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1、10申请公布号CN104059888A43申请公布日20140924CN104059888A21申请号201410271452322申请日20140617CCTCCNOV20134020130905C12N7/00200601A01N63/00200601A61P7/04200601C12R1/9320060171申请人高小文地址212009江苏省镇江市丁卯潘宗路40号1栋72发明人高小文74专利代理机构南京苏科专利代理有限责任公司32102代理人何朝旭54发明名称一种夜蛾颗粒体病毒、含该病毒的制剂的制备方法及应用57摘要本发明涉及一种病毒、含该病毒的制剂的制备方法及应用，尤其涉及夜蛾颗粒体病。
2、毒、含该病毒的制剂的制备方法及应用，属于生物技术领域。本发明将夜蛾颗粒体病毒GXW93接种于高龄夜蛾等幼虫食料中让其捕食致幼虫细胞病变，而在24H32H搜集的罹病尸体经体表75酒精消毒后粉碎创制高含量的颗粒体颗病毒GXW93制剂。可根据不同植物上夜蛾科害虫发生和危害的特点，将该制剂配制成所需浓度，对发生危害面大、暴食性和抗化性强的夜蛾幼虫进行防治，其有益效果是，防控效果好，防控时间长，可有效降低夜蛾后代发生基数。达到控制夜蛾害虫暴发和危害，促进生态平衡，保护植物生长、提高产量，改进品质之功能。83生物保藏信息51INTCL权利要求书1页说明书11页附图1页19中华人民共和国国家知识产权局12发。
3、明专利申请权利要求书1页说明书11页附图1页10申请公布号CN104059888ACN104059888A1/1页21一种夜蛾颗粒体病毒GXW93，其保藏号为CCTCCNOV201340。2一种含有夜蛾颗粒体病毒的制剂的制备方法，包括以下步骤第一步、将野外与室内交替繁育的幼虫喂食夜蛾颗粒体病毒GXW93，当野外繁育的幼虫为35龄时开始接夜蛾颗粒体病毒GXW93；当室内工厂化繁育的35龄幼虫斜纹夜蛾禁食3545小时，再将夜蛾颗粒体病毒GXW93混入饲料中，搅拌均匀，喂食幼虫，保持环境温度2838，光照强度25003000LUX，相对湿度7075，待幼虫细胞病变；第二步、在幼虫细胞病变的2432小。
4、时内搜集具有急剧痉挛反应、后足指尖插入植物顶部组织或叶缘叶肉组织而倒挂死亡幼虫尸体，将幼虫尸体经体表酒精消毒后，待80以上的尸体体表破裂流出乳白色的浓稠液体后，将幼虫尸体粉碎至粒径在75NM以上；第三步、将粉碎出的幼虫体液制成大于110亿OB/ML的夜蛾颗粒体病毒GXW93制剂。3根据权利要求2所述含有夜蛾颗粒体病毒的杀虫剂的制备方法，其特征在于所述第一步中，幼虫包括银纹夜蛾、烟青虫、小莱蛾、菜青虫、斜纹夜蛾、稻螟虫或粘虫的幼虫，所述交替繁育是室内工厂化繁育斜纹夜蛾等夜蛾昆虫5代后，再将斜纹夜蛾等夜蛾昆虫移至室外寄主作物上繁殖1代。4根据权利要求3所述含有夜蛾颗粒体病毒的杀虫剂的制备方法，其特。
5、征在于所述幼虫为高龄斜纹夜蛾幼虫。5根据权利要求3所述含有夜蛾颗粒体病毒的杀虫剂的制备方法，其特征在于所述夜蛾颗粒体病毒GXW93的加入量为每百斤饲料接入干燥GXW93菌株100G。6根据权利要求2所述含有夜蛾颗粒体病毒的杀虫剂的制备方法，其特征在于所述步骤三中粉碎方式为砂磨粉碎。7根据权利要求2所述含有夜蛾颗粒体病毒的制剂的应用，其特征在于将所述夜蛾颗粒体病毒GXW93制剂用清水稀释500600倍液后加入8ML的农用有机硅制成悬浮液，在晴天的傍晚将悬浮液喷施于斜纹夜蛾等幼虫取食植株上即可。8根据权利要求7所述含有夜蛾颗粒体病毒的制剂的应用，其特征在于所述喷施条件是2838、光照强度25003。
6、000LUX，相对湿度6585的环境下喷施。权利要求书CN104059888A1/11页3一种夜蛾颗粒体病毒、含该病毒的制剂的制备方法及应用技术领域0001本发明涉及一种病毒、含该病毒的制剂的制备方法及应用，尤其涉及夜蛾颗粒体病毒、含该病毒的制剂的制备方法及应用，属于生物技术领域。背景技术0002半个多世纪以来，用化学农药防治害虫对农业增产增收作出了巨大贡献。但长期依赖和大量使用化学农药所带来的环境及农产品污染、生态失衡以及食品安全等问题也日益显现。减少使用高毒高残留农药，并推广无公害生产或防控技术就成了当务之急，害虫的生物防治也就显得尤为迫切。寄生于农业害虫的病毒巳发现约200余种，其中大多。
7、数属于杆状病毒，少数是颗粒体病毒，由于昆虫病毒有高度的专一寄生性，通常一种病毒只侵染一种昆虫，而对他种昆虫和人无害，因此不干扰生态平衡，已有小规模商品化生产的病毒杀虫剂，多数用于防治鳞翅目害虫，例如棉铃虫舞毒蛾斜纹夜蛾天幕毛虫菜粉蝶等，我国在80年代巳广泛试验推广核型多角体病毒杀虫剂。现有生物制剂的缺陷是宿主窄、致病慢、效果差、病原体易受光照影响而药效期短，其次制剂不耐40度以上高温贮存、货架期短会失去防效。发明内容0003本发明要解决的技术问题是针对现有技术存在的缺陷，提出一种夜蛾颗粒体病毒，该颗粒体病毒可使三种或三种以上的夜蛾幼虫致病死亡，俗称为夜蛾颗粒体病毒。如银纹夜蛾、烟青虫、小莱蛾、。
8、钭纹夜蛾等、含该病毒的制剂的制备方法及应用，安全高效地防治害虫。0004本发明首先提供夜蛾颗粒体病毒GXW93，于2013年9月20日保藏在中国武汉大学中国典型培养物保藏中心其保藏号为CCTCCNOV201340。0005夜蛾颗粒体病毒MAMESTRAOLERACEAGRANULOSISVIRUSGVGXW93隶属于杆状病毒科颗粒体病毒属，是一种双链包涵体病毒。在JSM7001F扫描分析电镜下研究发现，包涵体病毒呈折光性的颗粒，呈圆形，大小为320189，内部含有一个病毒粒子，病毒粒子分子量为859KB的DNA和蛋白质外壳组成，病毒的感染力主要由DNA和蛋白衣壳的完整性决定的，病毒粒子外包裹了。
9、致密的晶格的颗粒体蛋白，形成病毒包涵体。0006本发明将夜蛾颗粒体病毒GXW93接种于高龄夜蛾幼虫食料中让其捕食致幼虫细胞病变，而在24H32H搜集的罹病尸体经体表75酒精消毒后粉碎创制高含量的颗粒体颗病毒GXW93制剂，具体的制备方法如下0007第一步、将野外与室内交替繁育的幼虫喂食夜蛾颗粒体病毒GXW93，当野外繁育的幼虫为35龄时开始接夜蛾颗粒体病毒GXW93；当室内工厂化繁育的35龄幼虫斜纹夜蛾禁食3545小时，再将夜蛾颗粒体病毒GXW93混入饲料中，搅拌均匀，喂食幼虫，保持环境温度2838，光照强度25003000LUX，相对湿度7075，待幼虫细胞病变；说明书CN104059888。
10、A2/11页40008第二步、在幼虫细胞病变的2432小时内收集具有急剧痉挛反应、后足指尖插入植物顶部组织或叶缘叶肉组织而倒挂死亡幼虫尸体，将幼虫尸体经体表酒精消毒后，待80以上的尸体体表破裂流出乳白色的浓稠液体后，将幼虫尸体粉碎至粒径在75NM以上；0009第三步、将粉碎出的幼虫体液制成大于110亿OB/ML的夜蛾颗粒体病毒GXW93制剂。0010所述第一步中，选择野外或室内繁育的幼虫。幼虫包括银纹夜蛾、烟青虫、小莱蛾、菜青虫、斜纹夜蛾、稻螟虫或粘虫的幼虫，交替繁育的步骤是室内工厂化繁育斜纹夜蛾等夜蛾昆虫5代后，以保持毒力效价的稳定，再将斜纹夜蛾等夜蛾昆虫移至室外寄主作物上繁殖1代，所述夜蛾。
11、颗粒体病毒GXW93的加入量为每百斤饲料接入干燥GXW93菌株100G。所述步骤三中粉碎方式为砂磨粉碎。0011本发明进一步提供含有夜蛾颗粒体病毒的制剂的应用，将所述夜蛾颗粒体病毒GXW93制剂用清水稀释500600倍液后加入8ML的农用有机硅制成悬浮液，在晴天的傍晚将悬浮液喷施于植株上即可。0012优选的喷施条件是2838、光照强度25003000LUX，相对湿度6585的环境下喷施，防治效果可达100，持效期达到60天以上。0013由于纯化的病原体具有与野外环境相适应的特性，具有耐高温强光和很强致病性，目前已知宿主害虫近十种且具广谱性。本发明采用夜蛾幼虫活细胞在特定温度、光照和相对湿度的条。
12、件下繁殖夜蛾颗粒体颗病毒GXW93，并利用夜蛾颗粒体颗病毒GXW93创制一种安全、高效的含有夜蛾颗粒体颗病毒GXW93的微生物制剂。可根据不同植物上夜蛾科害虫发生和危害的特点，将该制剂配制成所需浓度，对发生危害面大、暴食性和抗化性强的夜蛾幼虫进行防治，本发明的优点是制剂致病快、效果好、杀虫谱广，又因GXW93病毒耐高和湿强光显示和较好野性，具有持续防控效果、防控时间长，可有效降低夜蛾后代发生基数。达到控制夜蛾害虫暴发和危害，促进生态平衡，保护植物生长、提高产量，改进品质之功能。附图说明0014图1为110亿OB/ML夜蛾颗粒体颗GXW93制剂500倍液防治辣椒斜纹夜蛾的虫尸体。0015图2为夜。
13、蛾颗粒体颗GXW93在JSM7001F扫描分析电镜特征。具体实施方式0016实施例0017本发明的夜蛾颗粒体病毒GXW93的来源是发明人于2004年8月13日高温强光季节在镇江南山野茄子上发现采集的罹病倒挂斜纹夜蛾尸体。并于2013年9月20日保藏在中国武汉大学中国典型培养物保藏中心其保藏号为CCTCCNOV201340。0018本实施例通过以下方法制备含夜蛾颗粒体病毒GXW93的制剂00191将从野外罹病夜蛾幼虫尸体中分离纯化的，具有高致病力夜蛾颗粒体颗病毒GXW93经过5、15、75冷冻干燥后备用。因冷冻前物料含水份的差异，每个温度的冷冻时间分别为80100分钟、17001800分钟、12。
14、001300分钟。说明书CN104059888A3/11页500202将野外与室内交替繁育。即室内工厂化繁育斜纹夜蛾等夜蛾昆虫5代后，以保持毒力效价的稳定，再将斜纹夜蛾等夜蛾昆虫移至室外寄主作物上繁殖1代，35龄的幼虫时开始接夜蛾颗粒体病毒GXW93或室内工厂化繁育的35龄幼虫斜纹夜蛾禁食3545小时，再将夜蛾颗粒体病毒GXW93混入饲料中，搅拌均匀，喂食幼虫，保持环境温度2838，光照强度25003000LUX，相对湿度7075，待幼虫细胞病变；00213当2幼虫细胞病变，且在24H32H搜集的罹病尸体经体表75酒精消毒后，待80以上尸体体表破裂流出乳白色的浓稠液体时，用砂磨机粉碎至粒径在7。
15、5NM以上，制成每毫升GXW93菌株110亿OB以上高含量的颗粒体颗病毒GXW93制剂，主要是将砂磨粉碎出的幼虫体液，抽样涂板电镜测定110128亿OB/ML的夜蛾颗粒体病毒GXW93制剂。00224对颗粒体颗病毒GXW93制剂进行相关试验。0023以上幼虫可以是银纹夜蛾、烟青虫、小莱蛾、菜青虫、钭纹夜蛾、稻螟虫、粘虫的幼虫。00241鉴别试验002511夜蛾颗粒体病毒体MOGV的形态特征0026夜蛾颗粒体颗GXW93制剂致中毒昆虫产生剧烈痉挛性反应攀登至辣椒顶部枝条和叶缘部，后腹两对足剌插入叶肉呈倒挂死亡见图1。0027罹病尸虫体液在JSM7001F扫描分析电镜下研究发现，病毒呈折光性的颗粒。
16、，圆形，大小为320185，内部含有12个病毒粒子，病毒粒子分子量为859KB的DNA和蛋白质外壳组成，病毒粒子外包裹了致密的晶格的颗粒体蛋白见图2。002812仪器0029移液器、量筒、试管、载玻片、酒精灯、WARNING型喷金仪、JSM7001F扫描电镜分析仪。003013试验方法0031131制备夜蛾颗粒病毒MOGV图片0032将制好的夜蛾颗粒病毒MOGVGXW93悬浮液，用移液器取1ML，稀释至105106，再取稀释液001ML于2CM2载玻片上，将载玻片移置酒精灯上快速烤干。0033132玻片喷铂金0034将制作的载夜蛾颗粒病毒MOGVGXW93玻片标本输入WARNING型喷金仪内喷。
17、金，约20秒，喷金厚度为20NM，停机取出。0035133夜蛾颗粒体病毒微粒图像的投影0036将喷有铂金的载玻片输入JSM7001F扫描电镜分析仪，搜捕靶标，当屏幕上出现病毒颗粒体320185左右的图形，即为夜蛾颗粒体病毒MOGVGXW93病毒颗粒。00372含BO量及杂菌率测定003821待测样稀释0039取试管8支，每试管中装无菌水9ML，用无菌移液器抽取样品1ML加入第一支试管，抽吸三次，充分摇匀后，移液器换上无菌吸头，吸取1ML转入第二支试管，依次类推，得到稀释倍数为101、102、103、104、105、106、107、108的夜蛾颗粒体病毒稀释液。004022载片涂布及夜蛾颗粒体病。
18、毒计数说明书CN104059888A4/11页60041221载片涂布0042分别取稀释倍数为106、107、108三个梯度的夜蛾颗粒体病毒MOGVGXW93稀释液01ML，涂布在22CM载玻片上，重复5次，共15片，以无菌水作空白对照，将载玻片移置酒精灯上快速烤干，将制作烤干的载夜蛾颗粒病毒MOGVGXW93玻片标本输入WARNING型喷金仪内喷金，约20秒，喷金厚度为20NM，停机取出后，再将喷有铂金的载玻片输入JSM7001F扫描电镜分析仪，搜捕靶标，进行计数。0043222夜蛾颗粒体病毒MOGVGXW93及杂菌计数0044在JSM7001F扫描电镜分析仪下，选择22CM载玻片上夜蛾颗粒。
19、体病毒MOGVGXW93数在30300范围内的同一稀释度片5个，清点选中的5个片中的夜蛾颗粒体病毒体总数。非夜蛾颗粒体病毒体MOGVGXW93形态特征的计数为杂菌。0045每片夜蛾颗粒体病毒体平均数A病毒总数/50046每片非夜蛾颗粒体病毒体平均数非MOGVGXW93总数/5。00473毒力效价的测定004831材料和试剂0049斜纹夜蛾野外捕获，经室内饲养一代后备用。0050饲料未施农药的甘蓝叶片或辣椒叶片。005132测定方法0052采用浸叶法测定。根据估计的LC50值，以此为中心上下23个梯度，将待测样和标准品稀释成57个等比系列浓度，以清水为对照，将供饲喂的菜叶在不同浓度的待测液、标准。
20、液中和清水中浸5S，取出后自然晾干，每烧杯内放入处理后的菜叶24片，接入三龄幼虫20头，重复三次，每浓度共处理幼虫60头，用保鲜膜封口，放入温度271，光周期为1410HLD的养虫室内，48H检查试虫死亡情况，用细签触动虫体，完全无反应者为死虫。计算待测样品和标准品的平均死亡率和校正死亡率。对照死亡大于10，测试结果无效，必须重新试验。0053校正死亡率药剂处理死亡率空白对照死亡率/1空白对照死亡率10030054将试验所得的数字输入SPSS12软件，求出标准品和待测样品的LC50值及置信限，计数待测样品的毒力效价。0055待测样品毒力效价标准品LC50值标准品效价/待测样品LC50值4005。
21、633允许差0057毒力测定允许相对偏差，每个样品三次重复测定结果最大相对偏差不超过20。或经合适的统计方法检测差异不显著。00584悬浮率的测定005941仪器、试剂0060量筒250ML具塞，吸液管，秒表，三角瓶500ML、100ML，恒温水浴锅，标准硬水配制方法按GB/T54512001中标准硬水配制方法进行。006142操作步聚0062将样品摇匀后取5ML精确到001ML，于100ML三角瓶中，加入标准硬水，用手说明书CN104059888A5/11页7摇动作圆周运动，左右旋各30次。制得悬浮液移到250ML具塞量筒中，用标准硬水稀释到250ML。0063将量筒放入301恒温水浴锅中，。
22、当悬浮液温度达30时，将量筒盖好，拿起量筒轻轻摇起沉淀物，然后有规律地以量筒中部为中心上下颠倒30S，使呈均匀悬浮液，量筒仍放入恒温水浴锅中，打开瓶塞，静置30MIN，用吸液管以抽气法将量筒上部9/10的悬浮液抽出在15S30S内完成。抽液过程中，吸管应依附筒壁随液面下降而下降，勿搅动下部沉淀。0064用平板计数法测定试样和留在量筒底部25ML悬浮液的含夜蛾颗粒病毒量。006543计算0066试样悬浮率1111BC/B0067式中0068B配制悬浮液所取试样中的含颗粒体病毒，单位亿OB；0069C留在量筒底部25ML悬浮液的含菌量，单位亿OB。007045倾倒性试验0071451方法提要007。
23、2将置于容器中的悬浮剂试样放置一定时间后，按照规定程序进行倾倒，测定滞留在容器0073内试样的量；将容器用水洗涤后，再测定容器内的试样量。0074452仪器0075具磨口塞量筒500ML2ML。量筒高度39CM，上、下刻度间距离25CM。0076453试验步骤0077将抽取的样品倒入已称量的量筒中包括塞子，装至量筒体积的8/10处，塞紧磨口塞，称量，放置24H后，打开塞子，将量筒由直立位置旋转1350，倾倒60S，再倒置60S，重新称量筒和塞子。0078将相当于80量筒体积的水20倒人量筒中，塞紧磨口塞，将量筒颠倒10次后，按上述操作倾倒内容物，第三次称量量筒和塞子。0079454计算0080。
24、倾倒后的残余物W1,和洗涤后的残余物W2,分别按6、7式计算。008100820083式中0084M1量筒、磨口塞和试样的质量，G；0085M2倾倒后，量筒、磨口塞和残余物的质量，G；0086M3洗涤后，量筒、磨口塞和残余物的质量，G；0087M0量筒、磨口塞恒重的质量，G。00886持久起泡性试验说明书CN104059888A6/11页8008961方法提要0090将规定量的试样与标准硬水混合，静置后记录泡沫体积。009162试剂0092标准硬水PCA2MG2342MG/L，PH6070。按GB/T148252006配制。009363仪器0094具塞量筒250ML分度值2ML，0250ML刻。
25、度线20CM215CM，250ML刻度线到塞子底部4CM6CM。0095工业天平感量01G，载量500G。009664测定步骤0097将量筒加标准硬水至180ML刻度线处，置量筒于天平上，称入试样10G精确至01G，加硬水至距量筒塞底部9CM的刻度线处，盖上塞，以量筒底部为中心，上下颠倒30次每次2S。放在试验台上静置1MIN，记录泡沫体积。00987低温稳定性试验009971方法提要0100试样在0保持1H，观察外观有无变化。继续在0贮存7D,测试其物性指标是否符合标准要求。010172仪器0102制冷器保持02。010373试验步骤0104取80ML试样置于100ML烧杯中，在制冷器中冷却。
26、至02，保持1H，其间每隔15MIN搅拌1次，每次15S，观察外观有无变化。将烧杯放回制冷器，在02继续放置7D。7D后，将烧杯取出，恢复至室温，按46、47完成悬浮率和湿筛试验的测定。悬浮率和湿筛试验符合标准要求为合格。01058热贮稳定性试验010681仪器0107恒温箱452；安瓿50ML；医用注射器50ML。010882试验步骤0109用注射器将约30ML试样，注入洁净的安瓿中避免试样接触瓶颈，置此安瓿于冰盐浴中制冷，用高温火焰封口避免溶剂挥发。至少封6瓶，分别称量。将封好的安瓿置于金属容器内，再将金属容器放入恒温箱452中，放置42D。取出将安瓿外面拭净后分别称量，质量未发生变化的试。
27、样，于24H内进行含量和悬浮率的测定，热贮后有效成份分解率不大于5，悬浮率符合标准要求为合格。110亿OB/ML的夜蛾颗粒体病毒悬浮剂包装件应贮存在通风、干燥的库房中。0110本实施例进一步提供夜蛾颗粒体颗病毒GXW93制剂的应用，将夜蛾颗粒体病毒GXW93制剂用清水稀释500600倍液后加入8ML的农用有机硅制成悬浮液，在晴天的傍晚将悬浮液喷施于植株上即可。优选的喷施条件是2838、光照强度25003000LUX，相对湿度6585的环境下喷施，防治效果可达100，持效期达到60天以上。0111防效实验01121将获得的110亿OB/ML颗粒体颗病毒GXW93制剂进行室内生测试验说明书CN10。
28、4059888A7/11页90113室内毒力测定结果表明采用浸液法处理斜纹夜蛾3龄初幼虫后，夜蛾颗粒体颗病毒GXW93杀虫剂的LC50值为003110ML/L95置信限为0022900423ML/L，表明对斜纹夜蛾幼虫具有明显的杀虫活性；与对照药剂BTWP60000IU/MG的LC50值为04422G/L95置信限为0283606895G/L相比，其毒力明显高于BTWP60000IU/MG，LC50值的95置信限不重叠表1，统计分析差异显著。0114表1夜蛾颗粒体颗病毒GXW93杀虫剂对斜纹夜蛾的室内毒力测定结果浸叶法3龄初幼虫201384011501162将获得的110亿OB/ML颗粒体颗病。
29、毒GXW93制剂进行野外黄杨卷叶野螟防效试验0117110亿OB/ML颗粒体颗病毒GXW93制剂用于黄杨卷叶螟的防控，浓度以800倍液左右为宜，单位面积用药量视黄杨植被情况或者叶面积指数而定，以均匀喷细雾且药液遍布叶片为度。0118表2各药剂对黄杨卷叶螟的防控效果0119表2各药剂对黄杨卷叶野螟在自然界的防治效果0120201372801210122说明书CN104059888A8/11页100123各药剂室外防治试验结果见表1。从表1可以看出，药后1D，110亿OB/ML颗粒体颗病毒GXW93制剂处理的虫口减低率最高，防效最好，其次是48乐斯本。药后3D，100亿孢子/ML短稳杆菌处理的虫口。
30、减低率和防效仍据第一位，2甲维盐、12苦参烟碱、48乐斯本的防效较好。药后7D，48乐斯本防效最好，达99以上，110亿OB/ML颗粒体颗病毒GXW93制剂位居第二，25灭幼脲3号防效极显著差于其他各处理，仅有3726。从药剂的持续防效和见效速度来看，110亿OB/ML颗粒体颗病毒GXW93制剂最好，不仅具有及时性，同时具有持效性。01243将获得的110亿OB/ML颗粒体颗病毒GXW93制剂进行野外防控试验0125表3110亿BO/ML颗粒体颗GXW93制剂辣椒害虫试验01262013月8月正是江苏镇江菜区秋季辣椒上斜纹夜蛾、银纹夜蛾以及烟青虫暴发的季节，整个辣椒全株受害，三种害虫世代重叠，。
31、孙剑华和高小文两位高级农艺师选择一块虫态最复杂、危害最严重的辣椒田，于8月16日上午10时用110亿OB/ML颗粒体颗GXW93制剂500倍液喷雾法防治，于8月17日上午630分进行防后观察时，发现暴露捕食的害虫全部攀登辣椒顶部枝条和叶缘部，后腹两对足剌插入幼嫩技条表皮组织或叶肉组织呈倒挂死亡，这种昆虫夜蛾颗粒体颗GXW93制剂夜蛾类害虫攀登辣椒顶部枝条和叶缘部，后腹两对足剌插入叶肉呈倒挂死亡现象，经中国农科院蚕业研究所吴福安研究员以及江苏大学医学陆荣柱教授等6位专家分析，可能是中毒昆虫的痉挛性反应。因斜纹夜蛾、银纹夜蛾和烟青虫并有潜入辣椒果实内危害和转椒以及昼伏夜出危害的特点，一但接触取食到。
32、辣椒植株表面颗粒体颗GXW93就必死无疑，加上喷洒颗粒体颗GXW93的小区辣椒长势嫩绿茂盛，每天都能诱集到迁移性较强的斜纹夜蛾罹病尸体，根据逐日人工搜集虫尸体记载从2013年8月17日2013年10月25日表30127说明书CN104059888A109/11页110128说明书CN104059888A1110/11页120129从表3看出，从8月16日用110亿BO/ML颗粒体颗GXW93制剂500倍液防治辣椒害虫单因子试验到10月25日67天的时间里来讲，110亿OB/ML颗粒体颗GXW93制剂500倍液表现为快速、高效、持效以及能长时间控制害虫、且不伤害天敌如图。01304110亿OB/。
33、ML颗粒体颗GXW93制剂室内试验原始记录表0131试验时间2014年5月6日到5月9日0132供试材料害虫名称小菜蛾药剂名称110亿OB/ML颗粒体颗GXW93制剂0133稀释浓度、号样分别为600、800、1000倍液清水对照，三次重复，每处理10头3龄初幼虫；110亿OB/ML颗粒体颗GXW93制剂500倍液，12头3龄中幼虫、12头4龄说明书CN104059888A1211/11页13初幼虫0134表4结果调查死/活01350136除上述实施外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。说明书CN104059888A131/1页14图1图2说明书附图CN104059888A14。