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1、(10)申请公布号 CN 103604934 A (43)申请公布日 2014.02.26 CN 103604934 A (21)申请号 201310616079.6 (22)申请日 2013.11.29 G01N 33/74(2006.01) G01N 33/577(2006.01) (71)申请人 刘宏书 地址 100086 北京市西城区新街口外大街 28 号 B 座 321 (72)发明人 刘宏书 (74)专利代理机构 北京金智普华知识产权代理 有限公司 11401 代理人 皋吉甫 (54) 发明名称 畜类绒毛膜促性腺激素快速检测方法及快速 检测测试卡 (57) 摘要 本发明是一种畜类绒。
2、毛膜促性腺激素快速检 测方法及快速检测测试卡， 该检测测试卡由测试 盒和试纸条结构构成， 测试盒包括盒盖 (1) 和盒 底(2)， 所述盒盖(1)中心处设有观察窗(3)， 试纸 条结构设置在盒底 (2) 内表面并处于观察窗 (3) 下方 ； 盒底 (2) 底部一端设有开口 (18) 和吸样块 (9)， 所述吸样块 (9) 为倒梯形， 插接在所述开口 (18) 内， 其长底处在盒内， 短底处在盒外。本发明 直接吸取畜类排在地面的尿液进行即时检测， 而 不受地面其它污物的影响， 不用人工和特殊设备 去接收畜类的排尿 ； 检测设备准确高效、 便于携 带、 简便快捷、 即时， 成本低、 易于操作 ； 。
3、能根据不 同畜类的绒毛膜促性腺激素含量的不同变化检测 出孕胎的数量。 (51)Int.Cl. 权利要求书 3 页 说明书 7 页 附图 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书3页 说明书7页 附图2页 (10)申请公布号 CN 103604934 A CN 103604934 A 1/3 页 2 1. 一种畜类绒毛膜促性腺激素快速检测测试卡， 所述测试卡包括测试盒和试纸条结 构， 所述测试盒由盒盖 (1) 和盒底 (2) 构成， 盒盖 (1) 与盒底 (2) 插接吻合在一起 ； 其特征 在于 ： 所述盒盖(1)中心处设有观察窗(3)， 试纸条结构设置在盒。
4、底(2)内表面并处于观察窗 (3) 下方 ； 所述盒底(2)底部一端设有开口(18)和吸样块(9)， 所述吸样块(9)为倒梯形， 插接在 所述开口 (18) 内， 其长底处在盒内， 短底处在盒外 ； 所述试纸条结构包括底板 (11)、 吸水纸 (10)、 NC 膜 (12)、 覆盖胶 (13) 和胶体金垫 (14) ； 所述底板 (11) 固定在盒底 (2) 底部， 所述吸水纸 (10)、 NC 膜 (12) 和胶体金垫 (14) 顺次搭接并粘贴在底板 (11) 的上表面， 搭接方式为吸水纸 (10) 和胶体金垫 (14) 分别盖住 NC 膜 (12) 的两端 ； 所述胶体金垫 (14) 的另。
5、一端完全覆盖所述吸样块 (9) 上表面， 所述 NC 膜 12 处于观察窗 (3) 正下方， 所述覆盖胶 (13) 覆盖在 NC 膜 (12) 和胶体金垫 (14) 的搭接 处。 2. 根据权利要求 1 所述的检测测试卡， 其特征在于 ： 所述盒盖 (1) 内表面设有固定柱 (6)、 固定栓 (4)、 透明片 (15) 和压金台 (5)， 所述固定柱 (6) 分别设置在矩形的四个角处 ； 所述透明片 (15) 覆盖观察窗 (3) ； 所述固定栓 (4) 和压金台 (5) 分别设置在观察窗 (3) 的 两侧， 其中固定栓 (4) 处于吸水纸 (10) 上方， 压金台 (5) 处于吸样块 (9) 。
6、上方 ； 所述盒底(2)内表面设有固定柱孔(7)， 所述固定柱孔(7)的位置与所述固定柱(6)对 应， 所述盒盖 (1) 与盒底 (2) 通过固定柱 (6) 和固定柱孔 (7) 插接 ； 在所述盒盖 (1) 与盒底 (2) 扣合时， 所述压金台 (5) 配合吸样块 (9) 将覆盖在吸样块 (9) 上的胶体金垫 (14) 和覆盖胶 (13) 的一端压稳 ； 所述固定栓 (4) 将吸水纸 (10) 固定。 3. 根据权利要求 2 所述的检测试卡， 其特征在于 ： 所述盒底 (2) 外表面设有外支柱 (8)， 内表面设有干燥剂存放处 (16) 和夹槽档 (17)， 所述外支柱 (8) 和干燥剂存放处。
7、 (16) 处于开口 (18) 的相对一侧， 所述干燥剂存放处 (16) 设置在两个固定柱孔 (7) 中间， 所述夹 槽档 (17) 围成一个矩形框， 处于固定柱孔 (7) 的 4 个顶点内， 所述底板 (11) 固定在该矩形 框内。 4. 根据权利要求 1-3 其中之一所述的检测测试卡， 其特征在于 ： 所述盒盖 (1) 和盒底 (2) 一侧扣合处分别设置上闭合柱 (21) 和下闭合柱 (22)， 在该侧盒底 (2) 与压金台 (5) 对 应位置设置下压金台 (19) ； 所述盒盖 (1) 和盒底 (2) 扣合时， 下压金台 (19) 与压金台 (5)、 上闭合柱 (21) 和下闭合柱 (2。
8、2) 分别闭合 ； 所述吸样块 (9) 加长加宽为长方片状， 设置在上闭合柱 (8) 与下闭合柱 (16) 以及下压 金台 (19) 与压金台 (5) 的闭合处， 并伸出盒外 ； 所述上闭合柱(8)和下闭合柱(16)闭合夹住吸样块(9)， 同时下压金台(19)配合压金 台 (5) 将吸样块 (9)、 胶体金垫 (14) 和覆盖胶 (13) 压稳。 5. 根据权利要求 1-3 其中之一所述的检测测试卡， 其特征在于， 所述吸样块 (9) 下方 的盒底 (2) 上设置下压金台 (19) ； 吸样块 (9) 上方的盒盖 (1) 内设置加样孔 (20)， 在盒盖 (1) 与盒底 (2) 扣合时， 下压。
9、金台 (19) 配合加样孔 (20) 将吸样块 (9)、 胶体金垫 (14) 和覆 盖胶 (13) 的一端压稳， 吸样块 (9) 露出盒盖 (1)。 6. 使用如权利要求 1-3 其中之一所述的畜类绒毛膜促性腺激素检测测试卡的检测方 权 利 要 求 书 CN 103604934 A 2 2/3 页 3 法， 其特征在于， 所述检测方法包括步骤 ： 1)将盒盖(1)与盒底(2)扣合， 使所述压金台(5)配合吸样块(9)将覆盖在吸样块(9) 上的胶体金垫 (14) 和覆盖胶 (1)(3) 的一端压稳， 固定栓 (4) 将吸水纸 (10) 固定住， 吸水 纸 (10) 和胶体金垫 (14) 分别盖住。
10、 NC 膜 (12) 的两端 ； 2) 将盒体直接平放至畜类动物尿液上， 使吸样块 (9) 接触并吸收动物尿液， 过滤其杂 质， 保持 5 10 秒钟 ； 3) 取出平放， 从观察窗观察测试结果 ； 4) 当试纸 NC 膜 (12) 出现两条紫红色或红色条带， 为妊娠诊断阳性 ； 只在控制区出现 一条紫红色条带红色条带， 为妊娠诊断阴性 ； 当测试线和控制线均不显色时， 表示测试卡无 效。 7. 使用如权利要求 4 所述的畜类绒毛膜促性腺激素检测测试卡的检测方法， 其特征在 于， 所述检测方法包括步骤 ： 1)将盒盖(1)与盒底(2)扣合， 使所述压金台(5)配合吸样块(9)将覆盖在吸样块(9。
11、) 上的胶体金垫 (14) 和覆盖胶 (1)(3) 的一端压稳， 固定栓 (4) 将吸水纸 (10) 固定住， 吸水 纸 (1)(0) 和胶体金垫 (14) 分别盖住 NC 膜 (12) 的两端 ； 2)将吸样块(9)盒外部分直接蘸取畜类动物尿液， 吸样块(9)吸收动物尿液， 并过滤其 杂质， 保持 5 10 秒钟 ； 3) 取出平放， 从观察窗观察测试结果 ； 4) 当试纸 NC 膜 (12) 出现两条紫红色或红色条带， 为妊娠诊断阳性 ； 只在控制区出现 一条紫红色条带红色条带， 为妊娠诊断阴性 ； 当测试线和控制线均不显色时， 表示测试卡无 效。 8. 使用如权利要求 5 所述的畜类绒毛。
12、膜促性腺激素检测测试卡的检测方法， 其特征在 于， 所述检测方法包括步骤 ： 1) 将盒盖 (1) 与盒底 (2) 扣合， 下压金台 (19) 配合加样孔 (20) 将吸样块 (9)、 胶体金 垫 (14) 和覆盖胶 (13) 的一端压稳 ； 固定栓 (4) 将吸水纸 (10) 固定， 吸水纸 (10) 和胶体金 垫 (14) 分别盖住 NC 膜 (12) 的两端 ； 2)将盒体平放， 向加样孔(20)滴加畜类动物尿液， 吸样块(9)吸收动物尿液， 并过滤其 杂质， 保持 5 10 秒钟 ； 3) 取出平放， 从观察窗观察测试结果 ； 4) 当试纸 NC 膜 (12) 出现两条紫红色或红色条带。
13、， 为妊娠诊断阳性 ； 只在控制区出现 一条紫红色条带红色条带， 为妊娠诊断阴性 ； 当测试线和控制线均不显色时， 表示测试卡无 效。 9.根据权利要求6所述的检测方法， 其特征在于， 所述吸样块(9)使用前经处理液侵泡 后干燥， 该处理液按以下步骤顺序进行制备 ： 1) 取 18 兆超纯水 4000ml， 用清洁干净的洁净烧杯盛装 ； 2) 称 60g Tris 试剂 ( 分析纯 ) 直接加入， 搅拌溶解 ； 3) 称 48g PVP 试剂， 直接加入， 溶解 ； 4) 称 Casein( 酪蛋白 )30g， 直接加入， 搅拌完全溶解 ； 5) 加入 Na2CO3( 无水 )20g， 直接加。
14、入溶解 ； 权 利 要 求 书 CN 103604934 A 3 3/3 页 4 6) 称 S-9(Tetronic1307) 试剂， 直接加入， 完全溶解 ； 7) 量取 13.8ml Triton X-100 试剂， 完全溶解 ； 8) 加入 1.0g NaN3蛋白保护剂， 完全溶解 ； 9) 用稀 HCC 调配， 直至 PH=9.0。 10. 根据权利要求 7 或 8 所述的检测方法， 其特征在于， 所述吸样块 (9) 使用前经处理 液侵泡， 该处理液按以下步骤顺序进行制备 ： 1) 取 18 兆超纯水 4000ml， 用清洁干净的洁净烧杯盛装 ； 2) 称 60g Tris 试剂 ( 。
15、分析纯 ) 直接加入， 搅拌溶解 ； 3) 称 48g PVP 试剂， 直接加入， 溶解 ； 4) 称 Casein( 酪蛋白 )30g， 直接加入， 搅拌完全溶解 ； 5) 加入 Na2CO3( 无水 )20g， 直接加入溶解 ； 6) 称 S-9(Tetronic1307) 试剂， 直接加入， 完全溶解 ； 7) 量取 13.8ml Triton X-100 试剂， 完全溶解 ； 8) 加入 1.0g NaN3蛋白保护剂， 完全溶解 ； 9) 用稀 HCC 调配， 直至 PH=9.0。 10) 均匀处理后， 在干房烘干待用。 权 利 要 求 书 CN 103604934 A 4 1/7 页。
16、 5 畜类绒毛膜促性腺激素快速检测方法及快速检测测试卡 技术领域 0001 本发明属于畜牧兽医领域， 尤其是涉及一种免疫学检测技术， 是畜禽病害早期防 控、 有效繁殖检测监控的最有效的装置及方法。 背景技术 0002 建立快速、 准确、 简便易行的早期母畜妊娠快速检测技术， 是从事动物疫病防控、 动物繁殖等研究工作者和产业界人士的迫切愿望。 0003 早期妊娠检测是一项重要的技术， 在我国养殖业生产中具有重要意义。妊娠母畜 类早期孕检方法， 经过多年临床实践经验和动物学科技的发展， 已有多种临床方法， 以母猪 为例包括 ： 激素法的孕马血清促性腺激素(PMSG)法和已烯雌酚法。 尿液检查法的尿。
17、中雌酮 诊断法， 液碘化检查法 ； 超声诊断法适用的的 B 型超声诊断仪， 多普勒超声诊断仪 (D 型， A 型超声诊断仪用。以及其它方法的公猪试情法， 阴道检查法。 0004 除上述方法外， 还有血或乳中孕酮测定法、 EPF 检测法、 红细朐凝集法、 掐压腰背部 法和子宫颈黏液涂片检查等。 母猪早期妊娠诊断方法有很多， 它们各有利弊， 临床应用时是 根据实际情况选用。 这些方法， 不是准确率较低， 就是使用成本高， 而且不能即时监控， 对出 现的一些母畜空怀几个情期而不返情， 而延误及时配种， 使繁殖周期延长， 繁殖成本增高， 从而降低养猪生产效益。 0005 自从开辟免疫分析技术以来， 越。
18、来越多更灵敏、 更便捷的免疫分析方法被开发出 来， 以胶体金免疫层析 ( 双抗原夹心法、 双抗体夹心法 ) 法为基础建立起来的快速检测试 纸， 被认为是当前最快捷、 高敏感的一种免疫学检测技术。 该项技术真正实现了快速简易检 测靶目标， 并已在畜牧业中得到普及应用， 成为当前畜禽病害早期防控、 有效繁殖检测监控 的最有效方法之一。 0006 免疫学诊断方法不仅检出率高， 而且反应快速， 在医学、 兽医及水产领域已经得到 广泛应用。传统的经典免疫学诊断方法主要包括免疫沉淀反应 ( 免疫扩散、 免疫电泳等 )、 免疫凝集等等， 但都不能实现高效、 快捷、 简便、 即时的早期检测。 0007 该方法。
19、学， 能够为养殖业的高效率、 健康繁殖提供及时依据和有效信息， 降低时 间、 饲料等饲养成本 ； 同时， 因其便于携带可以大大提高普通散养用户对孕畜的可控性， 降 低因野外临产造成的不必要财产损失。 0008 目前， 畜类早孕早期检测、 监控的具体方法普遍采用试条法进行尿样分析， 将试条 插入容器里的尿液里， 使用方便， 但是需要人为采集畜类动物尿液， 需要长时间跟随畜类动 物并随时准备采集尿液， 既不安全也极为不便。现有专利号为 ZL200420077747.9 的早孕快 速测试卡发明专利， 将凹槽构成的孔插入尿液 ( 或标准液， 对比液， 测试液 ) 即可进行取液 检测， 而畜类排放尿液直。
20、接排放在地面上， 凹槽构成的孔不宜直接插入排放在地面上尿液 进行取液检测。 0009 因此， 针对于经济类的养殖动物， 至今尚无一种真正达到高效、 快捷、 简便、 即时的 早期快速检测测试卡和快速检测方法。 说 明 书 CN 103604934 A 5 2/7 页 6 发明内容 0010 本发明的目的是提出一种哺乳类动物专用的畜类绒毛膜促性腺激素快速检测测 试卡及快速检测方法， 通过畜类尿液检测体内(多指孕畜)绒毛膜促性腺激素的指标， 来判 断是否已受精怀孕， 为养殖动物的有效繁殖的早期诊断提供借鉴。 0011 为了实现本发明的目的， 提出以下技术方案 ： 0012 一种畜类绒毛膜促性腺激素快。
21、速检测测试卡， 所述检测测试卡由测试盒和试纸条 结构构成， 所述测试盒包括盒盖 1 和盒底 2， 所述盒盖 1 与盒底 2 插接吻合在一起 ； 0013 所述盒盖 1 中心处设有观察窗 3， 试纸条结构设置在盒底 2 内表面并处于观察窗 3 下方 ； 0014 所述盒底2底部一端设有开口18和吸样块9， 所述过滤块9为倒梯形， 插接在所述 开口 18 内， 其长底处在盒内， 短底处在盒外 ； 0015 所述试纸条结构包括底板 11、 吸水纸 10、 NC 膜 12、 覆盖胶 13 和胶体金垫 14 ； 所述 底板 11 固定在盒底 2 底部， 所述吸水纸 10、 NC 膜 12 和胶体金垫 1。
22、4 顺次搭接并粘贴在底板 11 的上表面， 搭接方式为吸水纸 10 和胶体金垫 14 分别盖住 NC 膜 12 的两端 ； 所述胶体金 垫 14 的另一端完全覆盖所述吸样块 9 上表面， 所述 NC 膜 12 处于观察窗 3 正下方， 所述覆 盖胶 13 覆盖在 NC 膜 12 和胶体金垫 14 的搭接处。 0016 所述盒盖1内表面设有固定柱6、 固定栓4、 透明片15和压金台5， 所述固定柱6分 别设置在矩形的四个角处 ； 所述透明片 15 覆盖观察窗 3 ； 所述固定栓 4 和压金台 5 分别设 置在观察窗 3 的两侧， 其中固定栓 4 处于吸水纸 10 上方， 压金台 5 处于吸样块 。
23、9 上方 ； 0017 所述盒底 2 内表面设有固定柱孔 7， 所述固定柱孔 7 的位置与所述固定柱 6 对应， 所述盒盖 1 与盒底 2 通过固定柱 6 和固定柱孔 7 插接 ； 0018 在所述盒盖 1 与盒底 2 扣合时， 所述压金台 5 配合吸样块 9 将覆盖在吸样块 9 上 的胶体金垫 14 和覆盖胶 13 的一端压稳 ； 所述固定栓 4 将吸水纸 10 固定。 0019 所述盒底 2 外表面设有外支柱 8， 内表面设有干燥剂存放处 16 和夹槽档 17， 所述 外支柱 8 和干燥剂存放处 16 处于开口 18 的相对一侧， 所述干燥剂存放处 16 设置在两个固 定柱孔7中间， 所述。
24、夹槽档17围成一个矩形框， 处于固定柱孔7的4个顶点内， 所述底板11 固定该矩形框内。 0020 本发明还提出另一种技术方案， 其中所述盒盖 1 和盒底 2 一侧扣合处分别设置上 闭合柱 21 和下闭合柱 22， 在该侧盒底 2 与压金台 5 对应位置设置下压金台 19， 盒盖 1 和盒 底 2 扣合时， 下压金台 19 与压金台 5、 上闭合柱 21 和下闭合柱 22 分别闭合 ； 0021 所述吸样块 9 加长加宽为长方片状， 设置在上闭合柱 8 与下闭合柱 16 以及下压金 台 19 与压金台 5 的闭合处， 并伸出盒外 ； 0022 所述上闭合柱 8 和下闭合柱 16 闭合夹住吸样块。
25、 9， 同时下压金台 19 配合压金台 5 将吸样块 9、 胶体金垫 14 和覆盖胶 13 压稳。 0023 本发明还提出再一种技术方案， 其中， 所述吸样块9下方的盒底2上设置下压金台 19 ； 吸样块 9 上方的盒盖 1 内设置加样孔 20， 在盒盖 1 与盒底 2 扣合时， 下压金台 19 配合 加样孔 20 将吸样块 9、 胶体金垫 14 和覆盖胶 13 的一端压稳， 吸样块 9 从盒盖 1 露出。 0024 本发明提出使用上述畜类绒毛膜促性腺激素检测测试卡的检测方法， 所述检测方 说 明 书 CN 103604934 A 6 3/7 页 7 法包括步骤 ： 0025 1) 将盒盖 1。
26、 与盒底 2 扣合， 使所述压金台 5 配合过滤块 9 将覆盖在过滤块 9 上的 胶体金垫 14 和覆盖胶 13 的一端压稳， 固定栓 4 将吸水纸 10 固定住， 吸水纸 10 和胶体金垫 14 分别盖住 NC 膜 12 的两端 ； 0026 2) 将盒体直接平放至畜类动物尿液上， 使过滤块 9 接触并吸收动物尿液， 过滤其 杂质， 保持 5 10 秒钟 ； 0027 3) 取出平放， 从观察窗观察测试结果 ； 0028 4) 当试纸 NC 膜 12 出现两条紫红色或红色条带， 为妊娠诊断阳性 ； 只在控制区出 现一条紫红色条带红色条带， 为妊娠诊断阴性 ； 当测试线和控制线均不显色时， 表。
27、示测试卡 无效。 0029 使用另一种畜类绒毛膜促性腺激素检测测试卡的检测方法， 所述检测方法包括步 骤 ： 0030 1) 将盒盖 1 与盒底 2 扣合， 使所述压金台 5 配合过滤块 9 将覆盖在过滤块 9 上的 胶体金垫 14 和覆盖胶 13 的一端压稳， 固定栓 4 将吸水纸 10 固定住， 吸水纸 10 和胶体金垫 14 分别盖住 NC 膜 12 的两端 ； 0031 2)将吸样块9盒外部分直接蘸取畜类动物尿液， 吸样块9吸收动物尿液， 并过滤其 杂质， 保持 5 10 秒钟 ； 0032 3) 取出平放， 从观察窗观察测试结果 ； 0033 4) 当试纸 NC 膜 12 出现两条紫。
28、红色或红色条带， 为妊娠诊断阳性 ； 只在控制区出 现一条紫红色条带红色条带， 为妊娠诊断阴性 ； 当测试线和控制线均不显色时， 表示测试卡 无效。 0034 使用再一种畜类绒毛膜促性腺激素检测测试卡的检测方法， 所述检测方法包括步 骤 ： 0035 1) 将盒盖 1 与盒底 2 扣合， 下压金台 19 配合加样孔 20 将吸样块 9、 胶体金垫 14 和覆盖胶13的一端压稳 ； 固定栓4将吸水纸10固定， 吸水纸10和胶体金垫14分别盖住NC 膜 12 的两端 ； 0036 2)将盒体平放， 向加样孔20滴加畜类动物尿液， 吸样块9吸收动物尿液， 并过滤其 杂质， 保持 5 10 秒钟 ； 。
29、0037 3) 取出平放， 从观察窗观察测试结果 ； 0038 4) 当试纸 NC 膜 12 出现两条紫红色或红色条带， 为妊娠诊断阳性 ； 只在控制区出 现一条紫红色条带红色条带， 为妊娠诊断阴性 ； 当测试线和控制线均不显色时， 表示测试卡 无效。 0039 本发明的方法还包括对所述吸样块(过滤块)9使用前的处理液侵泡， 该处理液按 以下步骤顺序进行制备 ： 0040 1) 取 18 兆超纯水 4000ml， 用清洁干净的洁净烧杯盛装 ； 0041 2) 称 60g Tris 试剂 ( 分析纯 ) 直接加入， 搅拌溶解 ； 0042 3) 称 48g PVP 试剂， 直接加入， 溶解 ； 。
30、0043 4) 称 Casein( 酪蛋白 )30g， 直接加入， 搅拌完全溶解 ； 0044 5) 加入 Na2CO3( 无水 )20g， 直接加入溶解 ； 说 明 书 CN 103604934 A 7 4/7 页 8 0045 6) 称 S-9(Tetronic1307) 试剂， 直接加入， 完全溶解 ； 0046 7) 量取 13.8ml Triton X-100 试剂， 完全溶解 ； 0047 8) 加入 1.0g NaN3蛋白保护剂， 完全溶解 ； 0048 9) 用稀 HCC 调配， 直至 PH=9.0。 0049 10) 均匀处理后， 在干房烘干待用。 0050 本发明现有技术相。
31、比的优点 ： 0051 本发明直接吸取畜类排在地面的尿液进行即时检测， 而不受地面其它污物的影 响， 不用人工和特殊设备去接收畜类的排尿 ； 0052 检测设备准确高效、 便于携带、 简便快捷、 即时， 成本低、 易于操作 ； 0053 本发明的设备检测用途多。 还能根据不同畜类的绒毛膜促性腺激素含量的不同变 化检测出孕胎的数量。 附图说明 0054 图 1 为本发明整体结构示意图 ； 0055 图 2 为盒底内表面示意图 ； 0056 图 3 为本发明另一种实施例整体结构示意图 ； 0057 图 4 为本发明再一种实施例整体结构示意图。 0058 图中 0059 盒盖 1 NC 膜 12 0。
32、060 盒底 2 覆盖胶 13 0061 观察窗 3 胶体金垫 14 0062 固定栓 4 透明片 15 0063 压金台 5 干燥剂存放处 16 0064 固定柱 6 固定柱孔 17 0065 固定柱孔 7 开口 18 0066 外支柱 8 下压金台 19 0067 吸样块 9 加样孔 20 0068 吸水纸 10 上闭合柱 21 0069 底板 11 下闭合柱 22 具体实施方式 0070 为使本发明的目的、 技术方案和优点更加清楚明白， 以下结合附图和具体实施例， 对本发明进一步详细说明。 0071 妊娠中的雌性哺乳类， 不仅其脑垂体前叶分泌促性腺激素， 而且胎盘的绒毛膜也 可分泌， 胎。
33、盘分泌的称为绒毛膜促性腺 ( 激 ) 素， 成分为糖蛋白， 是一种糖蛋白激素， 由 、 两个亚基构成， 而 亚单位是表现其活性的主要部分 ； 有类似促黄体激素的作用。 0072 本发明是利用免疫学胶体金法和人绒毛膜促性腺激素(胶体金法)快速检测试剂 的技术原理的基础上研制生产的。 0073 由于绒毛膜促性腺激素具有极高的敏感性与特异性， 而使其成为目前协助诊断妊 说 明 书 CN 103604934 A 8 5/7 页 9 娠体内是否有怀孕产物， 绒毛分泌的绒毛膜促性腺激素是最为准确和可靠的检查早期怀孕 诊断方法之一。母畜的妊娠时期绒毛膜促性腺激素在血液中出现， 含量多少以及消失都有 一定的规。
34、律， 这种规律与子宫内膜杯的出现、 增长和消失是一致的。 0074 本发明采用双抗体夹心法和胶体金免疫层析法原理定性地检测孕畜尿液中的绒 毛膜促性腺激素含量， 在硝酸纤维素膜上的检测线处包被鼠抗-HCG单克隆抗体(根据不 同动物种类包被的抗体亚型不同)， 在对照线处包被羊抗鼠IgG， 配以金标鼠抗-HCG单克 隆抗体 ( 根据不同动物种类标记的抗体亚型不同 )。检测时， 尿样在毛细效应下层析。当畜 类受精怀孕时， 尿液中的绒毛膜促性腺激素抗原与胶体金交联的单抗形成促性腺激素 - 金 标抗体复合物， 在检测区 (T) 显紫红色 ( 或红色 ) 的条带， 余下部分继续迁移至固定有羊抗 鼠 IgG 。
35、处， 在控制区 (C) 呈现紫红色 ( 或红色 ) 的条带 ； 反应结果， 当试纸出现两条紫红色 条带， 为妊娠诊断阳性。反之只在控制区 (C) 出现一条紫红色条带， 为妊娠诊断阴性。当测 试线和控制线均不显色时， 表示测试卡无效。控制区 (C) 内所呈现的紫红色条带是判定是 否有足够尿样， 层析过程是否正常的标准， 同时也作为试纸的内控标准。 0075 促黄体素与促卵泡素 (FSH) 都是由垂体前叶分泌的一种激素。促黄体素 (LH) 刺 激卵巢排卵， 卵泡破裂释放出卵子之后， 破裂卵泡内的细胞继续发育， 形成黄体。黄体分泌 孕酮， 孕酮是负责维持妊娠的主要激素。如果卵子受精， 成为有活力的孕。
36、体， 这些孕体就会 在结合在子宫壁上。这种结合的信号会反馈给黄体， 使黄体继续分泌孕酮， 维持妊娠。促黄 体素抗原或抗体与绒毛膜促性腺激素的抗体或抗原在一定浓度时很容易发生产交叉反应。 0076 图 1 是本发明的快速检测测试卡的整体结构， 图 2 是盒底机构。如图所示， 测试卡 由测试盒和试纸条结构构成， 测试盒包括盒盖 1 和盒底 2， 其中， 0077 盒盖 1 和盒底 2 插接吻合在一起， 整体为长方体。盒盖 1 外表面为矩形， 中心处设 有观察窗3， 盒盖1内表面依次设有固定柱6、 压金台5、 透明片15和固定栓4， 所述固定柱6 分布在盒盖 1 的四个角， 压金台 5 和固定栓 4。
37、 分别设置在观察窗 3 的两侧， 透明片 15 覆盖 观察窗 3 的内沿。 0078 盒底 2 外表面为矩形， 与盒盖 1 对应。在盒底 2 外表面一侧的两个角分别设有外 支柱 8， 盒底 2 内表面设有固定柱孔 7， 分别设置在盒底 2 内表面的四个角， 与所述 4 个固定 柱 6 相互插接 ； 在外表面与压金台 5 对应的一侧设有开口 18 ； 在另一侧设置干燥剂存放处 16， 所述干燥剂存放处 16 设置在两个固定柱孔 7 中间 ； 在开口 18 与片状干燥剂存放处 16 之间设置夹槽档 17， 所述夹槽档 17 围成一个以固定柱孔 7 为顶点的矩形框。 0079 本发明的试纸条结构包括。
38、底板11、 吸样块9、 吸水纸10、 NC膜12、 覆盖胶13和胶体 金垫 14。所述底板 11 固定在夹槽档 17 围成的矩形框内， 吸样块 9 为倒梯形， 卡在开口 18 处， 所述吸水纸 10、 NC 膜 12 和胶体金垫 14 顺次搭接并粘贴在底板 11 的上表面， 搭接方式 为吸水纸 10 和胶体金垫 14 分别盖住 NC 膜 12 的两端 ； 同时所述胶体金垫 14 的另一端完全 覆盖过吸样块 9 上表面， 所述覆盖胶 13 覆盖在 NC 膜 12 和胶体金垫 14 的搭接处。 0080 在盒盖 1 与盒底 2 扣合时， 压金台 5 配合吸样块 9 将覆盖在吸样块 9 上的胶体金 。
39、垫 14 和覆盖胶 13 的一端压稳 ； 固定栓 4 将吸水纸 10 固定住。 0081 使用方法 ： 将本发明的盒体直接平放至畜类动物尿液上， 无需手持， 吸样块 9 接触 并吸收动物尿液， 过滤其杂质， 保持510秒钟， 取出平放， 等待观察结果， 从观察窗观察测 试结果。 说 明 书 CN 103604934 A 9 6/7 页 10 0082 干燥剂存放处 16 内的干燥剂为片状， 内置于塑料件内部， 避免使用后造成的 “白 色污染” 和垃圾分散， 本发明可直接及时接触畜类排放在地面上的尿液， 做为被测尿样吸取 在吸样块9上， 吸样块9为专用纤维材料， 避免渣类物质干扰， 反应更直接、。
40、 更灵敏、 更简捷， 易于携带， 做到真正的随时检测与监控 ； 适用于测哺乳类动物的尿液、 体液、 血液。 0083 图 3 为本发明另一个实施例整体结构示意图 ； 本实施例在将原开口 18 封闭， 其上 设置下压金台 19， 下压金台 19 上方是压金台 5， 在该侧的盒盖 1 和盒底 2 两端扣合处分别 设置上闭合柱 21 和下闭合柱 22。盒盖 1 和盒底 2 扣合时， 下压金台 19 与压金台 5、 上闭合 柱 21 和下闭合柱 22 分别闭合。 0084 吸样块9加长加宽为长方片状， 设置在上闭合柱8与下闭合柱16以及下压金台19 与压金台5的闭合处， 由上闭合柱8和下闭合柱16闭合。
41、夹住， 并伸出盒外 ； 同时下压金台19 配合压金台 5 将吸样块 9、 胶体金垫 14 和覆盖胶 13 压稳。 0085 使用时， 吸样块 9 盒外部分直接蘸取畜类动物尿液， 吸样块 9 吸收动物尿液， 并过 滤其杂质， 保持 5 10 秒钟， 取出平放， 等待观察结果， 从观察窗观察测试结果。 0086 图 4 为本发明再一种实施例整体结构示意图。本实施例将将原开口 18 封闭， 其上 设置下压金台 19 ； 同时在原压金台 5 的位置开加样孔 20。 0087 在盒盖 1 与盒底 2 扣合时， 下压金台 19 配合加样孔 20 将吸样块 9、 胶体金垫 14 和 覆盖胶 13 的一端压稳。
42、 ； 固定栓 4 将吸水纸 10 固定。 0088 使用时将盒体平放， 向加样孔20滴加畜类动物尿液， 无需手持， 吸样块9吸收动物 尿液， 并过滤其杂质， 保证了检测的准确性， 保持 5 10 秒钟， 等待观察结果， 从观察窗 3 观 察测试结果。 0089 本发明的吸样块 9 使用前经处理液侵泡， 然后干燥， 该的处理液配方按以下步骤 顺序进行制备 ： 0090 1、 取 18 兆超纯水 4000ml， 用清洁干净的洁净烧杯盛装 ； 0091 2、 称 60g Tris 试剂 ( 分析纯 ) 直接加入， 搅拌溶解 ； 0092 3、 称 48g PVP 试剂， 直接加入， 溶解 ； 009。
43、3 4、 称 Casein( 酪蛋白 )30g， 直接加入， 搅拌完全溶解 ； 0094 5、 加入 Na2CO3( 无水 )20g， 直接加入溶解 ； 0095 6、 称 S-9(Tetronic1307) 试剂， 直接加入， 完全溶解 ； 0096 7、 量取 13.8ml Triton X-100 试剂， 完全溶解 ； 0097 8、 加入 1.0g NaN3蛋白保护剂， 完全溶解 ； 0098 9、 用稀 HCC 调配直至符合要求的 PH=9.0 ； 0099 10、 均匀处理后， 在干房烘干待用。 0100 试纸结构的其他部分试剂的配方与常规工艺要求基本相同， 对不同种属的抗体 ( 。
44、或抗原 ) 做适当调整即可。 0101 畜类绒毛膜促性腺激素 ( 胶体金法 ) 快速检测测试卡的功用 ： 0102 1、 通过畜类尿液检测体内 ( 多指孕畜 ) 绒毛膜促性腺激素的指标， 来判断是否已 受精怀孕、 怀孕的时间阶段 ； 0103 2、 利用畜类尿液中促黄体素 (LH) 抗体与绒毛膜促性腺激素抗体发生交叉反应的 原理， 来判断有些畜类是否已受精怀孕 ； 说 明 书 CN 103604934 A 10 7/7 页 11 0104 3、 通过设定的不同阈值检测绒毛膜促性腺激素的相对浓度来监测孕畜怀胎的数 量， 如 2 胎、 3 胎等 ； 孕畜的种类、 体型、 胎数不同， 绒毛膜促性腺激。
45、素的数值亦不同。 0105 4、 与检测促黄体素相结合， 孕畜受精、 孕期各项指标检测和监控孕期状况 ； 0106 5、 在孕后期通过测定绒毛膜促性腺激素的消失来辅助判断具体临产日期， 对养殖 业意义更为重大 ； 0107 6、 本方法学产品还可以用于临床检测、 监控畜类因一些疾病而产生的病变， 辅助 进行疾病检测。 0108 以上所述的具体实施例， 对本发明的目的、 技术方案和有益效果进行了进 1 步的 详细说明， 所应理解的是， 以上所述仅为本发明的具体实施例而已， 并不用于限制本发明， 凡在本发明的精神和原则之内， 所做的任何修改、 等同替换、 改进等， 均应包含在本发明的 保护范围之内。 说 明 书 CN 103604934 A 11 1/2 页 12 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 103604934 A 12 2/2 页 13 图 3 图 4 说 明 书 附 图 CN 103604934 A 13 。