是近年来缓控型注射剂领域的研究热点，它是将药物和聚合物溶于适宜的溶剂中，局部皮下注射，在给药部位，聚合物在生理条件下凝固而形成半固体或固体药物贮库。原位凝胶克服了普通乳剂、脂质体、微球和胶束的缺点，具有可用于病变部位的局部给药、延长释药周期、降低给药剂量和药物不良反应、避免植入剂开刀植入时的痛苦、工艺相对简单等优点。

本发明提供的硼替佐米药物组合物可以通过硼替佐米原位凝胶系统的形式实现所述的释放行为，其特征在于，该原位凝胶系统包含活性成分药物硼替佐米、适宜的溶剂、释放速率调节用凝胶形成材料。其中，所述硼替佐米原位凝胶系统包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，甚至更优选1-50重量份，甚至更优选1-20重量份的活性成分硼替佐米；50-2000重量份，优选100-1000重量份的可药用的注射用溶剂0.1-500重量份，优选0.5-250重量份，甚至更优选0.5-100重量份的所述释放速率调节用凝胶形成材料。

所述硼替佐米原位凝胶系统可以本领域公知的方式制备，具体地，例如，可用聚乙二醇甲醚或N-甲基吡咯烷酮等溶剂溶解药用聚合物聚乳酸或聚乳酸-羟基乙酸共聚物等释放速率调节用凝胶形成材料，形成溶液，该溶液可直接溶解活性药物硼替佐米，或与活性药物分别预装在无菌注射器后，临用前再溶解药物。溶解药物后的溶液，局部注射至人体，凝胶形成材料溶解用溶剂在局部快速吸收，部分溶解药物也随溶剂的吸收而快速吸收，而凝胶材料体内遇水性环境，形成半固体或固体状凝胶，而溶解或分散至凝胶系统内的大部分活性药物，则随着凝胶的降解和溶蚀缓慢释放，实现体内药物平稳吸收和血药浓度维持。

本发明所述的原位凝胶系统中的适宜的溶剂可为选自N-甲基吡咯烷酮、聚乙二醇(单)甲醚、三乙酸甘油酯、苯甲酸苄酯、甘油糖醛、甘油缩甲醛、丙二醇、乙醇、乙二醇二乙醚、苯甲醇、二甲亚砜及其他药学可应用的有机溶剂中的一种或两种以上的组合。

所述释放速率调节用凝胶形成材料包括：聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、醋酸异丁酸蔗糖酯、脂肪酸甘油酯、聚乙二醇化的PLA/PLGA、三乙二醇聚(原酸酯)聚合物以及其他药学可应用局部注射用缓控释材料中的一种或两种以上的组合。

原位凝胶系统中的活性成分硼替佐米的单次给药量范围是0.1-200mg，优选0.5-100mg，更优选1-50mg，甚至更优选1-20mg。

本法明所提供的硼替佐米原位凝胶系统，于6小时内释放量小于制剂中硼替佐米总量的20％，甚至小于10％；24h释放量小于硼替佐米总量的40％，甚至小于30％；90％药物释放时间>3天。本发明所提供的硼替佐米原位凝胶系统注射给药后，可快速达到有效抗肿瘤蛋白酶体抑制所需的血药浓度水平，并可避免血药浓度波动，维持在有效的血药浓度下几天，甚至数十天。该有效血药浓度可几天至几十天维持在0.2ng/mL-50ng/mL的范围内，甚至血药浓度大于2ng/mL<C<25ng/mL维持7天以上。

本发明提供的原位凝胶系统可以溶液状态短期贮存，或以预分装药物和溶剂的注射器形式贮存。

本发明提供的原位凝胶系统可静脉、皮下或肌肉注射给药，优选皮下和肌肉注射给药。

4.微球

本发明提供的微球是指药物溶解或分散在缓释高分子材料基质中形成的微小球状实体，粒径较小，属于基质型骨架微粒。微球具有高效无毒、释药速率恒定以及粒径可控的优点，已广泛应用于长效注射剂的研制。微球注射剂的药物释放速率主要由聚合物传递系统决定。当微球注射入皮下或肌内后，药物可从微球基体内缓慢释放，骨架材料可逐渐水解溶蚀，降解的最后产物为CO2和水，易为机体吸收而不会引起不良反应。

本发明所述释放行为的药物组合物可以硼替佐米微球的方式提供，所述硼替佐米微球包含活性成分硼替佐米和释放速率调节用聚合物材料。本发明的缓释微球包含0.1-200重量份，优选0.5-100重量份，甚至更优选1-50重量份，甚至更优选1-20重量份的活性药物硼替佐米，和0.1-500重量份，优选0.2-250重量份，甚至更优选1-200重量份的释放速率调节用聚合物。

本发明提供的微球制剂为干燥粉末，临用前，需用可注射用水或其他溶剂混悬均匀后注射；所述其他溶剂可选自0.1wt％-1wt％Tween80的水溶液、甘油、聚乙二醇、聚乙二醇甲醚以及其他药物学上可用的并不影响微球稳定性的注射用溶剂中的一种或两种以上组合。

所述硼替佐米缓释微球可以用本领域公知的方式制备，具体地，可将活性药物硼替佐米与释放速率调节用的聚合物材料溶解于适宜的溶剂后，以智能化喷雾干燥静电收集系统喷雾干燥收集制备；硼替佐米与适宜的释放调节用聚合物材料如聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)，首先溶解于溶剂如二氯甲烷中，以0.2ml/min-1ml/min的速率缓慢注射入喷雾干燥静电系统(如瑞士步琦BUCHI小型喷雾干燥仪B-290)，干燥温度为40℃-80℃左右，在喷雾干燥过程，实时监测微球粒径，调节进样速率、喷雾频率，加热温度和通风量大小，待喷雾干燥结束后，收集静电收集系统壁上的微球粉末即可，药物和聚合物溶液的浓度，系统的进样速率，喷雾频率，干燥温度和通风量等对微球的理化性质和产率有较大影响，控制以上影响因素的条件，可获取粒径均匀的缓释微球制剂，本发明提供的缓释微球粒径一般在0.5～20μm之间。本发明提供的缓释微球局部注射至人体内，药物会随着释放速率调节用聚合物基质的降解和溶蚀缓慢释放，实现体内药物平稳吸收和血药浓度维持。所述释放速率调节用聚合物基质材料包括：聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚乙二醇化的PLA/PLGA、壳聚糖、水溶性羧甲基壳聚糖、丝心蛋白、聚-β-羟基丁酸戊酸酯、聚丙交酯/丙交酯-聚乙二醇共聚物共混物、聚β-羟基丁酸酯与聚乙二醇共混物、聚乳酸/羟乙酸共混物以及其他药学可应用的局部注射用缓控释材料中的一种或两种以上组合。

本发明提供的微球系统可以固体粉末形式长期贮存。

本发明提供的缓释微球制剂可静脉、皮下或肌肉注射给药，优选皮下和肌肉注射给药。

实施例

以下实施例一般性地记载了本发明典型组合物的制备方法和/或表征结果，所有的百分比均为重量百分比，除非另有指明。以下实施例是对本发明的具体说明，而不应该认为是对本发明范围的限制。在以下实施例中，未详细描述的各种过程和方法采用本领域中公知的常规方法。

实施例1硼替佐米原位凝胶制剂的制备(储库型制剂)

以N-甲基吡咯烷酮溶解并分散聚乙二醇化的PLA后，再将药物硼替佐米溶解，即得原位凝胶注射液。

对比实施例1：硼替佐米速释制剂

硼替佐米溶解至叔丁醇，再以5％甘露醇的水的溶液稀释，冻干，制备为粉针剂。

试验实施例1

3.5mg当量的对比实施例1的硼替佐米速释制剂给药空腹比格犬(n＝3)，3.5mg当量的实施例1的硼替佐米原位凝胶注射液，前肢内侧腋窝部位皮下给药，在预定时间点取血，血样在4℃条件下，以4000rpm，离心10min，取上层血浆，用于LC-MS的血药浓度检测，结果见图1。

相对于粉针剂的Cmax(501.3ng/mL)，原位凝胶制剂提供的血药浓度的Cmax降低至23ng/mL。由药时曲线图1结果可见，相对于速释制剂，原位凝胶制剂同样快速到达蛋白酶体抑制所需血药浓度后，但血药浓度未出现过高现象，可更长期的维持在有效血药浓度范围内，避免了过多用药毒性的产生，同时，更好的发挥酶抑制作用和抗肿瘤效果，也为药物剂量爬坡和最佳药效的发挥提供了更大的空间。

实施例2：硼替佐米微球的制备

以二氯甲烷溶解硼替佐米和PLGA，以0.2ml/min的进样速率0.5ml/min，注入到干燥温度为65℃、喷雾频率为120kHz、通风量为70L/min的BUCHI B-290喷雾干燥静电收集系统，制备粒径均匀的微球，80％的微球粒径为0.5-10um。

试验实施例2实施例2的硼替佐米微球的释放度试验

实施例2的硼替佐米微球置于生理等渗PBS溶液(pH 7.4)的释放介质中孵育，37℃，100r/min条件下，在预定的时间点，取溶出介质5ml，10000rpm离心5min后，精密量取上清液20μl滤液注入液相色谱仪，记录色谱图，并作出药物累积释放曲线图。

结果见图2，缓释微球于1小时内释放硼替佐米量小于20％，120小时内释放20％左右，192小时时仍持续释药，累积释放量不到30％。