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1、10申请公布号CN104069383A43申请公布日20141001CN104069383A21申请号201410343049722申请日20140718A61K36/899200601A23L2/38200601A61P3/0620060171申请人昆明滇龙生物医药科技有限公司地址650051云南省昆明市俯路296号昆明理工大学国家科技园创业大厦9320室72发明人夏玉山徐永敏王成邓杰文钟禄彪冯悦刘丽74专利代理机构昆明正原专利商标代理有限公司53100代理人金耀生54发明名称思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法及其应用57摘要本发明提供一种思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分及其应用，属。
2、于生物科学技术领域。该有效成分为云南普洱市甜龙竹竹子茎杆内部的汁液采集提取而得，经检测其成份为总糖253、总黄酮0085、总酚035、蛋白质114、总氨基酸8114。本发明通过高血脂大鼠模型体内试验表明，在大鼠高脂饮食的过程中，思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分能够降低大鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白的等血脂关键指标，并可以有效提高其高密度脂蛋白含量，进而升高其动脉粥样硬化指数和冠心病指数，从而降低动脉粥样硬化和冠心病发生的风险。51INTCL权利要求书1页说明书8页附图1页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书8页附图1页10申请公布号CN104069383ACN1。
3、04069383A1/1页21一种思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法，其特征在于选取生长于亚热带地区北纬22022450、东经990910219，海拔10002500米，高1218米、直径913厘米的甜龙竹，在空气湿度为80以上且无风或微风的凌晨，在竹子靠近地表的第二节或第三节的竹节下部打孔，孔径小于5毫米，用管径与打孔孔径相配的干净无菌管将孔与干净无菌的容器连通，收集竹沥水，然后采用静止或离心去除沉淀，取上层清液密封，于20长期保存，即得到思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分。2根据权利要求1所述的思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法，其特征在于所述的干净无菌管为不锈钢管。3根据权。
4、利要求1所述的思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法，其特征在于所述的干净无菌的容器为5升高密度聚乙烯材质方桶。4根据权利要求1所述的思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法，其特征在于所述的密封采用真空保鲜机高质塑料密封包装。5权利要求14所述的思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分作为制备治疗高血脂病药物的应用。6权利要求14所述的思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分作为制备降血脂饮品的应用。权利要求书CN104069383A1/8页3思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法及其应用技术领域0001本发明属于生物科学技术领域，具体涉及一种思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法，还涉及一种。
5、该甜龙竹竹水降血脂有效成分作为制备治疗高血脂病药物的应用。背景技术0002高脂血症是由体内脂质代谢紊乱引起的，血液中一种或多种脂质成分含量的异常增高的疾病。老年人的高脂血症的患病率大约在30到50之间，随着生活质量的提高和生活方式的改变，高脂血症发病呈年轻化趋势，45岁以下高血脂患病率达30。高脂血症是导致心血管疾病的首要因素，同时也是导致脂肪肝的重要原因。血脂的主要指标总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）与冠心病发生率呈正相关，而与高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）呈负相关，降低LDLC可使冠心病的发生率下降2038。0003现有的降血脂药物主要有他汀类（STATINS）、贝特类EI。
6、BRATES、释缓烟酸（NIACINER）、依替米贝（EZETIMIBE）、考来维仑（COLESEVELAM）等。其中他丁类的治疗效果最好，能有效的降低血清中的低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）和甘油三酯（TG），贝特类降TG效果显著，而释缓烟酸在升高高密度脂蛋白（HDL）方面表现良好，胆固醇吸收抑制剂依替米贝和胆酸螯合剂考来维仑主要降低LDLC，但这些药物也有一定的不良反应，如他汀类大剂量服用会产生肌毒和升高肝转氨酶，贝特类和释缓烟酸会产生胃肠道不适、肝肾损伤，依替米贝会产生面部和舌咽部水肿，考来维仑的服用会导致脂溶性维生素缺失从而引发一些并发症。0004天然产物对于疾病的治疗有着多靶点、多环节。
7、以及毒副作用小的特点。近年来，具有调血脂作用的天然产物及相关药物，以其疗效好、副作用小的优势而成为关注的热点。0005甜龙竹属于禾本科牡竹属，又称甜竹，杆直立或有时向外倾斜，高1218M，粗913CM，梢头长而下垂，基部数节环生气根。节2片，外稃长57MM，宽67MM，先端具长仅0305MM的芒刺状小尖头；下部小花中的内稃几与其外柞等长，先端2裂；花丝长，花药黄色，药隔先端长锐尖头，长34MM，成熟后伸出花外而垂悬；雌蕊全体被细毛，花柱长45MM。喜生于潮湿、疏松土壤，西双版纳州普遍栽培。笋鲜甜，是品质最优良的笋用竹之一，竹筒可作盛食品的容器，堪称“一身是宝”。当地少数民族常鲜食或腌制成风味独。
8、特的酸笋，并发生了延年益寿的效用。但其药用价值的研究尚鲜有报道，特别是在降血脂方面的研究未见报道。发明内容0006本发明的目的在于为了克服现有技术的不足，提供一种思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法，同时，本发明的目的还在于提供一种该甜龙竹竹水降血脂有效成分作为制备治疗高血脂病药物的应用。0007为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下说明书CN104069383A2/8页4一种思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法，选取生长于亚热带地区北纬22022450、东经990910219，海拔10002500米，云南普洱市，高1218米、直径913厘米的甜龙竹，在空气湿度为80以上且无风。
9、或微风的凌晨，在竹子靠近地表的第二节或第三节的竹节下部打孔，孔径小于5毫米，用管径与打孔孔径相配的干净无菌管将孔与干净无菌的容器连通，收集思茅勃氏甜龙竹竹水，然后采用静止或离心去除沉淀，取上层清液密封，于20长期保存，即得到思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分。0008本发明技术方案中所述的干净无菌管为不锈钢管。0009本发明技术方案中所述的干净无菌的容器为5升高密度聚乙烯材质方桶。0010本发明技术方案中所述的密封采用真空保鲜机高质塑料密封包装。0011本发明还提供一种上述思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分作为制备治疗高血脂病药物的应用。0012本发明还提供一种上述思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分。
10、作为制备降血脂饮品的应用。0013本发明提供一种思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分物化性质分析方法，包括以下步骤甜龙竹竹水物理性质测定通过感官判断颜色和气味；用台式酸度计测定PH值；将甜龙竹竹水在2001100NM范围内扫描测定其最大吸收波长MAX；取甜龙竹竹水1KG，先用045M滤膜过滤竹水，再用真空冷冻干燥剂冻干，收集冻干物，电子称称重测定干物质含量；甜龙竹竹水成分分析取竹沥水冻干物，按河北省地方标准DB13/T3851998测定总黄酮含量；按国家标准GB/T83132008测定总酚含量；按国家标准GB/T156722009测定总糖含量；按国家标准GB500952010测定蛋白质含量；用外标。
11、法测定氨基酸总类和含量。0014所述的外标法条件为6氨基咪唑基N羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为柱前衍生试剂，用ACCQTAG氨基酸分析柱（39MMX150MM,4UM,美国），柱温37，缓冲盐、乙腈和水梯度洗脱，光电二极管PDA检测器在248NM波长处监测，测定氨基酸的种类和含量。0015本发明的技术方案采用了一种思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分，该部位为云南普洱市甜龙竹竹子茎杆内部的汁液采集提取而得，是由云南普洱市独特的地理气候条件下，特有品种的竹子产生而得的思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分。0016本发明与现有技术相比，其有益效果为本发明的思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分是从竹子茎杆内。
12、部获取的，甜龙竹在云南以普洱市为代表的亚热带地区分布广泛，使得本发明的原料易得，成本较低，作用明显，可用于预防高血脂和心血管疾病的保健饮料开发。另外，本发明采水方法工艺工程简单，易操作。实验表明思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分具有很好的降血脂作用。体内实验表明在大鼠高脂饮食的过程中，思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分能够降低大鼠血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白LDLC的等血脂关键指标，并可以有效提高其高密度脂蛋白（HDLC）含量，进而提高其动脉粥样硬化指数AI（AIHDLC/LDLC）、抗冠心病指数CRI（CRIHDLC/TC），从而降低动脉粥样硬化和冠心病发生的风险；且未发现思茅勃氏甜龙竹竹。
13、水降血脂有效成分对实验动物的毒副作用。说明书CN104069383A3/8页5附图说明0017图1是思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分采集示意图；1出水管，2竹节，3竹壁，4出水孔，5竹叶；图2是思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分全波长扫描吸收光谱图；X轴为波长，Y轴为吸光值。具体实施方式0018以下结合实例对本发明作进一步描述,但本发明的保护范围并不仅限于此。0019实施例1如图1所示，本实施例思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法是选取生长于亚热带地区北纬22022450、东经990910219，海拔10002500米，云南普洱市，高12米、直径9厘米的甜龙竹，在空气湿度为80以上且微风的。
14、凌晨，在竹子靠近地表的第三节的竹节下部用钻孔机150斜向上方打孔，孔径499毫米，用管径与打孔孔径相配的干净无菌管将孔与干净无菌的容器连通，收集思茅勃氏甜龙竹竹水，然后采用静止或离心去除沉淀，取上层清液采用真空保鲜机18CM25CM高质塑料密封包装，于20长期保存，即得到思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分。其中，所述的干净无菌管为不锈钢管；所述的干净无菌的容器为5升高密度聚乙烯材质方桶。0020在不添加防腐剂的情况下，为了保证水质，将封装好的水于20保存，待用时再暂存于4融化后使用。实施例2如图1所示，本实施例思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法是选取生长于亚热带地区北纬22022450、。
15、东经990910219，海拔10002500米，云南普洱市，高18米、直径13厘米的甜龙竹，在空气湿度为80以上且无风的凌晨，在竹子靠近地表的第二节的竹节下部用钻孔机150斜向上方打孔，孔径为05毫米，用管径与打孔孔径相配的干净无菌管将孔与干净无菌的容器连通，收集思茅勃氏甜龙竹竹水，然后采用静止或离心去除沉淀，取上层清液采用真空保鲜机18CM25CM高质塑料密封包装，于20长期保存，即得到思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分。其中，所述的干净无菌管为不锈钢管；所述的干净无菌的容器为5升高密度聚乙烯材质方桶。0021在不添加防腐剂的情况下，为了保证水质，将封装好的水于20保存，待用时再暂存于4融化后。
16、使用。0022实施例3如图1所示，本实施例思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的制备方法是选取生长于亚热带地区北纬22022450、东经990910219，海拔10002500米，云南普洱市，高15米、直径11厘米的甜龙竹，在空气湿度为80以上且无风的凌晨，在竹子靠近地表的第三节的竹节下部用钻孔机150斜向上方打孔，孔径为3毫米，用管径与打孔孔径相配的干净无菌管将孔与干净无菌的容器连通，收集思茅勃氏甜龙竹竹水，然后采用静止或离心去除沉淀，取上层清液采用真空保鲜机18CM25CM高质塑料密封包装，于20长期保存，即得到思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分。其中，所述的干净无菌管为不锈钢管；所述的干净无菌。
17、的容器为5升高密度聚乙烯材质方桶。说明书CN104069383A4/8页60023在不添加防腐剂的情况下，为了保证水质，将封装好的水于20保存，待用时再暂存于4融化后使用。同时对本实施例思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分物化性质进行分析，具体步骤如下（1）思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分物理性质测定颜色和气味感官判断；PH值台式酸度计测定；最大吸收波长MAX将思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分在2001100NM范围内扫描；干物质含量测定取思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分1KG，先用045M滤膜过滤竹水，再用真空冷冻干燥剂冻干，收集冻干物，电子称称重。0024（2）思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分。
18、成分分析样品前处理先用045M滤膜过滤思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分，再用真空冷冻干燥剂冻干，收集冻干物。0025测定指标及方法总黄酮含量测定按河北省地方标准DB13/T3851998测定总黄酮含量；总酚含量测定按国家标准GB/T83132008测定总酚含量；总糖含量测定按国家标准GB/T156722009测定总糖含量；总蛋白质含量测定按国家标准GB500952010测定蛋白质含量；氨基酸含量测定用ACCQTAG柱前衍生法测定氨基酸总类和含量。0026ACCQTAG柱前衍生法色谱条件6氨基咪唑基N羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为柱前衍生试剂，用ACCQTAG氨基酸分析柱（39MMX150M。
19、M,4UM,美国），柱温37，缓冲盐、乙腈和水梯度洗脱，光电二极管PDA检测器在248NM波长处监测，测定氨基酸的种类和含量。0027以上检测均由云南省测试分析中心完成（送检编号NOKYT20140010）。0028结果（1）思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分物理性质思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分为微黄色，无味，PH值为438，每千克思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分经冷冻干燥后其所含干物质640MG，如表1所示。对制备的思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分进行全波长扫描后发现，其最大吸收波长为521NM，如图2所示。0029表1甜龙竹竹水主要物理性质（2）思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分成分分析如。
20、表2所示，根据云南省分析测试中心检测的结果为总糖含量253，总黄酮含量0085，总酚含量035，蛋白质含量114，总氨基酸含量8114，共含有16中氨基酸，其中有7种为必需氨基酸。0030表2甜龙竹竹水成份表说明书CN104069383A5/8页7应用例1本实施例为思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分在降血脂方面的应用例。0031思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分对大鼠降血脂效果主要从3个方面进行评价，第一思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分对高血脂的预防效果；第二思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分对高血脂的治疗效果；第三思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分在普通饮食中的作用；因此本实验主要采取以下措施高血脂。
21、大鼠模型的建立为了实现上述目的，本实验主要采取以下措施动物雄性SD大鼠22015G，由昆明医科大学实验动物中心提供（实验动物生产许可证号SCXK滇20050008，实验动物使用许可证号SYXK滇20050004）。0032材料与试剂25ML注射器，思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分，维生素D3，胆固醇，猪油，胆酸钠，丙基硫氧嘧啶，白糖，基础饲料。0033试验方法本实验高脂模型的建立主要采用喂养法，即饲喂高脂饲料并注射维生素D3。0034高脂饲料配方3胆固醇、10猪油、05胆酸钠、02丙基硫氧嘧啶、5白糖、813的基础饲料。0035实验分组取50只雄性SD大鼠，平均体重为22015G，空白对照组（。
22、CON组）10只；高脂建模组（AS组）20只；抑制高脂建模组（AAS组）20只；分组及处理详细见表3；表318周的分组及处理说明书CN104069383A6/8页8注普料普水饲喂普通饲料、饮用自来水；高脂普水饲喂高脂饲料、饮用自来水；高脂竹水饲喂高脂饲料、饮用思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分高血脂大鼠模型成功建立的标准按上述表3分组及处理，于第8周将各组大鼠均禁食12H，尾静脉采血，离心分离血清用于血脂水平的测定。对各组血脂水平进行T检验来分析来判断高血脂大鼠模型是否成功建立，如果差异显著或极显著则可以判定为高血脂建模成功。0036测定指标及方法血清总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDLC）、。
23、低密度脂蛋白（LDLC）、动脉粥样硬化指数AI（AIHDLC/LDLC）、抗冠心病指数CRI（CRIHDLC/TC）的测定由云南省第一人民医院检验科完成。0037数据处理实验数据XS表示，实验统计采用SPSS170统计软件进行T检验。0038结果经检测，建模8周后，模型组的TC和LDLC、AICRI均显著高于空白组，表明SD大鼠高血脂模型建模成功，而模型组的HDLC略微高于空白组，表明高脂饮食也会稍微提高血液中的HDLC含量。模型组的AI和CRI值均明显低于空白对照组，而AI和CRI的值越小说明其具形成动脉粥样硬化和冠心病的病程就越容易，因而从这三个角度均可以看出高脂建模型建模成功，结果见表4。
24、。0039表4高脂模型的建立组别TCLDLCHDLCAICRI空白组CON组12303901100306500259090529模型组（AS组）109934552919010201601930093表注血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、动脉粥样硬化指数AI（AIHDLC/LDLC）、冠心病指数CRI（CRIHDLC/TC），表示模型组与空白组差异极显著高脂模型建立之后，紧接着将AS组大鼠重新分为AS1组6只；AS26只；AS36只；将AAS组重新分为AAS1组6只；AAS26只；AAS36只；对照组不变。详细见表5。0040表5916周的进一。
25、步分组及处理说明书CN104069383A7/8页9表注普料普水饲喂普通饲料、饮用自来水；高脂普水饲喂高脂饲料、饮用自来水；高脂竹水饲喂高脂饲料、饮用思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分在916周期间按上述表5分组及处理，于第16周将各组大鼠均禁食12H，尾静脉采血，离心分离血清用于血脂水平的测定。0041血脂检测指标TC、HDLC、LDLC。0042检测方法由云南省第一人民医院检验科完成。0043数据处理实验数据XS表示，实验统计采用SPSS170统计软件进行T检验。0044结果思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分对高血脂的预防效果经过16周的实验结果表明，虽然模型组和实验组的TC、HDLC、LDL。
26、C均高于空白组，但是在同样食高脂饲料的情况下，实验组的TC和LDLC均要远远低于模型组的，表明在高脂饮食中配合饮用思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的话，可以有效地降低高血脂饮食导致的血脂增高。相反，实验组的HDLC、AI和CRI水平则要高于模型组，表明在高脂饮食的同时配合饮用思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分的话，能有效降低高血脂带来的危害，结果见表6。0045表6思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分在长期高脂饮食中对高血脂的预防效果组别TCLDLCHDLCAICRI空白组CON组12303901100306500259090529模型组（AS3组）1099345529190102016019300。
27、93实验组AAS1组85310735207714100904010165表注表示模型组与空白组差异极显著，表示模型组与实验组差异显著思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分对高血脂的治疗效果为了检测思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分对高血脂症的治疗效果，给模型组饮用思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分7周，即实验第15周时的结果表明，在同样食高脂饲料的情况下，实验组的TC、LDLC、HDLC、AI和CRI与模型组无显著性差异，此结果表明，思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分对已经发生的高血脂症未发生显著的治疗效果，结果见表7。0046表7思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分对高血脂的治疗效果组别TCLDLCHDLC。
28、AICRI空白组CON组12303901100306500259090529模型组（AS3组）109934552919010201601930093实验组AS1组118803957700312200202110103表注血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDLC）、高密度脂蛋白（HDLC）、动脉粥样硬说明书CN104069383A8/8页10化指数AI（AIHDLC/LDLC）、冠心病指数CRI（CRIHDLC/TC），表示模型组与空白组差异极显著思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分在普通饮食中的作用思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分在普通饮食中的效果实验结果表明，在普通饮食中如果配合饮用思茅勃氏。
29、甜龙竹竹水降血脂有效成分的话，实验组的TC、LDLC、HDLC、AI和CRI均与空白对照组差异不大，并不会进一步降低血液中的血脂含量，表明思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分并非通过与血液中的TC、LDLC、HDLC直接发生行作用而预防高血脂的，而是通过调理个体的各项机能、维持机体稳态而实现预防高脂饮食中血脂增高之功效的。结果见表8。0047表8思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分在普通饮食中的作用组别TCLDLCHDLCAICRI空白组CON组12303901100306500259090529模型组（AS3组）109934552919010201601930093实验组（AS2组）14501701。
30、100107400967270510实验组（AAS2组）13502301200306901157500511表注表示模型组与空白组差异极显著，表示实验组显著高于模型组综上，实验结果表明，思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分可作为保健型饮料，能够通过调理机能、维持机体稳态而防止血脂增高，故长期饮用具有预防高血脂发生之功效。0048思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分作为制备纯天然的预防高脂血症形成和降血脂保健饮料的应用思茅勃氏甜龙竹竹水降血脂有效成分可以经过加工制成预防高血脂形成及降血脂的保健饮料。0049最后所应说明的是以上实施例仅用于说明，而非限制本发明的技术方案，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解依然可以对本发明进行修改或者同等替换，而不脱离本发明的精神和范围的任何修改或局部替换，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。说明书CN104069383A101/1页11图1图2说明书附图CN104069383A11。