食品包装材料中邻苯二甲酸酯类物质迁移量的检测方法.pdf

本发明一种食品包装材料中邻苯二甲酸酯类物质迁移量的检测方法，所述方法包括：提取，提取食物样本，将所述食物样本中加入水、乙腈、MgSO4、醋酸钠，进行漩涡1min、4000r/min离心2min得到上清液以及残渣，收集上清液，将所述残渣使用40℃的氮气吹至近干；净化，将所述残渣加入乙腈，加入PSA净化填料，C18净化填料，MgSO4，涡旋1min、4000r/min离心2min，取上清液；测定，利用气相色谱进行分析、利用液相色谱进行分析，测定食物样本中邻苯二甲酸酯类物质的含量。本发明提供了一种可靠、方便、准确的对接触包装材料中邻苯二甲酸酯类物质迁移的检测方法。

权利要求书
1.  一种食品包装材料中邻苯二甲酸酯类物质迁移量的检测方法，其特征在于：所述方法包括：
提取，提取食物样本，将所述食物样本中加入水、乙腈、MgSO4、醋酸钠，进行漩涡1min、4000r/min离心2min得到上清液以及残渣，收集上清液，将所述残渣使用40℃的氮气吹至50uL；其中，每克食物样本中加入1-3mL去离子水、1-10mL乙腈、1-2g无水MgSO4、0.2-2g醋酸钠；
净化将所述残渣加入乙腈加入PSA净化填料，C18净化填料，MgSO4，涡旋1min、4000r/min离心2min，取上清液；
测定，利用气相色谱进行分析、利用液相色谱进行分析，测定食物样本中邻苯二甲酸酯类物质的含量。

2.  根据权利要求1所述的食品包装材料中邻苯二甲酸酯类物质迁移量的检测方法，其特征在于：进行气相-质谱检出限LOQ DINP、DIDP为0.5mg/kg，其它化合物为0.1mg/kg；进行液相色谱-质谱/质谱的定量限(LOQ)DAP为0.01mg/kg，其它化合物为0.1mg/kg，所述的其他化合物为DMP、DEP、DIPrP、DAP、DPrP、DIBP、DBP、DMEP、DIPP、BMPP、DEEP、DPP、DHXP、BBP、DBEP、DCHP、DEHP、DHP、DPhP、DNOP、DNP。

说明书食品包装材料中邻苯二甲酸酯类物质迁移量的检测方法
技术领域
本发明涉及一种食品中邻苯二甲酸酯类物质的检测方法，具体涉及食品接触包装材料中邻苯二甲酸酯类物质迁移污染检测方法。
背景技术
食品包装材料，特别是塑料包装材料中的增塑剂邻苯二甲酸酯类物质，在一定条件下能向食品中迁移、溶出，通过饮食、皮肤接触等途径进入人体,而且可能通过胎盘或者晡乳产生跨代影响。动物实验表明,邻苯二甲酸酷类物质急性毒性不大,但在大剂量情况下,对动物有不同程度的致畸、致癌和致突变作用。其亚急性毒性主要表现为对肾、肝、睾丸的损害,影响生殖机能,抑制精子形成等。
欧盟指令2002/72/EC及其后续修订2004/19/EC和2005/79/EC，对接触食品的塑料原料和制品规定了许可的列表，包括生产和加工的单体、起始物质和添加剂，任何邻苯二甲酸酯都不被允许其中。2006年12月,欧盟通过化学品注册、评估、授权的《化学品注册、评估、许可和限制制度》(REACH)制度,该制度是对以往化学品管理法规的综合,在其限制条款的有关附表中,对六种邻苯二甲酸酯釆取了使用限制。同时，国家质检总局也发布过公告要求禁止企业在生产PVC食品保鲜膜时使用DEHA。
食品行业对接触包装材料中邻苯二甲酸酯类物质迁移的检测方法一直有研 究。
发明内容
针对上述问题，本发明提供一种可靠、方便、准确的食品中邻苯二甲酸酯类物质的检测方法
为达到上述目的，本发明食品包装材料中邻苯二甲酸酯类物质迁移量的检测方法，所述方法包括：
提取，提取食物样本，将所述食物样本中加入水、乙腈、MgSO4、醋酸钠，进行漩涡1min、4000r/min离心2min得到上清液以及残渣，收集上清液，将所述残渣使用40℃的氮气吹至50uL；其中，每克食物样本中加入1-3mL去离子水、1-10mL乙腈、1-2g无水MgSO4、0.2-2g醋酸钠；
净化，将所述残渣加入乙腈，加入PSA净化填料，C18净化填料，MgSO4，涡旋1min、4000r/min离心2min，取上清液；
测定，利用气相色谱进行分析、利用液相色谱进行分析，测定食物样本中邻苯二甲酸酯类物质的含量。
进一步地，进行气相-质谱检出限LOQ DINP、DIDP为0.5mg/kg，其它化合物为0.1mg/kg；进行液相色谱-质谱/质谱的定量限(LOQ)DAP为0.01mg/kg，其它化合物为0.1mg/kg，所述的其他化合物为DMP、DEP、DIPrP、DAP、DPrP、DIBP、DBP、DMEP、DIPP、BMPP、DEEP、DPP、DHXP、BBP、DBEP、DCHP、DEHP、DHP、DPhP、DNOP、DNP。
有益效果：
本发明不同于现有技术，关注的是包装材料本身迁移出的邻苯物质，而本发明关注的是被迁移物质的邻苯物质含量；在已有的文献中，对被迁移食品基质的研究主要是液体型食品，本发明针对的是各类固体食品基质，从而完善了整个食品安全行业对邻苯类物质污染迁移的检测体系。综上，本发明为一种食品接触包装材料迁移到食品中邻苯类物质迁移污染检测方法的发明，可靠、方便、准确，是对食品安全问题的扩展和深入。
具体实施方式
下面对本发明做进一步的描述。
食品，《食品安全法》第九十九条对“食品”的定义如下：食品，指各种供人食用或者饮用的成品和原料以及按照传统既是食品又是药品的物品，但是不包括以治疗为目的的物品。
本发明涉及食品安全领域，属于食品接触包装材料中邻苯二甲酸酯类物质迁移污染检测方法的发明，适用于固体食品中邻苯二甲酸酯类物质检测方法的发明，检测基质包括：固体饮料、果酱、果浆、果冻、调味品、香精香料、油脂类食品、乳制品、面淀粉制品及糕点等。检测的邻苯二甲酸酯类物质有23种：邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二异丙酯(DIPrP)、邻苯二甲酸二烯丙酯(DAP)、邻苯二甲酸二丙酯(DPrP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2一甲氧基)乙酯(DMEP)、邻苯二甲酸二异戊酯(DIPP)、邻苯二甲酸二(4一甲基一2一戊基) 酯(BMPP)、邻苯二甲酸二(2一乙氧基)乙酯(DEEP)、邻苯二甲酸二戊酯(DPP)、邻苯二甲酸二己酯(DHXP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)、邻苯二甲酸二(2一丁氧基)乙酯(DBEP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸二(2一乙基)己酯(DEHP)、邻苯二甲酸二庚酯(DHP)、邻苯二甲酸二苯酯(二苯酯、DPhP)、邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)、邻苯二甲酸二异癸酯(DIDP)、邻苯二甲酸二壬酯(DNP)。该方法以QuEChERS作为前处理方法，分别采用气相色谱－质谱法和液相色谱－质谱/质谱法检测。
本发明适用于各类固体食品基质，开发了针对23种邻苯二甲酸酯类物质同时分析的QuEChERS样品前处理方法，以及气相色谱-质谱和液相色谱-质谱/质谱检测方法，这也是本发明的创新点所在。
本发明中所述的食品(分为不含油脂固体或半固体试样，以及油脂固体或半固体试样两类)包括固体饮料、果酱、果浆、果冻、调味品、香精香料、油脂类食品、乳制品、面淀粉制品及糕点等中23种邻苯类物质(DMP，DEP，DIPrP，DAP，DPrP，DIBP，DBP，DMEP，DIPP，BMPP，DEEP，DPP，DHXP，BBP，DBEP，DCHP，DEHP，DHP，DPhP，DNOP，DINP，DIDP，DNP)被迁移量的制样和气相色谱-质谱法，液相色谱-串联四级杆质谱测定方法，包括以下步骤：
提取
准确称取混合均匀固体或半固体试样5.0g(精确到0.01g)于50mL具塞磨口玻璃试管中，加入5mL水(含水试样,无需加水)，准确加入15mL乙腈， 加入6g MgSO4和1.5g醋酸钠，涡旋1min，4000r/min离心2min，收集上清液，于40℃氮吹至近干。
净化
氮吹后残渣用乙腈定容至5mL,加入50mg PSA净化填料，50mg C18净化填料，150mg MgSO4，涡旋1min，4000r/min离心2min，取上清液，供GC-MS分析。
测定：气相色谱－质谱条件条件
a)色谱柱：TG/DB-5MS石英毛细管柱，60m×0.25mm(内径)，0.25μm(膜厚)，或相当者；
b)进样口温度：280℃；
c)载气为99.999％He气，恒流模式，流速为1.5mL/min；
d)离子源温度：250℃；
e)电离能量：70eV；
f)接口(传输线)温度：300℃，；
g)电子轰击电离源(EI)，选择离子监测模式(SIM)，特征离子参见附录B中的表B.1，分组监测见表1；
h)溶剂延迟时间：10min；
i)进样量：1.0μL；
j)进样方式：不分流进样。
表1选择离子监测分组表
通道 时间(tR/min) 选择离子(m/z) 1 10.5 77，135，163，194 2 12.4 149，177，121，222 3 14.5 149，167，209， 4 16.2 104，132，149，189 5 17.7 76，149，191，209 6 19.1 149，167，205，223 7 21.5 121，149，223，205 8 23.2 59，104，149，207 9 24.7 69，85，104，149，167，251 10 26.4 72，149，176，193 11 27.4 104，149，219，237 12 30.1 76，91，149，104，206，251 13 33.7 85，101，149，193 14 35.4 104，149，167，247，249，265，279 15 36.4 77，104，153，225 16 38.7 149，167，261，279 17 40.9 85，127，141，149，167，261，279，293，307
表2 GC-MS方法程序升温

表3定性时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度 >50％ >20％至50％ >10％至20％ ≤10％
允许的相对偏差 ±10％ ±15％ ±20％ ±50％
表4 23种邻苯二甲酸酯化合物GC-MS的特征离子

测定：液相色谱-串联四级杆质谱测定条件
a)色谱柱I：Poroshell 120EC-C18柱，100mm×4.6mm(内径)，2.7μm；色谱柱II：Accucore RP-MS柱，100mm×2.1mm(内径)，2.6μm；或相当 者；
a)流动相：甲醇-0.1％甲酸溶液，梯度洗脱见表4；
b)流速：见表4；
c)柱温：35℃；
d)进样量：10μL。
表5液相色谱的梯度洗脱条件

质谱条件：
a)离子化模式：电喷雾电离正离子模式(ESI+)；
b)质谱扫描方式：多反应监测(MRM)；
c)分辨率：单位质量分辨率；
表6定性确证时相对离子丰度的最大允许误差
相对离子丰度 >50％ >20％至50％ >10％至20％ ≤10％ 允许的相对偏差 ±20％ ±25％ ±30％ ±50％
表7 23种邻苯二甲酸酯化合物LC-MS/MS特征选择离子及质谱参数


表8 23种邻苯二甲酸酯化合物信息


以下就几种具体的食物的检测方法进行具体的说明：
实施例1
调味粉中23种邻苯二甲酸酯类物质的制样和测定方法：
提取
准确称取混合均匀固体或半固体试样5.0g(精确到0.01g)于50mL具塞磨口玻璃试管中，加入5mL水(含水试样,无需加水)，准确加入15mL乙腈，加入6g MgSO4和1.5g醋酸钠，涡旋1min，4000r/min离心2min，收集上清液，于40℃氮吹至近干。
净化
氮吹后残渣用乙腈定容至5mL,加入50mg PSA净化填料，50mg C18净化填料，150mg MgSO4，涡旋1min，4000r/min离心2min，取上清液，供GC-MS分析。
测定：气相色谱－质谱条件条件
a)色谱柱：TG/DB-5MS石英毛细管柱，60m×0.25mm(内径)，0.25μm(膜厚)，或相当者；
b)进样口温度：280℃；
c)载气为99.999％He气，恒流模式，流速为1.5mL/min；
d)离子源温度：250℃；
e)电离能量：70eV；
f)接口(传输线)温度：300℃，；
g)电子轰击电离源(EI)，选择离子监测模式(SIM)，特征离子参见附录B中的表B.1，分组监测见表1；
h)溶剂延迟时间：10min；
i)进样量：1.0μL；
j)进样方式：不分流进样。
表2 GC-MS方法程序升温

该方法对调味粉中的23种邻苯二甲酸酯类物质具有选择性的纯化和测定，对每克样品中邻苯类物质的添加水平为0.1mg/kg、1mg/kg和10mg/kg，以基质空白标准工作液和待测液中23种邻苯二甲酸酯类物质在气相色谱-质谱仪上响应值的比值作对照，上述23种邻苯类物质的相对回收率在82.8-109.1％之间，其中DMP为82.1～93.3％，DEP为85.4～96.8％，DIPrP为92.2～96.4％， DAP为91.6～98.8％、DPrP为98.3～99.6％，DIBP为96.2～106.2％。
实施例2
水果酥中23种邻苯二甲酸酯类物质的制样和测定方法：
提取
准确称取混合均匀固体或半固体试样5.0g(精确到0.01g)于50mL具塞磨口玻璃试管中，加入5mL水(含水试样,无需加水)，准确加入15mL乙腈，加入6g MgSO4和1.5g醋酸钠，涡旋1min，4000r/min离心2min，收集上清液，于40℃氮吹至近干。
净化
氮吹后残渣用乙腈定容至5mL,加入50mg PSA净化填料，50mg C18净化填料，150mg MgSO4，涡旋1min，4000r/min离心2min，取上清液，供GC-MS分析。
测定：液相色谱-串联四级杆质谱测定条件
色谱柱I：Poroshell 120EC-C18柱，100mm×4.6mm(内径)，2.7μm；色谱柱II：Accucore RP-MS柱，100mm×2.1mm(内径)，2.6μm；或相当者；
流动相：甲醇-0.1％甲酸溶液，梯度洗脱见表4；
流速：见表4；
柱温：35℃；
进样量：10μL。
表5液相色谱的梯度洗脱条件

质谱条件：
离子化模式：电喷雾电离正离子模式(ESI+)；
质谱扫描方式：多反应监测(MRM)；
分辨率：单位质量分辨率；
该方法对水果酥中的23种邻苯二甲酸酯类物质具有选择性的纯化和测定，对每克样品中邻苯类物质的添加水平为0.1mg/kg、1mg/kg和10mg/kg，以基质空白标准工作液和待测液中23种邻苯二甲酸酯类物质在气相色谱-质谱仪上响应值的比值作对照，上述23种邻苯类物质的相对回收率在78.6-106.2％之间，DMP为84.1～99.6％，DEP为86.2～99.8％，DIPrP为90.2～100.4％，DAP为84.2～94.3％、DPrP为92.5～97.7％，DIBP为96.3～104.3％。
实施例3
鸡蛋面中23种邻苯二甲酸酯类物质的制样和测定方法：
提取
准确称取混合均匀固体或半固体试样5.0g(精确到0.01g)于50mL具塞磨口玻璃试管中，加入5mL水(含水试样,无需加水)，准确加入15mL乙腈，加入6g MgSO4和1.5g醋酸钠，涡旋1min，4000r/min离心2min，收集上清液，于40℃氮吹至近干。
净化
氮吹后残渣用乙腈定容至5mL,加入50mg PSA净化填料，50mg C18净化填料，150mg MgSO4，涡旋1min，4000r/min离心2min，取上清液，供GC-MS分析。
测定：液相色谱-串联四级杆质谱测定条件
色谱柱I：Poroshell 120EC-C18柱，100mm×4.6mm(内径)，2.7μm；色谱柱II：Accucore RP-MS柱，100mm×2.1mm(内径)，2.6μm；或相当者；
流动相：甲醇-0.1％甲酸溶液，梯度洗脱见表4；
流速：见表4；
柱温：35℃；
进样量：10μL。
表5液相色谱的梯度洗脱条件

质谱条件：
离子化模式：电喷雾电离正离子模式(ESI+)；
质谱扫描方式：多反应监测(MRM)；
分辨率：单位质量分辨率；
该方法对水果酥中的23种邻苯二甲酸酯类物质具有选择性的纯化和测定，对每克样品中邻苯类物质的添加水平为0.1mg/kg、1mg/kg和10mg/kg，以基质空白标准工作液和待测液中23种邻苯二甲酸酯类物质在气相色谱-质谱仪上响应值的比值作对照，上述23种邻苯类物质的相对回收率在76.7-114.0％之间，其中DMP为89.6～109.0％，DEP为89.7～98.5％，DIPrP为92.9～100.1％，DAP为81.0～93.9％、DPrP为89.6～109.0％，DIBP为97.2～98.5％。
对本发明应当理解的是，以上所述的实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细的说明，以上仅为本发明的实施例而已，并不用于限定本发明，凡是在本发明的精神原则之内，所作出的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内，本发明的保护范围应该以权利要求所界定的保护范围为准。