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1、(10)申请公布号 CN 103918472 A (43)申请公布日 2014.07.16 CN 103918472 A (21)申请号 201310017165.5 (22)申请日 2013.01.15 A01G 1/04(2006.01) (71)申请人 漳州美利德生物工程有限公司 地址 363600 福建省漳州市南靖县丰田镇丰 田村 (72)发明人 黄阿贤 (74)专利代理机构 厦门龙格专利事务所 ( 普通 合伙 ) 35207 代理人 郑晓荃 (54) 发明名称 牛樟芝的椴木栽培法 (57) 摘要 一种牛樟芝的椴木栽培法， 其在无菌操作环 境中将已经过完全灭菌处理的福建本地的小叶红 心。
2、樟椴木浸泡在天然牛樟芝菌种发酵制取牛樟 芝菌液中 ； 取出椴木后放在阴凉潮湿黑暗的培养 室， 当牛樟芝子实体在椴木平面上长到 1-1.5 厘 米时进行采收 ； 采收后， 切去椴木平面 1-2 厘米厚 切面， 经过完全灭菌处理后在椴木平面上再喷洒 牛樟芝菌液， 然后重复上述步骤进行下一轮接种， 直至椴木无樟油味为止。本发明以黄连提取物、 荷叶提取物、 蒲公英提取物、 虎杖提取物、 茵陈提 取物、 玉米淀粉、 蛋白栋和水作为天然牛樟芝菌种 发酵过程中的中药添加剂， 使本发明椴木栽培法 获得的牛樟芝菌子实体与野生牛樟芝成份组成一 致， 无论外观、 香气、 苦味与成分组成等均能完全 取代野生牛樟芝。 。
3、(51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 3 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书3页 (10)申请公布号 CN 103918472 A CN 103918472 A 1/1 页 2 1. 牛樟芝的椴木栽培法， 其特征在于 ： 该椴木栽培法的步骤如下 ： 天然牛樟芝菌种发酵制取牛樟芝菌液 ； 在无菌操作环境中将已经过完全灭菌处理的福建本地的小叶红心樟椴木浸泡在 牛樟芝菌液中 ； 椴木在牛樟芝菌液中浸泡 48-72 小时后， 取出椴木， 放在培养室， 每隔三天喷水雾 一次， 培养室的温度 14-30 度、 湿度 65-95%、 空气进气。
4、量 20-25 立方米 / 分钟、 8-10 立方米 / 分钟 ； 牛樟芝子实体在椴木平面上长到 1-1.5 厘米时进行采收 ； 采收后， 切去椴木平面 1-2 厘米厚切面， 经过完全灭菌处理后在椴木平面上喷洒步 骤中制取的牛樟芝菌液， 每三天喷一次， 连喷三天。然后重复步骤、 后进行下一轮接 种。如此轮种， 直至椴木无樟油味为止。 2. 如权利要求 1 所述的牛樟芝的椴木栽培法， 其特征在于 ： 步骤中， 采收时， 牛樟芝 子实体上层留 1-3 毫米的菌根部在椴木上。 3. 如权利要求 1 或 2 所述的牛樟芝的椴木栽培法， 其特征在于 ： 在步骤中的天 然牛樟芝菌种发酵过程， 按下面组份作。
5、为添加剂 ： 黄连提取物 0.02%-0.05%、 荷叶提取 物 0.02%-0.08%、 蒲公英提取物 0.02%-0.05%、 虎杖提取物 0.03%、 -0.05%、 茵陈提取物 0.02%-0.05%、 玉米淀粉 1%-3%、 蛋白栋 0.3%-0.05%， 其余为水。 4. 如权利要求 3 所述的牛樟芝的椴木栽培法， 其特征在于 ： 在步骤中的天然牛樟芝 菌种发酵过程， 按下面组份作为添加剂 ： 黄连提取物 0.02%、 荷叶提取物 0.02%、 蒲公英提取 物 0.023%、 虎杖提取物 0.03%、 茵陈提取物 0.02%、 玉米淀粉 1%、 蛋白栋 0.3%， 其余为水。 权 。
6、利 要 求 书 CN 103918472 A 2 1/3 页 3 牛樟芝的椴木栽培法 技术领域 0001 本发明涉及一种牛樟芝的培育技术。 背景技术 0002 牛樟芝又名牛樟菇， 属于非褶菌目、 多孔科、 多年生蕈菌类， 学名为 （Antrodia camphorata） ， 是1990年才被生化界发表的新种。 其生长区域为台湾山区海拔 450-2000公 尺山林间， 只生长在台湾特有百年以上的牛樟树树干腐朽之心材内壁， 或枯死倒伏之牛樟 树木材潮湿表面， 因其采集不易， 加上野生牛樟木近年已被政府列为国宝级生物之一， 也因 此盗采牛樟木社会事件仍时有所闻。由于樟芝在台湾被视为独特而珍贵的药用。
7、真菌， 因此 具有极高的研究和商业价值， 也是目前台湾最昂贵的野生真菌， 在港澳被称为 “神芝” ， 台湾 民间称之为 “森林中的红宝石” 。 0003 由于野生牛樟芝在民间应用时所产生的惊人疗效以及野生原料资源枯竭， 不但使 得其价格高涨、 并且激发了台湾政府及各大研究机构、 生技公司的强烈兴趣！一时之间， 各 种利用生化技术培育牛樟芝樟芝的研究和努力成为台湾最为红火的生化科技项目！目前， 对于樟芝人工培育大致可以分为椴木栽培法、 固体培养法、 液体发酵法三种。 0004 1、 椴木栽培法 0005 利用牛樟芝樟芝原有宿主牛樟树椴木为培养基栽培牛樟芝 ； 能获 得与野生樟芝 相同之成分， 功。
8、效相同， 避免野生牛樟树被盗伐 ； 但培养时间长达二至三年， 培养成本高。 0006 2、 固体培养法 0007 将牛樟芝樟芝菌种以太空包进行菌丝体培养。 太空包含有纤维物、 醣类、 五谷杂粮 类等 ； 能获得与野生牛樟芝樟芝外形相似但不一样的成分， 培养时间约三个月 ； 培养成本 高。 0008 3、 液体发酵法 0009 利用 500 公升甚至吨级以上的液体发酵槽进行牛樟芝樟芝菌种液体发酵以收取 菌丝体 ； 培养时间短， 约七至十四天左右 ； 但无法取得野生樟芝特有的三萜类。 0010 综上所述的三种培育方法， 存在以下的不足之处 ： 0011 、 现有技术培植与野生牛樟芝品质相当的产品，。
9、 须采用牛樟木作为培植菌木。 然 而牛樟树已列为台湾珍稀树种 （一级保护） ， 原料来源十分困难， 且牛樟树的种植条件要求 较高， 生长周期长， 产业化培植受到限制。 0012 2、 现有技术采用其他培养基 （如采用棉仔粕、 玉米芯及杂木屑为原料作为菌包） 培 育出的牛樟芝菌子实体三萜类含量极低， 药效价值低。 发明内容 0013 针对现有技术中存在的不足之处， 本发明提供一种牛樟芝的椴木栽培法。该椴木 栽培法获得的牛樟芝菌子实体与野生牛樟芝成份组 成一致， 无论外观、 香气、 苦味与成分 组成等均能完全取代野生牛樟芝。 说 明 书 CN 103918472 A 3 2/3 页 4 0014 。
10、为实现上述目的， 本发明技术方案为 ： 0015 牛樟芝的椴木栽培法， 该椴木栽培法的步骤如下 ： 0016 天然牛樟芝菌种发酵制取牛樟芝菌液 ； 0017 在无菌操作环境中将已经过完全灭菌处理的福建本地的小叶红心樟椴木浸 泡在牛樟芝菌液中 ； 0018 椴木在牛樟芝菌液中浸泡 48-72 小时后， 取出椴木， 放在培养室， 每隔三天喷 水雾一次， 培养室的温度 14-30 度、 湿度 65-95%、 空气进气量 20-25 立方米 / 分钟、 8-10 立 方米 / 分钟 ； 0019 牛樟芝子实体在椴木平面上长到 1-1.5 厘米时进行采收 ； 0020 采收后， 切去椴木平面 1-2 厘。
11、米厚切面， 经过完全灭菌处理后在椴木平面上喷 洒步骤中制取的牛樟芝菌液， 每三天喷一次， 连喷三天。 然后重复步骤、 后进行下一 轮接种。如此轮种， 直至椴木无樟油味为止。 0021 进一步的， 在步骤中的天然牛樟芝菌种发酵过程， 按下面组份作为添加剂 ： 黄连 提取物 0.02%-0.05%、 荷叶提取物 0.02%-0.08%、 蒲公英提取物 0.02%-0.05%、 虎杖提取物 0.03%、 -0.05%、 茵陈提取物 0.02%-0.05%、 玉米淀粉 1%-3%、 蛋白栋 0.3%-0.05%， 其余为水。 0022 上述技术方案的有益之处在于 ： 0023 宿主创新。通常台湾牛樟芝。
12、椴木栽培法一般用台湾独有的牛樟木经灭菌的椴 木。本发明制成的牛樟芝菌液具有较强的抗逆性及繁殖 能力， 用大陆小叶红心樟作为椴 木， 嫁接用本发明制备的牛樟芝菌液 ； 培育的牛樟芝基本达到用台湾牛樟木为宿主培养的 樟芝三萜含量。 0024 牛樟芝子实体培养期较短。一般椴木类的牛樟芝子实体生长期为 450-600 天， 而采用本发明牛樟芝子实体生长期为 150-180 天。 0025 椴木体可轮番综合利用。 椴木块可进行剖切、 灭菌处理后的多次轮种， 直至椴木 无樟油味为止。 0026 本发明提高牛樟木利用率， 培育的牛樟芝分子结构三萜类含量达到天然牛樟芝的 含量水平， 克服人工非樟木类的培育法虽。
13、三萜类含量相近， 高分子化合物分子量相差数十 倍， 药效价值较低等缺点。 附图说明 0027 无 具体实施方式 0028 下面对本发明进一步说明。 0029 本发明牛樟芝的椴木栽培法的步骤如下 ： 0030 步骤一 ： 采用天然牛樟芝菌种经分离、 砂土培养等生物深层发酵技术制取的牛樟 芝菌液， 再将该牛樟芝菌液置于无菌操作柜内浸泡槽中。在天然牛樟芝菌种发酵过程， 按 下面组份作为添加剂 ： 黄连提取物 0.02%-0.05%、 荷叶提取物 0.02%-0.08%、 蒲公英提取物 0.02%-0.05%、 虎杖提取物 0.03%、 -0.05% 茵陈提取物 0.02%-0.05%、 玉米淀粉 1。
14、%-3%、 蛋白 栋0.3%-0.05%， 其余为水。 其中， 上述添加剂的最佳组份是 ： 黄连提取物0.02%、 荷叶提取物 说 明 书 CN 103918472 A 4 3/3 页 5 0.02%、 蒲公英提取物 0.023%、 虎杖提取物 0.03%、 茵陈提取物 0.02%、 玉米淀粉 1%、 蛋 白栋 0.3%， 其余为水。作为抑杀杂菌、 活化樟芝菌的上述中药添加剂， 能有效抑制霉菌及革兰氏 阴性菌的繁殖， 并能有效阻断异生菌的蛋白质合成。因此使用上述中药添加剂能有次提高 牛樟芝菌的活性及繁殖力， 抑杀杂菌， 使单位含菌数大大提高。与不加抑菌剂相比， 此法有 效菌含量增加三倍。 00。
15、31 步骤二 ： 在无菌操作环境中将已经过完全灭菌处理的福建本地的小叶红心樟椴木 浸泡在牛樟芝菌液中， 应浸没整个椴木， 浸泡 48-72 小时， 最佳浸泡时间是 48 小时。 0032 步骤三 ： 取出椴木， 放在阴凉潮湿黑暗的培养室 （以定制的存放柜保存较好） ， 每隔 三天喷水雾一次， 培养室的温度14-30度、 湿度65-95%、 空气进气量20-25立方米/分钟、 空 气排气量 8-10 立方米 / 分钟， 最佳空气排气量是 8 立方米 / 分钟。 0033 步骤四 ： 牛樟芝子实体在椴木平面上长到 1-1.5 厘米时进行采收， 也就是本发明 牛樟芝子实体的生长期为 150-180 。
16、天， 而一般椴木类的牛樟芝子实体生长期是为 450-600 天， 本发明牛樟芝子实体培养期较短。 0034 采收时， 牛樟芝子实体上层， 留 1-3 毫米的菌根部在椴木上， 最好是留 2 毫米的菌 根部在椴木上， 然后将椴木放回培养室。 0035 步骤五 ： 采收后， 切去椴木平面 1-2 厘米厚切面， 最好是切去 1.5 厘米。经过完全 灭菌处理后在椴木平面上喷洒步骤一中制取的牛樟芝菌液， 每三天喷一次， 连喷三天。 然后 重复步骤三、 四后进行下一轮接种。如此轮种， 直至椴木无樟油味为止。 0036 以上实施例仅为说明本发明的技术思想， 不能以此限定本发明的保护范围， 凡是 按照本发明提出的技术思想， 在技术方案基础上所做的任何改动， 均落入本发明保护范围 之内。 说 明 书 CN 103918472 A 5 。